JC-1 线粒体膜电位荧光探针
JC 线粒体膜电位的检测方法
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒产品组成：产品编号BB-4105-1 BB-4105-2 BB-4105-3规格20 assays 50 assays 100 assaysJC-1 100ul 250ul 500ul10×孵育缓冲液4ml 10ml 20ml产品简介：线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。
可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。
在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，488nm激发时的最大发射波长为590nm，可以产生红色荧光，在流式图上表现为FL1和FL2双阳性；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，488nm激发时最大发射波长为527nm，可以产生绿色荧光，形成流式图中所有细胞FL1均为阳性。
凋亡细胞则大多为FL1单阳性。
这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。
常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
贝博线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)可以快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化，可以用于早期的细胞凋亡检测。
试剂盒染料与其他的阳离子染料如DiOC6(3)和罗丹明123相比，特异性更高，对线粒体膜电位变化的特异性高于质膜电位变化，对线粒体去极化检测的检测一致性更好；红绿色荧光强度比率只受线粒体膜电位的变化，不受线粒体大小，形状，密度的差异干扰；检测灵敏度强，对细胞应激反应的微小异质性都能辨别；使用方法：悬浮细胞1、孵育缓冲液和JC-1染色工作液的配制：根据样品数按下列比例配制孵育缓冲液和JC-1染色工作液。
取100ul 10×孵育缓冲液加900ul无菌纯水稀释，混匀并预热至37℃，即成1×孵育缓冲液；在500ul 1×孵育缓冲液中加入5ul JC-1，涡旋混匀配成JC-1染色工作液；2、收集样本细胞以及阴性、阳性对照细胞。
各种类型细胞器探针
各种类型的细胞器探针线粒体线粒体是细胞的能量工厂。
因其参与了细胞凋亡，这些年也成为研究的热门。
线粒体的荧光探针主要有：JC-1、Rhodamine 123等，Invitrogen还推出专门的MitoTracker 系列探针。
JC-1是用得最多的。
它在浓度或线粒体膜电位低时，以单体存在，激发波长为490 nm，发射波长为527 nm，呈绿色荧光。
当浓度升高或线粒体膜电位升高时，JC-1形成J-聚体，呈橙色荧光，此时激发波长为490 nm，发射波长为590 nm。
JC-1最重要的应用是检测活细胞内线粒体的膜电位，以及追踪凋亡细胞中的线粒体变化。
Rhodamine 123是一种能渗透入细胞，带阳离子的荧光探针。
它的激发波长为505 nm，发射波长为534 nm。
活细胞摄取Rhodamine 123达到平衡的速度较快，只需5分钟，通过激光扫描共聚焦显微镜观察，即可见到线粒体被Rhodamine 123染成绿色。
当细胞被反复冲洗时，Rhodamine 123通常不被细胞保留，但许多癌细胞可较长时间保留这种染料，因此，它有助于某些癌症的诊断。
MitoTracker 系列探针则是Invitrogen专为线粒体而设计的。
MitoTracker是细胞通透性的，只要与细胞简单孵育，就能被动渗透质膜，在有活性的线粒体中积累。
一旦线粒体被标记，细胞就能用甲醛固定剂固定，一些MitoTracker探针能在固定之后保留在线粒体内。
这对致病细胞格外有用。
而一些探针在随后的去污剂处理后还能保留，这样就能用在免疫细胞化学或原位杂交中。
尽管传统的线粒体探针如Rhodamine 123也很容易标记线粒体，但是一旦线粒体的膜电位损失，它们就很容易被洗掉。
这就限制了某些应用。
MitoTracker探针又分为好几种，且有红色、绿色和橙色。
其中还原态的MitoTracker Orange CM-H2TMRos和MitoTracker Red CM-H2Xros在进入细胞后不发出荧光，直到它们被氧化成相应的线粒体选择性探针，并聚集在线粒体内。
JC-1单染法检测CCCP对内皮细胞线粒体膜电位的影响
养Ｅ Ｃ Ｖ ３ ０ ４细胞 ， 不 同浓度 Ｃ Ｃ Ｃ Ｐ处理 细胞 ２ ０ ｍｉ ｎ后， 装载 荧光探 针 Ｊ ｃ 一 １或 Ｒ ｈ ｌ ２ ３ ． 流 式细胞 术检 测 Ｊ Ｃ 一 １单体 的发 射绿色 荧 光。 结果 伴 随 线粒体 毒性 剂 Ｃ Ｃ Ｃ Ｐ浓度 增加 ， 代表 Ｊ Ｃ 一 １单体 含 量 的绿色 荧 光 强度增 加 、结论
流 式细胞 术检 测 Ｊ Ｃ 一 １ 单 体 的绿色 荧光 可反 应线粒 体膜 电位 的变 化。 关 键 词 ：线粒 体膜 电位 ； 碳 酰 氰基一 对一 氯 苯腙 ； 流式 细胞 术 文献标 识码 ：Ａ 中图分类 号 ：Ｒ ３ ６ ３
Ｅｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ＣＣＣＰ ｏ ｎ ｅ ｎｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ａ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｍｉ ｔ ｏ ｃ ｈ ｏ ｎ ｄ ｒ ｉ ａ ｌ ｍｅ ｍｂ ｒ ａ ｎ ｅ ｐ ｏ ｔ ｅ ｎｔ ｉ ａ ｌ ｂ ｙ
２ ０ １ ４年 ｌ ０月
文章 编号 ： Ｉ ６ ７ ３ — ２ ９ ９ ５ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ５ － ０ ３ ２ ４ － ０ ３
・
论
著 ・
Ｊ Ｃ 一 １单染 法 检测 Ｃ Ｃ Ｃ Ｐ对 内皮细胞 线粒 体膜 电位 的影 响
官福 新 ， 周 露露 ， 张宸 豪 ， 李
，
２ ０ １ ０ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｙ ｃ ｌ ａ ｓ ｓ ｏ ｔ ’ Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｐｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｙ ３ ． Ｄｅ ｐ ｍｌ ｍｅ ｎ ｌ ｏ ｆ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ． Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｃ ｉ ｔ —
(完整版)线粒体膜电位检测(JC-1).
