草乌中乌头类生物碱提取方法比较研究_随志刚

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乌头碱类生物碱的含量测定方法概述

乌头碱类生物碱的含量测定方法概述陆燕萍;巩晓宇;陈秋燕;邱凤邹【摘要】The content determination methods of single ester alkaloids, diester alkaloids and total alkaloid in radix aconiti, kusnezoff monkshood, aconite and other aconitine drugs are described in this article including HPLC, RP-HPLC, LC-MS, TLCS, High Performance Capillary Zone Electrop- horesis and Spectrophotometry. Based on different mobile phase, HPLC and RP-HPLC is classified. At the same time, the classification of TLCS is carried out studied according to different deployment agents.%总结概括目前川乌、草乌、附子等乌头碱类药物的单酯型生物碱、双酯型生物碱及总生物碱的含量测定方法，主要有高效液相色谱法、反相高效液相色谱法、液－质联用方法、双波长薄层扫描法、高效毛细管电泳法和分光光度法。

该文根据不同的流动相对高效液相色谱法和反相高效液相色谱法进行分类，同时根据不同的展开剂对双波长薄层色谱法进行了分类。

【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2016(025)007【总页数】3页(P1-2,3)【关键词】乌头碱类生物碱;含量测定;高效液相色谱法;反相高效液相色谱法;液-质联用方法【作者】陆燕萍;巩晓宇;陈秋燕;邱凤邹【作者单位】广东省深圳市龙岗区人民医院，广东深圳 518172;广东省深圳市龙岗区人民医院，广东深圳 518172;广东医学院，广东东莞 523808;广东省深圳市龙岗区人民医院，广东深圳 518172【正文语种】中文【中图分类】R282.41;R286.0乌头碱类药物的主要成分是生物碱，包括单酯型生物碱、双酯型生物碱、氨醇型生物碱和其他类型化合物。

从乌头属中药材中分离提取单双酯型生物碱与脂型生物碱的方法[发明专利]

专利名称：从乌头属中药材中分离提取单双酯型生物碱与脂型生物碱的方法
专利类型：发明专利
发明人：刘志强,包懿,皮子风,越皓,宋凤瑞,刘淑莹
申请号：CN200710055977.3
申请日：20070821
公开号：CN101129500A
公开日：
20080227
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供从乌头属中药材中分离提取单双酯型生物碱与脂型生物碱的方法。

把乌头属中药材经过乙醇冷浸后，用无水乙醇醇沉，然后用环己烷－乙醇－水体系进行萃取，在上层溶液中即得纯净的脂型生物碱，在下层溶液中即得单酯型和双酯型生物碱。

通过电喷雾质谱检测，提取分离效果较好。

经计算脂型生物碱的产率在0.34％以上，单酯型和双酯型生物碱的总产率在1.02％以上。

申请人：中国科学院长春应用化学研究所
地址：130022 吉林省长春市人民大街5625号
国籍：CN
代理机构：长春科宇专利代理有限责任公司
代理人：马守忠
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草乌中乌头类生物碱提取方法比较研究_随志刚

(药理药化(收稿日期:2008-10-09; 修订日期:2008-12-20基金项目:国家自然科学基金(N o .30873360);吉林省科技发展计划资助课题(No .20080105)作者简介:随志刚(1979-),男(汉族),吉林长春人,现为吉林大学药学院在读博士研究生,硕士学位,主要从事质谱分析化学研究工作.*通讯作者简介:刘忠英(1964-),女(汉族),吉林白城人,现任吉林大学药学院教授,博士生导师,博士学位,主要从事生物化学分析研究工作.草乌中乌头类生物碱提取方法比较研究随志刚1,陈明玉1,刘志强2,皮子凤2,刘忠英1*(1.吉林大学药学院,吉林长春 130021; 2.中国科学院长春应用化学研究所,吉林长春 130022)摘要:目的优化草乌中乌头类生物碱提取方法,比较草乌、附子生品及市售炮制品中乌头类生物碱的含量,为相关中药中生物碱的测定和临床应用提供参考。

