分光光度计的操作方法及日常维护(3月份)
分光光度计的使用维护及操作规程
分光光度计的使用维护及操作规程分光光度计，又称光谱仪，是将成分多而杂的光，分解为光谱线的科学仪器。
在使用分光光度计时，我们必需要注意一些使用后的维护，保养，和一些基本使用注意事项，才能达到更好的使用效果。
分光光度计的使用维护：1、使用的吸取池必需干净，并注意配对使用。
量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。
2、取吸取池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。
吸取池放入样品室时应注意方向相同。
用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。
3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸取度以在0.3～0.7之间为宜。
4、测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对比，接受1cm石英吸取池，在规定的吸取峰2nm以内，测几个点的吸取度或由仪器在规定的波长相近自动扫描测定，以核对供试品的吸取峰位置是否正确，并以吸取度zui大的波长作为测定波长，除另有规定外吸取度zui大波长应在该品种项下规定的测定波长2nm以内。
5、供试品应取2份，如为对比品比较法，对比品一般也应取2份。
平行操作，每份结果对平均值的偏差应在0.5%以内。
6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸取带的半宽度，否则测得的吸取度值会偏低，狭缝宽度的选择应以削减狭缝宽度时供试品的吸取度不再加添为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。
7、单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内不能拆开,为防止色散元件受潮发霉,必需常常更换单色器盒干燥剂。
8、光电转换元件不能长时间曝光,应避开强光照射或受潮积尘。
紫外可见分光光度计使用方法紫外可见分光光度计是什么呢？紫外可见分光光度计是引用新型技术研发而成的，接受单色器技术波长范围190—1100mm，适用范围包括市政和工业废水领域。
紫外可见分光光度计使用方法：1、仪器预热。
打开样品室盖光门自动关闭、。
开启电源，指示灯亮，仪器预热20 min。
分光光度计的维护与注意事项 光度计操作规程
分光光度计的维护与注意事项光度计操作规程分光光度计属于精密仪器，应当妥当保管和细心维护，这样才能保证分光光度计长期使用、长期的稳定牢靠、测量精度高。
下面我为您讲解在确定环境下维护分光光度计的阅历，实在如下：1、环境温度在条件容许的情况下，尽量保持在15—30摄氏度之间，这样能保持电器件稳定工作，不易老化，使分光光度计不易损坏，灯源的使用寿命得到延长。
若条件不容许，在高温的情况下，缩短开机时间，使用分光光度计，使电器件不要长期保持在高温下。
在低温下，使预热时间比常温下的预热时间要长，这样能保证在仪器稳定的情况下进行测试。
2、环境湿度在条件容许的情况下，尽量保持在60%以下，这样能保证光度计内部的光学件和电器件不易受潮、腐蚀和上霉。
若条件不容许，在高湿度和低湿度的情况尽量保持通风。
3、环境在条件容许的情况下尽量保持干净，打扫环境时动作不宜太大，不要扬起灰尘，打扫之前用防尘罩盖上分光光度计，不要让灰尘进入分光光度计内部。
分光光度计注意事项：1、比色皿使用时注意不要沾污或将比色皿的透光面磨损，应手持比色皿的毛面。
2、待测液制备好后应尽快测量，避开有色物质分解，影响测量结果。
3、测得的吸光度A掌控在0.2～0.8之间，超过1.0时要做适当稀释。
4、开关试样室盖时动作要轻缓。
5、不要在仪器上方倾倒测试样品，以免样品污染仪器表面，损坏仪器。
6、比色皿在盛装样品前，应用所盛装样品冲洗两次，测量结束后比色皿应用蒸馏水清洗干净后倒置晾干。
若比色皿内有颜色挂壁，可用无水乙醇浸泡清洗。
