关于分光光度计基线校正的原理和方法
分光计的调整和使用实验原理
分光计的调整和使用实验原理分光计是物理学和化学学科中一个非常重要的实验装置。
它可以将白光分解成不同的颜色，同时也能够用来分析化学物质的成分。
本文将介绍分光计的调整和使用实验原理，并提供一些有用的实验技巧。
一、分光计的调整1. 调整光源分光计中使用的光源应该与标准光源保持一致，可以通过观察样品中的色光来判断光源的质量。
如果样品出现过多的杂质，那么可以尝试使用滤光片和其他仪器来调整光源，以确保它的稳定性和准确性。
2. 调整狭缝分光计中有两个狭缝，一个位于光源的前面，一个位于检测器的前面。
调整这些狭缝可以确保光线的稳定和精确。
调整前，需要关闭检测器，打开光源，并逐渐关闭前面的狭缝，直到出现明显的准线。
然后逐渐调整检测器前面的狭缝，直到准确地对准样品。
3. 调整铅直度分光计必须垂直放置才能发挥最佳效果。
要检查分光计是否水平，可以使用小气泡水平仪，当气泡在中心线上时表示水平度正确。
如果不正确，可以使用调节杆和调节螺丝来调整水平度，直到气泡在中心位置。
二、使用实验原理1.光的折射率当光线通过样品时，不同的颜色被折射的程度也不同。
通过调整分光计中的狭缝，可以确保只有一个颜色通过样品。
然后测量这个颜色在分光计中的折射率，通过比较这个折射率与标准表格中的值来确定样品的成分。
2.分析光谱另一个分光计的常见使用是分析光谱。
通过调整狭缝，可以确保只有一个特定颜色的光信号通过样品。
这个信号可以被光电探测器捕捉，并根据信号的强度来测量光谱中不同波长的强度。
三、实验技巧1. 调整分光计时，需要注意反光镜和准线的位置。
反光镜应该固定在准线上方，而准线应该准确地位于样品位置。
2. 为了保证分光计的准确性，必须使用高品质的光源和检测器，以及保持样品狭缝清洁，以避免漂移或误差。
3. 分光计应该每天进行一次校准，以确保准确度，并定期检查光源以确保它的亮度和色温恒定。
总结分光计是一个非常有用的实验装置，可以被用于化学和物理实验中。
在使用分光计时，需要保持准确的调整，以获得最准确的数据和分析结果。
分光光度计建立基线的方法
分光光度计建立基线的方法建立分光光度计基线是确保测量准确性和稳定性的重要步骤。
以下是50种关于分光光度计建立基线的方法，并展开详细描述：1. 使用空白试剂建立基线：将纯溶剂或空白试剂置于样品室中，利用光度计的基线校正功能进行基线校准。
2. 利用空白比色皿进行基线校准：在光度计中放置不含样品的空白比色皿，通过设定基线来校准。
3. 清洗比色皿：使用纯溶剂或空白试剂反复清洗比色皿，确保没有杂质干扰。
4. 检查光路：检查分光光度计的光路径是否干净，确保没有灰尘或污垢影响基线的建立。
5. 确保光源稳定：检查光源的稳定性，保证在建立基线时获得稳定的光源信号。
6. 校正仪器零点：使用零点滑动开关或校准程序进行零点校正，确保仪器读数准确。
7. 检查滤光片：确保分光光度计中使用的滤光片没有损坏或污染，以获得准确的信号。
8. 清洗样品室：定期清洗样品室以避免积聚的杂质影响基线。
9. 调整曝光时间：根据样品的吸光度，调整分光光度计的曝光时间以确保基线建立的准确性。
10. 采用双波长测量：通过双波长测量校正基线，进一步提高结果的准确性和稳定性。
11. 建立多个基线平均值：根据多次测量的平均值建立基线，减小随机误差。
12. 检查样品室密封性：确保样品室的密封性良好，避免外界环境对基线的影响。
13. 使用标准品建立基线：使用已知浓度的标准品进行基线校准，确保分光光度计的准确性。
14. 定期维护仪器：定期进行仪器维护，包括光源、滤光片和检测器的校准和清洁。
