丹参化学成分分离鉴定
丹参的化学成份分离及其抗氧化活性分析
丹参的化学成份分离及其抗氧化活性分析作者：李宣怡来源：《科技资讯》2017年第31期摘要：目的对于丹参的根和根茎的化学成分的分离和相关抗氧化性的活性进行相关性的研究。
方法分别去采用醇提法与水提法分离其脂溶性的化学成分以及水溶性的化学成份，这两种成分分别是丹参酮和丹酚酸。
运用相关的水杨酸与邻苯三分法分别去分析丹参酮对于羟基自由基以及超氧阴离子清楚的能力。
运用水杨酸法以及还原法分别的去分析其丹酚酸对于羟自由基清楚的能力和还原的能力。
结果丹参酮清除其羟基自由基与超氧阴离子能力强，丹酚酸有着较强的清除其羟基自由基的相关的能力和还原能力。
结论丹参根以及其根茎当中的含有的水溶性与脂溶性的相关的化学成份有很强的抗氧化活性和还原的能力，可以有效的去预防治疗心血管等相关的疾病疾病，有很好的药用价值，非常值得使用。
关键词：丹参化学成分抗氧活性讨论与分析中图分类号：TS26 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2017）11（a）-0213-02中医的相关理论认为，丹参味苦，微寒，归心、肝经，具有祛淤止痛、活血通经、清心除烦之功效。
古有“一味丹参，功同四物”之说，可以适用于月经不调、经闭痛经、瘾瘕积聚、胸腹刺痛、热痹疼痛、疮疡肿痛、心烦不眠和肝脾肿大以及心绞痛等等。
丹参和自身的相关制剂对于治疗一些心脑血管的疾病或者是癌症、中风以及肝炎等等包括抗衰老都有着十分好的效果。
自从20世纪30年代以来，我们国内外的一些学者都分分对丹参相关活性成分与相关的药理作用作出了大量的研究，并且还得到了大量的化学成分。
本文主要研究如何使用水提法和醇提法来对丹酚酸和丹参酮，经过分离之后就可以使用这些分离出来的成分对羟自由基以及超氧阴离子这些与抗氧性活性有关系的元素进行清除以及研究，最终为丹参治疗相关疾病提供理论依据。
1 仪器与试药1.1 仪器HWS-24型电热恒温水浴锅（上海泰坦科技股份有限公司）；磁力搅拌器（德国）；电子天平（梅特勒）；DHG-9005型的电热鼓风干燥箱（北京恒泰）；7235型可见光的分光光度计（上海天普）；离心机）；组织粉碎机（上海胜启仪表有限公司）；250ML的烧杯；专用移液器；ZKJ-1001型循环水真空抽气泵（成都普龙科学仪器有限公司）；KQ3200型超声波清洗器（上海精密）。
白花丹参中丹参酮成分的提取分离与含量测定
吉林农业大学硕士学位论文白花丹参中丹参酮成分的提取分离与含量测定姓名：董蕊申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：郑毅男20040601吉林农业大学硕士学位论文白花丹参中丹参酮成分的提取分离与含量测定摘要本文沮开发利用丹参的新资源，探明丹参的一个种下变种一一白花丹参（＆，ｖｉａⅢｆ，ｔｉｏｆｒｈｉｚａＢｕｎｇｅｖａｒ．ａｌｂａＣ．Ｙ．ｗｕｅｔＨ．ｗ．Ｌｉ）的化学成分及进行含量测定为主要目的。
对白花丹参中的丹参酮进行提取分离，初步摸索了采用新的提取分离方法，着重分离得到了三种纯度较高的单体化合物。
利用高效液相色谱法对白花丹参与紫花丹参中的丹参酮ＩＩＡ进行含量测定，证明白花丹参在一定程度上可以替代丹参的药用价值，为开发利用白花丹参这一新的药用植物提供科学依据。
本研究首次将复日ＦＲ一９８０生物电泳图像分析系统应用到对白花丹参与紫花丹参中丹参酮ＩＩＡ的含量测定中，为扩大中药化学成分含量测定方法开拓新的研究领域。
正品丹参来源于唇形科鼠尾草植物丹参（Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏ，．，ｈｉｚａＢｕｎｇｅ）的干燥根及根茎，主产于陕西随州（现湖北省境内），山东和河南等地。
