加德纳免疫荧光试剂盒
多色免疫荧光染色试剂盒使用说明
多色免疫荧光染色试剂盒使用说明多色免疫荧光染色试剂盒使用说明酪酰胺信号放大(TSA，Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白进行标记的酶学检测方法，类似常规免疫组化的DAB显色方法，TSA技术同样采纳HRP标记的二抗，同样有对应的“显色”步骤(HRP催化加入反应体系的酪胺荧光素底物，产生活化荧光底物，活化底物可与抗原上的酪氨酸等残基共价结合，使样品上稳定的共价结合酪胺荧光素。
之后用热修复法洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP复合物，重复下一种一抗-hrp二抗来其次轮孵育，换另一种酪胺荧光素底物，如此往复就可实现多重标记。
TSA具体原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结合位点)，产生大量的酶促产物，该产物能与四周的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合，这样在抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积，结果使其检测信号得到10-100倍增加。
简洁来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素)，来催化后续添加入体系的非活性荧光素。
荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟接近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。
然后微波或煮沸或者水浴等热修复处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素稳定共价结合在样本切片蛋白上。
再换个一抗来其次轮孵育，周而复始。
等到全部抗体孵育结束，荧光素都结合好后，最终去检测结果。
由于每次体系中都只有单一抗体孵育，因此无需担忧抗体交叉反应，以及一抗二抗种属匹配问题，大大削减了试验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。
也就是说，假如用TSA技术，同一张片子上全部的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。
搭配同一支抗兔的HRP二抗就可以进行试验，而且信号放大的倍数大大增加。
茹创生物开发的试剂盒详细酪胺荧光染料为以下其中一种或者多种：TYR-480，TYR-520，TYR-570，TYR-620，TYR-690，TYR-780。
LAT检查法
LAT检查法(1)胶乳凝集快速检查法(LAT)：本法操作简便、快速，敏感性和特异性高，优于直接湿片镜检和培养法，适合于临床常规应用。
(2)直接涂片法：将阴道分泌物与少许生理盐水混合涂片，高倍镜下观察。
直接湿片高倍镜检查法简便易行，是最常用的方法。
阳性诊断率较低(约50%)。
革兰或瑞特染色油镜观察可提高检出率。
标本送检应注意保温。
(3)培养法：阳性率可达98%。
但本法操作复杂，不宜常规应用。
(二)真菌检查阴道真菌有时在阴道中存在而无害，但在阴道抵抗力减低时容易发病，真菌性阴道炎以找到真菌为诊断依据。
阴道真菌多为白色假丝酵母菌，偶见阴道纤毛菌、放线菌等，使人类致病者85%为白色念珠菌。
检测方法及评价：(1)浓集法检查：取标本于清洁干燥试管内，加2、5mol/L NaOH溶液约1ml，混匀后置37℃水浴中3～5min，取出低速离心5min，取沉淀物作涂片镜检，可提高阳性检出率。
(2)湿片检查：同阴道滴虫检查。
本法简便易行，是目前临床上最常用的方法。
必要时可进行革兰染色后油镜观察。
(3)培养法：本法阳性率高，但操作复杂、费时，临床应用较少。
(三)加德纳菌检查阴道加德纳菌为革兰染色阴性或染色不定(有时呈革兰染色阳性)的小杆菌，和某些厌氧菌共同引起的细菌性阴道炎属性传播疾病之一。
