秀丽线虫基因敲除突变库中sec-10突变种系的筛选
秀丽线虫综述 (1)
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喂养方法
➢ 用冰M9缓冲液清洗虫体 ➢ 置4℃环境20min ➢ 1000r离心，弃上清,沉淀物用M9缓冲液重悬 ➢ 置4℃环境20min 弃上清 ➢ 取200ul沉淀物以靠接法接种到涂有大肠杆菌OP50的 NGM培养基上 ➢将培养基放置到16℃生化培养箱中，72h后可繁育至第二 代
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• 冻存 准备1mlEP管，加入700ul30%甘油（s缓冲
秀丽隐杆线虫的饲养及研究用途
精选课件
By 王传杰
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介绍
• 秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）,属于线形动物 门、线虫纲。体形非常小,成虫只有1mm左右。 线 虫 是 细 胞 定 数 动 物 ， 两性 成虫 只有 9 5 9 个 体 细 胞 ， 雄 性 成 虫 只 有 1 0 3 1 个 体细 胞 ， 其 中 1 3 1个 细 胞 注 定 要 接 一 定 的发 育 程 序 陆续 死 亡 。 神 经 系 统解 剖结 构 十 分 简 单 ， 仅有 3 0 2个细 胞 ， 约 占整 个 动 物 体 细 胞 总 数 的 三 分 之 一 。它身体透明,能感 知气味和味道,对光线、温度有反应。研究者很容易在显 微镜下对其细胞和组织进行跟踪观察
显微注射后的整合
•目前常用的整合方法有：用 y射线和 X射线照射，或用光敏剂补骨脂素 加长波紫外线照射整合(TMP/UV integration)． 基本策略是大量筛选经 •射线照射过的转基因线虫，一般挑取数百只 F1 代繁殖，筛选 F4 代， 检测是否有 100%的转基因表达，若是则说明整合成功． 一般一次整合 能得到若干个独立种系，可选择最好的一个进行实验．
出
容易脱水 而死
后的性腺被液体充 满．
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秀丽线虫
性别不同具有不同的细胞数。雌雄同体成虫含有959个体细 胞，约2000个生殖细胞，而雄性成虫则具有1031个体细胞 和1000个生殖细胞。
5.秀丽线虫有两种性别：雌雄同体和雄性。 雌雄同体可进行自我繁殖，也可与雄性交配繁殖；与雄
性交配的后代，50%是雌雄同体，50%为雄性。自我繁殖的 大多是雌雄同体，雄性个体以很低的频率自发产生。一条未 经交配的雌雄同体在生殖期可产生约300个后代。若与雄性 个体交配则产生多达1000个。
John E. Sulston
H. Robert Horvitz
2002年，Brenner和Horvitz、Sulston对器官 发育的遗传基础及程序性细胞死亡基因调控机 制的揭示，荣获了诺贝尔生理医学奖
Sydney Brenner
Andrew Z. Fire
Craigc. Mell
2006年，安德鲁· 法尔和克雷格· 梅洛获得诺贝尔生理医学奖， 以表彰他们发现了RNA干扰现象。
参考文献：
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秀丽隐杆线虫
分类号编号烟台大学毕业论文利用秀丽隐杆线虫筛选抗白色念珠菌活性物质Screening anti-Candida albicans substances using Caenorhabditis elegans利用秀丽隐杆线虫筛选抗白色念珠菌活性物质摘要：以秀丽隐杆线虫作为模型生物进展抗菌物质筛选。
用白色念珠菌感染线虫后，采用不同浓度的抗菌药物治疗，观察线虫存活情况，确定适宜用药浓度；采用微拟球藻提取物对白色念珠菌感染线虫治疗，观察线虫存活情况，与抗菌药物作用效果比照，从而筛选出可用于治疗白色念珠菌活性物质。