随着野生资源的减少，７０年代中期，药材丹参已经供不应求，目前发现鼠尾草属Ｓａｌｖｉａ共有４０多个种（含变种、变型）的根及其根茎可作丹参使用。
白花丹参为丹参的种下变种，白花丹参的花冠为白色或淡黄色，不同于正品丹参的紫色或紫红色花冠，为山东特产。
据文献报道，白花丹参为优良品种，其有效成分二萜醌类成分高于正品丹参（紫花丹参），被誉为妇科良药，固具有降血脂、降血压、延年益寿之功效，长久以来，民间得此为宝，常以礼品相赠。
白花丹参野生物种极为稀少，已濒临绝迹。
为挽救和开发利用这一名贵药材，１９８７年，国务院发布的《中国珍稀濒危保护植物名录》中，将具有活血化瘀作用的丹参Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ和白花丹参丘岳ｉｌｔｉｏｔｒｈｉｚａＢｕｎｇｅｖａｌ．ａＩｂａ包括在内。
丹参的提取纯化实验报告
一、实验目的1. 学习丹参药材的提取和纯化方法。
2. 掌握薄层色谱法、高效液相色谱法等分离纯化技术。
3. 提高对丹参药材中主要活性成分的认识。
二、实验原理丹参（Salvia miltiorrhiza Bunge）为唇形科植物，其根茎入药，具有活血化瘀、通络止痛、清心除烦等功效。
丹参中含有多种活性成分，如丹参酮、丹酚酸等。
本实验采用乙醇提取法提取丹参中的有效成分，利用薄层色谱法进行初步分离，再通过高效液相色谱法进行纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：丹参药材（干燥）、乙醇、正己烷、硅胶、薄层板、高效液相色谱仪等。
2. 仪器：电子天平、回流提取器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、高效液相色谱仪等。
四、实验方法1. 丹参提取（1）称取干燥丹参药材10g，置于回流提取器中；（2）加入50mL 95%乙醇，回流提取1h；（3）冷却，过滤，收集滤液；（4）将滤液旋转蒸发至近干，用正己烷溶解，备用。
2. 薄层色谱分离（1）制备薄层板：将硅胶均匀涂布在玻璃板上，晾干；（2）点样：将提取液点于薄层板上，晾干；（3）展开：将薄层板置于展开缸中，加入正己烷，展开至溶剂前沿；（4）显色：将薄层板取出，晾干，喷以10%FeCl3乙醇溶液，显色。
3. 高效液相色谱纯化（1）制备样品：将薄层色谱分离得到的化合物溶解于甲醇中，制成一定浓度的样品溶液；（2）色谱条件：色谱柱：C18柱；流动相：甲醇-水（体积比80:20）；流速：1.0mL/min；检测波长：254nm；（3）进样：将样品溶液进样，记录色谱图。
五、实验结果与分析1. 薄层色谱分离结果通过薄层色谱分离，观察到丹参药材中存在多个斑点，说明丹参中含有多种活性成分。
2. 高效液相色谱纯化结果通过高效液相色谱纯化，成功分离出丹参中的主要活性成分，如丹参酮IIA、丹参酮IIB等。
六、实验结论1. 本实验采用乙醇提取法成功提取了丹参中的有效成分；2. 通过薄层色谱法对丹参中的活性成分进行了初步分离；3. 高效液相色谱法进一步纯化了丹参中的主要活性成分。
丹参药材分析方法的确认
丹参药材分析方法的确认丹参是一种常见的药材，具有活血化瘀、止血、降压等药理作用。
为了确保丹参的质量和药效，需要对其进行药材分析。
下面是丹参药材分析的几种常用方法：1.外观特征分析：通过观察丹参的外观特征，可以初步判断其质量。
正常的丹参应该呈黑褐色，紧密而有弹性的质地，无霉斑和虫蛀。
同时，还需要观察丹参的香气是否正常，香气浓郁的丹参药效更好。
2.理化指标分析：可以通过测定丹参的含水量、挥发油含量、总黄酮含量等理化指标来评估其品质。
