转基因品系 转化事件 目的基因 标记基因 终止子 启动子 (超级大全)
基因工程知识点总结

基因工程总结一.概念(1)原理:。
(2)优点:与杂交育种相比,;与诱变育种相比,。
(3)基因工程成功的原因:①成功拼接的原因:②成功表达的原因:二.基本工具1、两种酶:(1):作用特点:。
(2):E ·coli DNA 连接酶与T 4 DNA 连接酶的区别:2、一种运载体(1)条件:①;②;③具有特殊的标记基因(作用:)(2)种类:最常用;其他动植物病毒、三、操作程序(1):方法:①:不知道脱氧核苷酸序列②:已知目的基因两端一小段序列,便于③利用化学方法人工合成:知道全部序列,且基因比较小。
这种方法不需要模板。
(2)——基因工程的核心基因表达载体的组成:(3)生物种类常用方法受体细胞将目的基因插入到Ti 植物动物受精卵将含有目的基因的表+微生物原核细胞Ca 2处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA 分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA 分子质粒的T-DNA 上→农达载体提纯→取卵转化过程杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得色体的DNA 上→表达具有新性状的动物(4)①目的基因是否插入到转基因生物的染色体DNA 上:②是否转录:③是否翻译:④个体水平鉴定:抗虫、抗病接种实验易错点说明:1、切割目的基因和运载体的要求:用限制酶。
目的是:。
同种的含义是:同一种或相同两种,即单酶切或双酶切。
选择双酶切的原因是。
2、工具≠工具酶;运载体≠质粒。
3、启动子≠起始密码子,终止子≠终止密码子起始密码子和终止密码子位于mRNA上,分别控制翻译过程的启动和终止。
启动子:。
终止子:一段有特殊结构的DNA短片段,位于基因的尾端,作用是使转录过程停止。
4、基因探针的要求:①单链②有③5、农杆菌转化法中的“2”次导入:第一次:将含有目的基因的T—DNA的质粒导入农杆菌;第二次(非人工操作):将含有目的基因的T—DNA导入受体细胞并整合到植物细胞的染色体DNA上。
6、转化:。
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)

高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)XXX《基因工程》练题题号得分一一、单选题(本大题共20小题,共20.0分)1.如图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次为()二总分A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶C.限制酶、DNA连接酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶D.DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是()A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
以下有关基因工程的说法错误的是()A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B.任何基因表达载体的构建都是一样的,没有差别C.图中启动子和终止子分歧与起始暗码子和终止暗码子D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因,用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者,而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限定酶的降解。
以下在动物体内发生的过程当中,与上述细菌行为相似的是()A.巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B.T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C.组织液中抗体与抗原的特异性结合D.疫苗诱导机体发生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示,最好应选用下列哪种质粒作为载体()XXX.C.D.6.下图是研究人员使用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
以下相关叙述精确的是()A.酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B.Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C.筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D.上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法,正确的是()A.切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B.PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下,在试管中进入物质X和物质Z,可得到相应产物Y.下列叙述正确的是()A.若X是DNA,Y是RNA,则Z是逆转录酶B.若X是DNA,Y是mRNA,则Z是脱氧核苷酸C.若X是RNA,Y是DNA,则Z是限制性内切酶D.若X是mRNA,Y是核糖体上合成的大分子,则Z是氨基酸9.下图透露表现的是三种黏性末端,以下说法精确的是A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B.若甲中的G处发生突变,限制酶可能无法识别该切割位点C.乙中的酶切位点在A与G之间D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
高考生物《基因工程知识点》总汇

