酵母菌筛选研究,
耐高温酵母菌的筛选及特性研究
酵母菌是酒精和食品行业 的重要生产菌株 ，随着人类 能
稀释液涂布于麦芽汁 固体培养基中 ，０Ｃ ３ ￣培养 ３ ｈ ６ 。挑取典型
耐高温酵母 菌的筛选及特性研 究
刘 畅ｔ ， 王 涛： ， 石翠芳 ，
（． １ 河北科技师范学院 食品 工程系，罗牛山） 股份有限 公司， 海口 ５０２ ） ７１５
摘 要： 从轻微 腐烂的水果中筛选到两株在 ４ ℃可以良好生长的耐 高温酵母茵 Ｂ ２和 Ｊ７ 并对其基本形态特 ５ 一 一，
产孢子培养基 ： 葡萄糖 ｌ ， Ｃ １ ｇ 酵母浸膏 ２ ｇ醋 酸 ｇＫ Ｌ ， ８ ． ， ５
钠 ８ ｇ 水 １０ ｍＬ ． ， ００ 。 ２
酒精 发酵培养基 ： 当浓 度的葡 萄糖 ， 适 玉米浆 ２ ｇ尿 素 Ｏ，
２ ， １０ ｍ 。 ｇ水 ００ Ｌ
１２ 方 法 ．
麦芽 汁作空 白对照 ， ６ ０ ｍ测其 Ｏ 于 ６ｎ Ｄ值 ， 以培养 时间为横坐
研究。 １材 料 与 方 法
１１材 料 ．
深红 色菌落 ， 将酵母 菌接种 于 Ｙ Ｄ固体培养基 中 ， 出菌落 Ｐ 长 后再接种于附有杜氏小管 的麦芽汁试管中 ，观察杜氏小管的
产气情况 ， 确定 目的菌株。 １ ． 酵母 菌的生理特性 ．３ ２
１ ．． ． ３１耐糖性 ： ２ 制备葡萄糖含量分别为 ５ １％、０ ３ ％、 ％、０ ２ ％、０
１ ． 耐高温 酵母 菌的筛选 ：利用产酒精 能力 强的酵母 菌能 ．２ ２ 还 原三苯基 四氮唑盐酸盐 （ ｒ 变为深红色 这一特性 ， Ｔ ｃ） 筛选
饲料中酵母菌的筛选
饲料中酵母菌的筛选一、问题的提出：酵母菌单细胞蛋白常用于配制畜类饲料，如何从普通饲料中提取实验所需的酵母菌菌株？二、1.实验假设：认为当前从市场上采集到的饲料标本含有实验所需的酵母菌，且酵母菌在饲料中的含量能够满足普通实验室提取所需的标准2.理论依据：（1）饲料样本中通常含有细菌、霉菌、酵母菌、放线菌。
（2）霉菌与放线菌属好氧菌，酵母菌为兼性好痒型，细菌多数好痒，少数厌氧。
（3）酵母菌的培养时间（2~3天）较霉菌（3~5天）和放线菌（5~7天）的培养时间短，较细菌（24h）的培养时间长。
（4）酵母菌能适应pH值（3~7.5）较低的培养基，其他三种菌则不能。
（5）上述四种菌的菌落特征区分度较大。
酵母菌菌落表面一般光滑、湿润，有粘稠性，大多数是乳白色，边缘呈褶皱状，用针不易挑取，且挑起后的菌块不易散开。
三、实验目标：获得纯度较高的酵母菌菌种，保存于冰箱中备用。
四、实验方法（1）：将购得的饲料用四分法获取样品20~30 g，然后置于研钵中研磨均匀。
（2）：称取1g饲料，置于PDA液体培养基中（含氯霉素），经28 ℃，24 h，180 rpm 摇床富集培养。
（3）：取1ml 富集培养液，分别进行5个梯度稀释（1∶500，1∶1000，1∶1500 1∶2000 1∶2500）（4）：用移液枪分别从每一稀释度各取0.1ml 稀释液，注于平板上，用涂布棒将样品涂布均匀。
盖好培养皿，并倒置于28℃恒温箱中培养，每个梯度做三个重复。
观察各培养基，直到形成清晰易辨的菌落。
（5）：配置pH=3的PDA固体培养基。
（6）：选定（4）中最接近酵母菌菌落特征的部分，用针尖挑取少量菌块，稀释100倍，点接于（5）中培养基表面，28℃下培养48 h。
选取杂质较少的菌落，重复3次培养。
（7）制取高层琼脂培养基，在普通试管中灌注大约10cm高的琼脂。
从（6）中最后一次所得的菌落中选取杂质最少的菌落。
稀释100倍后，进行穿刺接种。
抗冻酵母的筛选及发酵特性研究
抗冻酵母的筛选及发酵特性研究薛美翠;汪立平;郝彦利;王正全;赵勇;黄宇良【摘要】采用模拟面团预发酵法筛选出应用于冷冻面团的菌株,研究菌株胞内化合物含量与其抗冷冻能力、相对发酵力的相关性,并且根据菌株菌落形态和26S rDNA序列分析法鉴定抗冻性能或发酵性能优良的菌株.结果表明,4个样品中筛选了7株酵母菌,存活率为9％～86％,相对发酵力为9％～67％,其中菌株Y-3的存活率较高,达到86％,菌株H-1的相对发酵力最高,达到67％.相关性分析结果表明,细胞存活率与海藻糖含量、甘油、脯氨酸含量呈正相关,与精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸及相对发酵力呈负相关;相对发酵力与天冬氨酸、谷氨酸含量呈显著正相关,与海藻糖、甘油、脯氨酸、精氨酸呈负相关.菌株鉴定结果表明,菌株Y-3为汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii),菌株H-1为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).综合抗冷冻性能、发酵力和食用安全性,后续研究拟将菌株Y-3和H-1进行混合发酵,最终应用于冷冻面团的制作.