神经胶质瘤致病因子-1在肾癌细胞株769-P体外侵袭活性强化中的作用及其机制要点
Yb-1在肿瘤发展中的两面性
Yb-1在肿瘤发展中的两面性孙丽萍【摘要】Yb-1(Y-box binding protein-1)基因属于Y-盒家族成员之一,从细菌到人类的细胞质及细胞核中广泛存在,并且它编码的蛋白是一类高度保守的多功能蛋白.Yb-1蛋白含可变N-末端结构域(AP区)、C末端结构域(CTD区)及高度保守核苷酸结合结构域(CSD区).这些结构域对DNA或RNA的作用不同,导致YB-1对细胞功能调控的不一致性.多数研究报道YB-1能促进肿瘤的增殖、侵袭与转移以及多药耐药性,但也有研究表明YB-1具有抑制肿瘤的作用.本文就YB-1对肿瘤的双重作用做一综述.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2015(026)021【总页数】5页(P3182-3186)【关键词】YB-1;肿瘤;增殖;EMT;多药耐药性【作者】孙丽萍【作者单位】广东医学院,广东东莞 523770【正文语种】中文【中图分类】R730.2Yb-1(Y-box binding protein-1)是Y-盒家族成员之一，是一种从细菌到人类的细胞中广泛存在的高度保守、功能多样的蛋白质。
研究表明YB-1在多种肿瘤组织中高表达并与肿瘤的发生发展、侵袭转移、耐药、预后等密切相关。
多数情况下，YB-1作为一种促癌蛋白被广泛研究，但也有研究发现YB-1可以抑制肿瘤的过度增殖。
然而，导致YB-1双重作用的相关因素和分子机制是相当复杂的，需要更多研究。
充分了解其对肿瘤的详细作用和机制，才能更准确地防治肿瘤。
YB-1可以与Y-box序列5'-CTGATTGG-3'特异性结合，进而在转录水平和翻译水平对下游基因转录进行调控。
YB-1基因定位于染色体1p34(25，26)，跨越19kb染色体DNA，蛋白分子量为42 kDa，包含8个外显子[1]。
其编码的蛋白含三个典型的结构域：可变N-末端结构域(AP区)、C末端结构域(CTD区)及高度保守的核苷酸结合结构域(CSD区)[2]。
Neuropilin-1在肿瘤免疫调节中作用的研究进展
Neuropilin-1在肿瘤免疫调节中作用的研究进展
黄培翠;文瑞婷;杨志刚
【期刊名称】《现代肿瘤医学》
【年(卷),期】2022(30)16
【摘要】神经纤毛蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)是一种非酪氨酸激酶跨膜蛋白,可表达于多种肿瘤细胞及免疫细胞,与不同配体结合后参与轴突形成、血管发育、免
疫调节和肿瘤发生等过程。
最近,NRP-1在肿瘤免疫学领域引起广泛关注,其在肿瘤免疫微环境中发挥着强大的双重作用,不仅可协调免疫细胞介导的免疫抑制作用,同
时可限制抗肿瘤免疫反应,与肿瘤的发生发展密切相关。
越来越多的研究表明,NRP-1是肿瘤免疫治疗中独特的免疫调节分子,是最有前景的免疫检查点分子,深入探讨NRP-1在肿瘤免疫调节中的作用机制,有望为以NRP-1为靶点的免疫治疗提供新
策略。
本文就国内外关于NRP-1在肿瘤免疫调节作用中的最新研究进展作一综述。
【总页数】4页(P3028-3031)
【作者】黄培翠;文瑞婷;杨志刚
【作者单位】广东医科大学附属湛江中心医院;广东医科大学
【正文语种】中文
【中图分类】R730
【相关文献】
1.双磷酸盐在多发性骨髓瘤治疗中的免疫调节作用及抗肿瘤作用研究进展
2.外泌体对肿瘤微环境的免疫调节作用及在肿瘤诊疗中的应用研究进展
3.外泌体对肿瘤微
环境的免疫调节作用及在肿瘤诊疗中的应用研究进展4.外泌体对肿瘤微环境的免疫调节作用及在肿瘤诊疗中的应用研究进展5.SETD8在肿瘤发生发展和免疫调节中作用及机制的研究进展
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胶质瘤中间质细胞衍生因子-1及神经生长因子的表达及临床意义
胶质瘤中间质细胞衍生因子-1及神经生长因子的表达及临床意义张旭标;林涛;曾永亲;郑定容【摘要】目的探讨间质细胞衍生因子-1(SDF-1)及神经生长因子(NGF)在胶质瘤中的表达及临床意义.方法收集手术切除的人脑胶质瘤病理标本86例为观察组,其中观察组按不同病理级别分为Ⅰ级15例为Ⅰ组,Ⅱ级24例为Ⅱ组,Ⅲ级26例为Ⅲ组,Ⅳ级21例为Ⅳ组,同期随机选择颅脑外伤患者正常脑组织标本84例为对照组,2组组织均使用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测SDF-1与NGF mRNA,同时采用免疫组化法检测2组组织中SDF-1与NGF蛋白的表达情况.比较2组组织中SDF-1与NGF mRNA及蛋白表达情况.