《医学遗传学实验》——小鼠睾丸染色体制备
实验五小鼠初级精母细胞染色体畸变试验
滴片
预冷的玻片
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7、染色 将制备好的标本片放入Giemsa应用液 中染色20～30min。立即用蒸馏水或磷酸盐缓 冲液冲洗。晾干。
8、读片 在低倍镜下按一定顺序寻找背景清晰、 分散良好、染色体收缩适中的中期分裂相细 胞，再在油镜下选取邻近无游离染色体或中 期相的细胞进行观察。
9．观察 每只动物分析100个中期分裂相 细胞。
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仪器和器械
生物显微镜、离心机、解剖剪、眼科镊 子、注射器、灌胃针头、小平皿、离心 管、吸管、滴管、试管架、载玻片、玻 璃染色缸、擦镜纸等。
试剂
姬姆萨（Giemsa）染液
Giemsa染料
3.8 g
甲醇
375 ml
甘油
125 ml
配制：将Giemsa染料和少量甲醇于乳钵里仔
细研磨，再加入甲醇至375 ml，待完全溶解后，
实验五 小鼠初级精母细胞染色体畸变试验
Mammalian Spermatocyte Chromosome Aberration Test
目的
本试验是一项检测生殖细胞染色体畸变效 应试验，利用细胞遗传学方法，检测整体 哺乳动物初级精母细胞染色体畸变，以评 价受试样品引起生殖细胞可遗传突变的可 能性。 学习小鼠初级精母细胞染色体畸变试验方 法的基本操作步骤。
试验设计
实验动物 7～12周龄健康雄性小鼠，每组保 证至少5只存活
剂量分组 – 阴性对照组 溶剂 – 阳性对照组 丝裂霉素C 1.5～2mg/kg 腹 腔 注 射 一 次 ； 或 环 磷 酰 胺 40mg/kg ， 腹腔注射，1次/d，连续5天。
试验设计
－剂量组 高剂量 根据急性LD50，选用使动物轻 微中毒，体重略有下降，不引 起动物死亡的剂量 按等比级数2向下设置中、低剂量组
实验一 小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集、运动能力检测与结构观察
实验方法
采集附睾尾精子时，将其剪成几段。采集输精管 精子时，由于小鼠输精管非常细，不能直接冲洗 管腔，将输精管放入含有1ml培养液的表面皿内， 在实体显微镜下，用一只眼科异物针固定输精管， 用另一支异物针向相反方向纵向撕开输精管，精 子会浮游到培养液中。将大块输精管组织拨开， 用吸管连同精子吸出液体部分，装于2ml具塞试管 中暂存。
的重要指标。哺乳动物精子包括头部和尾部两
个主要部分，颈部介于头部和尾部之间，形成
头部和尾部的连接。精子头部主要由核组成，
实验原理
头部顶端是顶体，顶体包围核的前端形成帽状。 精子颈部变细并形成头部和尾部的连接。尾部 是精子的运动器官，可以分为中段、主段和末 端。
实验用品
1. 设备与器材：实体显微镜、恒温培养箱、 恒温水浴锅、注射器、注射针头、吸管、 试管架、血细胞计数板、剪刀、解剖刀、 解剖镊、载玻片、盖玻片等。 2. 药品、试剂： 精子操作液（CZB液或KSOM液）、0.5%龙 胆紫酒精液、36%甲醛溶液、磷酸缓冲液 （PH6.8）、精子固定液（福尔马林磷酸盐 缓冲液）、吉姆萨工作液。
实验用品
3. 实验动物： 选择60日龄以上，体重达到32-35g的昆明种 公鼠。
实验方法
1. 精子采集： 左手捏小鼠尾部，右手持镊子，或以图3-1所 示方法，以颈部脱臼法处死小鼠。使处死的小鼠 仰卧，用75%的酒精棉球消毒腹部开口部位被毛 及皮肤。剪开腹壁，暴露生殖系统。无菌分离睾 丸、附睾及输精管。在含培养液的表面皿中，用 眼科剪除去睾丸、附睾及输精管周围的系膜及脂 肪，并冲洗干净，以免血液或脂肪球混入液体妨 碍精子观察。
实验方法
将分离并清洗干净的睾丸、附睾及输精管，用眼 科剪再分离为睾丸、附睾尾及附带的小段输精管、 其余部分的输精管3部分，弃去附睾头。采集睾丸 精子时，将睾丸横切为如干段或组织块，放在表 面皿中，加1ml培养液，用眼科剪轻轻挤压睾丸组 织块，把精子挤入培养液中，去掉组织块 。置 37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱孵育20min，使 精子自行散开。
小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察
Isolation and staining of mouse meiotic metaphasechromosomes小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察xx 2011级生科四班201100140120 同组者：xx【实验目的】1、learn to isolate mouse testes cells and stain with Giemsa.学会分离小鼠睾丸细胞并用Giemsa染液染色2、Observe the number and morphology of mouse chromosomes观察小鼠染色体的数目及形态特征【实验材料】【Reagents】秋水仙素colchicine solution吉姆萨染液Giemsa stains solution生理盐水physiological saline氯化钾溶液KCl solution固定液fixation solution【Tools and equipments】Dissecting tray，beaker，centrifuge tube，microscope，glass slide，pipette，scissors，forceps，copper mesh.解剖盘，烧杯，离心管，显微镜，载玻片，吸管，剪刀，镊子，铜网【实验原理】meiosis is a process of reductional division in which the number ofchromosomes per cell is cut in half. In animals, meiosis always results in the formation of gametes, while in other organisms it can give rise to spores. 减数分裂是细胞分裂染色体数减半的过程，在动物中,减数分裂的结果总是在形成配子,而在其他生物可以产生孢子。