细菌性阴道炎的临床诊断依据为：①线索细胞：为阴道鳞状上皮细胞黏附大量加德纳菌及其他短小杆菌后形成；②pH值：>4、5；③胺试验：阳性；④阴道分泌物稀薄均匀。
凡有线索细胞，再加上述任意其他2条，诊断即成立。
(四)淋球菌淋病为发病率较高的性传播疾病，是淋球菌(革兰阴性双球菌)在泌尿生殖道黏膜引起的特殊炎症。
目前，淋球菌的检查方法主要有涂片法、培养法、免疫荧光检查及淋球菌快速诊断法等。
检测方法及评价：1、培养法本法对女性患者阳性检出率为80%～90%，是当前WH0推荐的唯一方法。
2、涂片法以宫颈管内分泌物涂片阳性率最高。
女性阴道分泌物，因杂菌多等原因，WH0不推荐用革兰染色检查女性患者，而推荐用亚甲蓝染色。
加德纳免疫荧光试剂盒
2020/11/4
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唾液酸酶
用扩增核糖体DNA限制性分析（ARDRA）和随 机引物扩增多态性DNA（RAPD）分析阴道加德 纳菌发现有唾液酸酶基因存在，且实验证明唾液 酸酶阳性。在细菌性阴道病和HIV感染后都有一 特征是唾液酸酶增高。
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唾液酸酶是黏液酶中的一种具有毒性因子的 物质，多由革兰阴性杆菌产生，它能破坏黏蛋 白，增强细菌黏着力，有助于致病菌穿透宫颈 黏液屏障，进入子宫腔，侵犯胎盘胎膜，使胎 膜的弹性和强度降低，胶原纤维合成减少，膜 的脆性增加，引起胎膜早破。
2020/11/4
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检测意义
阴道加德纳菌是BV的重要病原菌，与男性尿道炎 、早产、流产、低出生体重、宫颈炎、子宫内膜 炎、绒毛膜羊膜炎、产褥热等有关，影响精子质 量，还能增加性病和艾滋病的感染几率。
阴道加德纳菌在临床上具有重要的检测意义。
妇产科一般性常规感染，临床需求已存在，在二 甲及以下医院的检测量通常在1000-2000例/月 。
产品展示
2020/11/4
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检验原理
迈科龙生殖感染系列试剂盒采用直接免疫荧光法 对临床样本中的特异病原体进行检测。异硫氰酸 荧光素(FITC)标记的特异性单克隆抗体可与病原 体表面抗原发生特异性结合，所形成的抗原－抗 体－荧光素结合物在荧光显微镜495纳米波段激 发光照射下发出亮绿色荧光。
2020/11/4
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包装规格
体外诊断试剂：50人份/盒
适用范围
迈科龙生殖感染系列试剂盒适用于多种生殖感染 疾病的辅助诊断，可广泛应用于各级医疗机构、 计生服务中心、社区健康服务中心。
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性能参数
在三家国家临床实验基地开展的临床性能评估中， 对迈科龙生殖感染试剂盒与金标准进行了比较，迈 科龙生殖感染系列试剂盒性能指标如下：
抗核抗体检测试剂盒(磁条码免疫荧光法)产品技术要求丽珠
1性能指标
1.1外观
试剂盒各组份应齐全、完整，标签清晰，易识别；液体无渗漏。
1.2准确度
对准确度参考品进行检测，双链DNA（dsDNA）IgG抗体的相对偏差应在±20%范围内。
1.3最低检测限
对检测限参考品进行检测，dsDNA IgG抗体的检测限应不高于10 IU/mL；其它定性指标对应的各指标的L1应为阳性、L2应为阳性或阴性、L3应为阴性。
1.4线性
dsDNA IgG抗体在10~ 600 IU/mL范围内，其线性相关系数（r）r2应不小于0.950。
1.5阴性参考品符合率
对10份阴性参考品进行检测，对应指标的阴性参考品符合率应为100%。
1.6阳性参考品符合率
对12份阳性参考品进行检测，对应指标的阳性参考品符合率应为100%。
1.7重复性
