急性髓性白血病免疫球蛋白重链重因和T细胞受体γ基因重排的检测及意义
MLL-AF6融合基因阳性急性髓系白血病的临床特征及预后

$%I 融合基因阳性急性髓系白血病的
临床特征及预后
张梅香" 史文芝. 刘建新" 王春键" 李!燕" 王!蔚" 江!滨"!
$%资料与方法
$($!研究对象 .#"/ 年 & 月至 .#"$ 年 $ 月北京大学国际医院
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白血病流式报告解读

白血病流式报告解读白血病是一种由于造血系统恶性克隆增生导致的恶性疾病,其发病率逐年上升。
流式细胞术是一项常用的检测手段,能够对白血病患者的血液样本进行细胞分析,并提供重要的诊断和治疗指导信息。
根据白血病流式报告,我们可以看到以下几个关键指标。
1. 免疫表型分析免疫表型分析是流式细胞术最重要的应用之一。
通过检测细胞膜上的特定免疫标记物,可以确定细胞的类型和分布。
在白血病患者中,免疫表型分析可以帮助鉴别不同的细胞系,如淋巴细胞白血病和骨髓细胞白血病。
2. 异常细胞群分析通过流式细胞术,我们可以分析样本中的异常细胞群。
在白血病患者中,异常细胞群的存在可以提供重要的诊断线索。
例如,在急性淋巴细胞白血病中,常见的异常细胞群为早幼B细胞和早幼T细胞。
而在急性髓细胞白血病中,异常细胞群则包括早幼髓细胞和原始髓细胞。
3. 异常免疫表型分析流式细胞术还可以通过检测细胞的免疫表型异常来帮助白血病的诊断和分类。
例如,在B淋巴细胞慢性淋巴细胞白血病中,CD5和CD23的共表达异常是其诊断的关键特征之一。
而在骨髓异常增生综合征中,CD34和CD117的共表达异常则是其诊断的重要标志。
4. 异常细胞比例分析流式细胞术可以通过测定样本中异常细胞的比例来评估疾病的严重程度。
在白血病患者中,异常细胞比例的增加通常与疾病进展和预后不良相关。
因此,通过流式细胞术的异常细胞比例分析,可以提供白血病患者的预后评估和治疗指导。
5. 微小残留病灶检测流式细胞术还可以用于微小残留病灶的检测。
在白血病患者接受治疗后,流式细胞术可以检测微小残留病灶的存在,从而评估治疗的疗效和预后。
通过流式细胞术的微小残留病灶检测,可以及早发现复发风险,采取相应的治疗措施。
白血病流式报告的解读可以通过免疫表型分析、异常细胞群分析、异常免疫表型分析、异常细胞比例分析和微小残留病灶检测等指标来进行。
这些指标不仅可以帮助白血病的诊断和分类,还可以评估疾病的严重程度、预后和治疗效果。
急性白血病的分型-精品医学课件

CD117。 ④巨和核系:CD41、CD42。 ⑤ RBC系:CD36、血型糖蛋白A、H。
⑥造血干祖C:CD34、CD90、CD38、Lin。
③伴t(1;19)的儿童型ALL预后较差。 ④伴 t(1;22)儿童型AML预后很差。
缺陷:
①报结果时间长、代价高。 ②分裂相少、造成分析困难。 ③不够特异,往往几种AL同时出现一种染色体异常。
大约40~70%的MDS患者有克隆性染色体畸变,其 对疾病的预后有着重要的价值。MDS国际预后计分系 统(IPSS)将核型和细胞减少的细胞系列的数目、原 始细胞百分比一起列为MDS预后的主要危险因素。根 据核型可将MDS分为3种不同的预后类型:①低危:正 常核型、-Y、5q-或20q-;②高危:-7/7q-、复杂异常 或核型演变;③中危:其它异常,如+8等。
融合基因
TTG1-TCR TAL1-TCR MYC-TCR MLL-AF4 BCR-ABL BCR-ABL BCR-ABL E2A-PBX1 TEL-AML1 MLL-ENL MYC-IgH MYC-Ig MYC-Ig
AML常见染色体移位及融合基因
FAB
核型
融合基因
M1
t(9;22)(q34;q11)
AML 遗 传 学 分 型
分 型
ALL
意义
1、克隆性染色体异常的检出有助于急性白血病 的诊断和分型
2、染色体异常可作为监测病情缓解或复发的重 要指标,最初核型异常完全消失提示病情缓解, 而重新出现则预示复发。
3、性染色体标志可用来验证异基因骨髓移植成 功与否或确定白血病的复发及其来源。
MRD检测在急性白血病分层治疗中的意义解读

加速/急变期
推荐采用第二代TKI尼洛替尼治疗
NCCN最新版治疗指南推荐
对于伊马替尼400mg/d初始治疗患者,出现以下事件 推荐患者接受尼洛替尼治疗:
• 3个月未达到血液学反应或者血液学复发,
• 6 个月未达到任何CyR,
• 12个月未达到PCyR或者细胞遗传学复发, • 18个月未达到CCyR或者细胞遗传学复发,
北京大学人民医院 北京大学血液病研究所
微量残留病检测在急性白血病 分层治疗中的意义