7、向比色皿中加样时，若样品流到比色皿外壁时，应以滤纸點干，镜头纸擦净后测量，切忌用滤纸擦拭，以免比色皿显现划痕。
8、测定紫外波长时，需选用石英比色皿。
9、测量过程中不可打开测量室的窗门，否则会影响测量结果的精准性。
紫外可见分光光度计保养维护要点紫外可见分光光度计是精密光学仪器。
因此, 使用者要注意日常保养和维护。
除常常做好清洁卫生工作外, 还要注意以下几点。
紫外分光光度计的使用与维护保养
紫外分光光度计的使用与维护保养
紫外分光光度计是一种常用于测量物质在紫外光区域的吸光度值
的仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
在使用和维护保养时，需要注意以下几点：
一、使用注意事项：
1. 仪器应放置在干燥、通风、光线良好的实验室中，远离强烈
光源和电磁干扰。
2. 仪器使用前应打开电源开关，预热20分钟以上后才能进行测量。
3. 测量前应按照要求选择适当的工作光谱区域、光程、光栅等，以获得准确的测量结果。
4. 测量前需要校准仪器，以保证测量结果准确可靠。
二、维护保养：
1. 仪器应定期进行清洁和校准，以保证仪器的精度和稳定性。
2. 仪器的光路、检测器等关键部件要注意保养，定期进行清洁
和检查，以确保其正常使用。
3. 镜面等易受污染的部件应经常进行清洗，清洗时应使用特定
的清洁剂和方法，避免损坏仪器。
4. 仪器长时间不使用时应注意防潮、防尘，最好使用专门的仪
器防护罩进行保护。
以上是紫外分光光度计的使用和维护保养注意事项，正确使用和
保养能够延长仪器的寿命和使用效果。
紫外可见分光光度计安全操作及保养规程
紫外可见分光光度计安全操作及保养规程一、引言紫外可见分光光度计是一种用于测量液体或溶液样品的吸收或透过率的仪器。
为了确保正确操作和延长设备寿命，本文档将详细介绍紫外可见分光光度计的安全操作和保养规程。
二、安全操作规程1.戴好个人防护装备：在操作紫外可见分光光度计之前，必须戴上安全眼镜和实验室手套，以防止潜在的伤害和化学品对皮肤的损害。
2.确保电源和设备安全：在连接电源之前，确保电源电压和设备要求的电源电压相匹配。
确保电源插头没有损坏，并正确插入到设备插座中。
3.避免操作错误：在操作紫外可见分光光度计时，务必遵循操作手册中的指导和操作步骤。
操作过程中，不要随意调整设备设置或参数，以免对设备造成损害。
4.注意正确存储试剂和标本：在测量之前，确保试剂和标本正确存放并标记清楚。
避免使用已过期的试剂或受损的标本，以免对测试结果造成误差。
5.避免直接接触光源和样品槽：紫外光源会产生辐射，可能对眼睛和皮肤造成损害。
因此，避免直接注视或接触紫外光源。
同时，在操作样品槽时，避免直接接触样品或使用手指触碰，以防止污染和损坏样品槽。
6.正确清洁仪器：定期清洁紫外可见分光光度计以确保准确的测量。
在清洁过程中，使用适当的清洁剂和工具，按照操作手册中的指导进行清洁操作。
避免使用对设备有害的化学物质或工具。
三、保养规程1.定期校准设备：为了确保准确的测量结果，定期校准紫外可见分光光度计是非常重要的。
根据设备的要求，选择适当的校准方法和校准标准，对设备进行定期校准。
2.保持设备通风良好：紫外可见分光光度计在运行过程中会产生一定的热量。
因此，确保设备周围有足够的空间和通风条件，以保持设备正常工作温度并防止过热。
3.保持设备清洁和干燥：避免污染和湿气对设备的影响，定期清洁设备表面和内部。
在关机之前，确保设备彻底干燥，避免积水或污渍对设备造成损害。
4.定期维护和检查：定期检查设备的各个部件和连接。
确保电缆、插头、控制面板等没有损坏或松动。
分光光度计的使用方法
D、测定有色溶液吸光度时，一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量误差。
F、在实际分析工作中，通常根据溶液浓度的不同，选用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2-0.7。
分光光度计使用方法
1、操作方法
（1）预热仪器
为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。