高考生物《基因工程知识点》总汇1、基因工程的先导是?艾弗里等人的工作证明了DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体2、不同生物的基因为什么可以连接在一起?因为所有生物的DNA基本结构是相同的3、真核生物的基因为什么可以在原核生物体内表达?(或者原核生物的基因为什么可以在真核生物体内表达?)所有生物共用一套密码子4、基因工程育种的原理是什么?具有什么优点?原理:基因重组优点:打破了生殖隔离,定向改造生物的性状5、与DNA有关的酶的比较6、特定的核苷酸序列,并在特定的位点上进行切割7、限制酶不切割自身DNA的原因是什么?原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
8、DNA连接酶可以连接什么样的末端?①同一种限制酶切割形成的相同的黏性末端②两种不同限制酶切割后形成的相同黏性末端③任意的两个平末端9、如何防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”?可用不同的限制酶分别处理含目的基因的DNA和载体,使目的基因两侧及载体上各自具有两个不同的黏性末端。
10、载体需具备的条件及其作用11、基因工程的基本操作步骤是哪四步?目的基因的获取;基因表达载体的构建;将目的基因导入受体细胞;目的基因的检测与鉴定12、目的基因的获取方法有哪些?三种方法都需要模板吗?①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③通过化学方法人工合成前两种需要模板,从基因文库中寻找目的基因时需要用DNA探针利用DNA分子杂交的方法找到目的基因;化学方法人工合成不需要模板,只要知道核苷酸序列就行,这是一个纯粹的化学反应13、CDNA文库和基因组文库的区别?cDNA是指以mRNA为模板,在逆转录酶的作用下形成的互补DNA。
以细胞的全部mRNA 逆转录合成的cDNA组成的重组克隆群体成为cDNA文库。
cDNA文库只包含表达的基因,并且逆转录得来的基因缺乏内含子和启动子、终止子等调控序列基因组文库指的是将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞,进行克隆得到的所有重组体内的基因组DNA片段的集合,它包含了该生物的所有基因。
第3章 基因工程-【必背知识】高二生物章节知识清单(人教版选择性必修3)(教师版)

新人教版生物学选择性必修3《生物技术与工程》知识梳理第三章基因工程第一节重组DNA技术的基本工具基因工程:指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。
从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫重组DNA技术。
一、分子手术刀—限制性内切核酸酶1.全称和简称全称:_限制性内切核酸酶_简称:__限制酶_2.来源:主要是从_原核生物__中分离纯化出来的3.作用:①能够识别_双链_DNA分子的某种_特定核苷酸序列。
①使_每一条_链中_特定部位_的_磷酸二酯键__断开。
4.作用部位:_磷酸二酯键__5.识别序列:大多数限制酶的识别序列由_6_个核苷酸组成,也有少数限制酶的识别序列由_4_个、_8_个或__其他数量_的核苷酸组成。
6.切割结果:DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式__黏性末端_和__平末端__。
(1)EcoR①限制酶切割EcoR①识别序列为GAATTCEcoR①切割部位为GA之间的磷酸二酯键(2)Sma①限制酶切割Sma①识别序列为CCCGGGSma①切割部位为CG之间的磷酸二酯键二、分子缝合针—DNA连接酶1.功能:将__两个DNA片段连接起来_,恢复被限制酶切开的_磷酸二酯键__。
2.种类E·coli DNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体特点只缝合黏性末端缝合黏性末端平末端作用恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键3.比较与名称作用部位作用底物作用结果限制酶磷酸二酯键DNA将DNA切成两个片段DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段将两个DNA片段连接为一个DNA分子DNA聚合酶或热稳定DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端DNA(水解)酶磷酸二酯键DNA将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸解旋酶碱基对之间的氢键DNA将双链DNA分子局部解旋为单链,形成两条长链RNA聚合酶磷酸二酯键核糖核苷酸将单个核糖核苷酸依次连接到单链末端三、分子运输车——载体1.作用:携带外源DNA片段进入受体细胞。
基因工程的操作程序

内含子
外显子
能够编码蛋白质的序列叫做外显子
不能够编码蛋白质的序列叫做内含子
启动子
终止子
编码区上游
编码区下游
内含子:
外显子:
真核细胞的 基因结构
编码区
非编码区
外显子:能编码蛋白质的序列 内含子:不能编码蛋白质的序列
:有调控作用的核苷酸序列, 包括位于编码区上游的RNA 聚合酶结合位点(启动子)。
启动子、终止子对于目的基因表达必不可少
目的基因不能单独进入受体细胞,必需以表达载体的方式携带进去。
注意
三将目的基因导入受体细胞
(一)转化:
(二)方法
将目的基因导入 植物细胞
将目的基因导入 动物细胞
将目的基因导入 微生物细胞
农杆菌转化法
基因枪法
花粉管通道法
——显微注射法
——感受态细胞
目的基因进入_________内,并且在 受体细胞内维持_____和_____的过程(1).基因(2).基因的构建方法
通过对受体菌的培养而储存基因 基因组的构建cDNA的构建-----反转录法: 以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需的基因。
目的基因的mRNA
单链DNA
1
2
3
6
5
4
双链DNA (目的基因)
① 概念:PCR全称为_______________,是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术
③条件:_______________________、 _______________、___________ 、 ___________.前提条件:
第3章 基因工程 期末复习知识点总结【新教材】人教版高中生物选择性必修三