Minimal Residual Disease (MRD)
MRD:The leukemic population undectable by morpglogic methods has been defined as MRD
T Flohr,Leukemia (2008) 22, 771–782
AIEOP-BFM ALL 2000化疗流程
MRD指导的分层标准
HR:PPR;NR,BCR/ABL,MLL/AF4
QR-PCR 检测MRD流程
Molecular response to treatment redefines all prognostic factors in children and adolescents with B-cell precursor acute Lymphoblastic leukemia:results in 3184 patients of the AIEOP-BFM ALL 2000 study
P
30/60
30000ul +/D14/D33 0.05%
P
0.05
0.05 N N 0.01
P
N
N 0.04 N 0.02
淋巴细胞发育及基因重排

阳性选择(获得MHC限制性)
阴性选择(获得自身耐受) 成熟的单阳性细胞(CD4T和CD8T细胞)
三个重要事件及其意义
1. 功能性TCR形成(基因重排)
在双阴性晚期β链完成重排并开始表达,与替代α链 (pre T cell α)形成替代TCR (pTα:β); 在双阳性期α链完成重排并开始表达,与β链形成 TCRαβ
2. 基因重排(rearrangement)
V/D/J/C基因群中各选择一个片段,组成单个Ig或 TCR的编码基因,再转录翻译成功能性Ig或TCR 。
BCR基因重排:胚系B细胞
VH基因(D-J V-DJ)重排 轻链基因(V/J)重排 转录为初始RNA RNA剪接 VDJ或VJ基因与C基因连接,形成mRNA 翻译为重链和轻链 以二硫键组合成Ig
一、BCR和TCR基因结构及其重排
1. 基因结构 TCR: β链:V-D-J-C
52 2 13
α 链:V-J-C
70 61
TCR: β链和δ链与BCR重链相似 α链和γ链与BCR轻链相似
• TCR胚系基因分别由定位于不同染色体的 多个不连续基因片段组成。 • 每一个TCR分别由V,D,J,C(或V,J, C)基因片段群中各选择一个基因片段组合 而成。由于基因片段数量众多,选择的随 机性和排列组合的多样性,形成TCR的多 样性。
阳性选择(获得MHC限制性)
阴性选择(获得自身耐受) 成熟的单阳性细胞(CD4T和CD8T细胞)
2. 阳性选择
在胸腺皮质中, DP细胞TCR与胸腺皮质上皮细胞表 面的MHCI/II类分子以适当亲和力结合,分化为 CD8/CD4的SP细胞;不能结合或高亲和力结合的DP 细胞发生凋亡。
流式细胞术在微小残留(MRD)检测

4、流式细胞术:根据白血病细胞表面或细胞 内免疫分子来区别并计数白血病细胞。可以 直接计数白血病细胞(PCR是根据扩增产物 的量进行推算),并可区分活细胞或将要凋 亡 的 细 胞 及 碎 片 。 敏 感 性 10-4 , 较 PCR 低 (但达到临床要求);白血病进展及治疗后,
免疫表型可能发生改变,造成假阴性。目前 仍是最简单、直接、精确、使用的方法。
四、以ALL为例流式细胞术在MRD检 测中的具体应用
1、原理
2、指标的选择:理想的指标是只在白血病 细胞表达而不在正常细胞表达的抗原。尚未 发现。但据白血病细胞抗原表达特点(跨系、 时相紊乱、量的异常),及正常早期B细胞对 糖皮质激素十分敏感等特点,仍能找出相应 指标。常为几种抗原的组合。如 CD34+/CD10+/CD19+
流式细胞术在微小残留(MRD) 检测中的应用
一、MRD概念
指白血病患者经诱导治疗达临床缓解后,体 内残存的少量白血病细胞。此时白血病细胞 仍可达1010,是复发的根源。研究表明当体 内白血病细胞小于106时,肌体通过自身免疫 机制可将之清除。即MRD检测敏感性应达到 10-4,才有意义。
二、MRD检测意义
TDT/CD34/CD10/CD19
65.71%
CD38/CD34CD10/CD19
45.71%
CD58/CD34/CD10/CD19
61.43%
CD45/CD34/CD10/CD19
44.29%
CD66c/CD34/CD10/CD19 32.86%
CD22/CD34/CD10/CD19 合计
பைடு நூலகம்
12.86% 91.43%
TdT/CD10/CD34/CD19抗体组合
外周血T细胞受体删除环(TRECs)定量测定在评估骨髓移植术后免疫重建中的应用概况及进展