（2）选定波长
根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。
（3）固定灵敏度档
根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
（6）测定
轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后，打开比色皿暗箱盖。
（7）关机
实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
分光光度计使用方法
2、注意事项：
（1）为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。
（4）调节“0”点
轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）。
（5）调节T=100%
将盛蒸馏水（或空白溶液或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=100%，即表头指针恰好指在T=100%处。
（2）比色皿的使用方法：
紫外可见分光光度计的操作和维护
紫外可见分光光度计的操作和维护紫外可见分光光度计是一种常用的分析仪器，用于测定物质的吸光度、透过率、浓度等参数为了确保设备的准确性和稳定性，正确操作和维护紫外可见分光光度计至关重要本手册提供了紫外可见分光光度计的基本操作步骤和维护方法一、操作步骤1. 开机准备1.确保设备放置在稳定的环境中，避免振动和强光干扰2.接通电源，开启设备等待设备自检完成后，进入操作界面2. 调整波长1.在操作界面中选择“波长调整”功能2.使用鼠标或触摸屏点击波长切换按钮，直至选择到所需的波长3.确认波长后，点击“确定”按钮3. 调零1.在操作界面中选择“调零”功能2.点击“调零”按钮，设备将自动进行调零操作3.调零完成后，点击“确定”按钮4. 测量1.在操作界面中选择“测量”功能2.将样品放入样品池中，确保样品不接触池底3.点击“测量”按钮，设备将自动进行测量4.测量完成后，点击“确定”按钮，获取测量结果5. 数据处理1.在操作界面中选择“数据处理”功能2.根据需要选择适当的数学运算方法，如吸光度、透过率等3.点击“计算”按钮，设备将自动进行数据处理4.数据处理完成后，点击“确定”按钮，获取最终结果二、维护与保养为了确保紫外可见分光光度计的正常运行和延长使用寿命，定期进行维护与保养至关重要以下是一些基本的维护与保养方法：1. 清洁1.定期清洁设备表面，避免灰尘和污垢积累2.使用湿布擦拭设备，不要使用腐蚀性清洁剂3.清洁样品池和比色皿，确保无污垢和残留物2. 更换光源1.定期检查光源是否正常工作，如发现异常，及时更换2.更换光源时，请确保使用与设备兼容的光源3. 校准1.定期进行设备校准，确保测量结果的准确性2.根据设备说明书，按照校准步骤进行操作4. 检查光学系统1.定期检查光学系统，确保无划痕、污垢或损坏2.使用清洁布轻轻擦拭光学元件，避免使用腐蚀性清洁剂5. 检查电源1.确保设备接入稳定的电源，避免电压波动对设备造成损害2.若设备出现电源问题，及时与专业人员进行联系三、安全注意事项1.在操作紫外可见分光光度计时，请佩戴适当的防护用品，如防护眼镜、手套等2.避免直接照射眼睛和皮肤，以防紫外线伤害3.不要将样品与设备接触，以防污染或损坏设备4.操作设备时，请勿触摸热源或光源部分，以免造成烫伤正确操作和维护紫外可见分光光度计是确保设备准确性和稳定性的关键请遵循本手册提供的操作步骤和维护方法，并在使用过程中注意安全如有疑问或设备故障，及时与专业人员进行联系紫外可见分光光度计是一种常用的分析仪器，用于测定物质的吸光度、透过率、浓度等参数为了确保设备的准确性和稳定性，正确操作和维护紫外可见分光光度计至关重要本手册提供了紫外可见分光光度计的基本操作步骤和维护方法一、操作步骤1. 开机准备1.确保设备放置在稳定的环境中，避免振动和强光干扰2.接通电源，开启设备等待设备自检完成后，进入操作界面2. 调整波长1.在操作界面中选择“波长调整”功能2.