15. 利用基准样品进行基线校准：选取具有稳定吸光度的基准样品进行基线校准，确保结果的可靠性。
16. 使用自动化校准程序：利用仪器自带的自动化校准功能进行基线校准，减少人为误差。
17. 检查基线漂移：在建立基线后观察基线的漂移情况，根据情况进行调整和重新校准。
18. 检查温度影响：观察温度对分光光度计基线的影响，并进行相应的温度校准。
19. 使用零浓度溶液进行基线校准：选用浓度极低的零浓度溶液进行基线校准，确保灵敏度和准确性。
紫外可见分光光度计
临床分析 色彩測定 环境分析
生物化学分析
有机化学分析
无机化学分析 光学测定
有机化学分析 无机化学分析 光学测定 生物化学分析 环境分析 色彩測定 临床分析
紫外/可见分光光度计的基本结构
光源 单色器 样品室 检测器 控制放大电路 显示器
比色皿 单色光
光电管（或光电池） 放大器
显示器
斩光器 单色光
阳光是复合光的事实。
分光光度法
❖ 1859年德国物理学家本生(R．W．Bunsen)和基尔 霍夫(G．R．Kirchhoff)发现由食盐发出的黄色谱线 的波长和“夫琅和费线”中的D线波长完全一致， 才知道一种物质所发射光的波长(或频率)，与它所能 吸收的波长(或频率)是一致的。
分光光度法
❖ 朗伯(J．H．Lambert)早在1760年就发现物质对光 的吸收与物质的厚度成正比，后被人们称之为朗伯 定律；比耳(A.Beer)在1852年又发现物质对光的吸 收与物质的浓度成正比，后被人们称之为比耳定律。 在应用中．人们把朗伯定律和比耳定律结合起来， 称之为朗伯—比耳定律。随后，人们开始重视研究 物质对光的吸收，并试图在物质的定性、定量分析 方面予以使用。因此，许多科学家开始研究以朗 伯—比耳定律为理论基础的仪器装置。
对其分别进行光度测定。
ABS (%T)
ABS (%T)
时间
时间
（二）定性分析
一、利用标准物质定性 在相同条件下，用光谱扫描法测定未知物的吸收光谱，与所推断化合物的标
准物的吸收光谱进行比较，如果两吸收光谱的形状和吸收峰的数目、位置、拐点 等完全一致，就可初步判定未知物与标准物是同一种物质。但要注意，物质不同 但光谱相似的特殊情况。
波长
722N分光光度计使用指南及校正方法
722N分光光度计使用指南及校正方法一、使用指南1.仪器准备：将分光光度计放置在平稳的台面上，确保仪器稳定不会晃动。
插上电源线，并打开电源开关，待仪器预热一段时间后，方可使用。
2.选择合适的光源：分光光度计的光源有多种选择，包括白炽灯、钨丝灯、氙灯等。
根据实验需求选择合适的光源，并进行相应的设置。
3.设置波长：根据具体实验需求，选择合适的波长进行测量。
先调节波长旋钮，使其指针指向所需的波长，然后可通过微调旋钮进行精确调节。
4.样品处理：根据实验需求，对待测样品进行必要的预处理，如稀释、过滤等。
确保待测样品符合测量要求。
5.样品吸光度测量：将样品稀释后倒入光度比色皿中，放入仪器测量位，然后将测量位移入仪器中央，确保无气泡和杂质。
将上盖盖严，按下“测量”按钮进行测量。
6.结果记录：根据仪器显示的吸光度数值，记录测量结果，并按照实验要求进行结果分析和处理。
二、校正方法1.波长校正：使用标准溶液进行波长校正。
首先选取一瓶已知浓度的标准溶液，然后进行零校正，即在无样品的情况下，将波长设置为标准溶液对应的波长，调节“零校正”旋钮，使得仪器读数为零。
接下来，将标准溶液置于测量位，进行测量，确保读数与标准溶液浓度一致。
如果不一致，可通过调节“波长校正”旋钮进行校正。
2.灵敏度校正：使用标准溶液进行灵敏度校正。
选取一系列已知浓度的标准溶液，按照相同的方式进行测量。
根据标准溶液的吸光度与浓度的关系，绘制标准曲线。
通过标准曲线来校正仪器的灵敏度，使得后续测量结果更准确可靠。