对重复性参考品检测10次，同一指标的变异系数（CV）应不大于15%。
1.8批间差
用三个批号试剂盒检测同一份重复性参考品，批间差应不大于20%。
1.9dsDNA 校准品均匀性
1.9.1瓶内均匀性
校准品的瓶内均匀性（变异系数，CV）应不大于15%。
1.9.2瓶间均匀性
校准品的瓶间均匀性（变异系数，CV）应不大于15%。
一种定量检测mxa蛋白的免疫荧光层析试剂盒及其制备方法与流程
一种定量检测mxa蛋白的免疫荧光层析试剂盒及其制备方法与流程制备方法及流程如下：材料：1. MXA蛋白抗原2. 鼠抗MXA蛋白单克隆抗体3. 定量检测蛋白的荧光染料4. 清洗缓冲液：含有洗涤缓冲液成分的缓冲液5. 结合缓冲液：含有蛋白结合成分的缓冲液6. 检测缓冲液：含有荧光检测成分的缓冲液7. 试剂盒包装物：包含试剂盒内部反应所需的材料8. 微量离心管9. 离心机10. 试管架制备流程：1. 准备MXA蛋白抗原的工作液：将MXA蛋白抗原溶解于适量的清洗缓冲液中，制得浓度为X的MXA蛋白抗原工作液。
2. 准备鼠抗MXA蛋白单克隆抗体的工作液：将鼠抗MXA蛋白单克隆抗体溶解于适量的清洗缓冲液中，制得浓度为Y的鼠抗MXA蛋白单克隆抗体工作液。
3. 免疫荧光层析试剂盒制备：a. 向微量离心管中加入一定量的结合缓冲液，使其能够覆盖住试管底部。
b. 加入适量的MXA蛋白抗原工作液和鼠抗MXA蛋白单克隆抗体工作液到微量离心管中，混匀。
c. 加入定量检测蛋白的荧光染料到微量离心管中，混匀。
d. 将微量离心管放入离心机中，使其在适宜的离心速度下进行离心，离心时间根据试剂盒使用说明进行设定。
4. 包装试剂盒：a. 将制备好的试剂分装进试剂盒包装物中。
b. 在试剂盒包装物上标明相应的试剂名称、浓度和使用方法等信息。
c. 将试剂盒包装物密封并储存于适宜温度下。
制备好的免疫荧光层析试剂盒可以用于定量检测MXA蛋白的含量。
使用者根据试剂盒使用说明，将待测样品与试剂按照一定比例混合后，通过层析技术检测样品中MXA蛋白的含量。
根据荧光信号的强度与标准曲线进行定量分析，得出MXA蛋白的含量。
临床新项目推荐书(加德纳菌生殖)
临床新项目推荐书项目名称：免疫荧光染色检测加德纳菌临床用途：用于不孕不育领域的加德纳菌病原检测项目简介加德纳菌（GV）是引起细菌性阴道病和尿道炎等生殖道感染的重要病原体，亦与不孕不育高度相关。
不孕和不良怀孕史患者中约15%-20%左右可检出加德纳菌，不孕配偶间互感率高达90%。
加德纳菌已被证实产生唾液酸酶和脯氨酸酶，这些酶能有效分解保护性黏液层的组成部分并且破坏宫颈黏液和其他宿主防御机制并导致相关微生物菌群侵犯上生殖道，引起子宫内膜炎及输卵管炎，如不及时治疗，可因反复感染而引起组织损伤，结果形成输卵管阻塞而导致不孕。
加德纳菌也是男性不育患者生殖道感染的病原菌，是导致少、弱精子症的重要原因之一。
加德纳菌感染可累及男性生殖道的不同部位。
如睾丸、附睾及其他附属性腺，因而精子在其发育和成熟的不同阶段都可能受到加德纳菌感染的影响而导致精子质量变差，而精子质量（精子密度、活动率、活动力）差则是导致男性不育或低育的直接原因之一。
已开展单位上海瑞金医院生殖中心、上海第一妇婴保健院生殖中心、南京市妇幼保健院生殖中心、河南省人民医院生殖中心、北京大学深圳医院遗传医学科、等临床数据❑加德纳菌感染可引起生精细胞大量凋亡、脱落，支持细胞形态改变(刘春萌et al.,2008)。
❑在生育能力低下的696例患者精液样本中发现加德纳菌是分离最多的一种细菌。
与对照比较发现，在加德纳菌感染的样本中精子数量、活动率和形态等情况较为恶化(Francesco et al., 2011)。
❑无锡市妇幼保健院对1095例男性不育患者进行精液常规检查的同时进行加德纳菌（GV）检测项目，发现在男性不育患者的生殖道内，GV的感染率达33.4％。
而197例接受治疗的GV阳性不育患者中，经加德纳菌针对性治疗后，少精子症、精子活动率低下、精子活动力低下患者的总有效率分别为93％、97％、97％，同时发现，治疗后197例患者的精子密度、精子活动率、a级精子所占比例及a、b级精子之和所占比例与治疗前比较差异均有统计学意义(均为P<0.01)。
