5多糖分子量测定
高效凝胶渗透色谱测定多糖分子量
高效凝胶渗透色谱测定多糖分子量
高效凝胶渗透色谱是一种常用于测定多糖分子量的分析方法。
该方法通过将样品溶解在适当的溶剂中，并进行筛选和过滤，得到分子量较小的物质进入固定相凝胶的孔隙中，分子量较大的物质则较难进入孔隙。
在外加压力下，溶质会通过凝胶孔隙向前移动，移动速度与其分子量成反比。
具体操作步骤如下：
1. 准备样品：将多糖样品溶解在适当的溶剂中，并进行筛选和过滤以去除杂质。
2. 准备载流相：选择适当的溶剂作为载流相，并调整pH值和离子强度等条件以提高分离效果。
3. 准备色谱柱：选择合适的色谱柱，如凝胶过滤柱或凝胶渗透柱等，并进行适当的条件调节和均匀填充。
4. 注入样品：将准备好的样品注入色谱柱，并施加适当的压力或重力，使样品通过色谱柱。
5. 分离和检测：通过凝胶孔隙的大小，分子量较小的多糖能够快速通过孔隙而分离出来，分子量较大的多糖则需要花费更长的时间。
通过检测样品在不同时间点处的浓度变化，可以得到多糖的分子量分布曲线。
6. 数据分析：根据分子量分布曲线，可以计算得到多糖的平均
分子量和分子量分布范围等参数。
需要注意的是，高效凝胶渗透色谱在测定多糖分子量时对样品的前处理工作要求较高，尤其是去除杂质和筛选合适的载流相条件。
此外，在进行数据分析时，还需要结合多糖的特性和实验条件进行综合考虑，以获得准确的分子量结果。
多糖的评价指标
多糖是一类由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物，具有多种生物活性和药理作用。
多糖的评价指标主要包括以下几个方面：
1.分子量：多糖分子量是评价多糖分子大小的重要指标，通常用凝胶渗透法、分子量测定仪等方法进行测定。
分子量越大，多糖的稳定性和生物活性通常越好。
2.糖组成：多糖的糖组成是指多糖分子中不同单糖分子的比例，不同的多糖具有不同的糖组成。
糖组成对多糖的生物活性和药理作用具有重要影响，因此是评价多糖的重要指标之一。
3.分子结构：多糖的分子结构包括链长、分支结构、空间构型等方面。
多糖的分子结构对其生物活性和药理作用具有重要影响，因此是评价多糖的重要指标之一。
4.生物活性：多糖的生物活性是评价多糖药效的重要指标，包括免疫调节、抗炎、抗肿瘤、降血糖、保护肝脏等方面。
多糖的生物活性通常通过体外和体内实验进行评价。
5.纯度：多糖的纯度是评价多糖质量的重要指标，通常通过高效液相色谱、气相色谱等方法进行测定。
多糖的纯度越高，其生物活性和药理作用通常越好。
综上所述，多糖的评价指标包括分子量、糖组成、分子结构、生物活性和纯度等方面，这些指标对多糖的研究和应用具有重要意义。
多糖含量测定的方法综述
多糖含量测定的方法综述多糖是一种以糖为主要组成成分的生物大分子，包括多种不同类型的糖类，如葡萄糖、果糖、半乳糖等。
多糖在生物体内具有重要的生理功能，包括能量供应、结构支持、细胞识别和信号传递等。
测定多糖的含量对于分析生物体内的代谢物质和生物功能很重要。
下面将综述几种常用的多糖含量测定方法。
1. 酚-硫酸法：酚-硫酸法是一种常用的测定糖类含量的方法。
该方法通过将样品与酚和硫酸反应，产生带有吸收峰的复合物，然后使用紫外光谱仪测定复合物的吸光度来计算糖含量。
该方法适用范围广，对于多种糖类都可以测定。
2. 酶法：酶法是通过特定酶对特定的糖类进行反应，生成比色物或荧光物质来测定糖含量的方法。
常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法、木糖醇氧化酶法和半乳糖标准酶法等。
这些方法具有灵敏、快速的特点，适用于糖类含量较高的样品。
3. 高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种通过分离和检测糖类来测定多糖含量的方法。
该方法使用高压注射仪将样品中的糖类分离，然后通过色谱柱进行分离，并使用检测器测定峰的面积或高度来计算糖含量。