外周血T细胞受体删除环(TRECs)定量测定在评估骨髓移植术后免疫重建中的应用概况及进展武小亮;韩娟;王靖;卢林纲【摘要】骨髓移植成功的关键在于移植后免疫系统的重建状况,特别是T细胞数量及功能的重建.T细胞受体删除环(TRECs)作为胸腺近期输出naive T细胞含量的标志,在细胞中十分稳定,可作为评价胸腺近期的输出功能及T细胞免疫重建状况的指标.鉴于TRECs对评价骨髓移植术后免疫重建状况具有重要现实意义,该文就TRECs的定量检测及其在评价骨髓移植后免疫重建状况中的应用概况及进展进行综述.【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2019(034)004【总页数】6页(P1-5,27)【关键词】T细胞受体删除环(TRECs);骨髓移植;免疫重建【作者】武小亮;韩娟;王靖;卢林纲【作者单位】农业农村部食物与营养发展研究所评价研究室,北京 100081;农业农村部食物与营养发展研究所评价研究室,北京 100081;农业农村部食物与营养发展研究所评价研究室,北京 100081;农业农村部食物与营养发展研究所评价研究室,北京 100081【正文语种】中文【中图分类】R457.7;R392.4胸腺是人体重要的中枢免疫器官,是T淋巴细胞生长、发育和成熟的重要场所[1]。
来自骨髓中的前T细胞在胸腺中发育形成naive T细胞,随血流运输至外周血发挥免疫作用。
胸腺naive T细胞的输出能力,一定程度上反映了机体的免疫水平。
研究表明,胸腺输出功能与年龄呈现明显的相关性,随着年龄的增长胸腺逐渐萎缩,胸腺输出功能逐渐降低,但还是能够维持最基本的输出naive T细胞的能力并对机体发挥免疫作用[2-3]。
除年龄增长所引起胸腺萎缩及输出功能下降外,HIV,CHB,AIDs,白血病等病毒和疾病,临床中的化疗、放疗、骨髓移植、实体器官移植、免疫治疗,或长期接触有害化学物质如苯等,均会引起胸腺输出功能降低[4-6]。
SET-NUP214融合基因阳性儿童白血病淋巴瘤IgTR基因重排模式及其临床特征
igtr基因重排模式为探讨肿瘤细胞的分化成熟情况我们分析了3患儿的白血病淋巴瘤细胞的igtr基因重排模式包括ighigkigltrdtrgtrb基因的完全重排以及ightrdtrb基因的不完全重排结果见可以看出3例患儿的白血病淋巴瘤细胞都具有tr基因克隆性重排其中患儿1和患儿3都检出trdtrgtrb基因重排患儿2只有trdtrb基因重排这与3例患儿的t细胞免疫表型特setnup214融合基因阳性儿童白血病淋巴瘤igtr基因重排模式及其临床特征figureheteroduplexanalysistcrgenerearrangementsthreemajorrearrangementsindicated
隆性重排,患儿 1 和患儿 3 检出 TRD、TRG 、TRB 基因重排; 患儿 2 只有 TRD、TRB 基因重排,还检出 IgH 以及 IgK
Kde 重排。3 例患儿共检出 6 个 TRB 基因重排,均为不完全重排; TRD、TRG 基因重排中,85. 7% ( 6 /7) 为完全重排, 14. 3% ( 1 /7) 为不完全重排。结论: SET-NUP214 + 白血病 / 淋巴瘤细胞发生恶性转化的阶段可能在 TRG 、TRD 基因
J Exp Hematol 2011; 19( 6) : 1362 - 1367
急性白血病MICM分型
急性白血病MICM分型:白血病MICM分型,是指形态学(morphology)、免疫学(immunology)、细胞遗传学(cytogenetics)、分子特征(molecular)分型形态学分型(FAB)分型1.急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)或急性髓系白血病(AML):M1型:急性原粒细胞性白血病未分化型,骨髓中原粒细胞≥90%,POX染色阳性率>3%。
M2型:急性原粒细胞性白血病部分分化型,以原幼粒细胞为主,早幼粒细胞>3%,中、晚幼及成熟粒细胞>10%为M2a型。
M3型:急怀多颗粒早幼粒细胞性白血病,以颗粒增多的异常早幼粒细胞为主,>30%。
其又分为粗颗粒型(M3a)和细颗粒型(M3b)。
M4型:急性粒-单核细胞性白病,粒系及单核细胞均增生。
M5型:急性单核细胞性白血病,M5a为原单核细胞型,原单核>80%;M5b为部分分化型,以幼单核细胞为主,原单核<80%。
M6型:急性红白血病,原幼红细胞≥50%,非红系细胞中原始细胞>30%。
M7型:急性巨核细胞性白血病,原巨核细胞>30%,并经电镜、血小板过氧化物酶检查、血小板免疫标志物或血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa检查等证实。