使用鼠标或触摸屏点击波长切换按钮，直至选择到所需的波长3.确认波长后，点击“确定”按钮3. 调零1.在操作界面中选择“调零”功能2.点击“调零”按钮，设备将自动进行调零操作3.调零完成后，点击“确定”按钮4. 测量1.在操作界面中选择“测量”功能2.将样品放入样品池中，确保样品不接触池底3.点击“测量”按钮，设备将自动进行测量4.测量完成后，点击“确定”按钮，获取测量结果5. 数据处理1.在操作界面中选择“数据处理”功能2.根据需要选择适当的数学运算方法，如吸光度、透过率等3.点击“计算”按钮，设备将自动进行数据处理4.数据处理完成后，点击“确定”按钮，获取最终结果二、维护与保养为了确保紫外可见分光光度计的正常运行和延长使用寿命，定期进行维护与保养至关重要以下是一些基本的维护与保养方法：1. 清洁1.定期清洁设备表面，避免灰尘和污垢积累2.使用湿布擦拭设备，不要使用腐蚀性清洁剂3.清洁样品池和比色皿，确保无污垢和残留物2. 更换光源1.定期检查光源是否正常工作，如发现异常，及时更换2.更换光源时，请确保使用与设备兼容的光源3. 校准1.定期进行设备校准，确保测量结果的准确性2.根据设备说明书，按照校准步骤进行操作4. 检查光学系统1.定期检查光学系统，确保无划痕、污垢或损坏2.使用清洁布轻轻擦拭光学元件，避免使用腐蚀性清洁剂5. 检查电源1.确保设备接入稳定的电源，避免电压波动对设备造成损害2.若设备出现电源问题，及时与专业人员进行联系三、安全注意事项1.在操作紫外可见分光光度计时，请佩戴适当的防护用品，如防护眼镜、手套等2.避免直接照射眼睛和皮肤，以防紫外线伤害3.不要将样品与设备接触，以防污染或损坏设备4.操作设备时，请勿触摸热源或光源部分，以免造成烫伤正确操作和维护紫外可见分光光度计是确保设备准确性和稳定性的关键请遵循本手册提供的操作步骤和维护方法，并在使用过程中注意安全如有疑问或设备故障，及时与专业人员进行联系应用场合科学研究紫外可见分光光度计广泛应用于化学、生物学、环境科学、材料科学等领域的科学研究它可以帮助科学家们测定物质的浓度、分析物质的组成、研究物质的结构等在实验室中，紫外可见分光光度计是一种常用的分析工具，可以为研究提供准确、可靠的数据工业生产紫外可见分光光度计也可用于工业生产中的质量控制和工艺优化例如，在制药行业中，它可以用于测定药品中活性成分的含量，确保产品质量符合标准在食品工业中，它可以用于检测食品中的添加剂和污染物此外，在材料制造业中，它可以用于监测材料的光学性能变化，以优化生产工艺教育与培训紫外可见分光光度计也是教育和培训的重要工具在高校和职业学校的化学、物理、生物等课程中，它可以用于实践教学，让学生们亲手操作，学习光谱分析的基本原理和方法同时，它也可以用于教师和研究人员的科研工作，提高科研教学水平注意事项操作规范1.在操作紫外可见分光光度计之前，应仔细阅读设备说明书，了解设备的操作方法和注意事项2.操作设备时，应遵循安全规程，佩戴适当的防护用品，如防护眼镜、手套等3.避免直接照射眼睛和皮肤，以防紫外线伤害4.不要将样品与设备接触，以防污染或损坏设备维护与保养1.定期进行设备校准，确保测量结果的准确性2.定期清洁设备表面，避免灰尘和污垢积累3.使用湿布擦拭设备，不要使用腐蚀性清洁剂4.清洁样品池和比色皿，确保无污垢和残留物5.定期检查光源是否正常工作，如发现异常，及时更换6.检查光学系统，确保无划痕、污垢或损坏7.确保设备接入稳定的电源，避免电压波动对设备造成损害数据处理与分析1.在数据处理与分析过程中，应确保操作的正确性，避免误操作导致数据错误2.根据实验需求，选择适当的数学运算方法，如吸光度、透过率等3.注意检查数据的合理性，如有异常，应重新进行测量或检查设备4.在数据分析过程中，应充分理解数据背后的含义，结合实验背景进行合理解读安全与环保1.操作设备时，请注意安全，遵守实验室安全规程2.设备运行过程中，如发现异常情况，应立即停止运行，并及时与专业人员进行联系3.使用过程中，应遵守环保法规，妥善处理废弃物，减少对环境的影响正确操作和维护紫外可见分光光度计，能为科学研究、工业生产和教育与培训提供准确、可靠的数据支持同时，遵循注意事项，确保设备的安全、稳定运行，延长使用寿命。