该方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点，适用于多糖含量较低的样品。
4. 红磷法：红磷法是一种比色法，通过氧化红磷，使其转变成淡黄色后与不同浓度的糖溶液比较颜色的深浅来测定糖含量。
该方法简单、快速，适用于粗测糖含量。
5. 聚合度测定法：多糖的聚合度是指多糖分子中含有的糖基个数。
测定多糖的聚合度可以通过核磁共振和凝胶渗透色谱等方法进行。
这些方法可以确定多糖的分子量和聚合度分布，从而间接地测定糖含量。
测定多糖含量的方法有很多种，每种方法都有其适用范围和优缺点。
在实际应用中，根据样品的特点和研究目的选择合适的方法进行多糖含量的测定。
多糖的分子量测定
多糖的分子量测定常用的是凝胶滤过法。
将充分膨胀好的SephadexG-200、G-150或G-75湿法装柱，用一定离子强度的氯化钠水溶液进行平衡，然后将各种不同的已知分子量的多糖分别相继上柱，同一离子强度的氯化钠水溶液洗脱，分步收集，苯酚-硫酸法监测，分别求得洗脱体积Ve，然后再将兰葡聚糖（M V>200万）上同一条柱，求出柱的空体积V o，根据V e/V o与logM之间存在着线性关系，可绘制标准曲线。
最后，将待测样品按上述不变的条件上柱，求得待测多糖的V e。
通过标准曲线上的V e/V o，查得待测多糖的分子量对数，便可求出M。
对于黏度大的多糖，可采用黏度法求得。
亦有用蒸汽压渗透法（VPO，基本原理是根据理想溶液的拉乌尔定律，参考文献：崔锡红, 等. 蒸汽压渗透法分析异丁烯的数均分子量. 河南化工. 2001, 1: 32. 骆传环. 蒸气压渗透计测定多糖分子量. 现代科学仪器, 1994, 4:11.）、超速离心法（骆传环, 等. 香姑多糖的分子量测定. 科学技术与工程. 2006, 6(8): 1058~1060）、光散射法（LS，光散射法测定高分子量基于高分子溶液的瑞利散射，垂直偏振光通过溶液产生的不同角度散射光的强度与溶质分子的大小即分子量成正比。
参考文献：魏立平, 姜雄平. 光散射法在医学分子生物学中的应用. 国外医学分子生物学分册. 2000, 22(2): 123.）、玻璃纤维纸电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳（原理：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠），SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异，由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。
多糖的分子量与分子量分布测定标准操作规程
多糖的分子量与分子量分布测定标准操作规程目的：建立多糖的分子量与分子量分布测定的标准操作规程。
2. 依据：《中华人民共和国药典》2000年版二部。
3. 范围：适用于药品中多糖的分子量与分子量分布的测定。
4. 职责：QC检验员对本标准的实施负责。
5. 程序：5.1. 对仪器的一般要求：色谱柱为测多糖专用凝胶柱（按所测样品的分子量大小选择特定排阻范围的凝胶柱）。
检测器为示差折光检测器。
5.2. 系统适用性试验：按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，规定分析状态下色谱柱的最小理论板数（n）和供试品在该分析状态下的分配系数（K d）应达到规定的要求。
K d =t R—t0t T—t0式中t R为供试品峰的保留时间；t0为完全被填料颗粒网孔排阻的大分子的保留时间，一般指蓝色葡聚糖的保留时间。
t T为能自由进出填料颗粒网孔的小分子的保留时间，一般指葡萄糖的保留时间。
5.3. 测定法：5.3.1. 系统校正：根据供试品分子量大小，一般选用5个已知分子量的多糖标准品（常用的为葡聚糖）分别用流动相制成每1ml中约含10mg的标准溶液，分别取上述标准溶液25μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