3.零校正：每次测量前都要进行零校正，即保持测量位为空白，调节“零校正”旋钮，使读数为零，确保后续测量结果准确无误。
三、常见注意事项1.使用仪器时应注意避免强光照射，避免干扰测量结果。
2.仪器使用完毕后，应及时清洁测量位和检查仪器状态，确保干净整洁。
3.使用仪器时应注意避免样品溢出、杂质污染等情况的发生，以免影响测量结果。
4.定期校准和维护仪器，保证仪器的正常运行和测量精度。
紫外可见分光光度计的介绍及使用
32
在measure中选择波长wavelength，在Calibration中选择 “1st order”， “2st order”， “3st order”，也可以不校准。 在concertration中键入标准浓度单位。
3. Instrument
可编辑ppt
33
4 standards标准参数设置 键入标系的样品浓度及名称
可法可以开始测量： ❖ 使用菜单方式
选择[Spectrophotometer]菜单下Start]选项开始测量 ❖ 使用按钮方式 ：按按钮 开始测量 ❖ 如果要终止扫描按按钮 。
可编辑ppt
29
二光度扫描
开始 方法设定
样品名输入 将空白样品分别放入参比池和样品池
进行用户基线校正 将样品放入样品池 开始测量
打印数据
可编辑ppt
30
开始测量
测量参数设置
在[Edit]菜单中选择[Method…]选项。出现下列设置窗口.
可编辑ppt
31
具体操作程序
Method:
1. general: Measurement测量方式选择Photometry（光度 计测量）
2. Quantitation定量参数设置页面：
可编辑ppt
可编辑ppt
紫外分光光度计校准方法
紫外分光光度计校准方法
紫外分光光度计校准方法
紫外分光光度计是样品吸收紫外光的吸光度与其频谱曲线或光谱的一种仪器分析仪器，是测量样品中物质可吸收紫外的含量的一种重要工具。
它是用来校准样品的吸光度，以便准确测量和分析样品的组成成分的。
本文将就紫外分光光度计校准的步骤进行介绍。
首先，按照使用说明，正确安装好紫外分光光度计，打开电源，接上电源线，确认当前状态为校准模式，紫外分光光度计准备完毕。
其次，准备校准标准溶液，校准标准溶液可以是绝对吸光度稳定的，如空气、水或某些固定的化合物，也可以是根据紫外分辨率的测量精度而决定的广义校准标准溶液。
接着，将校准标准溶液滴入测盘点，注意保持每点滴数一致，然后打开校准功能，选择需要校准的波长，全部校准完毕后可以进行测试样品的测量。
同时，还可以改变灵敏度、零点、滤波等参数，来提高测量准确度。
最后，利用紫外分光光度计测量样品的吸光度，并根据校准结果计算出实际吸光度，最终形成完备的数据，以满足实验要求。
到此，紫外分光光度计的校准工作就结束了。
校准是一个很重要的环节，只有经过准确的校准，才能使紫外分光光度计测量的数据准确可靠。
在对样品的测量中，还需要经常进行校准，以便得出更加准确可靠的测量结果，为科学实验和技术研究提供有力的支持。
差示分光光度法范文
差示分光光度法范文分光光度法（spectrophotometry）是一种常见的分析方法，用于测定溶液中物质的浓度。
它通过测量溶液对特定波长的光的吸收程度来确定物质的浓度，可以应用于各个领域，包括化学、生物、环境等。
分光光度法的原理是基于光的吸收现象。
物质吸收光的能力与其浓度成正比，所以可以通过测量吸光度来推断物质的浓度。
在分光光度法中，一束光通过样品，然后被接收器接收，并转化为电信号。
接收器的输出信号与样品吸收的光的强度成正比。
由于吸收光的强度与物质的浓度相关，通过测量样品吸光度，可以推断物质的浓度。
分光光度法的具体步骤如下：首先，根据实验需要，选择适当波长的光源。
