淀粉中还原糖的测定
生化实验七 淀粉中还原糖含量的测定
实验七淀粉中还原糖含量的测定一、目的掌握还原糖含量的测定方法，学习用比色法测定还原糖的方法；二、原理单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基，有还原性，属于还原糖；而多糖和蔗糖等属于非还原性糖。
还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在过量的NaOH 碱性溶液中此化合物在540nm处有最大吸收，在一定浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中还原糖的含量三、器材1、吸管1.0mL（×2）、5.0mL（×1）、0.1mL（×1）、0.2mL（×1）、0.5mL（×3）2、试管1.5cm×15cm（×10）3、分光光度计 ,水浴锅、电子分析天平,电炉、容量瓶（100mL×1）、玻璃漏斗、量筒、研钵和三角烧瓶。
四、试剂与材料1、标准葡萄糖溶液（1.0mg/mL）：准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg，溶于蒸馏水并定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。
2、3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂：将6.3g DNS和262mL 2mol/L NaOH溶液，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，存储于棕色瓶中备用。
3、食用面粉五、操作1、1. 葡萄糖标准曲线的制作：取8支15mm×180mm试管，按下表加入1.0mg/ml葡萄糖标准液和蒸馏水。
吸光度为纵坐标，葡萄糖含量（mg ）为横坐标做图得标准曲线。
2、样品中还原糖的提取和测定称取1.5g 食用面粉加水约5mL ，在研钵中磨成匀浆，转入三角烧瓶中，并用约20mL 蒸馏水冲洗研钵2～3次，洗出液也转入三角烧瓶中。
于50℃水浴中保温约0.5h （使还原糖浸出），取出，冷却后定容至50mL 。
过滤，取1.0mL 滤液进行还原糖的测定。
淀粉的国标测定方法
淀粉的国标测定方法测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法（酶-直接法）一、酶水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定,并折算成淀粉。
2。
适用范围GB5009。
9-85，适用于所有含淀粉的食物。
3.仪器（1） 回流冷凝器(2） 水浴锅4。
试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
（1） 乙醚（2） 0.5 ％ 淀粉酶溶液：称取淀粉酶（Sigma 公司， E 。
C3.2。
1.1）0。
5 g ，加100ml 水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中.（注：配成溶液的淀粉酶破坏很快，最好邻用现配。
）（3） 碘溶液：称取3.6 g 碘化钾溶于20 ml 水中，加入1。
3 g 碘，溶解后加水稀释至100 ml 。
（4） 85 ％乙醇.(5) 其余试剂同《蔗糖测定方法》5.操作方法5。
1 样品处理称取2~5 g 样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50 ml 乙醚分5次洗除脂肪(注：如果脂肪含量少，此步骤可免），再用约100 ml85 ％乙醇洗去可溶性糖类（注:此步骤目的是去除可溶性糖)，将残留物移入250 ml 烧杯内，并用50ml 水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化，放冷至60 ℃以下,加20ml 淀粉酶溶液，再55～60 ℃保温1h,并时时搅拌(注：温度过高,淀粉酶的活性破坏）。