实验发现，添加10~20mg/L的氟康唑对感染白色念珠菌的秀丽隐杆线虫治疗效果较好，在一定剂量范围内，治疗效果和剂量成线性关联；微拟球藻提取物不具备抗菌活性。
关键词：秀丽隐杆线虫；白色念珠菌；抗菌物质Abstract: In the study, Caenorhabditis elegans were used as model organism to screen antibacterial agents. C.elegans were infected by Candida albicans and treated by different concentrations of antibacterial agents which had been known and extracts from Nannochloropsis OZ-1, observating the survival situation and comparing the effects of the two antibacterial agents, thus, the bioactive substance could be screened which cured the Candida albicans. The result showed that Candida albicans could be treated by 10~20 mg/L Fluconazole, moreover within the scope of the dose, treatment effect and the dose of a linear correlation. And the results showed that extracts from Nannochloropsis OZ-1 did not have antibacterial activity.Key words:C.elegans；Candida albicans；Antibacterial substances目录1 文献综述 (5)1.1 秀丽隐杆线虫 (5)1.2 秀丽隐杆线虫研究进展 (5)1.2.1 环境毒理学的研究 (6)1.2.2 程序性细胞死亡的研究 (6)1.2.3 秀丽隐杆线虫感染模型的建立 (6)1.2.4 抗菌物质作用机制的研究 (6)1.2.5 病菌致病机制和线虫免疫机制的研究 (7)1.3 白色念珠菌 (7)1.4 抗菌物质的筛选 (8)1.5 实验研究意义 (9)2 材料和方法 (10)2.1 材料 (10)2.1.1 实验药品 (10)2.1.2 实验仪器 (10)2.1.3 线虫和菌株 (11)2.1.4 培养基 (11)2.1.5 试剂 (11)2.2 方法 (11)2.2.1 线虫培养和保存 (11)2.2.2 线虫同步化 (11)2.2.3 线虫真菌感染 (12)2.2.4 线虫抗感染治疗 (12)2.2.5 观察 (12)3 实验结果分析 (9)3.1 氟康唑用药浓度的选择 (9)3.2 筛选可用于治疗白色念珠菌的微拟球藻提取物 (9)4 结论 (12)致谢 (13)参考文献 (14)1 文献综述1.1 秀丽隐杆线虫秀丽隐杆线虫[1]〔Caenorhabditis elegans〕〔图1〕是一种多细胞真核生物，个体很小，以细菌为食，可独立生存在温度恒定环境中，对人、动植物没有危害。
秀丽隐杆线虫在药物筛选中的应用
秀丽隐杆线虫在药物筛选中的应用秀丽隐杆线虫是一种常见的实验室模式生物，通常被用于生理学、神经学和药理学等研究领域。
随着科技的不断发展，人们越来越发现秀丽隐杆线虫的潜力以及应用价值，尤其是在药物筛选过程中。
下面，本文将为大家介绍秀丽隐杆线虫在药物筛选中的应用。
秀丽隐杆线虫的基本特点秀丽隐杆线虫的一个重要特点是其生命周期短。