含水量过高可能是由于丹参储存不当或存在霉变现象，而挥发油含量和总黄酮含量则能够反映丹参的药效。
3.超微量元素分析：丹参中含有多种重要的微量元素，如锌、铁、钙等。
这些元素对丹参的药效起到重要的作用。
采用原子吸收光谱法和电感耦合等离子体质谱法等技术，可以对丹参中的微量元素进行定量分析，从而评估其品质。
4.薄层色谱分析：薄层色谱法是一种常用的药材鉴别和质量评价方法。
利用不同溶剂体系的柱层进行分离和鉴别，在紫外可见光或者荧光检测器下观察色谱图谱，可以判断丹参中是否存在其他成分，进而评估其纯度和品质。
5.高效液相色谱分析：高效液相色谱法是一种常用的定性和定量分析方法。
通过采集丹参提取物的色谱图谱，并与已知标准品进行比对，可以鉴定丹参中的主要有效成分，如丹参酮、丹参酸等，并测定其含量，从而评估其药效。
总之，丹参药材分析方法的确认包括外观特征分析、理化指标分析、超微量元素分析、薄层色谱分析和高效液相色谱分析等多种方法。
通过这些方法的综合应用，可以对丹参的质量和药效进行准确评估，确保丹参的药用价值和安全性。
丹参有效成分的分离与提取
丹参有效成分的分离与提取（作者： _________ 单位：___________ 邮编：___________ ）【关键词】丹参；隐丹参酮；丹参酮H A丹参为唇形科多年生草本植物，丹参的干燥根及根茎，主产于四川、安徽、江苏及河南等省。
春秋两季采挖，除去茎叶泥沙，须根晒干。
其根茎短粗，顶端有残留茎基，根数条，长圆柱形，略弯曲，有的分枝并有须状细根，长10-20 cm，直径0.3-1 cm，表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹，老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状脱质硬而脆，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，本部灰黄色或紫色，导管束黄白色，呈放射状排列，气微，味微苦涩。
丹参有效成分主要有脂溶性非醌色素类化合物，如丹参酮H A、丹参酮HB、隐丹参酮及其异构体。
水溶性酚酸类成分如原儿茶醛、丹参素。
其中，隐丹参酮是抗菌的有效成分。
1材料与方法1.1材料与试剂丹参粉末，乙醇，苯，氧化铝，丙酮。
1.2实验方法取丹参粉末，用乙醇热煮，煮沸15-20 min，用苯洗脱过滤，洗脱液经氧铝（皿级）层析，再用苯洗脱，样品呈紫色样段，橙红色样段，暗红色样段，取橙红色样段经过苯洗脱，再用丙酮洗脱，呈板状结晶，为丹参酸甲脂，呈橙红色结晶，为隐丹参酮。
将暗红色样段，氧化铝棒置容器中，经苯洗脱，再用丙酮洗脱，呈暗红色结晶，为丹参酮H A。
隐丹参酮与丹参酮H A为脂溶性成分，样品的甲醇提取液，回收溶剂至干，残渣溶于氯仿期滤，滤液加水振摇静止，取氯仿层浓缩至干，加氯仿显色。
原儿茶醛、丹参素为水溶性成分，用荧光法鉴别。
取本品粉末，置白瓷板上，于紫外灯（365 mm）下检视，呈灰色荧光，即原儿茶醛。
薄层色谱法：样品水提液，浓缩后，以80% 醇沉，用盐酸调值，pH 2，乙醚萃取，醚提取液挥去乙醚，用乙醇溶液，点于硅胶G （或H）—羧甲基纤维素钠薄层板上，先以苯一乙酸一乙甲酸（4 : 1）展开1 cm取出挥溶剂再以苯一乙酸乙酯一甲酸（80 : 50 8）展开，以三氯化铁一铁氰化钾（1 1）试剂显色。
丹参中主要成分的提取分离标准工艺简述
丹参最重要具有旳成分为脂溶性旳二萜类成分和水溶性酚酸类成分，因此在设计丹参提取分离时，重要考虑旳是这两类物质旳提取过程。