原子吸收分光光度计的使用维护和检修
原子吸收分光光度计的使用维护和检修原子吸收分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量物质在特定波长下的吸收光谱。
它主要用于化学和生物分析领域，如测量金属元素浓度、有机物和无机物的光谱特性等。
本文将介绍原子吸收分光光度计的使用方法、维护和检修。
一、使用方法：1.准备工作：接通电源，插入负载（负载应与工作电源相匹配），将玻璃集样器插入光纤导入口，并清洁样品室。
2.打开仪器开关，启动光谱软件，选择合适的波长和功率，进行预热和初始调整。
3.样品处理：根据实验需求，采集待测试样品，将样品放入集样器中。
对于固体样品，通常需要将其溶解或研磨成液体或粉末。
对于液体样品，通常需要进行稀释处理。
4.校准：根据测定样品的要求，选择合适的标准溶液进行校准。
将标准溶液依次加入空白溶液中，记录吸光度值。
5.测量：将集样器插入样品室，记录吸光度值。
可以连续测量多个样品或重复测量同一样品，计算平均值。
6.数据处理：使用光谱软件进行数据处理和分析，如绘制吸收曲线、计算样品浓度等。
二、维护：1.清洗：定期清洗仪器，避免残留物或化学物质污染样品室和光路系统。
可以使用去离子水、丙酮等溶剂进行清洗，注意不破坏仪器结构。
2.检查灯源：定期检查和更换灯源，避免灯泡老化或损坏影响测量结果。
3.校准：定期校准仪器，确保测量结果准确可靠。
可以使用标准溶液进行校准，根据实验要求检查系统的准确性和灵敏度。
4.保养：定期检查仪器的连接部件和电气部件，确保其正常工作。
避免仪器受潮、受热或受损。
三、检修：1.故障排除：当仪器出现故障时，首先检查仪器连接是否正常、电源是否正常、灯源是否损坏等。
定期维护和保养可以降低仪器故障的概率。
2.更换零部件：如果仪器出现部件损坏或老化，需要更换相应的零部件。
调试时，应按照仪器使用说明书进行操作。
3.维修维护：对于一些较大的故障，需要请专业技术人员进行维修和维护。
4.定期维护：为了保证仪器的工作效果和使用寿命，定期维护非常重要。
分光光度计的使用方法以及注意事项
分光光度计的使用方法以及注意事项使用方法：1.准备样品：将需要测量的溶液或物质准备好，确保它是均匀的并无悬浮物质。
如果必要，可以通过过滤或离心的方式去除悬浮物。
2.校准仪器：打开分光光度计并进行校准。
这可以通过校准溶剂或标准物质进行，从而获得正确的基准值。
3.设置光程：根据实验目的，选择合适的光程。
光程是指光通过样品的距离，通常以毫米为单位。
4.设置波长：选择想要测量的波长。
分光光度计可以在可见光至紫外光范围内进行测量，根据样品需要选择适当的波长。
5.测量样品：将样品放置在光程区域，并将光源通过样品。
记录下通过样品的光的强度数据，可以使用显示器或计算机进行记录。
6.分析数据：使用测量得到的数据进行进一步的分析。
可以根据数据计算出物质的浓度或进行光谱扫描。
注意事项：1.保持仪器干净：分光光度计是非常精密的仪器，所以需要保持它的干净和整洁。
使用柔软的纸巾或净化棉轻轻擦拭仪器的外表，并避免使用粉尘较多的环境中进行操作。
2.维护波长校准：定期校准分光光度计的波长，以保证测量结果的准确度。
校准可以使用标准物质或校准溶剂进行，按照仪器操作手册中的方法进行校准。
3.避免反射和散射：在测量样品时，避免外部光源的反射和样品本身的散射对结果产生干扰。
可以使用黑色容器或覆盖物来最小化这些干扰。
4.注意样品浓度：在测量样品时，确保样品的浓度在仪器量程内。
如果样品过于稀释或过于浓缩，可能会导致无法准确测量或出现非线性响应。
5.光程保持稳定：对于相同的实验，保持相同的光程以保证结果的可比性。
使用恒温仪器或室温范围内进行测量可以避免由于温度变化引起的光程变化。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
分光光度计的操作方法及日常维护
一，使用方法概述
1.分光光度法定义与应用
1.1定义:分光光度法是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的分析检测技术.