然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不现兰色,若显兰色，再加热糊化并加20ml 淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显兰色为止。
加热至沸，冷后移入250ml 容量瓶中,并加水至刻度，混匀，过滤.(注：此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素）弃去初滤液，取50 ml 滤液,置于250ml 锥形瓶中，加5 ml 6 mol/L 盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h ，冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L 氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml 容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100ml 容量瓶中，加水至刻度，混匀备用.（淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应，然后在淀粉酶的作用下，分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。
食物中还原糖的测定方法
⾷物中还原糖的测定⽅法⾷物中还原糖的测定⽅法⼀、直接滴定法1.原理样品经除去蛋⽩质后，在加热条件下，直接滴定已标定过的菲林⽒液，菲林⽒液被还原析出氧化亚铜后，过量的还原糖⽴即将次甲基蓝还原，使蓝⾊褪⾊。
根据样品消耗体积，计算还原糖量。
2.适⽤范围GB5009.7-85，本⽅法适⽤于所有⾷品中还原糖的检测。
检出限0.1mg。
3.主要仪器滴定管4.试剂除特殊说明外，实验⽤⽔为蒸馏⽔，试剂为分析纯。
（1）菲林甲液：称取15 g硫酸铜（CuSO4·5H2O），及0.05 g次甲基蓝，溶于⽔中并稀释⾄1 L。
（2）菲林⼄液：称取50 g酒⽯酸钾钠与75 g氢氧化钠，溶于⽔中，再加⼊4 g亚铁氰化钾，完全溶解后，⽤⽔稀释⾄500ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
（3）⼄酸锌溶液：称取21.9 g⼄酸锌，加3 ml冰⼄酸，加⽔溶解并稀释⾄100 ml。
（4）亚铁氰化钾溶液。
称取10.6g亚铁氰化钾，⽤⽔溶解并稀释⾄100ml。
（5）盐酸。
（6）葡萄糖标准溶液：精密称取1.000 g经过80 ℃⼲燥⾄恒量的葡萄糖（纯度在99%以上），加⽔溶解后加⼊5ml盐酸，并以⽔稀释⾄1 L。
此溶液相当于1 mg/ml葡萄糖。
（注：加盐酸的⽬的是防腐，标准溶液也可⽤饱和苯甲酸溶液配制）5.操作⽅法5.1样品处理：5.1.1乳类、乳制品及含蛋⽩质的⾷品：称取约0.5～2 g固体样品（吸取2～10 ml液体样品），置于100 ml容量瓶中，加50ml ⽔，摇匀。
边摇边慢慢加⼊5 ml⼄酸锌溶液及5 ml亚铁氢化钾溶液，加⽔⾄刻度，混匀。
静置30min，⽤⼲燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备⽤。
（注意：⼄酸锌可去除蛋⽩质、鞣质、树脂等，使它们形成沉淀，经过滤除去。
如果钙离⼦过多时，易与葡萄糖、果糖⽣成络合物，使滴定速度缓慢；从⽽结果偏低，可向样品中加⼊草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。
）5.1.2酒精性饮料：吸取50 ml样品，置于蒸发⽫中，⽤1mol/L氢氧化钠溶液中和⾄中性，在⽔浴上蒸发⾄原体积1/4后，移⼊100 ml容量瓶中。
实验一 淀粉酸水解制糖与还原糖的测定
实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定一、试验目的①掌握酸法制糖的工艺与方法；②掌握还原糖的测定方法。