简述小鼠骨髓染色体制备流程及注意形象
简述小鼠骨髓染色体制备流程及注意形象下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!小鼠骨髓染色体制备流程如下：1. 选取实验动物：选择健康、生长状况良好、年龄适宜的小鼠作为实验对象。
小鼠染色体的制备、观察、染色
生命科学学院Life Science College细胞生物学实验报告姓名：柳伟雄班级：2013级生科一班学号：************ 同组者：曾玮璠山东大学实验报告2015年6月1日姓名：柳伟雄系年级：生科一班2013级同组者：曾玮璠科目：细胞生物学实验题目：小鼠染色体的制备、染色、观察一、目的和要求1.初步掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法，了解各操作步骤的原理。
2.了解常用实验动物染色体的数目及特点。
3.认识不同生物染色体的特征，学会做染色体组形图。
二、原理凡处于活跃增殖状态的细胞，或者经过各种处理后，任何动物组织的细胞就可进入分裂，均可用于染色体分析。
在正常动物体内，精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织。
给动物注射一定剂量的秋水仙素，即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期，然后采用常规空气干燥法制备染色体，即可得到大量可分析的染色体标本。
本方法简便、可靠，不需要经体外培养和无菌操作，易于推广。
骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。
但在取材方面，精巢又比骨髓要简易一些，故本实验选用小鼠的精巢为实验材料。
对于小鼠精巢染色体标本的制作，一般包括以下几个要点: 1. 用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处; 2. 用低渗法使细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞被胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上; 3. 空气干燥法可使细胞的染色体在载片上展平,经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。
Giemsa染色是最常用的染色方法之一，适用于多种细胞和染色体染色。
主要用Giemsa染液可以将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。
三、试剂和器材1.试剂：秋水仙素、生理盐水（0.9%的NaCl溶液）、0.3%KCl低渗溶液、固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液Giemsa染液的配制：吉姆萨粉(Giemsa stain)甘油(AR)甲醇(AR)将Giemsa粉放入研钵中，先加入少量甘油，研磨至无颗粒为止，然后再分批加入甘油，放56℃温箱中2h后，分批加入甲醇，将配制好的染液密封保存棕色瓶内(最好于0~4℃保存)。
两种小鼠生精细胞染色体制备方法的探讨与评价
— 104 —CHINESE JOURNAL OF ANATOMY V ol.44 No.2 2021 解剖学杂志 2021年第44卷第2期两种小鼠生精细胞染色体制备方法的探讨与评价*卢文亮 孟卫京 薛春梅 杨 静 宁伟霞 毛国丽 郭兴萍△（山西省生殖科学研究所，太原 030006）摘要 目的：比较改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法制作小鼠生精细胞减数分裂中期染色体标本的优劣。
方法：选用8~12周龄雄性Balb/c 小鼠，分别采用改良的体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法进行减数分裂中期染色体制备，并用Giemsa 染色。
光镜下观察小鼠生精细胞减数分裂不同阶段分裂相细胞染色体形态并计数，计算各分裂相细胞的检出率。
结果：体内注射秋水仙素制备法和空气干燥直接制备法对生精细胞减数分裂中期染色体核型的检出率分别为10.37%和6.46%。
秋水仙素处理小鼠的最适浓度是4 mg/kg ，体内注射秋水仙素制备法制得的核型分裂相比空气干燥直接制备法多，直接制备法得到的染色体核型边缘清晰，更便于计数。
结论：体内注射秋水仙素制备法的优势在于核型分裂相多，而空气干燥直接制备法的优势在于染色体核型边缘清晰，更便于计数，可根据不同实验需求进行选择。