其中脂溶性成分以丹参酮ⅡA为重要有效成分，其含量也相对较高；而水溶性成分以丹参素、丹参酚酸类、原儿茶醛为重要成分，原儿茶醛虽为活性成分，但其在丹参中含量很低。
且水溶性成分对于热旳敏感性强，脂溶性成分有升华性，在长时间热解决过程中容易成分损失。
1、提取已知丹参中成分热不稳定，采用梯度渗漉法对脂溶性成分和水溶性成分进行提取。
先以95%乙醇对丹参药材进行浸泡溶胀一段时间后，再用95%乙醇进行渗漉，采用正交法选用合适旳渗漉速率，注意低温操作。
滤去渗漉液A（重要为提取丹参酮等脂溶性成分），再用8倍量水对药渣进行渗漉，滤去渗漉液B，提取水溶性成分。
两份渗漉液均需要采用减压浓缩旳方式进行合适浓缩，温度不适宜过高，时间也不适宜过长。
2、分离对渗漉液A可以采用水沉法进行精制。
由于丹参酮ⅡA等二萜醌类成分具有共轭体系，刷型作用力强，也可以选用合适旳大孔树脂吸附进行分离，再使用95%旳乙醇进行解吸附。
对渗漉液B可以采用醇沉法，查资料可以加醇使药液含醇量达50%，能减少成分旳损失，起到最佳旳分离效果。
此外，由于水溶性酚酸成分中，丹酚酸具多种酚羟基、且分子量较大，可以采用大孔吸附树脂和聚酰胺树脂吸附旳措施进行分离；而丹参素与原儿茶醛分子量不不小于丹酚酸类成分，分子间作用力相对于丹酚酸类较小，因此与水旳亲和力更大，更适合于阴离子互换树脂进行分离。
若要对丹酚酸类成分过大孔树脂进行分离，可采用先用水洗脱，再用醇洗脱旳方式进行分离纯化。
3、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是现行以便、有效提取丹参中有效成分旳措施，同样在条件旳选择上需要控制温度、压力、时间等因素，此外可以加入合适旳夹带剂来提高提取效率。
如脂溶性成分可以加入高浓度旳乙醇来增长脂溶性成分旳溶解性，而水溶性成分也可以选用合适旳夹带剂，有文献提出可以选用10%醇和非离子表面活性如吐温旳混合体系溶液进行提取。
丹参的水溶性成分的分离与纯化
丹参的水溶性成分的分离与纯化一、实验目的对丹参药材中脂溶性成分，利用大孔吸附树脂进行脂溶性成分纯化研究二、实验原理丹参是中国传统中药, 是山东省的地道药材。
其主要功效为祛瘀止痛、活血通经、清心除烦。
广泛应用于治疗冠心病、中风、微循环障碍等疾病据文献报道, 丹参中的化学成分主要为脂溶性与水溶性两大类。
其中α脂溶性成分主要有三种: 丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA 和隐丹参酮, 目前多以丹参酮Ⅱ A 或以丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA 及隐丹参酮等多种脂溶性成分联合作为含量测定的指标。
大孔吸附树脂具有吸附性和筛选性，其吸附性是由范德华引力或产生氢键的结果，分子筛选性是有其本身多孔性结构所决定的。
通过吸附和分子筛原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。
三、仪器与材料1、丹参药材、乙醚、乙醇、蒸馏水、丹参素对照品、、大孔树脂等2、高效液相色谱仪、电子天平、蒸发仪、水浴锅、锥形瓶等四、实验内容1、提取1.1 丹参脂溶性成分初提物的制备取粉碎的丹参药材50g，90%乙醇水浴回流三次，每次10倍量、1.5h。
合并滤液并回收溶剂。
残渣用氯仿萃取溶解3次，每次50ml，合并氯仿液，回收氯仿，残渣用适量乙醇溶解，备用2、大孔吸附树脂使用2.1三种不同的大孔吸附树脂对丹参素的静态吸附量考察精密称取大孔树脂各1g，置100ml烧杯中，精密加入上样溶液20ml，每隔5min振摇10s，持续120min，然后静置过夜，使其达到饱和吸附，过滤取续滤液，通过0.45μm的微孔滤膜，上高效液相色谱仪测定丹参素的含量，按公式计算树脂的饱和吸附量静态饱和吸附量=[（初始浓度—吸附后浓度）×吸附液体积]／树脂量（mg.g-1）。
