刺五加皂苷B和皂苷E抑制巨噬细胞活化作用的实验研究

２ 实 验 方 法
种单体 成分对细胞 因子 、 炎症介质 的调节作 用 ， 为 后 期 开 发
２ ． １ Ｔ Ｈ Ｐ 一 １细 胞 诱 导 及 实验 分 组 用 含 １ ０ ％胎 牛 血 清 的
基 金项 目： 国 家 自然 科 学基 金 （ Ｎ Ｓ Ｆ Ｃ） （ ８ １ ２ ０ ２ ３ ４ ８ ） ； 江 苏省 自然 科 学 基 金 （ Ｂ Ｋ ２ ０ １ ２ １ ７ １ ） ； 江 苏 省 高 校 自然 科 学研 究 项 目
提供实验依据。
１ 实验 材 料
刺 五 加 皂 苷 Ｂ及 刺 五 加 皂 苷 Ｅ标 准 品 （ 纯 度 大 于 ９ ８ ． ０ ％，购 于 成 都 瑞 芬 思生 物 科 技 有 限 公 司 ） ； ９ ６孔 细胞 培 养 板 （ Ｃ ｏ ｍｉ ｎ ｇ ， Ｕ Ｓ Ａ） ；胎 牛血 清 （ Ｂ Ｉ Ｏ Ｃ ＨＲ Ｏ Ｍ， Ｇ ｅ ｒ ｍａ ｎ ） ； Ｒ Ｐ ＭＩ １ ６ ４ ０培 养 基 （ Ｇ Ｉ Ｂ Ｃ Ｏ， Ｕ Ｓ Ａ） 。细 胞 ： Ｔ Ｈ Ｐ － １ （ 人 单 核 细胞 系 ） 由 。 ｊ Leabharlann 誊 誊 蓦誊 誊 要 誊
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刺五加皂苷 Ｂ和皂苷 Ｅ抑制 巨噬细胞活化作用的 实 验 研 究
何 春燕 陈晓辉 秦 陈浩 展 富琴 顾爱 萍 朱 雪明
（ 苏州大 学 附属 第二 医院 ， 江苏 苏州 ２ １ ５ ０ ０ ４ ）
摘 要 目的 ： 通过 体 外培 养 的 巨噬 细 胞 研 究 刺 五加 皂苷 Ｂ和 皂 苷 Ｅ对 巨噬 细胞 活化 的抑 制 作 用 。方 法 ： 将 经 弗波 酸 酯 诱 导 人 单 核 细胞 系生成 的 巨噬 细胞 ， 分 别 加 入 不 同 浓度 的刺 五 加 皂 苷 Ｂ和 Ｅ， 另设 不加 细胞 孔 为 空 白组 ， 加 入 细 胞
５ 参考 文献
［ １ ］ 田道 法． 中西 医结合耳鼻 咽喉科 学． 北京 ： 中 国中 医药出版社 ，
２ ０ ０ ８： ９ ８
［ ５ ］ 朱 玉 琴 ．过 敏 性 鼻 炎 ：过 敏 性 鼻 炎 当 责之 肺 脾 肾．中 医 杂 志 ，
与 巨噬 细胞 共培 养 ２ ｈ后 即 可 明 显抑 制 Ｔ Ｎ Ｆ — Ｏ ｔ 的分泌， 且 这 种 抑 制作 用 随 时 间延 长 而 增 强 。 结论 ： 刺 五加 皂 苷 Ｂ和 皂 苷 Ｅ 对 巨噬 细胞 的 活化 有 明显 的 抑 制 作 用 ， 有望开发成为抗炎、 抗 感 染及 治 疗 自身免 疫 性 疾 病 的 新 型 小分 子 药物 。
苏 州大学血 液研究所 惠赠 。试剂 ： Ｐ Ｍ Ａ （ 弗 波酸酯 ， Ｓ ｉ ｇ ｍ ａ ，
ＵＳ Ａ） ， Ｍ１ 丫 ｒ （ 噻唑蓝 ， Ｓ ｉ ｇ ｍａ ， ＵＳ Ａ） ， ＤＭＳ Ｏ （ 二 甲基亚砜 ，
抑 制 巨 噬 细 胞 活 化 的作 用 。 刺 五 加皂 苷 Ｂ 和皂 苷 Ｅ是 刺 五 加 中 重 要 的 有 效 单 体 成 分 ， 但 是 目前 对 该 两 种 单 体 成 分 抑 制