方法分别用7种提取方法提取附子中乌头类生物碱,比较各方法对3种双酯型生物碱的提取效率,并测定乌头类生药及其炮制品中乌头类生物碱含量。

结果10%氨水乙醚冷浸法对3种双酯型生物碱的提取效率最高。

炮制品中的乌头类生物碱含量明显低于生药,各种炮制品中乌头类生物碱的含量差别也比较大。

结论采用10%氨水乙醚冷浸法,高效液相色谱-紫外光谱(H PLC-UV )法对药材中乌头类生物碱进行提取和含量测定,能真实反映药材中药效和毒性成分。

不同的炮制品中各生物碱含量差别较大,临床应用应有差别。

关键词:提取方法; 草乌; 附子; 乌头碱类生物碱中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2009)03-0513-02Co mparison of D ifferent Extraction M ethods of Aconitu m A lkaloids fro m Radix Aconiti Kus nezoff iiS U I Z h-i gang 1,C H EN Ming -yu 1,L I U Z h-i q iang 2,P I Z -i feng 2,L I U Z hong -y i n g1*(1.College of Phar m acology,J ilin Un i v ersit y ,Changchun 130021,China;2.Changchun Institute of App lied Che m istry ,Chinese Acade m y of Sciences ,Changchun 130022,China )Abst ract :O bjective T o optim ize the ex tracti on techno logy of acon itu m a l ka l o i ds from R adi x A con iti K usnezoff ii ,and to de ter -m i ne the contents o f acon it u m a l kalo i ds i n R ad i x A conitiK usnezoffii ,Fuzi and their processed produc ts so l d i n Ch i nese phar m acy .M ethods The effi c iency of seven ex tracti on m ethods w ere compared by deter m i n i ng the conten ts o f acon i tine ,m esacon iti ne and hypacon iti ne of sa m ples extracted by d ifferent m ethods .The H PLC -UV m ethod w as used to deter m i ne t he contents o f acon itu m a l ka l o i ds i n R ad i x A conitiK usnezoffii ,Fuzi and their processed products .Re s u lts The m ost e fficient me t hod was to ex tract sa m ple w it h e t her from the herb sub m erged i n 10%a mm onia .T he three diester-d iterpeno i d a l ka l o i ds o f processed products w ere m uch lo w er than t hose o f the raw herbs and the con tents o f acon it u m a l kalo i ds i n d iffe rent processed products we re different w i de l y .Conc l u sion The me t hods used i n ex tracti on and ana l ysis f o r acon itu m a l ka l o i ds from herbs are e ffecti v e ,reli able and si m ple .D i -f ferent k i nds o f processed products of ra w herbs shou l d be d i scri m i nati ng l y treated in cli nic applica ti on .K ey w ords :Ex tracti on m ethod ; R ad i x A coniti Kusnezoff ii ; Fuz;i A conitu m a l kalo i ds 在乌头类生药及炮制品中,生物碱成分既是药效成分同时也是毒性成分[1],而且稳定性不好,很容易降解[2],所以生物碱的提取方法在其成分分析中十分重要。

中蒙药生物碱的提取方法与工艺研究

中蒙药生物碱的提取方法与工艺研究李云超1陈建平2布仁2塔娜2贾慧2朱晓伟2*（1.内蒙古赤峰学院附属医院药房，内蒙古赤峰 024000；2.内蒙古医科大学药学院，内蒙古呼和浩特市010110）摘要：阐述了近年来对生物碱类化合物提取方法的研究进展，生物碱类化合物具有广泛的生物和光学活性, 生物碱类化合物的提取方法有冷浸提法、浸渍法、超声波提取法、渗漉法、回流提取法、超临界提取法、酶提取法、醇类溶剂提取法、有机溶剂提取法、索式提取法、微波萃取法[1]等。