M0型:近年确定,为髓系最早阶段的白血病,形态学上极少髓系分化,不能鉴别,必须用免疫标志物确定。
2.急性淋巴细胞性白血病(ALL):L1:以小原淋巴细胞为主,大小较一致。
L2:以大原淋巴细胞为主,大小不一致。
L3:以大原淋巴细胞为主,胞质内含大量空泡。
3.急性白血病的主要化学染色特点:免疫学分型-基本免疫表型1.急性非淋巴细胞白血病(ANLL)FAB分型与免疫标志:2.急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)FAB分型与免疫学标志:3.急性非T淋巴细胞白血病(non-T-ALL)FAB分型与免疫学标志:4. 混合细胞性白血病:有极少部分病人白血病细胞为淋巴系和髓系细胞双克隆或同一细胞系免疫标志双表型,即混合细胞性白血病。
此型白血病用形态方法极难诊断,必须结合多参数流式细胞术分析才能确诊。
T淋巴细胞亚群检测临床意义
T淋巴细胞亚群检测临床意义展开全文一、淋巴细胞亚群分析检测淋巴细胞亚群可以了解患者机体的免疫功能是否处于平衡状态。
某种细胞亚群所占百分比过高或过低,都提示存在免疫功能的紊乱。
主要用于了解恶性肿瘤、遗传性缺陷病、重症病毒感染、自身免疫性疾病患者机体的免疫功能。
二、 HLA-B27检测HLA-B27是HLA-B位点上的一个重要等位原因,它与许多疾病呈强相关,尤其是强直性脊柱炎,是一种多发于青壮年男性(男女比例约3:1)并以中轴关节慢性炎症为主的原因不明的自身免疫性疾病。
临床表现以腰部疼痛、僵直不适为最常见症状。
利用流式细胞仪HLA-B27/CD3双标记来检测T 细胞上HLA-B27表达情况。
三、T细胞绝对值计数及T细胞亚群检测1.总T细胞(CD3 细胞)(1)增高:提示体内的T细胞免疫功能增强,见于临床某些自身免疫性疾病(如SLE)、重症肌无力、慢性活动性肝炎、甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、器官移植排斥反应、T细胞白血病等。
(2)降低:提示体内的T细胞免疫功能减低,见于某些白血病菌、应用免疫抑制药、放疗过程中、先天性细胞免疫缺陷、艾滋病、多发性骨髓瘤、传染性单核细胞增多症,以及过劳等造成机体免疫功能处于相对较低的其他一些情况。
2、T辅助细胞(CD3 CD4 细胞)(1)增高:主要见于临床各种细菌性感染性疾病(2)降低:主要见于临床各种病毒性感染性疾病,以HIV感染时减少最为明显。
也见于γ免疫球蛋白缺乏症、胸腺发育不良、严重联合免疫缺陷病、严重创伤、大手术等。
3、T抑制细胞(CD3 CD8 细胞)(1)增高:提示体内存在病毒或胞内寄生菌感染,主要见于HBV、CMV、EB等病毒及结核杆菌感染等。
(2)降低:见于γ免疫球蛋白缺乏症、胸腺发育不良、严重联合免疫缺陷病、糖尿病等。
4、CD3 CD4 /CD3 CD8 细胞比值(1)增高:见于某些自身免疫性疾病,如SLE、多发性硬化、器官移植排斥反应等。
(2)降低:见于AIDS、再障、某些白血病、传单、免疫缺陷综合征、某些病毒感染、恶性肿瘤、结核病等。
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4 06 ・
山西 医科大学学 报 ( S ax Me ) Q 生 Q J hni d i Q至 u v 旦:
(
文 章 编 号 : 10 —6 1 (0 2 0 0 7 6 12 0 )5—0 0 46—0 4
急 性 髓 性 白血 病 免疫 球 蛋 白重 链 重 因和 T细 胞 受 体 基 因 重 排 的 检 测
中图分类号 : R 3 .1 7 3 7 文献标 识码 : A
Sini c nc fdee ig hec o lr a r ng m e fi m u g o ln he v h n e nd c l r c pt rY g n n a int t a g f a e o tctn t lna e r a e nto m i no l bu i a yc ai g nea T l e e o e e i p te s wih - e
r e or ,a i e c e pt s ntg n,T —e ,ga ma det cl m — la;
p l— oy
m ea e c i e cin r s han r to a