对于一些物质来说，它们对特定波长的光有较高的吸收能力，因此需要选择合适波长的光源。
接下来，将待测溶液置于透明的试管或比色皿中，并将其放置在光路中。
光由光源穿过试管中的溶液，并被接收器接收。
然后，通过调节接收器的增益或调节光源的强度，使被接收到的光的强度控制在适当的范围内。
过高或过低的光强度都会影响测量结果的准确性。
接着，进行基线校正。
基线校正是为了排除试管或比色皿对光的吸收而引起的误差。
在进行测量之前，将纯溶剂（无待测物质的溶液）置于光路中，并记录接收器测得的光强度作为基线。
在测量待测溶液时，将接收器测得的光强度减去基线值，即可得到正式的吸光度。
最后，通过对一系列标准溶液进行测量，建立吸光度和浓度之间的标准曲线。
标准曲线可以通过绘制吸光度与浓度之间的线性关系来确定，从而将待测溶液的吸光度转化为浓度。
通过标准曲线可以方便地计算出待测溶液中物质的浓度。
综上所述，分光光度法是一种简单、灵敏且可靠的分析方法，广泛应用于各个领域。
通过测量溶液对特定波长的光的吸收程度，可以确定物质的浓度。
通过建立标准曲线，可以方便地将吸光度转化为浓度。
分光光度法为我们提供了一种快速准确地测定物质浓度的手段，对于科学研究和工业生产都有着重要的意义。
分光光度计使用原理及操作方法
分光光度法原理：光是一种电磁波 ,拥有必定的波长和频次。
可见光的波长范围在400-760nm，紫外光为 200-400nm，红外光为 760-5000nm。
可见光因波长不一样体现不一样颜色，这些波长在必定范围内体现不一样颜色的光称单色光。
利用棱镜可将白光分红按波长次序摆列的各样单色光，即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等，这就是光谱。
有色物质溶液可选择性地汲取一部分可见光的能量而体现不一样颜色，而某些无色物质能特点性地选择紫外光或红外光的能量。
物质汲取由光源发出的某些波长的光可形成汲取光谱，因为物质的分子构造不一样，对光的汲取能力不一样，所以每种物质都有特定的汲取光谱，并且在必定条件下其汲取程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物质的这类汲取特点对不一样物质进行定性或定量剖析的方法。
在比色剖析中，有色物质溶液颜色的深度决定于入射光的强度、有色物质溶液的浓度及液层的厚度。
当一束单色光照耀溶液时，入射光强度愈强，溶液浓度愈大，液层厚度愈厚，溶液对光的汲取愈多，它们之间的关系，切合物质对光汲取的定量定律，即朗伯-比尔（ Lambert-Beer）定律。
这就是分光光度法用于物质定量剖析的理论依照。
朗伯 -比尔定律：物理意义：当一束平行单色光垂直经过某一平均非散射的吸光物质时 ,与其吸光度 A 与吸光物质的浓度 c 及汲取层厚度 b 成正比。
数学表达式：A=lg(1/T)=KbcA——吸光度；1 / 3T——透射比，是透射光强度比上入射光强度；K——为摩尔汲取系数，它与汲取物质的性质及入射光的波长λ相关；C——吸光物质的浓度；B——汲取层厚度。
使用方法：721 可见分光光度计其波长范围360～800nm，色散元件为三角棱形 .1.检查仪器各调理钮的开端地点能否正确，接通电源开关，翻开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0位”，预热 20min 后，再选择须用的单色光波长和相应的放大敏捷度档，用调“0电”位器调整电表为 T=0％。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
关于分光光度计基线校正的原理和方法