由GPC专用软件绘制标准曲线，得线性回归方程：1gM W=a+bt R式中M W为标样的已知重均分子量；t R 为标样的保留时间。
5.3.2. 样品测量：取供试品溶液25µl注入液相色谱仪，记录色谱图，按下式计算分子量：M n=ΣRI i/Σ（RI i/M i）M w=Σ（RI i M i）/ΣRI iD =M w/M n式中M n为数均分子量；RI i为为样品i级分的物质量，即供试品在保留时间i的峰高；M i为样品i级分的分子量，即供试品在保留时间i的分子量。
5.4. 结果处理：采用GPC专用软件，可获得供试品归一化色谱图，微分、积分分子量分布图，各时间点的分子量（片段数据）和各种平均分子量。
根据供试品需要选择各项测定结果。
多糖 分子量
多糖分子量
多糖是一类由多个单糖分子通过糖苷键缩合而成的复杂糖类物质，具有高分子化合物的特征。
多糖的分子量因种类和结构的不同而有很大差异，可以从几千到数百万Da（道尔顿）不等。
多糖的分子量测定方法有以下几种：
1. 凝胶滤过法：常用的方法之一，通过将多糖样品加入凝胶柱，利用分子筛效应分离不同分子量的多糖。
常用的凝胶柱有Sephadex G-200、G-150或G-75。
通过测定洗脱体积与分子量的关系，可以计算出多糖的分子量。
2. 黏度法：适用于测定黏度较大的多糖样品。
通过测量多糖溶液的黏度，结合溶液的浓度和温度，计算多糖的分子量。
3. 蒸汽压渗透法（VPO）：基于理想溶液的拉乌尔定律，适用于分析高分子量多糖。
通过测量多糖溶液的蒸汽压，结合溶液的浓度和温度，计算多糖的分子量。
4. 超速离心法：通过测量多糖溶液的超速离心沉降速度，结合溶液的浓度和温度，计算多糖的分子量。
5. 光散射法：基于高分子溶液的瑞利散射原理，通过测量多糖溶液的光散射强度，计算多糖的分子量。
需要注意的是，不同的测定方法各有优缺点，选择合适的测定方法取决于多糖的性质和实验条件。
在实际应用中，通常会根据多糖的来源、结构和性质，选择最合适的分子量测定方法。
多糖结构测定的一般流程
多糖结构测定的一般流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!多糖结构测定的一般流程一、准备工作阶段。
在进行多糖结构测定之前，需要做好充分的准备。
多糖含量测定的方法综述
多糖含量测定的方法综述多糖是一类具有多个单糖分子组成的生物大分子，包括淀粉、葡萄糖、纤维素等。
多糖具有一定的营养和生理功能，在食品工业、医药工业等领域具有广泛的应用。
准确测定多糖含量对于保证产品质量和判断其功能性十分重要。
随着科学技术的进步，研究人员不断探索和改进多糖含量测定的方法，以满足不同领域对多糖含量测定的需求。
一、多糖含量的意义及常见方法1.多糖含量的意义多糖是人体所必需的能量来源之一，具有维持机体生理活动和保护细胞功能等作用。
在食品加工中，多糖也有着重要的作用，如增加产品的口感、增加产品的营养价值等。
在药物制剂中，多糖也有着重要的应用，例如用作药物的载体、吸附剂等。
准确测定多糖含量对于保证产品质量和判断其功能性十分重要。
2.常见方法目前，常见的多糖含量测定方法主要包括显微测定法、中分子量测定法、溶解度测定法、极限滤提法等。
二、多糖含量测定的方法综述1.显微测定法显微测定法是通过显微镜观察样品的形态和结构，根据细胞壁的薄膜形态、纤维素等物质的分布情况等来判断多糖的含量。
这种方法简单直观，但无法准确测定多糖的含量，只能用来初步判断。
2.中分子量测定法中分子量测定法是根据多糖的分子量大小来测定多糖含量的方法，常见的方法有凝胶渗透色谱法、高效液相色谱法等。
这种方法可以准确地测定多糖的分子量，但需要设备较为复杂，操作较为繁琐。
3.溶解度测定法溶解度测定法是通过测定多糖在水中的溶解度来间接测定多糖含量的方法。
这种方法简单易行，但无法准确地测定多糖的含量和种类。