1.2特点:灵敏,精确,快速和简便,在复杂组分系统中,不需要分离,即能检测出其中所含的极少量物质.
1.3应用:生物，化学研究中广泛使用的方法之一,广泛用于糖,蛋白质,核酸,酶等的快速定量检测. 。
2.分光光度计的基本结构和工作原理
2.1分光光度计的分类
红外分光光度计:测定波长范围为大于760 nm的红外光区
可见光分光光度计:测定波长范围为400~760 nm的可见光区
紫外分光光度计:测定波长范围为200～400 nm的紫外光区
2.2分光光度计工作原理
人眼可见的光只占电磁波谱的很小—部分(400~760nm)
它是一种频率较大的电磁波.电磁波按频率大小,从频率最小的无线电波到频率最大的γ-射线排成一列,即组成电磁波的波谱。
2.2.1分光光度计的光谱范围
包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200～400 nm的紫外光区.不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源.
钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400～760nm波长的光谱,光通过三棱镜折射后,可得到由红,橙,黄,绿,蓝,靛,紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源.
氘灯的发射光谱:氢灯能发出185～400 nm波长的光谱,可作为紫外光光度计的光源.
2.2.2物质的吸收光谱(1)
如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的
光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱.
不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质.
2.2.2物质的吸收光谱(2)
当光线通过某种物质的溶液时,透过的光的强度减弱.因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收,只有一部分光可透过溶液.
入射光=反射光+分散光+吸收光+透过光
如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失,则:
入射光=吸收光十透过光
2.2.3物质吸光度(A)与透射比(T)的关系
物质的吸光度与吸收物质的浓度和液层的厚度成正比,这就是光吸收的基本定律-- 朗伯-比耳定律.
2.3分光光度计的基本结构
无论哪一类分光光度计都包括:光源,单色器,吸收池,检测器和测量仪表.
分光光度计的基本部件
(1):光源:分光光度计上常用的光源有两种:钨丝灯或氢灯,在可见光区,近紫外光区和近红外光区常用钨丝灯作为光源;在紫外光区多使用氢弧灯.
单色器:把混合光波分解为单—波长光的装置.在分光光度计中多用作为色散元件.
吸收池比色杯,比色皿,比色池)一般由玻璃,石英或熔凝石英制成,用来盛被测的溶液.在低于350 nm的紫外光区工作时,必须采用石英池或熔凝石英池.
分光光度计的基本部件:
(2)吸收池(比色皿)必须与光束方向垂直.此外,每套比色皿的质料,厚度应完全相同,以免产生误差.比色皿上的指纹,油污或壁上的沉积物都会显著地影响其透光性,因此在使用前务必彻底清洗.
常用光电池,光电管和光电倍增管三种.
测量装置—般常用的紫外光和可见光分光光度计有3种测量装置,即电流表,记录器和数字示值读数单元.现代的仪器常附有自动记录器,可自动描出吸收曲线.
(3)检测器：
棱镜与光栅
棱镜:光波通过棱镜时,不同波长的光折射率不同;因而能将不同波长的光分开.玻璃对紫外线的吸收力强,故玻璃棱镜多用于可见光分光光度计.石英棱镜可在整个紫外光区传播光,故在紫外光分光光度计中广为应用.
衍射光栅:在石英或玻璃表面上刻划许多平行线(每英寸约刻15000—30000条).由于刻线处不透光,通过光的干涉和衍射使较长的光波偏折角度大,较短的光波偏折角度小,因而形成光谱.