对于双光束分光光度计而言在使用前必须要做基线校正（也称为基线记忆），
对于此项工作的原理和操作方法许多使用者的认识不尽相同；为此谈谈我的认
识。
（一）为何要做基线校正？
众所周知、光度计的光学系统基本是由光源（氘灯、钨灯）—单色器（光栅、狭
缝）—检测器（光敏二极管、光电倍增管）等三部分组成的。在我们使用的波长
区域中（一般紫外可见仪器均在 190nm～1100nm范围里，）上述部件在不同的
波长下的响应值（光源的发射强度、单色器的色散强度、检测器的放大倍数）均
不相同；通俗地说、即使没有样品，仪器如果不做基线校正，那么在 190nm至
1100nm的范围中， 吸光值或透过率不会是一条直线， 这是一种客观的物理现象，
如下图；
尽管上图反映的是单光束的能量图，但在基线未校正状态下，即使改用双光束测
量方式来扫描一个样品，其所得到的图谱或吸光值也是不可信的。
（二）被校正的基线种类和用途
（1）系统基线：
所谓系统基线就是仪器固有的波长范围的总基线； 例如一台仪器出厂设计的波长
全程范围是 190nm 至 1100nm，那么它的系统基线就是这个范围。一般来讲，
作为分析人员对一台仪器做全程扫描测试是比较少见的； 之所以要做系统基线的
目的一般是将仪器的光学系统的响应值校正到基本一致； 这就类似马拉松赛跑一
样，只要大家在同一起跑处（注意：不是起跑线）比赛，前后差几米出发无所谓。
（2）用户基线：
所谓用户基线就是分析者自己设定的测量波长区域的一段基线； 由于这是分析所
需要的区域，为了保证测试的准确性，故用户基线的校正是非常重要和必要的；
这就类似百米赛跑一样，运动员要在同一个起跑线上比赛而不能抢跑，否则无法
准确计算成绩。
（三）基线校正的方法
（1）系统基线：
系统基线的校正较为简单， 一般情况下样品室内不放样品， 仅做光学系统的校正；
如果一定要使用全波段的测量那另当别论。同时需要注意的是：系统基线无需经
常校正，一般半个月或一个月校正校正一次即可。对有的仪器来说，系统基线校
正过于频繁反而会造成基线漂移严重。
（2）用户基线校正：
正确的校正方法是：两只比色杯盛有空白溶液分别放置在样品及参比光路中，校
正波长范围要大于分析波长范围；例如、分析设定范围为 220nm～500nm，那
么校正波长就要设定为 210nm～510nm；等待校正结束后再将波长设定回到原
来的220nm～500nm范围。这种校正方法的优点是：如果校正波长与分析波长
完全吻合一致，有可能在校正后的基线两端出现大的噪声；如果校正范围大于实
际分析范围并掐头去尾后可以提高分析精度。我将这种校正方法起名为“豆芽菜
原理”，目的是便于记牢；（因为我们吃豆芽菜时均要掐头去根，仅吃中间部分，
故以前的饭馆将炒豆芽这道菜称为“炒掐菜”；对不起、跑题了）。关于这种校正
方法，许多使用者往往不知晓或忽略掉了，在此顺便介绍给版友。
值得注意的是，有的仪器操作者在做基线校正时，参比一侧不放参比溶液，也就
是用空气来做参比对照。这种方法在可见区对有的样品也许有时影响不大，但在
紫外区影响就会很明显了。严格的说，用空气做参比所测得的结果不是真正意义
上的校正光谱。
（四）基线校正的注意事项
（1）基线校正时要保证仪器有一定的预热时间
（2）每更换一种参比溶液后均要重新做基线校正
（3）如果参比溶液的吸光度大于样品的吸光度值时测试结果会出现负值，此时
要考虑使用何种溶液做基线校正了。
（4）做基线校正时要考虑试剂的使用波长范围问题，因为有的试剂在某个波长
以下的吸光度值会无限大，这时去做校正会超出仪器的有效量程范围，无法得到
真正的结果。关于试剂的使用波长范围，目前一般在试剂瓶的标签上会有标注。
我有个简单资料表供大家参考如下：