结果观察组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于对照组(P<0.05);Ⅳ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅲ组;Ⅲ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅱ组;Ⅱ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅰ组,胶质瘤组织中SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率随病理级别的增高而增高(P<0.05);胶质瘤组织中SDF-1 mRNA表达量及蛋白阳性率呈正相关(r=0.95,P<0.05),NGF mRNA表达量及蛋白阳性率呈正相关(r=0.96,P<0.05);SDF-1和NGF高表达均是预测胶质瘤预后不良的独立因素(P<0.01),SDF-1和NGF的高表达与胶质瘤患者整体不良预后显著相关.结论胶质瘤中SDF-1与NGF高表达对病变进展有一定促进作用,二者与肿瘤的病理级别密切相关,两者相互作用,SDF-1与NGF在胶质瘤的发生发展中扮演重要的角色,有望为胶质瘤的临床检测及治疗提供新思路.%Objective To investigate the expression and clinical significance of stromal cell-derived factor-1 (SDF-1) and nerve growth factor (NGF) in gliomas.Methods Eighty-six pathologicalspecimens of human brain glioma that were collected in our hospital from January 2012 to February 2016 were enrolled as observationgroup,moreover,which was redivided into 4 subgroups according to different pathological grade,including 15 cases in grade Ⅰ group,24 cases in grade Ⅱ group,26 cases in grade Ⅲ group,21cases in grade Ⅳ group,moreover,the other 84 cases of brain tissue specimens of patients with craniocerebral trauma were seclected as control group.The expression levels of SDF-1 and NGF mRNA were detected by Real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR), at the same time,the expression levels of SDF-1 and NGF protein were detected by immunohistochemistry.Results The expression levels of SDF-1 and NGF mRNA gene and protein in observation group were significantly higher than those in control group (P<0.05).The expression levels of SDF-1 gene,NGF mRNA and protein in grade Ⅳ group were significantly higher than those in grade Ⅲgroup,which in grade Ⅲ group were significantly higher than those in grade Ⅱ group, moreover, which in grade Ⅱ group were significantly higher than those in grade Ⅰ group, besides,the expression levels of SDF-1, NGF mRNA gene and protein in glioma were increased with the increase of pathological grade (P<0.05).Moreover the expression levels of SDF-1 mRNA in gliomas were positively correlated to positive rates of protein(r=0.95,P<0.05),and the expression levels of NGF mRNA were positively correlated to positive rates of protein (r=0.96,P<0.05).Moreover the high expression of SDF-1 NGF was independent factors to predict poor prognosis of glioma (P<0.01),and the high expression of SDF-1 NGF wasclosely correlated to whole poor prognosis of