4.极限滤提法极限滤提法是通过将多糖样品溶解于适当的溶剂中，再在高温下滤提，最后通过烘干样品，称取得到的残渣质量来计算多糖的含量。
这种方法操作简单，但需要注意样品预处理和滤提条件的控制，同时也需要考虑对多糖的热稳定性。
多糖含量测定的方法有很多种，各有其特点和适用范围。
在实际应用中，需要根据需要选择合适的方法进行测定。
也需要不断深入研究和改进，以提高多糖含量测定的准确性和稳定性，为多糖在不同领域的应用提供更好的支持。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
多糖的分子量测定
多糖的分子量测定是研究多糖性质的一项 较为重要的工作.多糖的性质往往与它的分 子量大小有关.例如,多糖溶液的粘度不但 随浓度的增大而升高,而且与多糖分子量大 小有关.一般说来,分子量增大,粘度增高. 在生物学研究中,发现某些多糖由于分 子量大小方面的差别,所产生的某些效应也 有一定差异.
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
五,分子筛法
[原理] 原理] 凝胶过滤测定中,洗脱体积称为Ve,当分子量足够大, 过凝胶柱时不进入凝胶的洗脱体积为死体积V0,小分子物 质进入柱子后,其洗脱体积较大,极限值为Vt,即床体积.
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
Kav为分配系数,表示物质在流动相(凝胶珠外的液体)和固 定相(包括凝胶内的液体和凝胶本身)之间的分配比,则有: Kav=(Ve-Vo)/(VtKav=(Ve-Vo)/(Vt-V0), 另一种分配因子的表示法为Kd,即溶质在凝胶外液体和凝胶 内液体体积Vi之间的分配比 Kd=(Ve- )/Vi, Kd=(Ve-V0)/Vi Kav可能与球状蛋白或多糖的表观Stokes半径rs有关,并有下 式 Kav=exp[Kav=exp[-丌L(rs+rr)(rs+rr)] 式中,L表示固定相浓度,rr表示固定相棒状分子的半径,对 于类似形状和水合作用的分子,rs与分子量之间存在一种固定的 相互关系. Kav,Kd及其他凝胶过滤参数与球状蛋白和糖胺聚糖分子量之 间的经验关系式已经建立.对于球状蛋白,Kav对lgM作图得校正 曲线.
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
[操作] 操作] (1) 精确称取样品100～200 mg,放在500 mL具磨砂口的圆 底烧瓶中,加蒸馏水3 mL,使样品吸水润湿,再加浓度为O.4 mol/L的醋酸5 mL和浓度为O.8 mol/L的KCN的溶液5 mL,盖 上玻璃塞后于39℃温度保温48小时.然后用酸将反应液酸化至 甲基红呈酸性. (2)通以空气,驱逐反应液中剩留的氰化物,然后加浓度为 20%的氢氧化钠溶液10mL. (3)以蒸汽蒸馏法将氨蒸出并吸收于一定体积(VHCL,)的标准 盐酸中.蒸馏完毕,以标准氢氧化钠滴定盐酸(吸收溶液),记 录所消耗的氢氧化钠的体积(VNAOH). (4)样品的分子量: M=样品质量/[( HCL*0 01) NAOH*0 01) M=样品质量/[(VHCL*0.01)-(VNAOH*0.01) 样品质量
M=样品(mg)/x. M=样品(mg)/x. 样品(度鉴定
碱性铜盐试剂反应滴定法: 以碱性铜盐试剂氧化还原糖方法,测定多糖端基的半缩醛基团 ,从而计算出它的分子量. [试剂] 试剂] 碱性铜盐试剂:Na2HPO412H2O 76.6 g, 酒石酸钾钠40 g, 浓度为1 mol/L的氢氧化钠溶液100 mL, 浓度为10%的CuSO45H2O的溶液80 mL,Na2S04 180 g,加水配 成1000 mL. O.01 mol/L碘酸钾溶液 2.5%碘化钾溶液(用时新鲜配制) l mol/L H2S04 0.0025 mol/L硫代硫酸钠溶液(临用前,以O.02 mol几的 硫代硫酸钠溶液稀释,经标定后使用).