巨 噬 细 胞 活 化作 用 的研 究 还 未 见 文 献 报 道 。本 研 究 对 刺 五 加 皂 苷 Ｂ和 皂 苷 Ｅ抑 制 巨 噬细 胞 活 化 的 作 用 进 行 研 究 ， 检 测 两
Ｓ ｉ ｇ ｍ ａ ， Ｕ Ｓ Ａ） ， Ｔ ｈ １ ／ ｒ ｈ ２细 胞 因 子 检 测 试 剂 盒 （ Ｂ Ｄ， Ｕ Ｓ Ａ） 。仪 器： 流式 细 胞 仪 （ Ｆ Ａ Ｃ Ｓ ｃ ａ ｌ ｉ ｂ ｕ ｒ ， Ｂ Ｄ） ， 酶标仪 （ Ｔ Ｅ Ｃ Ａ Ｎ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ） 。
（ １ ２ Ｋ Ｊ Ｄ３１ ０ ０ ０ ６ ）
态 反应 进程 的作用 ， 此 可 能 为针 刺 治疗 变 应性 鼻 炎 的 作用 机 制
（ ３ ）： ２ ２ ２
之一． 但针 刺治 疗 变应 性 鼻 炎远 期 疗 效是 否 比西药 好 还需 进 一
步 做大 样本 和 延 长观 察 治疗 时 间 的实验 研究 。
不 加 刺 五 加 皂 苷 为对 照组 ． 采用 Ｍ ｒ Ｉ Ｔ ｒ 方 法 检 测 巨噬 细 胞 增 殖 情 况 ， 用 流 式 细胞 术检 测 细 胞 培 养 上 清 中 Ｔ ｈ ｌ ， ｒ ｈ ２细 胞 因
子 含 量 的 变化 。 结 果 ： 刺 五 加 皂 苷 Ｂ 和 皂苷 Ｅ对 巨噬 细 胞 无 明 显 毒 性 作 用 ． 对细胞增殖没有明显影响 ． 但 其 在 低 浓 度 时 （ ２ ０ Ｗ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ） 即可 明 显 抑 制 巨噬 细胞 分 泌 Ｔ Ｎ Ｆ — Ｏ ｔ 和 Ｉ Ｌ 一 ６ ， 且 这 种 抑 制 作 用 呈现 剂 量依 赖 性 。 此外 。 刺 五 加 皂 苷 Ｂ和 皂苷 Ｅ
会分泌大量的 Ｔ Ｎ Ｆ 一 、 Ｉ Ｌ 一 ６等炎 性 细 胞 因子 ，最 终 会 引 起 局 部 组 织 的 炎 症 反 应 。有 文 献 报 道 刺 五 加 提 取 物 具 有 抗 肿 瘤 、 调节免 疫功能 、 抗炎镇 痛 、 降血糖及延 缓衰老 等药理作用【 １ ｌ 。 本 课 题 组 前 期 在 活 性 筛 选 中发 现 ． 刺 五 加 提 取 物 具 有 一 定 的
关 键 词 巨噬 细胞 刺 五 加 提 取 物 细 胞 因 子 实验 研 究
中图分类号
Ｒ ２ ８ ５ ． ５
文献标识码
Ａ
文 章编 号 １ ６ ７ ２ — ３ ９ ７ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） １ ２ — ０ ０ ７ １ － ０ ２
巨 噬 细 胞 是 天 然 免 疫 系统 重 要 的效 应 细胞 之 一 ． 具 有 免 疫防御 、 免疫 监 视 、 免 疫 调 节 以及 抗 原 呈 递 等 多种 免 疫 功 能 ， 在 机 体 的 免 疫 系 统 中起 重 要 作 用 。但 是 ， 巨噬 细 胞 过 度 活 化