它的寿命大约为2-3周，从卵发育到成虫只需要3到4天，这使得生物实验更方便、快捷。
此外，秀丽隐杆线虫的身体结构简单，易于观察、操作和控制。
药物筛选药物筛选（Drug screening）是将可能具有治疗作用的化学物质进行筛选，以发现新的药物或治疗手段的过程。
经过多年的探索和发展，人们已经发现了一些能够抑制乃至治愈某些疾病的药物。
但是，受到次级反应、耐药性以及毒副作用的限制，现行的药物仍然存在局限性。
因此，对药物的筛选和研发仍然是重要的科学问题。
秀丽隐杆线虫在药物筛选中的应用秀丽隐杆线虫作为一种便于操作的模式生物，可应用于各种药物筛选实验。
其基本筛选过程通常分为以下几个步骤：1.选择适当的突变体作为实验对象线虫有数千种基因变异体可用于研究。
因此，选择适当的突变体可大大提高实验的成功率。
例如，翻译抑制线虫能够胜任神经学实验，易造成神经元死亡的突变体便于设计细胞毒性实验。
2.将样本与药物混合在进行实验之前，需要将样本与待测药物混合。
线虫通常生活在标准培养液中，药物可通过不同的给药方式添加入培养液。
比如，可直接加入到培养液或用食物富含药物等等。
3.检测线虫反应添加药物后，需要观察并记录线虫的反应。
由于线虫身体简单，因此人们可以便捷地观察突变体或线虫的行为、发育和生存等指标，如运动速度、排便频率、生育率以及寿命等。
4.分析数据采集反应记录数据后，通常需要进行统计学分析处理，来证明线虫是否与药物有明显的互动影响。
秀丽隐杆线虫在药物筛选中的亮点基于其适用范围广泛、反应速度快等特点，秀丽隐杆线虫已经逐渐成为药物筛选中不可或缺的一种重要类别。
浅谈秀丽隐杆线虫的模型建立与研究进程
浅谈秀丽隐杆线虫的模型建立与研究进程作者：邓阳来源：《大东方》2017年第04期摘要：秀丽隐杆线虫作为一种简单的多细胞真核生物由于具有较多优点成为科研者建立模型与药物靶点研究与新药研制的重点研究生物。
本文仅将近年来秀丽隐杆线虫的特点、模型建立及研究进展作简要整理与分析。
关键词：秀丽隐杆线虫；模型筛选建立一个较为优良的筛选模型，至少应具备良好的稳定性、重复性和可操作性这些特征。
在传统的药物研究中，实验者往往使用小鼠、兔子作为模型研究药物靶点和进行药物研发，但这些动物模型具有传代时间长、受环境因素影响较强、实验结果准确性低等缺点，而秀丽隐杆线虫作为一种操作较为简便的生物逐渐被尝试，优点也不断显现。
一、秀丽隐杆线虫（以下简称线虫）的“秀丽”之处1.易于培养。
实验过程中线虫一般在琼脂平板上或液体培养基中培养，温度在20℃左右，以E.coli OP50为食。
能在-80℃冰箱长期保存[1]，因其稳定性较强而便于保存与使用。
2.繁殖快，且产后代数量多，成本较低。
其绝大多数个体为雌雄同体，雄虫仅占0.05%。
一只雌雄同体野生型线虫可以产出 300个左右的后代，其在产卵期产卵，优先选择雄性的精子。
若与雄虫交配，后代数则可多达1000个。
20℃时，野生型线虫发育一个世代仅需要3d左右，平均寿命为2-3 周。
3.线虫以动物整体作为实验对象，同时规模容易进行扩大研究。
线虫成虫体长仅1mm，体径30μm，结构相对简单。
从最初的培养板准备，到最终目的线虫筛选或特定量化性质的测定均可以实现全/半自动化，因此具有较高的操作性，准确率高。
目前研究者已完成线虫全基因组测序，并且这些基因中高达42%的基因与人类基因同源[1，2]，其遗传背景相对清晰。
因此作为整体动物实验，当药物在体内的作用靶点不止一个时，往往能提供更准确的评估。
4.线虫身体透明，便于染色、观察与荧光标记。
这一特点已被用于基于线虫的高通量筛选并获得了成功[3]。
二、药物模型的建立1.抗衰老药物模型的建立自20世纪70年代开始，研究者便开始逐步将秀丽隐杆线虫模型用于人体衰老、神经生理学等领域的研究。
秀丽隐杆线虫作为抗感染药物筛选模型的研究进展
近年来 ， 线 虫 模 型 的发 展 推 进 了我 们 对 于 一些 感 染 类 疾
病 发病 机制的理解 ， 而对疾病本质 的深刻认识 自然会 为感染 类 疾病的治疗提供启示 ， 同时也 大大加速 了新 型抗 生素 的发