本文详细介绍了中蒙药生物碱的提取方法与工艺，并比较了各种方法的优缺点。

通过对这些提取方法与工艺进行综合性的论述与分析，为中蒙药生物碱的开发利用提供了借鉴和理论依据。

关键词：生物碱类化合物；提取工艺；中蒙药；Extraction methods and technology research of alkaloids in traditional Chinese medicines and Mongolian medicinesLi Yun-chao1 Chen Jian-ping2, Bu Ren2, et al.(Pharmacy, Affilited hospital of Chifeng College,Chifeng 024000 Inner Mongolia China;Pharmacydepartment,Inner Mongolia Medical University,Hohhot 010110 China)Abstract The article elaborated the research progress of extraction methods of alkaloids in recent years. Alkaloids compounds have comprehensive biological and optical activity.The extraction methods of alkaloids compounds include quenching method,impregnation,ultrasound extraction method, percolating method, refluxing method,supereritical fIuid extraction method,enzyme-assisted extraction,the ethanol refluxing method,organic solvent extraction method,Soxhlet extraction,microwave extraction and so on.The article introduced detailedly the extraction and techonology of traditional Chinese medicine and Mongolian medicin es’alkaloids.Moreover,it compared the above methods’ advantages and disadvantages.Through comprehensive discussion and analysis,the article provided successful experiences and theoretical foundation for development and utilization of alkaloids. Key Words alkaloids compounds;extraction technology; traditional Chinese medicine and Mongolian medicin e生物碱类化合物广泛存在于自然界的植物中,属植物次生代谢产物。

一种从乌头药材中提取生物碱的方法[发明专利]

专利名称：一种从乌头药材中提取生物碱的方法专利类型：发明专利
发明人：罗维早,覃瑶,阳勇,张毅,翁代群
申请号：CN201010176104.X
申请日：20100519
公开号：CN101829201A
公开日：
20100915
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开一种从乌头药材中提取生物碱的方法，包括药材提取和精制；本发明工艺简单，生物碱转移率高；与大孔吸附树脂法提取和离子交换树脂法提取，具有使用酸碱性水溶液的量较小，减少了环境污染的优点。

申请人：重庆市中药研究院
地址：400065 重庆市南岸区南山路34号
国籍：CN
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乌头类生物碱体外代谢、吸收的质谱研究的开题报告

乌头类生物碱体外代谢、吸收的质谱研究的开题报
告
一、题目：
乌头类生物碱体外代谢、吸收的质谱研究
二、研究目的:
乌头类植物是一类致命性毒草，含有多种生物碱，长期以来被广泛应用于中药疗法中。

然而，乌头类植物生物碱在人体内的动态代谢及吸收等方面仍不完全清楚。

因此，本研究旨在利用质谱技术研究乌头类生物碱体外代谢及吸收的基础机制，为进一步揭示其药理学作用和毒性作用提供理论依据。

三、研究内容与方法:
1. 研究乌头类生物碱在体外代谢规律：利用人血浆、肝微粒体或细胞色素P450等不同体系设置不同反应瓶，探究乌头类生物碱的体外代谢规律。

2. 研究乌头类生物碱的体外吸收规律：采用人体组织切片或单元培养细胞等不同体系，观察乌头类生物碱的体外吸收规律。

3. 质谱技术分析：使用LC-MS/MS、GCMS或MALDI-TOF等质谱技术分析乌头类生物碱体外代谢和吸收过程中产生的代谢产物及其结构。

四、可行性和预期结果:
1. 本研究采用了多种体系和质谱技术，有一定的可行性。

2. 通过研究乌头类生物碱的体外代谢和吸收规律，可较为全面地了解乌头类生物碱在人体内的药理作用和毒性作用，为其应用提供理论依据。

同时，研究可为毒理学和药理学领域提供有价值的基础研究成果。

3. 预期结果为得到乌头类生物碱体外代谢和吸收过程中代谢产物及其结构，对乌头类植物的研究提供基础性数据和参考依据。

草乌中有毒生物碱的提取分离

草乌中有毒生物碱的提取分离
唐庆旭
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2005(018)005
【摘要】针对药材中乌头碱,中乌头碱、次乌头碱的提取分离方法进行了研究,本方法提取回收率与碱性苯溶液提取方法相似.方法中所用试剂成本低、毒性小,适用于乌头碱、中乌头碱、次乌头碱的提取分离以及对照品的制备.
【总页数】2页(P344-345)
【作者】唐庆旭
【作者单位】哈药集团制药六厂,黑龙江哈尔滨150080
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.大孔吸附树脂用于川草乌中总生物碱的分离提取 [J], 杨桦;邓晓静;易红
2.草乌中酯型生物碱的提取动力学 [J], 赵平鸽;宋俊英;余陈欢;戴晓燕;严云良
3.泰山产草乌中总生物碱的提取工艺研究 [J], 李永芳;苏延友;夏成才;唐瑜菁;牛瑞仙
4.草乌中有毒生物碱的提取分离 [J], 唐庆旭
5.草乌中乌头类生物碱提取方法比较研究 [J], 随志刚;陈明玉;刘志强;皮子凤;刘忠英
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附子煎煮与配伍应用中乌头类生物碱含量的变化及意义