patients withglioma.Conclusion The high expression of SDF-1 and NGF in gliomas has a certain role in promoting progression of disease,both of them are closely correlated with pathological grade,thus,both factors play an important role in pathogenesis and development of glioma,it is expected to provide new ideas for clinical detection and treatment of glioma.【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2017(039)015【总页数】4页(P2250-2253)【关键词】胶质瘤;间质细胞衍生因子-1;神经生长因子;实时荧光定量聚合酶链式反应;免疫组化【作者】张旭标;林涛;曾永亲;郑定容【作者单位】510510 广州市,广东三九脑科医院神经外科;510510 广州市,广东三九脑科医院神经外科;510510 广州市,广东三九脑科医院神经外科;广东省深圳市宝安区中心医院社区健康服务管理中心【正文语种】中文【中图分类】R338.15胶质瘤是最常见的颅内原发性恶性肿瘤之一，胶质瘤的生长方式为浸润性生长，药物治疗与手术治疗圴预后差，发率非常高，其致残率及致死率均很高[1]。
脑神经胶质瘤细胞癌胚抗原相关细胞黏附分子1对替莫唑胺化疗敏感性的作用及其机制研究
脑神经胶质瘤细胞癌胚抗原相关细胞黏附分子1对替莫唑胺化疗敏感性的作用及其机制研究陈锡贤;孙海峰;成江;吴建明【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2023(33)4【摘要】目的探究脑神经胶质瘤细胞癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)表达对替莫唑胺(TMZ)化疗敏感性的作用及其机制研究。
方法体外培养TMZ耐药人脑神经胶质瘤细胞系U251/TMZ细胞,采用空载质粒或siRNA转染U251/TMZ细胞,分为空载组、TMZ组、siRNA组及siRNA+TMZ组,转染48 h后,GFP荧光检测细胞转染效率。
采用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞CEACAM1 mRNA的表达,MTT法检测U251/TMZ细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附试验和Western blotting检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达。
结果与空载组比较,siRNA组、siRNA+TMZ组CEACAM1 mRNA相对表达量降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高(P<0.05),Wnt1蛋白表达水平、β-catenin及c-myc蛋白相对表达量降低(P<0.05);与TMZ组比较,siRNA组、siRNA+TMZ组CEACAM1 mRNA相对表达量降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高(P<0.05),Wnt1蛋白表达水平、β-catenin及c-myc蛋白相对表达量降低(P<0.05);与siRNA组比较,siRNA+TMZ组CEACAM1 mRNA相对表达量降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、细胞凋亡率均升高(P<0.05),Wnt1蛋白表达水平、β-catenin及c-myc蛋白相对表达量降低(P<0.05)。
结论CEACAM1表达下调能够抑制脑神经胶质瘤细胞增殖能力,促进细胞凋亡,提高TMZ化疗敏感性,其作用机制可能与Wnt/β-catenin通路有关。
神经突起导向因子Netrin-1参与肿瘤发生研究进展
神经突起导向因子Netrin-1参与肿瘤发生研究进展
文灿
【期刊名称】《局解手术学杂志》
【年(卷),期】2011(020)001
【摘要】@@ 神经突起导向因子Netrin-1是Netrin家族成员之一,由底板分泌,是最早被发现的可溶性神经突起导向因子,在许多物种的神经系统中都有较高表达.在神经发育过程中,Netrin-1通过与其受体结肠直肠癌缺失(deleted in colorectal cancer,DCC)蛋白和UNC-5同源蛋白(uncoordinated-5 homolog,UNC5H)两大家族结合发挥作用,促进生长锥生长使轴突延长,并引导神经轴突的生长方向.随后的研究又发现Netrin-1参与调节血管内皮细胞的迁移和血管新生[1-4].但近年的研究表明,Netrit-1及其受体DCC和UNC5H在诸多肿瘤中表达异常,可能在肿瘤的发生过程中扮有重要角色,并日益在肿瘤发生研究领域受到关注.