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
因
n=W/M, W=CV, 代人上式简化后得: M=RT/(π/C ) (1—2) 2 C:浓度 有些研究者认为应当考虑溶剂在不同温度时的密度D,即 M=RT/(π/c*D) (1—3) 3 D:密度 仪器和试剂] [仪器和试剂] 本试验采用的膜渗透压计为德国Knauer公司的膜渗透仪. 与该公司特制的专为测定水溶性物质用的双层膜作为半透膜, 溶剂为脱气蒸馏水. 膜渗透仪的主要部件是渗透池,由半透膜分隔成上下两池, 下池底部中央有一压敏换能元件.操作时先将下池充满纯水, 加上半膜后再将上池充满测定的溶液.在恒温条件下使两池达 成平衡,压力之差由换能器输出信号放大后记录,求得π值.
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
下面介绍几种常用的测定多糖还原端基的定量分析方法: 3,5一二硝基水杨酸比色法 本方法在还原糖与3,5一二硝基水杨酸反应时,产生颜色. 测定检样时,用一个已知分子量和已知浓度的溶液作参比,经 过比色,计算检样的分子量. [试剂] 试剂] 3,5一二硝基水杨酸溶液:称取666 mg经2次重结晶的3,5 一二硝基水杨酸,溶解于200 mL浓度为1 mol/L的氢氧化钾溶 液中. [操作] 操作] (1)称取样品100～200 mg放人100 mm×20 mm试管,加15 mL试 剂,经过搅拌使样品溶解,然后在65℃的恒温水浴中保温1小时 ,待冷却至室温后,将反应液移入50 mL容量瓶,用水淋洗反应 管多次,淋洗液并入容量瓶,添加水至刻度.
RT M= π × D CC-O
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
二,端基法 原理] [ 原理] 测定单位重量样品中所含可测端基之数,计算检样的分子 量. 例如,对某一种多糖的分子结构,业已明确知道它每一个分 子链含有一个可测端基和每毫克中所含的可测端基为A mmol, 那么,该多糖的分子量应该是1/A. 可见检样的分子量,是它每毫克重量中所含可测端基的毫摩 尔数的倒数,在端基法测定分子量时,分子量计算的通式为: 检样重量mg 可测端基(mmol)=检样的分子量(Mn) mg/ (mmol)=检样的分子量 检样重量mg/可测端基(mmol)=检样的分子量(Mn) 用端基法测分子量要求检样的化学结构须具备如下两个条件: (1)每一个分子链端须具有可以用化学方法作分析的基团, 以便采用一定的定量分析方法,对该端基作定量分析. (2)检样的每一个分子链,它所含可测端基的数目,不但须 明确,而且数目应固定不变.
第六章 多糖的分子量测定
把多糖转化为氰醇(cynohydrin)的测定法: 把多糖转化为氰醇(cynohydrin)的测定法: (cynohydrin)的测定法 把多糖(P)与氰化钾反应,成为多糖氰醇(PCHOHCN),然后在 碱性条件下使氰醇水解,释放出氨 PCHO——>PCHOHCN PCHO >PCHOHCN——>NH3 > 释放的氨用标准浓度盐酸吸收,再用氢氧化钠滴定.释放 的氨的毫摩尔量,即为多糖还原基团的毫摩尔量,从而计算多 糖的分子量. 本方法常用于纤维素等的分子量测定. 试剂] [试剂] O.4 mol/L醋酸, O.8 mol/L氰化钾溶液, 20%氢氧化钠溶液, O.01 mol/L的标准盐酸, O.01 mol/L的标准氢氧化钠.