现。Ｅ ｗ ｂ ａ ｎ ｋ等 综述 了一些种族 抗菌 肽和蛋 白质 ， 可作 为 候选新型抗生素 。并且 阐述 了线 虫感染 系统提供 新 型抗 生 素大规模体 内筛选 的可能性 。这些 发现 为新型抗 菌疗 法提 供 了广阔前景 。 ２ ． ３ 利用秀 丽隐杆线 虫感染模 型研 究新型抗茵药物作 用机 制 减 弱 细 菌 的毒 力 是 抗 菌药 物 的 研 发 的一 个 靶 点 ， Ｈ ｏ
菌 ， 革兰 阴性菌铜绿假单胞菌
、 沙 门菌 ¨ 等。
耐药铜绿假 单 胞菌 （ ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｍ ｏ ｎ ａ ｓ ａ ｅ ｒ ｕ ｇ ｉ ｎ ｏ ｓ ａ ） 是 常 见 的 院内感染致病菌 。通过 制备耐药 铜绿假 单胞菌 感染 秀丽 隐
秀丽隐杆线 虫可以通过检测并且识别 Ｔ ｏ ｘ Ａ介导的翻译抑制
染。
杆线虫平板 ， 周雨朦等 建立 线虫 一耐 药铜绿 假单 胞菌感
染模 型 ， 并且在感染线虫救治实验中发现 ， 可 以排 除毒性 高 、
体 内外相关性差 的化合物 ， 线虫感染 模型适合用于筛选抑制
耐药菌生长和繁殖 的化合物 。陈丽红 等 建立 了铜绿假单 胞菌 一 线 虫感染模 型 ， 确 立 了最佳 操作参 数 ， 并且研 究 了不 同抗 生素对线虫存 活时间的影 响 ， 得 出了线虫感染程度 可量
２ ． ２ 利用秀丽隐杆线虫感染模型研究细菌致病机制和 线虫
免疫机 制 早 期研究 中， Ｇ ａ ￣ｉ ｎ等 采 用线虫 作为 宿 主模
秀丽隐杆线虫在药物筛选中的应用
秀丽隐杆线虫在药物筛选中的应用周雨朦;陈代杰【摘要】秀丽隐杆线虫在药物和靶蛋白筛选方面越来越受到药物学家的重视,已形成了较为完善的药物筛选技术平台.本文以新药的发现为目标,介绍线虫作为新药筛选模型的特点、研究现状及该模型在新药发现中的应用.【期刊名称】《上海医药》【年(卷),期】2011(032)011【总页数】6页(P566-571)【关键词】秀丽隐杆线虫;模型;药物筛选;药靶筛选【作者】周雨朦;陈代杰【作者单位】中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海,200040;中国医药工业研究总院上海医药工业研究院,创新药物与制药工艺国家重点实验室,上海,200040【正文语种】中文生物学界对秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans，C. elegans）的研究始于20世纪60年代。
英国科学家Brenner [1]选择了线虫作为确定完整神经系统的较为简单的生物模型。
随后，Sulston经过20年的努力，到20世纪90年代中期构建了完整的线虫细胞谱系图，使线虫成为唯一一个身体中所有细胞能被逐个盘点并归类的生物。
Horvitz利用遗传突变和基因克隆等手段，揭示了线虫细胞程序性死亡的遗传调控机制，并证明相应的调节基因在高等动物和人体中也存在。
这三位科学家的研究对生命科学领域做出了极为重要的贡献，于2002年分享了诺贝尔生理或医学奖[2]，使秀丽隐杆线虫成为当代生命科学和医学研究中最重要的模式生物之一。
近年来，秀丽隐杆线虫在药物或靶蛋白筛选方面越来越受到药物学家的青睐，已形成了较为完善的药物筛选技术平台。
本文从药物研发的角度讨论线虫作为模式生物的特点，以及目前利用秀丽隐杆线虫建立的疾病模型在新药发现中的应用。
1 秀丽隐杆线虫整体生物模型的特点秀丽隐杆线虫属于线形动物门线虫纲动物，结构如图1[3]所示。
利用秀丽隐杆线虫整体生物能够建立和模拟与人类疾病相关的模型、筛选不同的新型活性物质并发现新颖生物功能的靶点或靶标，实现这些目标的基础主要在于以下两个方面。
实验报告：线虫RNA干扰的基因沉默