线粒体膜电位检测（JC-1)大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△ψ的破坏，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)是一种阳离子脂质荧光染料，可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。
JC-1有单体和多聚体两种存在状态，在低浓度时以单体的形式存在，高浓度时以多聚体形式存在，两者的发射光谱不同，但均可在流式细胞仪绿色（FL-1）通道检测出绿色荧光，JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内，正常健康线粒体的膜电位（△ψ）具有极性，JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内，并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体，多聚体发射光为红色荧光；可被流式细胞仪的红色（FL-2）通道检测到，而细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。
根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。
所需仪器或者试剂流式细胞仪或荧光显微镜、高速离心机、CO2培养箱、微量移液器1.5m L Microtube、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS、灭菌去离子水使用注意事项1．微量试剂取用前请离心集液。
2． JC-1避光保存及使用。
3．细胞培养的数量不宜超过1×106，否则细胞会产生自然凋亡影响检测。
4．对PH变化过于敏感的细胞建议用胎牛血清取代Buffer孵育染色及洗涤，或延长观测时间5．流式细胞仪检测线粒体膜电位变化受到多种因素的影响，因诱导剂、细胞株类型，作用时间的不同而荧光强度比例都有不同，因此没有通用标准的补偿设门指南，因此每个试验需设阴性及阳性对照组进行荧光补偿及设门。
流式细胞仪检测细胞凋亡操作流程 - 线粒体膜电位变化检测细胞凋亡
线粒体膜电位变化检测细胞凋亡实验原理JC-1（5,5′,6,6′-Tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide）是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。
可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。
在线粒体膜电位较高时，JC-1 聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以产生红色荧光（FL-2 通道）；在线粒体膜电位较低时，JC-1 不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1 为单体(monomer)，可以产生绿色荧光（FL-1 通道）。
这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。
常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
通过JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1 从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1 单体的最大激发波长为514nm，最大发射波长为527nm；JC-1 聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。
实验用品1.12⨯75mm 的Falcon 管和15ml 聚苯乙烯离心管2.微量加样器和加样头3.线粒体检测试剂盒（货号551302，100tests），包括JC-1和10 ⨯ Assay Buffer, 注：每个KIT 包括 4 小瓶JC-1 试剂，每小瓶试剂足够检测25 个样本4.离心机5.CO2 培养箱6.流式细胞仪样本制备图1：试剂准备和JC-1 染色步骤总揽1.在JC-1粉末中加入125ulDMSO使其充分溶解，配成JC-1 Stock Solution，需根据实验的量分装-20度保存。
2.根据样本量配制JC-1 Working Solution，每个样品500ul 1×Assay Buffer + 5ulJC-1 Stock Solution。
jc1线粒体膜电位流式
jc1线粒体膜电位流式
【最新版】
目录
一、JC1 检测线粒体膜电位的原理
二、JC1 的流式检测方法
三、JC1 的应用优势
四、总结
正文
一、JC1 检测线粒体膜电位的原理
线粒体膜电位是细胞内重要的生理指标之一，它直接影响着细胞的能量代谢。
JC1 是一种常用的线粒体膜电位检测试剂，其原理是基于 JC1 在低浓度下以单体存在，能检测到绿色荧光，而在高浓度下以多聚体存在，能检测到红光。
通过流式检测，JC1 可以对线粒体膜电位进行快速、准确的测量。
二、JC1 的流式检测方法
JC1 的流式检测方法通常分为两个通道，即 FL-1 和 FL-2。
在低浓度下，JC1 以单体存在，通过 FL-1 通道检测，可以得到绿色荧光信号。
在高浓度下，JC1 以多聚体存在，通过 FL-2 通道检测，可以得到红光信号。
通过比较不同浓度下的荧光信号强度，可以计算出线粒体膜电位的值。
三、JC1 的应用优势
相较于其他线粒体膜电位检测方法，JC1 具有以下优势：
1.快速：JC1 的流式检测方法可以在短时间内完成大量样本的检测，提高了检测效率。