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
[操作] 操作] (1)精确称取样品1～2 g,用蒸馏水溶解后,配制成50 mL,吸取两 份5 mL分别置于两只容量为100 mL具磨砂口的三角烧瓶. (2)另取一只100 mL具磨砂口的三角烧瓶,盛放5 mL蒸馏水,作滴定 对照用. (3)向三角烧瓶中分别加入碱性铜盐试剂5 mL,然后接上具磨砂接头 的冷凝管,放入正在沸腾的水浴中,煮沸30分钟之后,小心地把它们 从水浴取出,取时勿使瓶中溶液搅动,待冷至室温后,于各瓶中精确 量加O.01 mol/L的碘酸钾溶液15 mL,再加2.5%的碘化钾溶液1 mL(须沿瓶壁加入,使沾在瓶壁上的反应液淋洗入瓶中,加液时勿使 反应液搅动,避免受空气氧化),再加1 mol/L的H2S04 1.5 mL,加 毕后立即搅拌混匀,然后加1%可溶性淀粉l mL为指示剂,用O.002 5mol/l的硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色退去为止.
第六章 多糖的分子量测定
样品 (4)分子量计算: R—气体常数(848) 浓度C (g/100 mL) T—绝对温度 渗压" π—渗透压 π/C D—密度 1
O.209
2
0.403
3
0.626 0.8 1.238
O.3 0.5 1.435 4 1.271 7
将π/C对C作图求得 π/C c→0为1.50.T=24℃ ,D=0.9973代人式得: M≈168 00. 168O M≈168O00
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
渗透压法: 一,渗透压法: 利用膜渗透压计(Membrane Osmometer,简称MO仪) 可以测定范围在1万～50万之间的多糖分子量.本法 不需用标准品. 原理] [原理]:把多糖水溶液装在半透膜制成的透析袋内, 袋外为溶剂(水),水分子可以自由通过半透膜,多糖 分子则不能通过透析膜,因此袋内的多糖分子必将吸 引更多的水分子渗入袋内,形成一定的渗透压.渗透 压与溶液中的溶质分子数有关,可以用范特荷甫公式 表示,即 πV=nRT (1-1) 式中π——渗透压; V——溶液体积; n——溶液摩尔数; R——气体常数; T——绝对温度.
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
测定多糖分子量时,为了避免因存在杂质而影 响测定结果,需要把检测的样品(简称样品或 检样)适当提纯.用于分子量测定的样品,纯 度要求虽然不十分高,但至少要达到 : (1)去除杂质和水分. (2)把不同化学结构的组分相互分开,使它们在 测定分子量中不相互干扰. (3)把不同分子量大小的组分相互分开. 另外,在用某些方法进行分子量测定时,需要先 将小分子量的盐和单糖除去.
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
膜渗透压计示意图
第4章 章
多糖的干燥和纯度鉴定
[操作] 操作] 以右旋糖酐分子量的测定为例. (1)仪器准备:将脱气后的蒸馏水充满下池.浸泡好的半透膜 覆盖其上并注意勿使气泡进入.将上池压紧.按操作要求逐步 旋紧中心螺丝(约8小时),装上针阀及校正杯进行仪器校正(约 12小时),取下针形阀及校正杯,装上进样管,用溶剂充分冲洗 后,开动记录仪,划出基线(约12小时). (2)样品准备:每一测定的样品需配3～5个不同浓度的溶液. 本试验中用右旋糖酐配制成 O.209 g/100 mL(C1),O.403 g/ 100 mL(C2)及O.626 g/lOO mL(C3)3种浓度的溶液. (3)样品测定:先用浓度为C1的样品由进样管注入上池,清洗 3次,再注满进行测量,直到记录仪达到平衡.划出的直线与基 线之间的距离即为该浓度溶液的π值. 同法测定C2,C3溶液的π值.