目前认 为 , 多 能 造 血 干 细 胞 向淋 巴细 胞 系 定 当 向分化 时 可 发 生 免 疫 球 蛋 白重 链 (g 、 细 胞 受 IH) T 体 ( C 基 因特 异性重 排 。 因此 ,g 和 T R基 因 T R) IH C 克隆 性 重 排 常 被 认 为是 淋 巴 细 胞 的 克 隆 标 志。 但 是, 近年 来 的研 究 表 明 , 性 髓 性 白血 病 ( 急 AML) 细 胞亦可 出现 IH 和 TC 基 因 的 克 隆性 重 排 , 其 g R 但 发生率 及 相关 临 床 意 义 仍有 待 进 一 步 研 究 。为 此 , 本文 采 集 5 1例 AML患者 骨髓 , 用 P R 方法 检测 利 C
因此从形态学角度细胞仍以髓系特点为主greaves等1对他们及其他研究小组发现的淋髓两系中系列失真现象进行总结认勾在排除技术因素后那些确实具有系列失真现象的标本不是因为细胞内基因发生r错排而是因为正常多能干细胞中本身存在着短暂的基因表达混杂现象prmlscu
维普资讯
发 生 IH 基 因 重 排 , 1例 ( 1 5 % ) 现 T R g 1 2 .7 出 C 7基 因 重 排 。 由 此 可 见 , ML 中 确 实 存 在 系 列 失 真 现 象 , 有 IH 及 T R A 可 g C 7重 排发 生。
关 键 词 : 白血 病 , 红 细 胞 , 幼 急性 ; 免 疫 球 蛋 白类 , 链 ; 受 体 , 原 , 细 胞 , —6 聚 合 酶 链 反 应 重 抗 T 7 ;
ra r n m e n 51 a int t c t y li e e i The r uts o e ha gH e e r a ge e a ou n 9 pai n s e r a ge nti p te s wih a u em eo d luk m a. e l h w d t tI s g ne ra r n m ntw s f nd i te t a d TCR7 e e r a ge e n 11 p te s I u g t h tt e e wilb he l a n ieiy no n y I H e e b lo TCR7 n g ne ra r n m nti a int . ts g e s t a h r l e t i gei fd l , s ne t to l g g n utas
及意 义
许 莲 蓉 , 乔振 华, 苏丽萍 , 马梁 明, 王 宏伟 , 张 丽, 朱 镭 ( 山西医科大学第二临床医学院血液内
科, 太 原 000 ) 3 0 1
摘 要 : 为 检 测 急性 髓 性 自 血 病 ( AML 患者 免 疫 球 蛋 白重 链 基 因 (g  ̄ T 细 胞 受 体 7基 因 ( C 7 克 隆性 重 排 情 况 , 初 步 ) IH) TR ) 并 探讨其意 义, 用聚 合酶链反应 (C 检 测 5 采 P R) 1例 A L 患者 IH 及 T R7基 因 重 排 。 结 果 表 明 , 1 患 者 中 9例 ( 7 6 % ) M g C 5例 1.5
c e m y l d lu m i ut e oi e ke a
XU inr n , QI Z e — u 。S L —ig ta De t fHa maoo y,S cn lnc lMe c lC l g ,S a xi d ia L a —o g AO h nh a U ipn ,e l( p e tlg o eo d C i ia di o l e h n a e Me clU- n vr i iest T iu n0 0 0 y, ay a 3 0 1,C ia) hn ・ Ab ta t Toi vsiaet ec n l era g me t fmmu o lb l e v h i I H)a d T elrc po TC sr c : et t h l a a rn e n n g o r oi n go ui h a yc an(g n n cl ee tr( R)7g n a ee i p— s n te t t c t e i e k mi n h i inf a c ,p lmeaec an ra t n P inswih au emy l dlu e aa d ters ii n e oy rs h i eci ( CR)wa sd t td g a d TCR7 g n o g c o sue Osu y IH n ee s
g n e r ng m e t i e e rara e n , n AM L .
Ke r s: y wo d
lu mi 。e y hr bls i,a ut e ke a r t o a tc c e;
Байду номын сангаас
i m u ogo li s e v — han; m n lbu n ,h a y c i