免疫荧光法用于生殖道感染检测的应用申请(妇、产科)
免疫荧光法用于生殖道感染检测的应用申请尊敬的院领导：为提升临床生殖道感染病原体检测效果和创造更为客观的社会效益与经济效益，我科室申请开展生殖道感染病原体免疫荧光法检测项目，具体包括沙眼衣原体、阴道加德纳菌、奈瑟氏淋球菌、白色念珠菌、阴道毛滴虫、单纯疱疹病毒II型共6种病原体的免疫荧光法快速检测，单项检测的收费价格为元/例，预计每月的样本量约在例左右。
另附详细的申请报告。
一、在妇、产科开展免疫荧光技术的背景生殖道感染(RTI)是由于受细菌、病毒、衣原体、真菌、原虫等多种病原体的侵袭，引起男女性生殖道感染的一大类传染病的总称，包括细菌性阴道病、假丝酵母菌病、滴虫性阴道炎、性传播疾病(STD)等。
有资料显示，生殖道感染病例中男女比例为1:3.3-5.9，所以说生殖道感染对广大育龄妇女的危害远大于男性，该系列疾病严重威胁到广大育龄妇女的生殖健康和身心健康，目前已成为全球特别是发展中国家非常关注的生殖健康和公共卫生问题。
曾有机构对在妇科门诊和产前检查门诊就诊的患者中进行调查，18岁-45岁的育龄妇女中STDs的患病率高达34.85%，对于育龄妇女而言，生殖感染的危害不仅限于妇女本身，同时也会对下一代的健康产生影响，导致不孕不育、早产、死胎、畸形和出生缺陷的发生，因此生殖道感染还是优生优育工作的重大问题。
造成生殖道感染的重要病原体包括沙眼衣原体、奈瑟氏淋球菌、单纯疱疹病毒Ⅱ型、阴道加德纳菌、白色念珠菌等。
由于引起生殖道感染的病原体种类多，所致临床表现通常不典型，因此临床诊断上需要能够在妇科门诊和产科产前检查中做到对上述病原体的快速、准确检测，从而对患者进行早发现、早治疗，这也是保障人民群众特别是广大育龄妇女的生殖健康、控制性传播疾病流行以及预防出生缺陷的重要措施。
直接免疫荧光技术(Direct Immunofluorescence Assay, DFA )是在免疫学、生物化学和荧光显微镜技术的基础上建立起来的医学检验技术，其原理为将不影响抗原抗体活性的荧光素直接标记在抗体上，与样本中相应抗原结合后在荧光显微镜下呈现特异性荧光成像，该方法结合了免疫学和形态学的双重优点，适用于病原体快速检测。
免疫荧光法检测阴道加德纳菌和唾液酸苷酶活性测定的结果对比探究
免疫荧光法检测阴道加德纳菌和唾液酸苷酶活性测定的结果对比探究发布时间：2021-06-16T12:30:02.607Z 来源：《医师在线》2021年12期作者：蔡晓龙[导读] 目的：开展检测相关研究，对比分析免疫荧光法与唾液酸苷酶活性测定对阴道加德纳菌感染所发挥的价值。
蔡晓龙韶关市妇幼保健院 512026【摘要】目的：开展检测相关研究，对比分析免疫荧光法与唾液酸苷酶活性测定对阴道加德纳菌感染所发挥的价值。
方法：研究样本的收集时间是19年11月-20年5月，共采集阴道分泌物标本92份，分别对样本进行免疫荧光法和唾液酸苷酶活性测定，分析检测结果。
结果：免疫荧光法的检测阳性率是96.74%，显著高于唾液酸苷酶活性测定阳性率88.04%，数据对比有差异，P<0.05。
结论：在阴道加德纳菌的测定中，免疫荧光法所取得的阳性准确率高于唾液酸苷酶活性测定，适用于作为细菌性阴道病中加德纳菌感染者的筛查方式，建议推广。
【关键词】免疫荧光法；唾液酸苷酶；活性测定；阴道加德纳菌；检测价值阴道加德纳菌是女性阴道内常见的细菌，可通过性接触的方式进行传播。
阴道加德纳菌会对女性的生殖健康造成非常大的影响，会导致妊娠期的孕妇出现胎膜早破、输卵管异位妊娠或新生儿早产等情况，同时也会导致非妊娠期女性盆腔炎、子宫内膜炎、输卵管炎等妇科疾病的发作[1]。
经过性传播造成男性感染时，也会导致泌尿系统感染或不育等严重疾病，因此需要快速、准确的判断女性阴道内是否被加德纳菌感染。
当前临床上有比较多的阴道加德纳菌检测方式，但受一些因素的影响，导致检测结果容易出现误差[2]。
本文对比分析免疫荧光法与唾液酸苷酶活性测定两种检测方式在阴道加德纳菌检测中发挥的价值，现总结如下。