光源照到棱镜(或光栅)以前,先要经过一个入射狭缝,再通过平行光镜使成为平行光束投到棱镜上.透过棱镜的光再经另一聚光镜,在此聚光镜的焦面内可得一清楚的光谱图.如在焦线处放—出射狭缝,转动棱镜使光谱移动,就可以从出射狭缝射出所需要的单色光.整个装置称为"单色器"
光电池
光电池装在一个特制的匣子里面由3层物质组成的圆形或长方形薄片.第一层是一种导电性良好的金属,这是光电池的负极.中间极薄的一层是半导体硒,第3层是铁,这是光电池的正极.当光电池受光照射以后,半导体硒的表面逸出电子,这些电子只向负极方向移动,而不向正极移动,因此在上下两金属片间产生一个电位差,线路连通时即产生电流
光电管
光电管是由封装在真空透明封套里的一个半圆柱型阴极和一个丝阳极组成.阴极的凹画上有一层光电发射材料,此种物质经光照射可发射电子.当在两极间加有电位时,发射出来的电子就流向丝阳极而产生光电流.对于相同的辐射强度,它所产生的电流约为光电池所产生电流的1/4.由于光电管具有很高的电阻,所以产生的电流容易放大.
光电倍增管
它比普通的光电管优越,它可将第一次发射出的电子数目放大到数百万倍.当电子打在兼性阳极上时,能引起更多的电子自表面射出.这些射出的电子又被第二个兼性阳极所吸引,同样再产生更多的电子.
此过程重复9次后,每个光子可形成106~107个电子.这些电子最后被收集在阳极上.所得到的倍增电流可进一步加以放大和测量.
二，分光光度计的使用及维护
在日常使用及维护当中应注意以下几点：
第一，在使用仪器前，必须仔细阅读其使用说明书。
第二，若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新调零及满度后，再测量。
第三，指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。
若不是这种情况，需进行机械调零。
第四，操作人员不应轻易触动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。
第五，放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。
第六，比色皿使用时要注意其方向性，并应配套使用，以延长其使用寿命。
新的比色皿使用前必须进行配对选择，测定其相对厚度，互相偏差不得超过2%透光度，否则影响测定结果。
使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净（测定有色溶液后，应先用相应的溶剂或（1+3）的硝酸进行浸泡，浸泡时间不宜过长，再用蒸馏水冲洗干净），并用
干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。
第七，比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。
首先，应保证比色皿不倾斜。
因为稍许倾斜，就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致，还有可能使入射光不能全部通过样品池，导致测试准确度不符合要求。
其次，应保证每次测试时，比色皿架推拉到位。
若不到位，将影响到测试值的重复性或准确度。
第八，干燥剂的使用问题。
干燥剂失效将会导致以下问题：①数显不稳，无法调零或满度。
②反射镜发霉或沾污，影响光效率，杂散光增加。
因此分光光度计应放置在远离水池等湿度大的地方，并且干燥剂应定期更换或烘烤。
第九，分光光度计的放置位置应符合以下条件：避免阳光直射；避免强电场；避免与较大功率的电器设备共电；避开腐蚀性气体等。
三，常见故障排除
在分光光度计的实际操作过程中，最容易出现的几个典型故障是：①仪器不能调零；②仪器不能调“100%”；③测量过程中，“100%”点经常变动；④数显不稳。
故障类型：仪器不能调零
原因：仪器严重受潮电路故障光门不能完全关闭
排除方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂；修复光门部件，使其完全关闭；送修理部门，检修电路
故障类型：仪器不能调“100%”光能量不够
原因：比色皿架未落位；光电转换部分老化；电路故障
排除方法：增加灵敏度倍率档位，或调整光源灯的位置。
若光源灯变黑，说明光源灯已老化，更换光源灯；调整比色皿架使其落位，更换部件；送修理部门，检修电路
故障类型：测量过程中,“100%”点经常变动
原因：比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴；电路故障
排除方法：用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定位；送修理部门，检修电路
故障类型：数显不稳
原因：预热时间不够；光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮；光电管老化、电路等其它原因；光源灯问题；操作不当；环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等；
排除方法：延长预热时间至30分钟左右（部分仪器由于老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳）；烘烤电路，并更换或烘烤干燥剂；改善工作环境；更换相同的光电管或送修；光源灯不稳定，更换光源灯，更换时注意防止灯泡污染；注意操作规范，按照使用说明书要求进行操作。
总之，分光光度计是一种精密的分析仪器，在其使用过程中应严格遵守其操作规范，按照使用说明书正确进行操作，并做好日常维护工作，以保证分析结果的准确性。