2.准确：JC1 能对线粒体膜电位进行定量检测，结果更为准确可靠。
3.可重复性强：JC1 检测结果具有较好的重复性，适合进行大规模研究。
4.安全性高：JC1 对细胞毒性低，对实验结果影响较小。
四、总结
综上所述，JC1 是一种适用于线粒体膜电位检测的高效、准确、安全的试剂。
细胞线粒体膜电位检测实验服务
细胞线粒体膜电位检测实验服务一、实验原理JC-1是一种碳氰化合物类阳离子荧光染料，可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。
JC-1在细胞内以聚合体和单体两种不同的物理形式存在，分别处于不同的荧光发射峰。
当JC-1 浓度低或膜电位水平低时，主要以单体形式存在，激发波长为527nm，呈绿色荧光；当JC-1浓度升高或线粒体膜电位水平较高时，形成聚合物，发出红色的荧光，激发波长为590nm。
当细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光，根椐这一特征就可以检测线粒体膜电位的变化。
【晶莱生物】大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（MMP）的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。
它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转.二、实验流程1. 细胞培养；2. 用适当的方法诱导细胞凋亡，同时设立阴性依照组合阳性对照组，收集细胞；3. 用PBS洗涤细胞三次，收集不多于1×106的细胞；4. 取100μL 10×Incubation Buffer加900μL灭菌去离子水稀释成1×Incubat ion Buffer，混匀并预热至37℃；5. 吸取500μL 1×Incubation Buffer，加入1μL JC-1，涡旋混匀配成JC-1工作液；6. 取500μL JC-1工作液将细胞均匀悬浮，37℃，5% CO2的培养箱中孵育15~20min。
7. 室温离心（2000rpm,5min）收集细胞，用1×Incubation Buffer洗两次；8. 吸取500μL 10×Incubation Buffer重新悬浮细胞；9. 流式细胞仪检测，分析。
三、服务说明1.客户提供：细胞株(冻存株或培养好的细胞)，相关药品或MMP检测试剂盒（可代购）2 公司提供：实验步骤、结果图、数据结果和分析报告3实验周期：1-2周，具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。
jc1线粒体膜电位流式
jc1线粒体膜电位流式
JC1 是一种荧光分子，广泛用于评估线粒体膜电位的变化。
线粒
体膜电位是线粒体内外膜之间电势差的测量，是维持线粒体正常功能
的关键指标。
线粒体通常具有负向的膜电位，也就是内负外正。
使用
JC1荧光分子可以直接测量线粒体膜电位的变化，通过流式细胞仪等仪器进行分析。
在测量线粒体膜电位时，使用JC1荧光染料，其在低膜电位条件
下形成短波长绿色荧光（JC1单聚体形式），而在高膜电位条件下形成长波长红色荧光（JC1聚集体形式）。
通过测量这两种荧光信号的比例，可以间接反映线粒体膜电位的变化。
当线粒体膜电位较高时，红色荧
光的比例会增加，反之则绿色荧光比例增加。
通过流式细胞仪测量JC1荧光的信号强度，并根据绿色和红色信
号的比例计算出线粒体膜电位的变化情况。
这种方法可以用于评估线
粒体功能的改变，例如线粒体膜电位的下降可能表示线粒体功能异常
或氧化应激的发生。
因此，JC1线粒体膜电位流式是一种常用的实验方法，用于研究线粒体的生物学功能和相关疾病。
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JC-1线粒体膜电位荧光探针
货号：J8030
CAS：3520-43-2
化学名：CBIC2(3)，5,5’,6,6’-Tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide 结构式：
分子式：C 25H 27Cl 4IN 4
分子量：652.23
性质：
1.外观：红色粉末
2.纯度：≥95%（HPL C）
3.产品描述：
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm 的理想荧光探针。
可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。
在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，可以产生绿色荧光。
这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。
常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1单体的最大激发波长为514nm，最大发射波长为529nm；JC-1聚合物的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。
实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
JC-1用于检测细胞的线粒体膜电位时常用的浓度范围为1～20µg/mL，对于很多细胞适宜采用的JC-1浓度为10µg/mL。
储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。
注意事项：1)如果一次使用量较小，需把每管再适当进行分装，尽量避免反复冻融。
2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。