【总页数】3页(P78-80)
【作者】文灿
【作者单位】第三军医大学基础医学部外科应用解剖与手术学教研室,重庆,400038【正文语种】中文
【中图分类】R730.231
【相关文献】
1.神经突起导向因子netrin-1及其受体与肿瘤发生 [J], 秦树桐;张成岗
2.神经突起生长导向因子Netrin-1与肿瘤的关系 [J], 蔡艳;魏万里
3.神经导向因子Netrin-1对血管内皮细胞生长因子蛋白表达的影响 [J], 李敬华;王素莉;沈继春
4.神经突起生长导向因子-1在相关疾病中作用的研究进展 [J], 常小双;孟令波
5.神经导向因子Netrin-1调节单核巨噬细胞迁移与动脉粥样斑块关系的研究进展[J], 易玉红;张璐璐;彭道泉
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恶性肿瘤嗜神经浸润的体内外模型研究进展
恶性肿瘤嗜神经浸润的体内外模型研究进展
骆惊涛
【期刊名称】《山东医药》
【年(卷),期】2022(62)17
【摘要】恶性肿瘤的嗜神经浸润(PNI)是肿瘤细胞在神经内、周围或沿神经扩散的肿瘤进展模式,常见于胰腺癌、头颈部癌、前列腺癌、胃癌、结肠癌等,可以导致瘫痪、疼痛、感觉异常,并且与肿瘤复发率增加和患者生存率降低有关,是导致预后不良的重要因素。
建立合理的嗜神经浸润模型对PNI相关机制的研究至关重要。
目前,肿瘤细胞与DRG、神经外植体、施万细胞、PC-12神经元细胞/50B11神经元细胞共培养模型等PNI体外模型以及小鼠原位胰腺肿瘤的神经侵袭和转移模型、将同基因胰腺癌细胞注射到坐骨神经中进行神经侵袭的活体小鼠模型、CAM体内模型等PNI体内模型已被应用于肿瘤学的研究中,在肿瘤转移、侵袭及药物治疗等研究领域发挥作用。
对这些模型的操作方法及优缺点进行深入研究,可以为PNI提供更加精确合理的研究方法。
【总页数】4页(P91-94)
【作者】骆惊涛
【作者单位】天津医科大学肿瘤医院颌面耳鼻喉肿瘤科
【正文语种】中文
【中图分类】R73-3
【相关文献】
1.消化道恶性肿瘤的周围神经浸润研究进展
2.嗜神经浸润与宫颈癌临床病理特征的关系及其意义
3.嗜神经侵袭在恶性肿瘤中的研究进展
4.在澳大利亚莫氏显微外科手术治疗基底细胞癌Ⅲ:嗜神经浸润
5.非神经源性恶性肿瘤嗜神经侵袭机制研究进展
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Survivin对体外培养胶质瘤细胞U251替莫唑胺敏感性的影响
Survivin对体外培养胶质瘤细胞U251替莫唑胺敏感性的影响王鹏;张剑宁;陈金辉;于新;赵虎林;孙艳杰【摘要】目的探讨Survivin对体外培养的人脑胶质瘤细胞(U251)替莫唑胺化疗敏感性的影响.方法将人脑胶质瘤细胞U251中Survivin的表达上调或者抑制后,经替莫唑胺处理.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,平板克隆形成试验评价各组细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测各组细胞激活caspase-3的表达情况.结果替莫唑胺处理后,与亲代细胞相比,下调Survivin的表达,细胞的生长抑制效果增强,凋亡率增加,激活的caspase-3蛋白表达增多;上调Survivin 的表达,细胞生长抑制作用减弱,凋亡率减少,激活的caspase-3蛋白表达下降.结论Survivin可通过抑制凋亡,影响胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感性.【期刊名称】《中华神经外科疾病研究杂志》【年(卷),期】2016(015)004【总页数】4页(P317-320)【关键词】胶质瘤;细胞凋亡;替莫唑胺;存活素【作者】王鹏;张剑宁;陈金辉;于新;赵虎林;孙艳杰【作者单位】海军总医院神经外科,北京100037;海军总医院神经外科,北京100037;海军总医院神经外科,北京100037;海军总医院神经外科,北京100037;海军总医院神经外科,北京100037;海军总医院神经外科,北京100037【正文语种】中文【中图分类】R739.41胶质母细胞瘤占胶质瘤的50%以上，并且是致死性最高的恶性肿瘤之一[1]。
在美国每年大约有10 000人诊断为胶质母细胞瘤；经过手术、放疗、化疗等综合治疗后，患者的中位生存时间为14.6月[2]。
与其他肿瘤相比，胶质瘤的治疗进展相对滞后，除了将替莫唑胺(temozolomide,TMZ)引入到胶质瘤的治疗之外，临床上目前暂无其他可以提高胶质瘤治疗效果的方法。
替莫唑胺是一种口服的烷化剂，通过干扰肿瘤细胞DNA的复制并导致肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞增殖，进而提高患者的存活时间[3,4]。
星形胶质细胞高表达基因-1在中枢神经系统肿瘤中的应用价值