实验报告：线⾍RNA⼲扰的基因沉默实验⼀：线⾍RNA⼲扰的基因沉默⼀、实验⽬的RNA⼲扰（RNA interference,RNAi）是⼀种使基因使失活的有效⽅法，在线⾍中，RNA⼲扰因为简单⽽成为研究基因功能的有效⼿段。
我们利⽤表达tag-214 dsRNA的⼤肠杆菌喂⾷线⾍来介导RNAi，以达到鉴定tag-214基因功能的⽬的。
⼆、实验背景RNAi是近年来以秀丽线⾍的研究为基础⽽发展起来的⼀种基因knock down 技术，将体外合成的含有⽬的基因的dsRNA通过某种⽅式引⼊到线⾍体内，导致其体内相应的⽬的基因mRNA降解，从⽽达到基因沉默的⽬的。
三、实验原理通过显微注射dsRNA或者把线⾍浸⼊到含有dsRNA的溶液中，或者⽤能够表达dsRNA的⼤肠杆菌喂⾷线⾍，可以将dsRNA导⼊⼤肠杆菌中。
在⼤肠杆菌HT115中，含有⽬的基因发夹结构的质粒，在IPTG的诱导下转录出正义和反义的RNA,两条RNA链通过退⽕形成dsRNA。
当线⾍以此⼤肠杆菌为⾷时，就摄取了⼤肠杆菌合成的dsRNA，并触发了线⾍体内RNA⼲扰的发⽣。
本实验将利⽤表达tag-214 dsRNA的⼤肠杆菌喂⾷线⾍来介导RNAi，以达到鉴定tag-214基因功能的⽬的。
四、实验材料：1.秀丽线⾍（C.elegans）rrf-3突变体（RNAi敏感型）由于线⾍的RNA的⼲扰操作简单快速，且重复性好，已成为鉴定基因功能以及基因间互相作⽤关系的有效材料。
秀丽线⾍属于线性动物门，线⾍纲，⼩杆线⾍⽬，⼴杆线⾍属。
秀丽线⾍是⼀种⽣活在⼟壤中的线⾍，长约1mm，直径70um，由959个细胞组成。
秀丽线⾍具有雌雄同体和雄性个体两种性别。
雌雄同体的线⾍有两条X染⾊体和5对常染⾊体。
其基因组⼤⼩为80Mb，包含13000个基因。
如上左图为秀丽线⾍的模式图（上为雌雄同体，下为雄性个体），右图为秀丽线⾍的⽣活史。
线⾍具有⽣活周期短，易培养和保存等优点，由于其⾝体透明，因此可以在显微镜下跟踪观察每个细胞的命运，是⽬前遗传学、发育学和细胞⽣物学研究的重要模式⽣物。
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１ 材 料 与 方 法
１ １ 酶 和试剂 ． Ｔｑ酶 （ａ Ｃ ｓ ｒ ｘＴＡ Ｇ ＮＫＴ ０）单虫裂 解液 ： ｓｐ ８０３ ｌＬ ａ ＴｑＰ Ｒ Ｍａｔ ， ＩＮ Ｅ ２１． ｅ Ｍｉ 商 Ｈ ．，Ｏｍｍｏ ； ／ Ｅ Ｔ ８ｍｍ ｌＩＮａ ｉ０ｍｎ ｌＬＮ ４ ． ９；ｗ ｅ２ ． ． 白酶 Ｋ，０ｒ ／ ， ｅ￣￣ｇ． Ｄ Ａ ｏ／ ａ ０ ＇ ／ ；Ｐ ００７／Ｔ ｅｎ ００７ 蛋 ； ￣ ６ １ ｇｍＥ － ０ ａ Ｃ
许不 同遗传 背景 的线 虫进行 遗传 交配 ， 而且也 可 以仅 以雌雄 同体 的形 式传 代 从 而保 持 其单 纯 的遗 传 背 景 ， 一点使 其在遗 传研究 上具 有其他 模式 动物无 可 比拟 的优势 ． 这 基 因敲 除是线虫 研究 过程 中的重 要 技术 之 一 ， 即通 过分 子 操作 改 变 生 物体 内某 已知 基 因 的 Ｄ ＮＡ 序列 ， 基 因进 行完 全或不 完全 的去除致 使其 功能丧 失 ， 对 以便 对 目的基 因在生 物体 内的功 能 开展进 一 步
基 因组序列 及其具 有约 ４ 与 人类 基 因组 同源 的基 因 ， 因为 它 具备 作 为模 式 动 物 所 必需 的多 个 特 ０ 还 征 ： 养方便 廉价 ； 饲 可像其 他动 物细胞 一样在 － ８ ０℃保存 ； 长周期 短 ， 生 传代 快 ； 体小 ， 体透 明 ， 通 易于 在 显微镜 下对 活体组织 和细胞 进行 跟踪 观察． 外 ， 此 由于具 有 雄性 和 雌 雄 同体 两种 性 别特 征 ， 仅 可 以允 不
收稿 日期 ：２ ０ —１ —０ ０９ １ ７ 基金 项 目 ：国家 自然 科 学 基金 （０ ０ １ ７ 资 助 ３５０１）