二、酸水解制糖原理在淀粉酸水解过程中，有如下三种反应：在水解过程中，淀粉的颗粒结构被破坏，α－(1, 4)－糖苷键及α－(1, 6)－糖苷键在酸的催化下被切断，示踪同位素原子O18研究证明，H＋先与H2O结合生成H3O＋，H3O＋能与糖苷键的氧原子结合生成不稳定化合物Ⅰ，随后C1－O键断裂生成C1正碳离子Ⅱ，H2O与具有正电荷的C1结合，再使C1失去H＋，完成糖苷键的水解过程。
三、实验仪器7230型分光光度计、水浴锅或电炉、100mL量筒、100mL或50mL容量瓶9个、10mL与2mL移液管各1支、250mL烧杯、250mL锥形瓶2个、布氏漏斗、真空泵、牛皮纸。
四、实验试剂淀粉（化学纯）、3, 5-二硝基水杨酸（化学纯）、1%硫酸、氢氧化钠（分析纯）、酒石酸钾钠、苯酚（化学纯）、亚硫酸钠（Na2SO3）、葡萄糖（分析纯）、无水酒精、粉末CaCO3。
①配制DNS（3,5－二硝基水杨酸）试剂：取7.5克3,5－二硝基水杨酸，14.0 g氢氧化钠，充分溶解于1000mL蒸馏水中。
再加入酒石酸钾钠216.0克，苯酚（在50℃水浴中融化）5mL，亚硫酸钠6.0克，完全溶解后盛于棕色瓶中。
②葡萄糖标准溶液(1g/L)：准确称取干燥衡重的葡萄糖1g，加1mL 1%硫酸(防止微生物生长)，以蒸馏水定容至1000mL。
③1%硫酸；④碘-碘化钾溶液四、实验步骤(一)葡萄糖标准曲线的制定管号0 1 2 3 4 5 6葡萄糖标准液(mL) 0 0.5 1.0 2.0 3.0 5.0 10.0②将各溶量瓶溶液混匀，在水浴锅或电炉上沸水浴5分钟，取出后立即用冷水冷却至室温，并加水定容，摇匀。
③于550nm 处用分光光计测定吸光度A 值，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线。
(二)还原糖的制备与测定 ①淀粉酸水解工艺取淀粉5~10g ，加入250mL 锥形瓶，按照固液比1∶10加入1%硫酸，用牛皮纸封好口，在121~125℃水解30min ，取出1、2滴置于白瓷板上，加1滴碘-碘化钾溶液直到不呈蓝色，即为水解终点。
淀粉中还原糖的测定
淀粉中还原糖的测定
淀粉是葡萄糖的重要前体，它的还原糖的测定是淀粉的酶水解分解过程中得到更多的葡萄糖的研究重点之一。
淀粉中还原糖的测定是指检测淀粉酶水解分解时得到多少葡萄糖。
它可以不同程度地揭示淀粉水解过程中多种反应物和反应机制，从而为淀粉研究和使用提供理论指导。
常用淀粉还原糖测定包括银蓟素法和紫色葡萄糖酶缓冲液（CERB）法。
银蓟素法通常使用复银蓟素（AIF3 ）作为还原剂，并用银溶液用作指示剂。
其原理是复银蓟素可以与葡萄糖反应，形成无色化合物，在添加银溶液后，无色化合物反应为深蓝色化合物，因此，用反应液的蓝色强度来表示淀粉水解中可以生成的葡萄糖量。
紫色葡萄糖酶缓冲液法（CERB）测定淀粉中生成的葡萄糖量，采用一定浓度的葡萄糖酶和一定浓度的磷酸柠檬酸钠缓冲液（pH 7.5）在中性环境下，葡萄糖酶将糖原分解成葡萄糖，而丙二醛大量生成，丙二醛和磷酸柠檬酸形成一种紫色混合物，并在530 nm处吸收光谱，计算其浓度来表示淀粉水解中的葡萄糖量。
淀粉的葡萄糖量有许多影响因素，如淀粉的粒径大小，水解温度、淀粉活性、淀粉溶液的pH值等。
淀粉还原糖测定可以反映淀粉水解过程中反应物和反应机制，可以用来研究淀粉的水解活性，进而洞察淀粉活性和可食用食品性能的关系。
淀粉中还原糖含量的测定实验报告
淀粉中还原糖含量的测定实验报告实验目的：了解淀粉中还原糖的含量测定方法,掌握其操作技能。
实验原理：淀粉在加热过程中会被分解为半乳糖单元,再由半乳糖单元与水分解产生葡萄糖和果糖,这些糖叫做还原糖。
还原糖会与硝酸铜溶液发生化学反应,生成蓝色沉淀。
利用这一特性,可以用硝酸铜法测定淀粉中还原糖的含量。
实验仪器：试管、恒温水浴、移液管、手持离心机、比色皿、分光光度计等。
实验材料：淀粉溶液、葡萄糖标准品、醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液、硝酸铜试液、碱式氯化钾溶液。
实验步骤：1.准备工作：将硝酸铜试液浓度稀释至0.1mol/L,将酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液PH值调至4.5,将碱性氯化钾溶液稀释至10%。