第3章基因工程1、什么是基因工程:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。
2、基因工程的诞生(三个理论和三个技术):基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科基础上发展起来的,正是这些学科的基础理论和相关技术的发展催生了基因工程,具体有三大理论发现和三个技术突破。
1)理论基础:DNA是遗传物质;DNA分子的双螺旋结构和半保留复制;遗传密码的通用性和遗传信息传递的方式;2)技术基础:限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割;DNA连接酶的发现与DNA片段的连接;基因工程载体的构建与应用●理论上的三大发现⑴、发现了遗传物质——DNA1944年,艾弗里(O.T.Avery)的肺炎双球菌转化实验⑵、揭示了遗传物质的分子机制:DNA分子的双螺旋结构和半保留复制1953年,沃森(J.D.Watson)和克里克(F.Crick)的DNA双螺旋结构模型、半保留复制图,获1958年诺贝尔奖。
⑶、确立了遗传信息的传递方式:以密码形式传递1963年,美国尼伦伯格(M.W.Nirenberg)和马太(H.Matthaei)确立了遗传信息以密码形式传递,破译了编码氨基酸的遗传密码(3个核苷酸=1个密码子=1个aa)。
●技术上的三大突破⑴、世界上第一个重组DNA实验:实现不同来源DNA的体外重组1972年斯坦福大学化学家伯格(P.Berg)借助内切酶和连接酶将猴病毒SV40的DNA 和大肠杆菌λ噬菌体的DNA在试管中连接在了一起,第一次成功地实现了DNA的体外重组。
⑵、第一个基因克隆实验:重组DNA表达实验,是世界上第一个基因工程实验1973年美国斯坦福大学医学院遗传学家科恩(S.Cohen)将体外构建的含有四环素和卡那霉素抗性基因的重组质粒导入大肠杆菌,获得了具有双抗性的大肠杆菌转化子,成功完成了第一个基因克隆实验。
《基因工程的基本操作程序》 知识清单

《基因工程的基本操作程序》知识清单基因工程,这个听起来充满科技感的词汇,其实已经在我们的生活中发挥着越来越重要的作用。
从农业领域的转基因作物,到医疗领域的基因治疗,基因工程正在悄然改变着我们的世界。
那么,基因工程到底是如何实现的呢?下面让我们来详细了解一下基因工程的基本操作程序。
一、目的基因的获取目的基因是我们希望导入受体细胞并使其表达的特定基因。
获取目的基因的方法主要有以下几种:1、从基因文库中获取基因文库就像是一个基因的“图书馆”,里面存储着各种生物的基因。
我们可以根据目的基因的有关信息,如基因的核苷酸序列、基因的功能、在染色体上的位置等,从基因文库中筛选出我们需要的目的基因。
2、利用 PCR 技术扩增目的基因PCR 技术,全称为聚合酶链式反应,就像是一个基因的“复印机”。
如果我们已经知道了目的基因的核苷酸序列,就可以通过设计引物,利用 PCR 技术在体外大量扩增目的基因。
3、人工合成当目的基因较小,而且核苷酸序列已知时,我们可以通过化学方法直接人工合成目的基因。
二、基因表达载体的构建获取了目的基因后,接下来要构建基因表达载体。
这就像是给目的基因打造一个“交通工具”,让它能够顺利地进入受体细胞并发挥作用。
基因表达载体通常由目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分组成。
启动子是一段特殊的 DNA 序列,它就像是基因表达的“开关”,能够启动基因的转录。
终止子则是基因转录的“停止信号”,告诉 RNA 聚合酶在这里停止转录。
标记基因的作用是便于筛选和鉴定含有目的基因的受体细胞。
常见的标记基因有抗生素抗性基因等。
构建基因表达载体时,需要用相同的限制性内切酶分别切割目的基因和载体,然后用DNA 连接酶将它们连接起来,形成重组DNA 分子。
三、将目的基因导入受体细胞将构建好的基因表达载体导入受体细胞,这是基因工程的关键步骤之一。
不同的受体细胞需要采用不同的导入方法。
1、植物细胞(1)农杆菌转化法:农杆菌中的 Ti 质粒上的 TDNA 可以转移并整合到植物细胞的染色体 DNA 上。
农业转基因生物安全评价 申 报 书