附子煎煮与配伍应用中乌头类生物碱含量的变化及意义随志刚;陈明玉;刘志强;皮子凤;刘忠英【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2009(35)2【摘要】目的:对比研究水浴和微波加热条件下附子中乌头类生物碱的水解规律,检测与不同中药配伍煎煮后附子中乌头类生物碱的含量变化.方法:分别以水煎煮和微波加热的方法提取附子药材,采用高效液相色谱法(HPLC)分别对其中的3种双酯型生物碱及其水解产物进行含量测定;同时检测与不同中药配伍煎煮后,附子中乌头类生物碱减少程度的差异.结果:附子水煎煮30 min后,中乌头碱和次乌头碱的含量分别变为峰值的10.5%和41.9%,乌头碱完全检测不到;附子微波加热150 S后中乌头碱、乌头碱和次乌头碱含量分别为峰值的59.2%、41.4%和86.6%.与生附子单煎煮比较,生附子与大黄、干姜或甘草共煎后,乌头类生物碱总含量均明显下降,分别降至附子单煎煮时的52.8%、66.2%和53.4 0A;与人参或白芍共煎煮后略有下降,分别为附子单煎煮时的79.5%和83.7%.结论:附子中乌头类生物碱在水煎煮和微波加热过程中有不同的水解规律;生附子与大黄、干姜、甘草、人参或白芍共煎后乌头类生物碱含量均有下降.【总页数】4页(P226-229)【作者】随志刚;陈明玉;刘志强;皮子凤;刘忠英【作者单位】吉林大学药学院生化教研室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院生化教研室,吉林,长春,130021;中国科学院长春应用化学研究所质谱中心,吉林,长春,130022;中国科学院长春应用化学研究所质谱中心,吉林,长春,130022;吉林大学药学院生化教研室,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.不同煎煮时间内生草乌中乌头碱含量变化研究 [J], 刘学湘;严维维2.生附子煎煮过程中生物碱含量变化及水解机理 [J], 龚又明;邓广海;郑显辉;覃军;罗明超;王芳3.离子选择性电极测定附子中乌头类生物碱含量... [J], 徐红雨4.附子理中口服液中乌头类生物碱的含量测定 [J], 杨云5.HPLC法测定附子配伍前后乌头类生物碱含量 [J], 张丽;李锦;王玉明;刘昆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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方法分别用7种提取方法提取附子中乌头类生物碱,比较各方法对3种双酯型生物碱的提取效率,并测定乌头类生药及其炮制品中乌头类生物碱含量。

结果10%氨水乙醚冷浸法对3种双酯型生物碱的提取效率最高。

炮制品中的乌头类生物碱含量明显低于生药,各种炮制品中乌头类生物碱的含量差别也比较大。

结论采用10%氨水乙醚冷浸法,高效液相色谱-紫外光谱(H PLC-UV )法对药材中乌头类生物碱进行提取和含量测定,能真实反映药材中药效和毒性成分。

不同的炮制品中各生物碱含量差别较大,临床应用应有差别。

目前有关生物碱的提取方法有很多[3~5],但是,各种方法对双酯型生物碱的提取效率的比较研究尚无报道。

中医临床常用的乌头类中药为附子的炮制品,市售的附子炮制品饮片按不同的炮制方法分为盐附子、黑附片、白附片、淡附子、熟附片及炮附子等[6],但是,不同的炮制方法,必然会造成生物碱含量的不同,在使用上应有所区别。