2.2 各种大孔树脂对丹参总黄酮的静态吸附-洗脱性能将2.1中过滤的大孔树脂精密加入70%乙醇20ml，时时振摇，持续120min，静置过夜，过滤取续滤液，通过0.45μm的微孔滤膜，用高效液相色谱法计算丹参素的含量静态洗脱率=（洗脱剂浓度×洗脱剂体积）／饱和吸附量×100%。
不同产地丹参其主要化学成分的分离和测定
不同产地丹参其主要化学成分的分离和测定吴世蓉(安徽中医学院第一附院,安徽合肥230031) 关键词:丹参;有效成分;差异;不同产地 中图分类号:R 284.1 文献标识码:A 文章编号:100422199(2002)0320024201 丹参是唇形科植物丹参S a lv ia m iltiorrh iz aB ge .的干燥根及根茎[1]。
其味苦性微寒,归心、肝经。
具有祛瘀止痛,活血通络,清心除烦的功效。
其分布广泛。
其中以安徽、山西等地产量最大,此外尚有甘肃丹参、褐毛丹参、滇丹参等几种植物的根亦作丹参入药[2]。
丹参的活性成分为两类,一类为脂溶性的二萜醌类,具有抗菌、抗炎及扩张血管作用,另一类为水溶性的酚酸类化合物,具有明显的抗凝,溶纤及很强的抗脂质过氧化作用。
本文作者用高效液相色谱法对丹参中丹参酮 A 和原儿茶醛进行测定,比较了不同产地丹参中丹参酮 A 和原儿茶醛的含量。
1 仪器、设备及试剂紫外分光光度计,高效液相色谱仪。
紫外检测器;C 18色谱柱。
丹参酮 A 和原儿茶醛由中检所提供;甲醇、冰醋酸。
2 丹参脂溶性成分的分析2.1 供试品的制备 取丹参粉末约0.3g ,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50m l ,密塞称定重量,加热回流1h ,放冷,密塞,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,滤液为脂溶性成分样品。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮 A 对照品,用甲醇制成每1m l 中含丹参 A 16Λg 溶液。
2.3 色谱条件 C 18色谱柱,甲醇2水(75∶25)为流动相,检测波长为270nm 。
2.4 测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20Λl ,注入液相色谱仪测定。
分析结果见表1。
表1 不同产地丹参中丹参酮 A 的含量丹参药材产地阜阳永诚医药有限公司提供涡阳元化堂中药材有限责任公司提供安徽中药材公司提供丹参酮 A 含量(m g g )2.3、2.6、4.03.00.443 丹参水溶性成分的分析3.1 供试品的制备(供三种方法)3.1.1 取丹参粉末约5g ,加水250m l ,索氏提取回流8h ,放冷,用水定容至250m l ,为水溶性成分样品。
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丹参化学成分的分离与鉴定
【摘要】目的：对唇形科鼠尾草属植物丹参（salvia miltiorrhiza bge.）的根及根茎化学成分进行研究。
方法运用硅胶柱色谱﹑sephadex lh-20柱色谱﹑ods柱色谱、制备hplc等分离手段进行化学成分的分离纯化，根据理化性质及波谱数据鉴定其结构。
结果：从山楂核体积分数70%乙醇水溶液的提取物中分离得到4个化合物，分别鉴定为芥子醛（sinapic aldehyde）（1）、原儿茶醛（2）、原儿茶酸（3）、儿茶酚（4）。
