内部专业知识培训

单克隆抗体用天然或重组抗原或 人工和成的多肽免疫小鼠。取出 淋巴细胞同肿瘤细胞融合，经培 养、筛选，从众多细胞中挑出单 个克隆的细胞。能产生抗体的克 隆细胞在小鼠腹腔生长，产生大 量腹水。经初步纯化后就可以得 到目的蛋白质抗体
多克隆抗体用天然或重组抗 原或人工和成的多肽免疫动 物后取血清。经过亲和纯化 的过程，就可以得到目的蛋 白质抗体
氨基端和羧基端的 修饰 共价修饰
亚基的聚合
水解断链
磷酸化 糖基化 羟基化 二硫键的形成
蛋白纯化
蛋白质分离纯 化的方法很多， 主要是根据蛋 白分子之间特 异性的差异， 如分子大小， 溶解度，电荷 等建立起来的。
分子大小
溶解度
电荷
吸附性质 对配体分子的 生物亲和力
透析、超滤、密度梯度离心、 凝胶过滤
等电点沉淀、盐析、有机 溶剂沉淀
功能基因组学是指在全基因组序列 测定的基础上,从整体基因水平研究 基因及其产物在不同时间、空间、 条件的结构与功能的关系及活动规 律的学科
定量检测蛋白质水平上的基因表达， 从而揭示生物学行为(，以及基因表 达调控的机制
基因是一段具特定功能的DNA序列；
基因是染色体的组成部分；
第二节 蛋白质
蛋白质结构 蛋白wenku.baidu.com合成修饰
α-螺旋
β折 叠
蛋白质三级结构（protein tertiary structure）
: 蛋白质分子处于它的天然 折叠状态的三维构象。三级 结构是在二级结构的基础上 进一步盘绕，折叠形成的。 三级结构主要是靠氨基酸侧 链之间的疏水相互作用，氢 键，范德华力和盐键维持的。
蛋白质四级结构（protein quaternary structure）
核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）
DNA：DNA贮存细胞 所有的遗传信息，是 物种保持进化和世代 繁衍的物质基础。主 要组成成分是腺嘌呤 脱氧核苷酸、鸟嘌呤 脱氧核苷酸、胞嘧啶 脱氧核苷酸和胸腺嘧 啶脱氧核苷酸
DNA和染色体的关系
染色体和DNA 的关系：DNA 是遗传物质， 染色体则是遗 传物质的主要 载体
z
第一章 专业知识 第二章 产品介绍 第三章 经销商须知
第一章 专业知识
核酸 染色体 中心法则
基因 基因组 功能基因组学
第一节 核酸
DNA RNA
核酸（nucleic acid）是重要的生物大 分子，它的构件分子是核苷酸
（nucleotide）。
脱氧核糖核酸 （deoxyribonucleic acid， DNA）
多亚基蛋白质的三维结构。 实际上是具有三级结构多 肽（亚基）以适当方式聚 合所呈现的三维结构。
蛋白合成修饰
不论是原核还是真核生物， 在细胞浆内合成的蛋白质 需定位于细胞特定的区域， 有些蛋白质合成后要分泌 到细胞外，这些蛋白质叫 做分必蛋白。真核生物细 胞结构更为复杂，而且有 多种不同的细胞器，它们 又具有各不相同的膜结构， 因此合成好的蛋白质还要 面临跨越不同的膜而到达 细胞器械，有些蛋白质在 翻译完成后还要经过多种 共价修饰，这个过程叫做 翻译后处理。
rRNA是组成核糖体的组分，是蛋 白质合成的工作场所。
染色体
染色体： 脱氧 核糖核酸 （DNA）以及 核蛋白在细胞 分裂时的呈现 形式。并有一 定的形态和结 构
中心法则
中心法则是 指遗传信息 从遗传物质 到蛋白质的 流动规律
基因
基因组
蛋白质组
基因
基因组
蛋白质组
基因通常又叫做顺反子(cistron)，是遗传的 基本单位，携带着某种蛋白质或RNA的遗 传信息。
抗体结构
抗体是能与抗原特异性结合并具有免疫活性 的球蛋白。它一般是由抗原刺激B细胞分化成 浆细胞后产生的。抗体分子具有结合部位(结 合簇)，能与对应的抗原决定簇结合。
抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条 重链(H链)；2条轻链(L链)。链间由二硫键和非 共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体 分子。整个抗体分子可分为恒定区和可变区 两部分。恒定区都具有相同的或几乎相同的 氨基酸序列。可变区位于"Y"的两臂末端。可 变区抗体结合抗原原的特异性。
多抗与单抗的特点及选用
重稳多沉产特异均复定抗淀生异性一性性和反二性强。。单应聚。，单单抗。体单敏一抗抗特多，抗感种的的性抗不是性单重稳比由能单高抗复定较于直一，中性较：与接地一，好差抗形针般每，，原成对不个而对多 抗抗 发多P价原原生体H抗结的交的变每合体某叉化化批容沉一反学敏都易淀决应结感不形物定。构，一成。簇而和对样网，多氨热。络所抗基不样以能酸稳沉用与顺定淀它抗序，，进原都提而行上相纯单血的同过抗清多，程只学种只中与反抗有易抗应原一变原时决种性结，定I，g亚合特簇而 多结类抗合。的，即稳所单定以抗性特是则异一较性种好较纯。差度，很较高易的引均起一交抗叉体反。应而。从不同动物，不同时期所得到的多抗， 各有不同的化学组成。多抗是多种种类和亚类Ig的混合物。
DNA的复制
RNA:存在于生物细胞以及部分病 毒、类病毒中的遗传信息载体 在
细胞中，根据结构功能的不同，
RNA主要分三类，即tRNA（转运 RNA）, rRNA（核糖体RNA）, mRNA（信使RNA）。mRNA是合 成蛋白质的模板，内容按照细胞
核中的DNA所转录；tRNA是 mRNA上碱基序列（即遗传密码 子）的识别者和氨基酸的转运者；
从化学本质上看，基因是一段具有特定功 能的连续的脱氧核糖核苷酸(DNA)序列， 是构成巨大遗传单位染色体的组成部分。
关于基因定义应掌握如下3个要点：
基因携带着蛋白质或RNA的信息，此即说 基因的编码产物是蛋白质或RNA；
基因组是指在特定机体中的的染色 体上完整的一套遗传物质,人类基因 组就是在人类细胞核内23对染色体 上的整套DNA
电泳、离子交换层析
羟基磷灰石层析、疏 水作用层析
亲和层析
抗体结构 单抗及多抗 抗体检测
第三节 抗体
单抗 多抗 多抗与单抗的特点及选用 ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) WB (Western Blot) IHC (immunocytochemistry) IF (immunofluorescence) ICC (immunocytochemistry) IP (immune precipitate)
蛋白质纯化
蛋白质一级结构（primary
structure）
蛋白质蛋结白构 结构
蛋白质的一级结构是指蛋白 质分子中氨基酸的排列顺序。 主要化学键是肽键和二硫键。 一级结构是蛋白质空间结构
和特异生物学功能的基础
蛋白质二级结构 （Secondary Structure）
在蛋白质分子中的局布区域内氨 基酸残基的有规则的排列。常见 的有二级结构有α-螺旋和β-折叠等。 二级结构是通过骨架上的羰基和 酰胺基团之间形成的氢键维持的。