作者简介 ： 李江丽 （９ １ ）女 ， １８ 一 ， 博士生 ； 张蓉颖 ， 通信作者， ｍａ ：ｙｈ ｎ ＠ｍａ． ｕｔｅｕ ｃ Ｅ ｉ ｒｚａ ｇ ｌ ｉ ｈ ｓ．ｄ ． ｎ ｌ
行 杂交 获得双 突变甚 至多 突变 的种系 ， 以便进 行多个 蛋 白质相 互作 用 的研 究 ． 因此 ， 作为 一 个经 典 的反
向遗传方法， 基因敲除技术依然保持着其无可取代的地位．
本文中以我们实验室构建 的线 虫基 因突变库 为对 象 ， 在简单 描述基 本原理 的基础上 ， 将前 人 的研 究方
第 ３ 期
李江丽等 ： 秀丽线虫基 因敲除突变库 中 ｓ￣ Ｏ突变种系 的筛选 ｅｌ
行分子机制的研究 ， 是研究不 同基 因及其蛋 白产物作用机制 的一项基 本技术． ｓ￣ Ｏ突变种 系的成功筛 选 以 ｅｌ
为例 ， 详细描述如何通过 Ｐ Ｒ检测方法从 笔者实 验室所构建的 国内第一个秀丽线虫基 因敲除 突变库 （ Ｃ 可进 行
多 达 几百 次 的筛 选 量 ） 中筛 选 出 目的 基 因 的 突 变种 系 ， 时 证 明 突变 库 的可 用 性 ． 据 ｓ ｌ 同 根 ｅ Ｏ基 因 序 列 设 计 多 ｅ
第３ 第３ ２卷 期
２ １ 年 ９月 ００
湖北大学学报（ 自然 科 学 版 ）
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＨ ｕ ｅ Ｕｎｖ ｒｉｙ Ｎａｕ ａ ｃｅ ｃ ） ｏ ｒ ａ ｂ ｉ ｉｅｓｔ （ ｔ ｒｌ ｉｎ ｅ ｏ Ｓ
Ｖｏ１ ２ Ｎ ｏ ．３ ．３ Ｓｅ ．，２ ０ ｐ ０１
文章 编 号 ：０ ０ ３ ５ ２ １ ）３ ３８— ５ １０ —２ ７ （０ ０ ０ —０ １ ０
秀 丽 线 虫基 因敲 除 突 变 库 中 ｓｅ Ｏ突 变 种 系 的筛 选 ｅ－ ｌ
李江 丽， 张蓉 颖
（ 华中科技大学 生命科学与技术学院 ， 湖北 武汉 ４ ０ ７ ） ３ ０ ４
摘 要 ： 秀 丽 隐杆 线虫 （ ａ ｎｒａｄ ｔ ｅａ ｓ 的基 因 突 变 库 中 筛 选 出 目的 基 因 的 突 变 种 系 ， 对 其 进 从 Ｃ ｅｏｈ ｂ ｉ ｓ ｌ ｎ ） ｉｅ ｇ 并
法［和我们 自己的实验经验相结合 ， ３ ］ 介绍从线虫库 中筛选 目的基 因的方法 ， ｓ－Ｏ为例 ， 以 ｅｌ ｃ 总结 了该过程的实
验技巧和可能 出现的问题 以及相应 的解决策略． 线虫 中的 ｓ － ｅｌ ｃ Ｏ与人 的 ｓｃ Ｏ蛋 白有着高达 ３ 的序列相似 ｅｌ ￣ ７ 性［ ， ４ 是高度保守的蛋 白质复合体 ｅｏｙｔ ］ ｘｃｓ 的八组分之 一， 在分泌途径中起着囊泡栓 系的作用 ］ ．
套针对不 同靶点 的含干扰引物的巢式 引物 ， 通过凝胶 电泳正确判断扩增产物的特异性 和干扰 引物对长 片段 产 物的抑制特性 ， 以选择有效 的检测引物． 简化 了线虫复苏后 的饲养 方法 ， 以取代恒温恒湿 培养箱 的使 用． 过 通 纯和致死平衡子 的引入 ， 克服 了 ｓｅ Ｏ基 因突变致死所导致 的无 法稳 定传代 的问题． ｅｌ 总结 了从 秀丽线虫基 因
突变库 中筛选 突变种系 的注意要点 ， 国内其它线 虫基 因突变库 的筛选提供重要的参考 意见 ． 为
关键 词 ： 丽 隐杆 线 虫 ；基 因 敲 除 ；筛 选 ； Ｃ 秀 Ｐ Ｒ检 测 ；ｓ ｌ ｅ Ｏ ￣标 志 码 ： Ａ
模 式生 物秀丽 隐杆线 虫在生 命科 学研究 中发挥 着举 足轻 重 的作 用． 这不 仅 由于其 已经被 解析 的全
研 究 ＿ ｊ通 过基 因敲 除可 以得 到遗传 背景 中完 全 没有 目的基 因表 达 产 物 的突 变种 系 ， 服 了 Ｒ １． 克 ＮＡｉ 过
程 中有 残余 蛋 白质 作 用 的缺 陷 ； 于 改 变 了 基 因 组 序 列 ， 除 所 得 的 突 变 可 以无 限遗 传 ， 不 同 于 由 敲 而 Ｒ ＮＡｉ 技术 的瞬 时干扰 ； 通过 基 因敲除得 到 的特 定基 因 的突变 体 线虫 可 以和 其 他基 因的 突 变体 线 虫 进