结论：化合物1为首次从鼠尾草属植物中分离得到。
【关键词】丹参化学成分结构鉴定
丹参为唇形科鼠尾草属（salvia l.）植物丹参（salvia miltriorrhiza bge.）的干燥根及根茎，丹参最早载于《神农本草经》，列为上品。
《本草纲目》记载丹参有“活血，通心包络，治疝痛的功效”。
《滇南本草》称其能“补心定志，安神宁心”。
丹参具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功能，临床用于月经不调、经闭痛经、癥瘕积聚、胸腹刺痛、热痹疼痛、疮疡肿痛、心烦不眠、肝脾肿大、心绞痛等症[1]。
现代研究表明，丹参具有扩张冠状动脉，增加冠状动脉血流量，改善心肌缺氧等之功效[2]，其对心血管心痛作用明显。
本研究对丹参70%乙醇提取物的化学成分进行研究，从中分离得到4个化合物，根据理化性质及波谱数据，确定了化合物1-4的结构。
化合物1为首次从鼠尾草属植物中分离得到。
1 提取分离
丹参10kg，粉碎后用体积分数70%工业乙醇加热提取三次，减压回收，得浸膏600g，浸膏用水混悬后，用乙酸乙酯萃取3次，合并水层。
水层经d101大孔吸附树脂，甲醇-水系统梯度洗脱
（v/v=10%-95%），得到fr.1-fr.6 共6个馏分。
其中fr.3和fr.4继以sephadex lh-20、反复聚酰胺柱色谱、反复硅胶柱色谱，反相制备高效液相色谱分离、纯化得到化合物1（16 mg）、2（17 mg）、3（5 mg）、4（12 mg）。
2 结构鉴定
化合物1：淡黄色针晶（甲醇），香草醛-硫酸显蓝色，三氯化铁-铁氰化钾反应呈阳性，示有酚羟基存在。
1h-nmr（300mhz，cdcl3）δ 9.65（1h，d，j=7.8hz），提示为醛基质子信号，δ 7.38（1h，d，j=15.6hz），6.60（1h，dd，j=15.6hz，7.8hz），提示存在一对反式双键，且反式双键与醛基相连，δ 6.81（2h，s）为苯环上间位2个质子信号，δ 5.95（1h，s）为活泼羟基质子信号，δ 3.93（3h，s）为甲氧基信号，推测有对称的四取代苯环结构，该化合物的氢谱数据与文献[3]报道数据基本一致，故确定化合物1为芥子醛（sinapic aldehyde）。
化合物2：无色结晶（甲醇），mp 153-154℃，fecl3反应呈阳性，提示有酚羟基存在。
1h-nmr（300mhz，dmso-d6）谱中，δ 6.90（1h，d，j=8.1hz）、7.26（1h，dd，j=8.1，1.8 hz）与7.23（1h，d，j=1.8hz）提示有一个abx耦合系统；δ 9.70（1h，s）为一个醛基峰。
以上数据与原儿茶醛的文献数据对照基本一致[4]，故鉴
定该化合物为原儿茶醛。
化合物3：原儿茶酸无色结晶（甲醇），mp 197-201℃，溴甲酚绿反应呈阳性，提示有羧基存在；fecl3反应呈阳性，提示有酚羟基存在。
1h-nmr（300mhz，dmso-d6）谱中，δ 6.78（1h，d，j=7.2 hz）、7.29（1h，dd，j=7.2，1.2 hz）与7.34（1h，d，j=1.2hz）提示有一个abx耦合系统；δ 10.09（1h，br.s）为羧基峰。
该化合物经与原儿茶酸对照品共薄层，在三种溶剂系统下展开，其rf
值一致相同，故鉴定该化合物为原儿茶酸。
化合物4：无色结晶（甲醇），mp 104-106℃，fecl3反应呈阳性，提示有酚羟基存在。
该化合物经与儿茶酚对照品共薄层，在三种溶剂系统下展开，其rf值一致，故鉴定其为儿茶酚。
参考文献：
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