2.样品制备：取1ml淀粉溶液加10ml酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液混合,放至沸水中加热5分钟,冷却至室温后离心取上清液,加50ml水调至粘度适宜。
3.标准品制备：取30mg葡萄糖溶于50ml水中,称取1、2、3、4、5ml混合溶液,并分别转移至不同的试管中,加入2ml酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液中。
4.加入试液：取淀粉样品0.5ml放入离心管中,加入2.5ml缓冲液和2.5ml硝酸铜溶液混合均匀,置于60℃水浴中加热15分钟后冷却,加入2.5ml碱性氯化钾溶液,静置10分钟。
5.比色测定：将标准品和样品离心管中的试液吸入移液管中,分别加入不同比色皿中静置10分钟后,用660nm的波长分光光度计检测蓝色产物溶液的吸光度值。
实验结果：样品试验：A值 = 0.45标准品试验：第一组：1ml葡萄糖,A值 = 0.12第二组：2ml葡萄糖,A值 = 0.24第三组：3ml葡萄糖,A值 = 0.37第四组：4ml葡萄糖,A值 = 0.49第五组：5ml葡萄糖,A值 = 0.60计算：以葡萄糖标准曲线计算样品中还原糖含量。
样品中还原糖含量 = (A值 - A0) / S其中,A0是淀粉试样的吸光度,S为标准曲线斜率。
计算得出样品中还原糖含量为3.5mg/ml。
淀粉、总糖、还原糖的测定方法
淀粉、总糖、还原糖的测定方法淀粉的测定方法---蒽酮法一( 原理用乙醇将烟叶中可溶性糖浸出并分离出去，而后烟叶中淀粉用适量Hcl，因淀粉在稀酸作用下被水解成葡萄糖，再按葡萄糖测定进行。
根据葡萄糖的含量从而算出淀粉含量。
二( 仪器设备三角瓶50ml 容量瓶100ml 移液管10ml、1ml 漏斗圆底烧瓶1000ml 离心管和离心机水浴锅温度计烘箱滤纸天平分光光度计三( 试剂盐酸乙醇氢氧化钠蒽酮四、试剂的配制和标准曲线的绘制1. 葡萄糖标准液的配制称取无水葡萄糖(AR级)0.1g溶于蒸馏水中，定容至100毫升，用前取此液10毫升，再用水稀释至100毫升。
2. 标准曲线的绘制取6支干洁刻度试管，依次移入葡萄糖标准液(100μg/ml)0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00ml后，再从1至6试管依次补加1.0，0.8，0.6，0.4，0.2，0ml蒸馏水后，再分别加入蒽酮试剂5毫升，于沸水中加热10分钟，冷却后在620nm波长处比色，记录OD值，以吸光值为纵坐标，糖含量为横坐标，绘出标准曲线 3. 80%乙醇的配制取400毫升乙醇加水定容至500ml4. 1当量的盐酸配制 43毫升浓盐酸加水定容至500ml5. 10%氢氧化钠配制 10g氢氧化钠溶于100ml水中6. 蒽酮试剂:1克蒽酮溶于72%的HSO1000ml(98%的HSO+240的蒸馏水)，棕色瓶冰箱2424保存2,3周。
五实验步骤1. 分离出水溶性糖0.1g样置于离心管中加入8毫升80%乙醇 80?水浴浸提30分钟冷却后离心(3600转)5分钟残渣再加入8ml80%乙醇。
重复三次2. 水解残渣用1当量的盐酸15ml洗入50ml三角瓶，摇匀后烘箱105度加热3.5小时，冷却后加10%氢氧化钠6ml中和，过滤，蒸馏水定容100ml。
3. 测定取滤液1ml(空白用1ml蒸馏水代替)，加入蒽酮试剂5ml，摇匀，于沸水浴中加热10分钟，冷却后在620nm波长处比色六结果的计算与表述C=AN*0.9/WC—样品淀粉含量(μg/g) W—样品重量(g)A—标准曲线查得的糖量(μg) N—样品提取液占样品反应液的倍数蒽酮比色法测总糖:实验步骤:1、可溶性糖的提取:准确称取烟叶样品0.100克，置于离心管中，加入8毫升80%乙醇，于80?水浴浸提30分钟，冷却后于4000转离心5分钟，收集上清液，残渣再加入8毫升80%乙醇，再次浸提，重复两次，将三次提取的上清液合并于100毫升容量瓶中并定容至100毫升。
淀粉的国标测定方法
淀粉的国标测定方法测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法（酶-直接法）一、酶水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。