本文比较了7种提取方法对乌头类中药中3种双酯型生物碱的提取效率,并测定乌头类生药及其炮制品中乌头类生物碱含量,以期准确测定附子中生物碱,为保证此类中药的临床应用更为安全合理提供可靠的分析方法。

1 仪器与试剂1.1 仪器LC -10A 高效液相仪(Shi m adzu ,日本);超声清洗器(Autosc i ence ,天津);高速离心机(Eppendo r,f 德国);电子天平(Sarto ri us ,德国)。

1.2 试剂乌头碱,中乌头碱和次乌头碱对照品购自中国药品生物制品检定所。

生附子、生草乌购自四川江油,制草乌、黑附片、白附片、盐附子、淡附子购自吉林省长春市吉深药店,经长春中医药大学王淑敏教授鉴定均为正品。

甲醇为色谱纯,水为去离子水,乙醚、二氯甲烷等其他试剂为分析纯。

2 方法与结果2.1 方法学考查2.1.1 色谱条件A g ilent extended C 18色谱柱(150mm @4.6mm,5L m );流动相为甲醇B 0.1%三乙胺(65B 35);流速为0.6m l #m i n -1;检测波长为230nm ;柱温为30e ;样品经过0.45L m 微孔滤膜过滤,滤液进样10L l 。

2.1.2 标准曲线精密称取中乌头碱、乌头碱和次乌头碱对照品适量置于容量瓶中,加入二氯甲烷溶解并定容,得浓度为1.08m g #m l -1的中乌头碱、1.12m g #m l -1的乌头碱和1.22m g #m l -1的次乌头碱标准品储备液。

每种对照品溶液分别进样2,4,6,8,10L ,l 高效液相色谱法测定。

以浓度(L g #m l -1)对峰面积计算回归曲线。

得到中乌头碱标准曲线方程为Y =20672.0X -58377.5,r =0.9995;乌头碱标准曲线方程为Y =18114.2X -28544.2,r =0.9999;次乌头碱的标准曲线方程为Y =186632X -13386.7,r =0.9993。

说明乌头碱在5.6~112L g #m l -1、中乌头碱在5.4~108L g #m l -1,次乌头碱在6.1~122L g #m l -1的浓度范围内均呈良好的线性。

2.1.3 重复性实验同一生草乌粉末按优选的提取方法操作,提取6份溶液,H PLC 测定,记录乌头碱、中乌头碱、次乌头碱峰面积。

乌头碱、中乌头碱和次乌头碱含量的RSD 值分别为4.32%,3.57%和4.84%。

说明方法重复性较好。

2.1.4 回收率实验精密称取已知含量的生草乌粉末18份,每份0.2g 。

第1个6份分别加入0.05m g 乌头碱,第2个6份分别#513#L I SH I Z H EN M EDIC I NE AND M ATER I A M ED I CA RESEARCH 2009VOL.20NO.3时珍国医国药2009年第20卷第3期加入0.4m g中乌头碱,第3个6份分别加入0.2m g次乌头碱,同法操作计算含量,乌头碱的平均回收率为91.2%,RSD值为2.84%;中乌头碱的平均回收率为90.4%,RS D值为3.12%;次乌头碱的平均回收率为92.8%,RS D值为3.10。

表明方法回收率较好。

2.1.5稳定性实验同一生草乌粉末样品溶液保存于-80e冰箱中,于放入冰箱后第4,8,12,18,24小时测定,计算含量。

24h 内乌头碱、中乌头碱和中乌头碱含量的RSD值分别为5.21%, 4.35%和6.24%。

表明提取液在-80e冰箱中24h内较稳定。

2.2提取方法的优选2.2.1水提氯仿萃取法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加30m l蒸馏水,振荡6h后,转移至50m l离心管中,3000r# m i n-1离心20m i n,取上清液,沉淀水洗2次,合并上清液,用10%氨水调p H值为10,分别加入15,5,5m l氯仿萃取3次,合并氯仿层,蒸干。

加甲醇溶解,定容至25m l。

2.2.2酸提法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加30m l 0.04%H C,l振荡6h,转移至50m l离心管中,3000r#m in-1离心20m i n,取上清液,沉淀用0.04%HC l洗2次,合并上清液,加0.04%H C l定容至50m l。