发酵罐操作流程

发酵罐操作流程

1 技术准备

发酵罐使用之前，应先检查电源是否正常，空压机、循环水系统是否能正常工作。同时要检查管道是否通畅及废水废气管道的完好情况。

2 空消

在投料前，气路、料路、发酵罐罐体必须用蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态。

2.1 空消步骤

打开蒸汽总开关----打开排冷凝水阀-------打开蒸汽过滤器开关------关闭预过滤器开关---打开空气精过滤器开关---

打开进罐空气阀---打开空气排气阀---打开上分气包进发酵罐蒸汽阀---打开取料口进罐蒸汽阀---打开取样口排气----打

开上分汽包进下分汽包阀---打开下分汽包总开关---打开下面进罐体蒸汽阀---打开接菌口和流量计出的排气阀。

2.2 空消注意事项

2.2.1 空气管路上有预过滤器和空气过滤器，预过滤器不能用蒸汽灭菌，因此在空气管路通蒸汽前，必须将预过滤器的阀门关闭。

2.2.2 空消时，应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为

0.13~0.15Mpa,空消时间为50分钟，夹层排水阀一直打开。

2.2.3 经常用手感受进蒸汽管道的畅通。

2.2.4 发酵罐空消前，应将夹套内的水放掉。空消结束后，应将罐内冷凝水排掉。

2.2.5空消结束后要通入无菌风吹干管路，并且管路和罐体要始终保持正压，以免杂菌的进入。

3 罐体实消

实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。空消结束后，罐体压力降至0.03Mpa,打开罐体下面出料口排水阀排冷凝水，待排完后，关紧出料口阀门。打开进料口，加入培养基，拧紧。

3.1 实消步骤

开启机械搅拌装置---打开蒸汽总开关---打开拍冷凝水阀---打开上分气包进发酵罐蒸汽阀---打开夹层蒸汽阀---打开排气口排罐体冷空气---夹层温度达到95℃时关闭夹层蒸汽阀---打开罐体上面进蒸汽阀---打开上分汽包进下分汽包阀---打开下分汽包总开关---打开下面进罐体蒸汽阀---罐体压力达到0.15Mpa时开始计时，通过调节蒸汽阀保压30分钟。3.2 实消注意事项

3.2.1 打开夹套蒸汽阀、排气阀，对罐内培养基预热，当罐内温度升到95℃时，关闭夹套进气阀，打开罐内所有进气阀，通入蒸汽。

3.2.2 当罐压升至0.15Mpa,控制蒸汽阀门开度，保持罐压在0.13～0.15Mpa,30分钟后停止供汽。

3.2.3 关闭进气阀后立即通入无菌空气以维持罐内正压。

4 冷却接种培养

4.1 操作步骤

打开进夹层冷水阀---打开夹层冷却水排水阀---待温度降至设定温度时用卡式罐从接种口接菌---打开油水分离器---打开预过滤器---通过空气流量计调通气量。

4.2 注意事项

4.2.1 接种时先用火焰对接种口进行灭菌，在接种口放置酒精圈，点燃后燃烧1分钟左右。灭菌迅速将卡式罐连接到接种口进行接种。

4.2.2 培养发酵罐压力保持在0.05Mpa,根据各培养条件设定通气量。

5 取样与放料

5.1 取样步骤

打开蒸汽总开关---打开排冷凝水阀---打开蒸汽过滤器开关---打开上分汽包进发酵罐蒸汽阀---打开取料口蒸汽阀

灭菌30分钟---用无菌三角瓶在取样口取样。

5.2 取样注意事项

用0.1Mpa左右空气压力取样，刚开始取的样弃去。

6 放料

打开连接混合罐的放料阀---用0.1Mpa左右空气压力放样至混合罐。