关键词 生精细胞；减数分裂；标本制备；小鼠Discussion and evaluation on chromosome preparation methodsof spermato genic cells in two groups of mice *Lu Wenliang ， Meng Weijing ， Xue Chunmei ， Yang Jing ， Ning Weixia ， Mao Guoli ， Guo Xingping △（Shanxi Institute of Reproductive Science ， Taiyuan 030006， China ）Abstract Objective ： To compare the advantages and disadvantages of the modified colchicine injection and the direct air drying methods for preparing meiotic metaphase chromosome of mouse spermatogenic cells. Methods ： Male Balb/c mice aged 8 to 12 weeks were used to prepare meiotic metaphase chromosomes by the modified colchicine injection and air drying ， respectively ， and stained with Giemsa. Under light microscope ， the chromosome morphology was observed and the mitotic phase cells were counted at different stages of meiosis in spermatogenic cells ， and the rate of cells in each phase was calculated. Results ： The detection rate of chromosome karyotypes in meiotic metaphase of spermatogenic cells by two methods was 10.37% and 6.46% respectively. The optimum concentration of colchicine for the mice was 4 mg/kg ， and the karyotype obtained by injection of colchicine in vivo was more than that by direct preparation. The chromosome karyotype obtained by direct preparation had clear edges and was easier to count. Conclusion ： Colchicine injection in vivo can obtain more karyotypes ， while air drying direct preparation can obtain clear chromosome karyotype edge ， which is easier to count ， and can be selected according to the different experimental requirements.Key words germ cell ； meiosis ； specimen preparation ；mousedoi ： 10.3969/j.issn.1001-1633.2021.02.003·论 著·*山西省卫生健康委科研项目（2019004）第1作者E-mail ：*****************△通信作者，E-mail ：***************收稿日期：2020-07-16；修回日期：2020-11-15生精细胞减数分裂期染色体分析是遗传学、组织学胚胎学、细胞生物学和生殖生物学研究的重要手段[1-2]。
简述小鼠染色体制备的流程
简述小鼠染色体制备的流程小鼠染色体制备。
选只小鼠，得挑健康的，不能是病怏怏的那种。
然后，得给它打麻药，让它舒舒服服地睡一觉。
这样咱们就能轻松取得细胞了。
取细胞这活儿，得迅速。
从骨髓或者脾脏里取，这得看实验需求。
取出来后，咱们得让细胞在低渗环境里待会儿，这样染色体就能胀大，看得更清楚。
然后，用固定液固定一下，这样细胞形态就稳定了。
接下来，就是染色和观察了。
用专门的染料给染色体上色，让它们变得五彩斑斓的。
然后，在显微镜下瞅瞅，看看这些染色体长啥样，数数有多少个。
这可得细心点，不能漏看了。
说起来，小鼠染色体制备这事儿，看着简单，其实挺考验技术的。
得选对小鼠，还得会取细胞、染色、观察。
不过，只要技术到位，就能得到清晰的染色体，为后面的研究打好基础。
简述小鼠骨髓染色体制备流程及注意形象
简述小鼠骨髓染色体制备流程及注意形象下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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三、实验内容与步骤
腹腔注射秋水仙素 处死小鼠
（损伤脊髓法）
取睾丸，剥离白膜， 剪碎曲细精管 弃上清
第一次低渗：0.4%KCL,37℃,5ml→10 ml,吹打2 min 37℃ 静置2min 第二次低渗： 0.4%KCL, 吹打2min, 37℃,10ml， 37℃静置5min
弃上清
固定：8ml新鲜固定液，10 min 弃上清
实验一、小鼠睾丸细胞染色体标本的制备
医学遗传学系
一、实验ห้องสมุดไป่ตู้的
1、掌握快速制备动物染色体的方法； 2、观察小鼠染色体的数目及形态特征。
二、实验原理
活体内注射秋水仙素使细胞停止在 分裂中期；低渗处理，使细胞膜胀破、染 色体分散，从而得到染色体的中期分裂相 静置5min ;固定剂处理使染色体结构保持完整，防 止染色体收缩。
离心：1000rpm，8min 滴片，烘干 镜检观察
软化：60%冰醋酸，3ml，3min 细流冲洗，晾干
染色：室温下10min
本文观看结束！！！
谢
欣
谢
赏！