星形胶质细胞高表达基因-1在中枢神经系统肿瘤中的应用价值叶翔;邢惠琴;许奇平;吴小艳【摘要】中枢神经系统(CNS)由大量的神经细胞组成,星形胶质细胞是其中分布最广的一类神经胶质细胞,具有营养支持、调节神经递质及影响突触功能等多种生理功能.星形胶质细胞高表达基因-1 (AEG-1)是一种原癌基因,对多种CNS肿瘤细胞的增殖、发展及转移有重要影响.本文从AEG-1对CNS肿瘤的诊断、治疗和预后评估方面的作用进行综述,寻找新的标志物用于CNS肿瘤的诊断和治疗.【期刊名称】《神经损伤与功能重建》【年(卷),期】2017(012)004【总页数】2页(P341-342)【关键词】星形胶质细胞高表达基因-1;中枢神经系统肿瘤;应用价值【作者】叶翔;邢惠琴;许奇平;吴小艳【作者单位】厦门大学基础医学部厦门510630;厦门大学基础医学部厦门510630;厦门大学基础医学部厦门510630;厦门大学基础医学部厦门510630【正文语种】中文【中图分类】R741;R7439.4中枢神经系统（central nervous system，CNS）主要由大量的神经细胞规律性地组成网络或回路[1]。
神经细胞由于受到致癌因子的作用出现过度增殖的现象，临床表现为CNS肿瘤。
临床上多采用病理学及影像学等辅助检查进行确诊，通过手术、放化疗进行治疗。
但对于恶性肿瘤的效果较差，并对周边良性细胞造成严重影响[2,3]。
星型胶质细胞是胶质细胞中体积最大的一类[4]，具有营养、调控突触形成、神经发育、调控脑血流量、免疫调节及释放化学递质的作用，可以调节CNS的功能[5-7]，还参与到了多种CNS的疾病中[7]。
星形胶质细胞高表达基因-1（astrocyte elevated gene-1，AEG-1），也称为异粘蛋白，最早在在感染人免疫缺陷病毒的胚胎星形细胞中被克隆出来[8]，同时在神经胶质瘤组织中异常高表达，其含量与组织分化程度密切相关[9]。
KiSS-1基因对不同恶性度骨肉瘤细胞体外侵袭能力的影响的开题报告
KiSS-1基因对不同恶性度骨肉瘤细胞体外侵袭能力的影响
的开题报告
引言：
骨肉瘤是一种常见的恶性肿瘤，通常在儿童和青少年中发生。
其特点为高度侵袭性和转移性，导致极高的死亡率。
尽管已经开发了多种治疗方法，但预后仍然不理想，因此需要进一步深入了解骨肉瘤的发病机制以寻求更有效的治疗策略。
KiSS-1是一种编码肽激素KiSS-1的基因，其产物KiSS-1肽通过结合G蛋白偶联受体GPR54，在多种类型的恶性肿瘤细胞中发挥抑制转移的作用。
然而，有关KiSS-1在不同恶性度骨肉瘤细胞中的表达及其对体外侵袭能力的影响尚未得到充分报道。
目的：
本研究旨在探讨KiSS-1基因在不同恶性度骨肉瘤细胞中的表达差异及其对体外
侵袭能力的影响，为深入了解骨肉瘤的发病机制和发展更有效的治疗策略提供理论基础。
方法：
选取多个不同恶性度的骨肉瘤细胞系，包括Saos-2、U2OS和MG-63等。
采用
实时定量PCR和Western blotting技术检测KiSS-1基因和蛋白在不同骨肉瘤细胞系中的表达水平。
使用Transwell实验评估KiSS-1对不同恶性度骨肉瘤细胞体外侵袭能力
的影响。
预期结果：
预计KiSS-1的表达水平在不同恶性度骨肉瘤细胞系中存在显著差异，其中KiSS-
1的表达水平和侵袭能力呈负相关。
此外，通过KiSS-1蛋白的表达水平来预测骨肉瘤
的预后可能性。
结论：
本研究将为深入了解骨肉瘤的发病机制和开发新型治疗策略提供重要的理论基础，并为预测骨肉瘤的预后提供一种新的手段。
胶质瘤中整合素β1的表达及其生物学意义
胶质瘤中整合素β1的表达及其生物学意义
曾义;游潮
【期刊名称】《中国神经肿瘤杂志》
【年(卷),期】2004(2)3
【摘要】背景与目的:整合素是一类重要的跨膜受体,在肿瘤的发生、发展过程中,其表达的改变对肿瘤细胞增殖、浸润等可产生的影响.本文探讨胶质瘤中整合素β1的表达及其生物学意义.方法:用免疫组化方法检测45例胶质瘤、5例正常组织中整合素β1及Ki-67的表达.结果:整合素β1在Ⅰ、Ⅱ级及Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中的阳性率分别为42.11%及73.08%,有显著性差异(P＜0.05);整合素β1的表达与Ki-67标记指数具有正相关关系.结论:整合素β1参与胶质瘤的增殖调控,随着整合素β1表达的增高,肿瘤细胞的增殖活性升高,恶性程度增加;并与胶质瘤的侵袭性生物学行为有关.
【总页数】3页(P212-214)
【作者】曾义;游潮
【作者单位】德阳市人民医院神经外科,四川,德阳,618000;四川大学华西医院,四川,成都,610041
【正文语种】中文
【中图分类】R739.4
【相关文献】
1.胶质瘤中整合素β1、α3的表达及其生物学意义 [J], 曾义;徐宏;周增俊;韩杨云;刘之彝
2.胶质瘤中整合素β1表达的生物学意义 [J], 曾义;韩杨云;徐宏
3.胶质瘤中整合素α3的表达及其生物学意义 [J], 曾义;徐宏
4.胶质瘤中整合素α3及Ki-67表达的生物学意义 [J], 曾义;游潮;徐宏
5.脑胶质瘤中整合素αvβ3表达的生物学意义 [J], 刘学勇;艾文兵;陈玉宏