1 资料和方法1.1一般资料研究选择我院在19年11月-20年5月诊治的阴道加德纳菌感染患者92例进行检测研究，纳入标准：患者阴道分泌物呈现均质稀薄白色乳液状，PH>4.5；加入10%氢氧化钾后，分泌物释放鱼腥样氨味道；分泌物湿片镜下可见线索细胞。
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包装规格
体外诊断试剂：50人份/盒
适用范围
迈科龙生殖感染系列试剂盒适用于多种生殖感染 疾病的辅助诊断，可广泛应用于各级医疗机构、 计生服务中心、社区健康服务中心。
2020/11/4
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性能参数
在三家国家临床实验基地开展的临床性能评估中， 对迈科龙生殖感染试剂盒与金标准进行了比较，迈 科龙生殖感染系列试剂盒性能指标如下：
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检测阴道加德纳菌有以下几种方法：
培养法 PCR法 免疫荧光法 涂片查线索细胞
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各种检测方法的对照比较
培养法：阴道加德纳菌分离培养是检测GV的金标 准，准确可靠，但其培养条件要求苛刻，分离复 杂，阳性检出率低，易受药物等环境因素的影响 ，且耗时长达2-3天、花费大，对于基层检验室不 易推广。
2020/11/4
20
PCR技术：无有注册证的PCR试剂盒上市，对 PCR技术由于污染造成的假阳性和操作复杂造成 的假阴性，需具备标准PCR实验室、标准试剂和 熟练的操作以及严格的质量控制等来保证试验的 准确性。其设备成本高和操作复杂性也决定了 PCR方法不适用于基层实验室。
2020/11/4
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博士后科研工作站
深圳市知识产权优势企业
2020/11/4
深圳市自主创新行业龙头企业
2
雄厚的科研基础
公司设立了独立的技术创新中心、研发中心，同时拥有政府 批准组建的市级工程技术中心，每年研发投入达年销售额的 11.5% ，近3年来已累计投入2000余万元的研发资金，充 足的资金投入确保公司的技术处于国内前沿、行业领先水平 。
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唾液酸酶
用扩增核糖体DNA限制性分析（ARDRA）和随 机引物扩增多态性DNA（RAPD）分析阴道加德 纳菌发现有唾液酸酶基因存在，且实验证明唾液 酸酶阳性。在细菌性阴道病和HIV感染后都有一 特征是唾液酸酶增高。
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唾液酸酶是黏液酶中的一种具有毒性因子的 物质，多由革兰阴性杆菌产生，它能破坏黏蛋 白，增强细菌黏着力，有助于致病菌穿透宫颈 黏液屏障，进入子宫腔，侵犯胎盘胎膜，使胎 膜的弹性和强度降低，胶原纤维合成减少，膜 的脆性增加，引起胎膜早破。
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研发人员学历构成比例如下：
博士及高级职称：26.7%
本科及初级职称：25%
本科 硕士 博士
硕士及中级职称：48.3%
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公司证照
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质量保障
迈科龙生殖感染系列试剂盒生产过程采用先进的 生产设备，应用具有自主知识产权的最新生产工 艺，按现代化管理模式进行严格质量管理。生产 环境全封闭，洁净度达到十万级净化水平，实现 自动温湿度控制，保证了试剂盒质量达到国际先 进水平。
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VLY毒素
阴道加德纳菌（Gv）产生Vaginolysin （VLY）