来源 来源
……
转基因方法
转基因生物品系(株系)名称
试验 起止 时间 地点 规模
转基因生物 安全等级
试验 1 试验 2
……
单位名称
基因操作类型
12 转基因生物品系 (株系)个数
转基因生物产品安全等级
地址
3(选一)
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境内单位(事业 企业 中外合作 中外合资 外方独资 )
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单位性质 境外单位(企业 其它 )(选√)
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ终止子 供体生物
终止子
生 载 体1
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物
……
﹡标记基因 1 概
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况 ……
名称 启动子 名称 启动子
﹡报告基因 1 ﹡报告基因 2
名称 启动子 名称 启动子
……
供体生物 供体生物
供体生物 终止子 供体生物 终止子
供体生物 终止子 供体生物 终止子
调控序列 1 调控序列 2
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联系人姓名
联系方式
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注:1.申请农业转基因生物实验研究的,“受体生物品种(品系)名称、目的基因启动 子和终止子、载体、标记基因、报告基因、调控序列、转基因生物品系(株系)”栏目不用 填写。
2.如果“标记基因”或“报告基因”已删除,应在表中标注。 3.申请人指所申请项目的安全监管具体负责人。
注:1.进口转基因生物直接申请安全证书的,“试验概况”一栏不用填写。 2.申请人指所申请项目的安全监管具体负责人。
3
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MON 1445*** Mon santo MON MON MON MON 531*** 531 x 1445 15985 Mon santo Monsanto Monsanto
MON 15985 Monsanto x MON 1445 3006-21023/281-24236 LLCOTTON2 5 MON 88913 MON 88913 x MON 15985 10215 LLRIC E62 LLRIC E601 Bt 63 RUR H7-1
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24
GMO with this trait Trait "classement"
16
11
4
Bay er CropScience I n P roc es s Bay er CropScience I n P roc es s
MS8/RF 3/ Bayer Crop Scien ce ¦ MS8xRF3*** TOPAS 19/2 Bay er CropScience I n P roc es s T45 Falcon GS 40/90*** Bay er CropScience¦ Bayer Crop Scien ce In P roc es s
Event GMO
• Defining the set of targets applied for GMP screening with frequency table • 用于GMP筛选的转基因目标因子集合的频率表
Productor CRL methods p35S published? ¦ ¦ I n P roc es s I n P roc es s ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ I n P roc es s I n P roc es s ¦ I n P roc es s ¦ I n P roc es s ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ p35S tNOS t35S pNOS rice actin tOCS nptII X X X X X X X X X X X X CP4 EPSPS 5 mEPSPS pat bar barnase X Cry1Ab X X X X X X X X X X tNOS X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X t35S pNOS rice actin tOCS nptII CP4 EPSPS X X X X X X mEPSPS PAT/pat PAT/bar barnase Cry1Ab Monsanto Sy ngenta seeds/Nov artis Ciba-Geigy Monsanto Monsanto AgrEv o Monsanto Monsanto My cogen/Pioneer Monsanto Monsanto Bay er CropScience Bay er CropScience Bayer CropScience Bay er CropScience Bay er CropScience Bayer CropScience Monsanto Monsanto Monsanto
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• The seven most represented elements in this GMO universe are p35S, tNOS, PAT/pat, PAT/bar, CP4-EPSPS, CryIAB and t35S. • 所有的GMO检测中出现频率最高的7个因子:p35S, tNOS, PAT/pat, PAT/bar, CP4-EPSPS, CryIAB and t35S.
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Matrix approach in GMO analysis