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・１０３７・
・实验研究・
神经胶质瘤致病因子一１在肾癌细胞株７６９一Ｐ 体外侵袭活性强化中的作用及其机制
杨庆良 张海芳 张广云
周晨龙
作者单位：４５５００１河南省安阳市人民医院泌尿外科
通信作者：张海芳，Ｅｍａｉｌ：ｏｋｌｉａｎｇｏｋ＠１６３．ｃｏｍ
ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ７６９一Ｐ ｃｅｉｌｓ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌ ｏｆ Ｇｌｉ一１一ｓｉＲＮＡ ｉｎ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｒｅａｌ— ｔｉｍｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ）ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ，ａｎｄ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａ． ｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ｍｅｔｈｙｌ ｔｈｉａｚｏｌ ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ（ＭＹｒ）ａｓｓａｙ．ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎｄ ｍｉｃｒｏ． ｓｃｏｐｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
和ｐＨｅｌｐｅｒ １．０共转染组。Ａ组为实验组，Ｂ、ｃ两组为对照组。应用基因转染方法，将Ａ组肾癌７６９一
Ｐ细胞转染Ｇｌｉ．１．ｓｉＲＮＡ慢病毒载体。检测Ｇｌｉ．１基因表达对肾癌细胞株７６９．Ｐ细胞的抗增殖作用和 生物学功能的影响，通过Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ和实时定量聚合酶链反应（Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ）技术检测Ｇｌｉ—ｌ—ｓｉＲＮＡ 在７６９－Ｐ细胞中的表达水平，并通过噻唑蓝（ＭｒＩ’Ｉ’）法、划痕实验、流式细胞仪、显微镜等观察比较转 染Ｇｌｉ－１．ｓｉＲＮＡ的７６９．Ｐ细胞的的迁移能力、黏附能力和凋亡等形态学改变。结果 （１）阴性对照组
ｔｉｍｅ—ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ
ｒａｔｅ
ｏｆ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐｓ Ｂ ａｎｄ Ｃ ｍａｎｎｅｒ（Ｐ＜０．０５）．（５）Ｆｌｏｗ ｗａｓ（１０．６７±０．２３）％ａｎｄ（６．８４±０．１６）％，ａｎｄ ｔｈａｔ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ ａｔ １２ ｈ ａｎｄ ２４ ｈ ｗａｓ（４５．４０± ５．７９）％ａｎｄ（６０．６７±５．７９）％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｉｎｇ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５）． （６）ｒ１１ｌｅ ｃｙｔｏｐｌａｓｍ ｏｆ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ ｗａｓ ｇｒａｎｕｌａｒ，ａｎｄ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｂｌｕｒｒｅｄ ａｎｄ ｄｉｓ— ａｐｐｅａｒｅｄ．Ａｆｔｅｒ ２４ ｈ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄ ａｆｔｅｒ ４８ ｈ，ｔｈｅ ｍａｊｏｒｉｔｙ ｏｆ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ａｐｏｐｔｏｓｔｉｃ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｄｅｂｒｉｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ．７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐｓ Ｂ ａｎｄ Ｃ ｗｅｒｅ ｉｎ ｇｏｏｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ
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ｍｅｔｈｏｄ．ｔｈｅ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｇｌｉ一１一ｓｉＲＮＡ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒ ｖｅｃｔｏｒ． ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏｉｏｄｃａｌ
Ｇ１ｉ一１一ｓｉＲＮＡ ｇｅｎｅ ｗａｓ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＧＩｉ—ｌ ｇｅｎｅ
１３ Ｊ。
和ｐＧＣＬ．ＧＦＰ共转染组；Ｂ组：未转染组；Ｃ组：ｐＧＣＬ 和ｐＨｅｌห้องสมุดไป่ตู้ｅｒ １．０共转染组。Ａ组为实验组，Ｂ、Ｃ两组为
对照组。严格按照说明书进行转染，加入Ｇ４１９筛选， 经３周后形成阳性克隆组，扩增培养，备用。
４．Ｒｅａｌ．ｔｉｍｅ Ｇｌｉ．１
ＰＣＲ检测转染成功后７６９．Ｐ细胞的
１Ⅱ１１
ｇｒｏｕｐ ｔｉｏｎ
ＷａＳ
ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ．ａｎｄ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｉｎ口ｎｒｏ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ
Ａ［Ｇｌｉ—ｌ—ｓｉＲＮＡ ａｎｄ ｐＧＧＬ—ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ（ＧＦＰ）ＣＯ—ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ］； Ｂ（ｎｏｎ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ），ａｎｄ ｇｒｏｕｐ Ｃ（ｐＧＣＬ ａｎｄ ｐｈｅｌｐｅｒ １．０ ＣＯ—ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ）．Ｕｓｉｎｇ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｃ－
ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ
Ｉｎｖａｓｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ
近年来研究结果显示，Ｈｅｄｇｅｈｏｇ（Ｈｈ）一神经胶质 瘤致病因子（Ｇｌｉ）信号通路在。肾癌发生发展中其关键 作用，而神经胶质瘤致病因子一１（Ｇｌｉ．１）作为该通路下 游转录激活子在肿瘤研究中受到广泛关注０１－２］。７６９．Ｐ 为雄激素非依赖性细胞，侵袭力强且高表达Ｇｌｉ一１
【关键词】
肾癌；神经胶质瘤致病因子一ｌ；小干扰ＲＮＡ；侵袭
Ｏｉｌ
Ｅｆｆｅｃｔ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｇＵｏｍａ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｏｎｃｏｇｅｎｅ ｈｏｍｏｌｏｇ一１ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ Ｃｈｅｎｌｏｎｇ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ（Ｐ＜０．０５）．（４）Ｍ ｒＩＴｌｌ ａｓｓａｙ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ
ａ
ｗａｓ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｄｕｃｅｄ
ａｓ
ｓｉＲＮＡ Ｇｌｉ—ｌ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｉｎ
ｎｏ
ｃ”ｏｍｅｔｒｙ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｅｌｌ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
Ｇｌｉ一１一ｓｉＲＮＡ
Ｃａｌｌ
ｉｎ．
ｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｇｌｉ一１ ｉｎ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ．ａｎｄ ｒｅｄｕｃｅ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ ａｂｉｌｉｔｙ．ｓｕｇ—
ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ７６９一Ｐ ｉｎ Ｇｕａｎｇｙｕｎ，Ｚｈｏｕ
‰昭Ｑｉｎｇｌｉａｎｇ，Ｚｈａｎｇ Ｈａｉｆａｎｇ，Ｚｈａｎｇ
ｏｆ