2.适用范围GB5009.9-85，适用于所有含淀粉的食物。
3.仪器（1）回流冷凝器（2）水浴锅4.试剂除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
（1）乙醚（2）0.5 % 淀粉酶溶液：称取淀粉酶（Sigma公司，E.C3.2.1.1）0.5 g，加100ml水溶解，加入数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。
（注：配成溶液的淀粉酶破坏很快，最好邻用现配。
）（3）碘溶液：称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中，加入1.3 g碘，溶解后加水稀释至100 ml。
（4）85 %乙醇。
（5）其余试剂同《蔗糖测定方法》5.操作方法5.1 样品处理称取2～5 g样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪（注：如果脂肪含量少，此步骤可免），再用约100 ml85 %乙醇洗去可溶性糖类（注：此步骤目的是去除可溶性糖），将残留物移入250 ml烧杯内，并用50ml水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15 min，使淀粉糊化，放冷至60 ℃以下，加20ml淀粉酶溶液，再55～60 ℃保温1h，并时时搅拌（注：温度过高，淀粉酶的活性破坏）。
然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不现兰色，若显兰色，再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显兰色为止。
加热至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤。
（注：此时淀粉已水解成双糖，过滤可去除残渣和纤维素）弃去初滤液，取50 ml滤液，置于250ml锥形瓶中，加5 ml 6 mol/L盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基红指示剂，用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100 ml容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。
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6. 实验完成后洗净仪器，放回原位。
骤步验实
? 1.标准曲线的绘制
管号
1mg/ml 葡
萄糖标准 液(ml)
蒸馏水 (ml)
0
0
2
1
0.2
1.8
2
0.4
1.6
3
0.6
1.4
4
0.8
1.2
5
1.0
1.0
6
1.2
0.8
DNS (ml)
葡萄糖含 量（mg)
光密度值
1.5
0
1.5
0.2
1.5
0.4
1.5
0.6
材料 ： 食用面粉。
项事意注
1. 沸水浴时应将试管口用保鲜膜封住，以防 止水分蒸发引起体积误差。
2. 应该待反应体系稳定后进行比色（约 10min ）。
3. 比色时，比色皿中盛放的溶液体积不应过 多，一般在 2/3~3/4 。
4. 比色时不能将溶液溅在仪器面板和仪器内。
5. 标准曲线制作与样品含糖量测定应同时进 行，一起显色和比色。
还原糖的测定
3,5-二硝基水杨酸比色 法
班级 ： 生科2班 姓名 ： 胡雨雨 同组人 ：张贤明
的目验实
? 1. 掌握还原糖和总糖测定的基本原理。 ? 2. 学习比色法测定还原糖的操作方法
和分光光度计的使用。
理原验实
还原糖是具有还原性的糖类的统称。分子中含有
游离醛基或者酮基的单糖和含有游离醛基的二糖 都具有还原性。如葡糖糖、果糖、半乳糖、乳糖、 阿拉伯糖、麦芽糖等。 在碱性条件下，还原糖与 3 ， 5 一二硝基水杨酸共热， 3 ， 5 一二硝基水 杨酸被还原为 3-氨基 -5- 硝基水杨酸（棕红色物 质），还原糖则被氧化成糖酸及其他产物。一定 范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程 度成一定的比例关系， 540nm 波长下测定棕红 色物质的消光值，查对标准曲线并计算，便可分 别求出样品中还原糖和总糖的含量。