蛋白毒素，具有溶细胞作用，可导致机体粘膜损 伤。
Vaginolysin (VLY)是一种蛋白毒素，属于胆固醇 依赖性毒素(CDCs)的一种，能溶解红细胞和阴道
上皮细胞，破坏阴道粘膜系统，使阴道内环境紊 乱，乳酸杆菌占优势的正常菌群被生长过盛的GV 及厌氧菌所取代。
公司概况
• 1994年成立，注册资金3000万元。 • 迈科龙大厦位于深圳市高新技术产 业园总面积31000多平米。
• 公司总资产1.98亿元，净资产
1.86 亿 元 （ 截 至 2009 年 12 月 31 日 ） 。
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迈科龙大厦 1
主要荣誉与资质
国家发改委高技术产业 化示范工程
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GV生物被膜
在BV患者中，阴道加德纳菌形成坚实的生物被膜 ，生物被膜的形成更能抵抗粘膜免疫防御和抗生 素。
生物膜的形成可增强对抗生素的抗药性，其在治 疗失败及反复发作的BV病例中发挥重要作用 。
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健康人群阴道乳酸菌通常产生一些副产物如乳酸 和过氧化氢，其通常能抑制厌氧菌如阴道加德纳 菌的生长，但生物膜的形成增加厌氧菌抵抗这些 副产物的能力。因此，即使乳酸杆菌存在，生物 膜形成也可能使阴道加德纳菌大量增殖。
查线索细胞：BV检测方法主要根据 Amsel 诊断 标准, 即患者出现下列4项临床特征中至少3 项可 诊断为BV。查线索细胞、氨试验阳性、阴道PH 值大于4.5、阴道均质稀薄的分泌物。其中涂片查 线索细胞简单方便，但因细胞和杂菌较多不易识 别，带有一定的主观性，缺乏特异性，不能作为
加德纳菌确证的方法。
产品展示
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检验原理
迈科龙生殖感染系列试剂盒采用直接免疫荧光法 对临床样本中的特异病原体进行检测。异硫氰酸 荧光素(FITC)标记的特异性单克隆抗体可与病原 体表面抗原发生特异性结合，所形成的抗原－抗 体－荧光素结合物在荧光显微镜495纳米波段激 发光照射下发出亮绿色荧光。
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以下就阴道加德纳菌检测的临床意义和免 疫荧光法检测的临床应用做简单介绍。
2020/11/4
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阴道加德纳菌致病性
阴道加德纳菌（Gardnerrela Vaginalis，Gv）
革兰染色阴性小杆菌或染色不定的小杆菌和球杆 菌 、厌氧、嗜血、无鞭毛、无荚膜、无芽孢。 Gv被证实与女性阴道病、不良妊娠、男女不孕不 育有关，是女性生殖道的主要病原菌之一，可经 性接触传播。
2020/11/4
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检测意义
阴道加德纳菌是BV的重要病原菌，与男性尿道炎 、早产、流产、低出生体重、宫颈炎、子宫内膜 炎、绒毛膜羊膜炎、产褥热等有关，影响精子质 量，还能增加性病和艾滋病的感染几率。
阴道加德纳菌在临床上具有重要的检测意义。
妇产科一般性常规感染，临床需求已存在，在二 甲及以下医院的检测量通常在1000-2000例/月 。
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迈科龙生殖感染系列产品
阴道加德纳菌诊断试剂盒（免疫荧光法） 沙眼衣原体诊断试剂盒（免疫荧光法） 奈瑟氏淋球菌诊断试剂盒（免疫荧光法） 单纯疱疹病毒Ⅱ型诊断试剂盒（免疫荧光法） 白色念珠菌诊断试剂盒（免疫荧光法） 阴道毛滴虫诊断试剂盒（免疫荧光法）
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