Ｕｒｏｌｏｇｙ。Ａｎｙａｎｇ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ。Ａｎｙａｎｇ ４５５００ｌ，Ｃｈｉｎａ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｚｈａｎｇ
Ｈａｉｆａｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｏｋｌｉａｎｇｏｋ＠１６３．ｃｏｍ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｇｌｉｏｍａ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ
ｉｎｖａｓｉｏｎ
ｏｎｃｏｇｅｎｅ
ｈｏｍｏｌｏｇ—ｌ
（Ｇｌｉ一１）ｏｎ ｔｈｅ
ｏｆ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ７６９一Ｐ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｖｅｃｔｏｒ
Ｇｌｉ一１一ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒ．
ｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ：ｇｒｏｕｐ
ｔｅｓｔ
０．０５）．（３）Ｓｃｒａｔｃｈ
ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｖｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ７６９一Ｐ ｃｅｌｌｓ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｇｌｉ—ｌ—ｓｉＲＮＡ
万方数据
・１０３８・
生堡塞坠生ｂ型盘查！！！ｉ生！旦箜！！鲞箜垒翅ｇ！鱼』垦狸！！强：垒Ｐ互！；Ｑ！！：ｙ！！：！≥：№：垒
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－９０３０．２０１６．０４．０５１
【摘要】
目的观察神经胶质瘤致病因子．１（Ｇｌｉ．１）在肾癌细胞株７６９．Ｐ细胞体外侵袭活性强
化中的作用。方法构建Ｇｌｉ．１一小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）慢病毒载体，将体外培养好的肾癌７６９一Ｐ细胞 株分为３组：Ａ组：Ｇｌｉ．１．ｓｉＲＮＡ和ｐＧＣＬ一绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）共转染组。Ｂ组：未转染组；Ｃ组：ｐＧＣＬ
５’．ＧＧＡＣＡＡＣＣＧＣＣＡＴＣＣＡＧＡＣＴ．３’，下游引物：５’一 ＧＣＣＡＧＧＧＡＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＣ一３’，产物长度３６３
ｂｐ；
１．材料：人肾癌７６９．Ｐ细胞株购自中国科学院上
海细胞研究所；Ｈａｍ’Ｓ Ｆ１２培养基、胎牛血清（ＦＢＳ）为
Ｂ－肌动蛋白（１３－ａｃｔｉｎ）上游引物５’一ＧｒＩＴＩ’ＧＣＴＡＴＣＣＡＧ—
我们拟构建针对Ｇｌｉ．１基因的小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）序
列，转染入肾癌７６９一Ｐ细胞，观察ｓｉＲＮＡ对肾癌７６９．Ｐ
ｍＲＮＡ变化：７６９．Ｐ转染后４８ ｈ，加入Ｔｒｉｚｏｌ
按照其说明书提取总ＲＮＡ，取３斗ｇ总ＲＮＡ进行反转
细胞增殖和侵袭能力的影响。
材料与方法
录后各取８斗ｌ行Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ反应，Ｇｌｉ．１上游引物：
（１）Ｉｎ
ｇｒｏｕｐ
Ｂ ａｎｄ Ａ．ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＧＩｉ一１ ｍＲＮＡ ｗａｓ ９８．２±６．６ ａｎｄ ５３．８±４．６
ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｉｎｇ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｏｆ Ｇｌｉ～ｌ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５）．（２）Ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｎｄ ｇｒｏｕｐ Ａ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎ Ｗａｓ ９４．９±７．９ ａｎｄ ４２．６±３．２ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｉｎｇ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｆ Ｐ＜