骤步验实
得出吸光值
管号
1mg/ml葡
萄糖标准 液(ml)
蒸馏水 (ml)
0
0
2
1
0.2
1.8
2
0.41.63源自0.61.44
0.8
1.2
5
1.0
1.0
6
1.2
0.8
DNS (ml)
葡萄糖含 量（mg)
光密度值
1.5
0
0
1.5
0.2 0.052
1.5
0.4 0.196
1.5
0.6 0.293
1.5
0.8 0.441
析分差误验实
1. 在称取面粉时候，滤纸上有少许淀粉未倒 干净，或者电子天平不太准确造成的质量 上的误差。
2. 在定容和移取液体时，读数不准确，或者 有的移液管没有写吹字却吹了，造成的误 差。
3. 在测吸光度值的时候没有擦干净导致的测 量误差，或者用酒精洗的时候没有洗干净 造成的误差。
骤步验实
3 ）显色和比色，取 2 支 25 ml 刻度试管， 编号，按下表所示的量操作。
管号
还原糖待 蒸馏水 测液（ml) （ml)
DNS
查曲线葡 光密度值 萄糖含量
(ml)
(mg)
样品1 0.5
1.5
1.5 0.112 0.27
样品2 0.5
1.5
1.5 0.121 0.28
样品光密度平均值=(0.112+0.121)/2=0.1165
1.5
0.8
1.5
1.0
1.5
1.2
骤步验实
? 按照上表取 7支试管配好试剂，将各管摇匀， 在沸水浴中加热 5min ，取出后立即冷却 至室温，再以蒸馏水定容至 25ml ，混匀。 在 540nm 波长下，用 0 号管调零，分别 读取 1-6 号管的吸光度。以吸光度为纵坐 标，葡萄糖毫克数为横坐标，绘制标准曲 线。
根据函数 y=0.595x-0.046 可得葡萄糖含量
理处据数及果结验实
? 已知提取液总体积为100ml、测定时取用体积为 0.5ml、样品毫克数为3000mg、根据以下公式进 行计算。
样品平均葡萄糖 =0.27+0.28=0.275mg 还原糖%= （0.275*100*100% ）/
（0.5*3000 ）=18.3%
法方他其
糖含量定量测定的方法除此之外还有 ①高效液相色谱法（ HPLC ） ②苯酚-硫酸法 ③蒽酮法 ④双折射现象
得心
从结果中所得到的的心得 并不是所有的糖有甜的味 道，只有少数结构简单的糖是有甜味的，如葡萄 糖、蔗糖、麦芽糖、果糖、乳糖等，充斥于各种 甜食之中的就是它们。自然界存在的多数糖——多
1.5
1.0 0.549
1.5
1.2 0.668
? 以吸光度为纵坐标，葡萄糖毫克数为横坐 标，绘制标准曲线
骤步验实
骤步验实
2. 样品中还原糖和总糖含量的测定
样品中还原糖的提取：准确称取 3.0g 食用 面粉，放在 50ml 三角瓶中，先以少量蒸 馏水调成糊状，然后加 25ml 蒸馏水，搅 匀，置于 5 0 ℃恒温水浴中保温 20min ， 使还原糖浸出。离心，用 2Oml 蒸馏水洗 残渣，再过滤，将两次的滤液全部收集在 50ml 的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度， 混匀，作为还原糖待测液。
料材、剂试、器仪
仪器 ： （ 1 ）试管X 11 （ 2 ）玻璃漏斗 X2 （ 3 ）烧杯： 1OOml X
1 （ 4 ）三角瓶： 100m1 X 1 （ 5 ）容量瓶： 100ml X 3 （ 6 ）恒温水浴 （ 7 ）沸水浴 （ 8 ）电子天平 （ 9 ）分光光 度计
试剂 ： （ 1 ） 1 mg/ ml 葡萄糖标准液：准确称取 10mg 分析纯葡萄 糖（预先在 8 0 ℃烘至恒重），置于小烧杯中，用少量蒸馏 水溶解后，定量转移到 10ml 的容量瓶中，以蒸馏水定容至 刻度，摇匀，冰箱中保存备用。 （ 2 ） 3 ， 5- 二硝基水杨 酸试剂：将 0.315g 3, 5- 硝基水杨酸和 13.1ml 2mol/NaOH 溶液，加到 25ml 含有 9.25g 酒石酸钾钠的热水溶液中，再 加 0.25g 结晶酚和 0.25g 亚硫酸钠，搅拌溶解。冷却后加蒸 馏水定容至 50ml ，贮于棕色瓶中备用。