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2018(034)004【总页数】6页(P6-11)【关键词】抗冻酵母;存活率;相对发酵力;胞内化合物【作者】薛美翠;汪立平;郝彦利;王正全;赵勇;黄宇良【作者单位】上海海洋大学食品学院食品热加工工程技术研究中心,上海201306;上海海洋大学食品学院食品热加工工程技术研究中心,上海201306;上海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海201306;上海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海201306;上海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海201306;上海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海201306;上海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海201306【正文语种】中文普通商业酵母在低温条件下易受冷冻迫害且解冻后不能保留应有的发酵力，从而影响发酵面制食品的风味和口感，因此不能应用于冷冻面团的制作。
酵母菌表面展示操作步骤之酵母细胞转化与筛选
酵母菌表面展示操作步骤之酵母细胞转化与筛选酵母菌表面展示是一种常用的生物技术方法，通过将目标蛋白质展示在酵母菌表面，可以方便地筛选和分析目标蛋白的性质和功能。
本篇回复将介绍酵母细胞转化和筛选的操作步骤。
1. 酵母细胞培养首先，准备酵母菌的培养基，可选择含有适当营养物质的液体培养基或固体培养基。
将培养基加热至适温（通常为30°C）后，将酵母菌培养基中接种适量的酵母细胞。
培养室环境应保持洁净，避免杂菌的污染。
2. 酵母细胞转化酵母细胞转化是将外源DNA导入酵母细胞的过程。
常用的方法有化学法、电穿孔法和冷冻转化法等。
化学法是最常用的方法之一。
首先，将目标DNA与载体质粒进行连接。
然后，将该DNA与酵母细胞混合，加入聚乙二醇和锂盐缓冲液，并进行热胁迫。
此时酵母细胞的细胞壁会变薄，使DNA能够进入细胞。
最后，将转化混合物分别进行热立体电转，温度变化会让酵母细胞摆脱聚乙二醇，转化DNA进入细胞内。
电穿孔法在酵母细胞转化中也被广泛使用。
该方法通过施加高压电脉冲来使细胞膜通透，从而使DNA能够进入细胞内。
冷冻转化法则通过将酵母细胞与DNA混合后迅速冷冻来实现DNA导入。
冷冻对酵母细胞膜的完整性要求较高，因此通常需要较高的转化效率。
3. 筛选转化酵母细胞筛选转化酵母细胞是为了找出具有目标蛋白质表面展示的细胞株。
常见的筛选方法包括基于细胞生长特性的选择筛选和基于蛋白质表达的筛选。
基于细胞生长特性的选择筛选方法利用某些基因的突变导致细胞对特定抗生素的敏感或抗药性来筛选细胞。
例如，将转化酵母细胞接种在含有某种抗生素的培养基上，只有表达了目标蛋白的细胞才能生长。
基于蛋白质表达的筛选方法则通过蛋白质表达水平的检测来筛选细胞。
常用的方法包括免疫检测、荧光标记和酶活检测等。
例如，可以利用特异性抗体来检测目标蛋白的表达情况，或者利用荧光蛋白标记来可视化表达目标蛋白的细胞。
4. 确认目标蛋白质表面展示在筛选出合适的酵母细胞株后，需要进行确认，确保目标蛋白质确实表达在酵母菌的表面。
酵母筛库操作流程
酵母筛库操作流程酵母是微生物领域中非常重要的一类微生物，它们用于生产各种工业酶、面包、啤酒、酒精等等。
为了寻找优良的酵母菌株，酵母筛库就应运而生。
那么酵母筛库的操作流程具体是怎么样的呢？下面我们就来详细了解一下：1. 筛选酵母菌株酵母筛选源于自然环境，因此有许多不同类型的酵母菌株。
在进行筛选之前，我们需要先收集不同来源的酵母样品。
这些样品包括来自水、土壤和植物等的酵母菌。
通过对这些酵母菌样品进行筛选和筛选，可以得到许多具有特殊性质（如产生特定酶的酵母菌株）的酵母菌。
2. 酵母分离为了分离出单个的酵母菌株，我们需要对样品进行处理，例如，将样品沉淀后，将沉淀重新悬浮在含有营养物质的培养基中。
接着，我们可以通过连续的尝试将单个细胞分离出来以获得它的一个单克隆。
3. 建立酵母筛库建立酵母筛库前，我们需要确定在筛选中使用的诱导剂。
在我们的实验室中，这些诱导剂通常为基因对（例如，Δ顺式样氨酸酶和顺式样氨酸酶等）。
当酵母菌株在这些诱导剂存在下生长时，它们会表现出特殊的生物活性。
这些生物活性包括诸如产生特殊酶类、对特定药品的敏感性、产生有用的代谢产物等属性。
建立酵母筛库需要我们使用插入了不同报告基因的表达载体来转化每个酵母菌菌株。
这些报告基因可以提供我们对诱导剂反应的定量分析能力，并且筛选酵母筛选库时起到很重要的作用。
4. 进行筛选筛选是最重要的部分，它是确定合适株的过程。
在筛选中，我们将确定针对我们研究重要的报告基因是否会受到特定诱导剂取向的表达，如果存在，则将其挑选出来进行进一步深入研究。
在酵母筛选库中，有多种酵母菌菌株，我们需要确定优先选择哪些酵母菌菌株，因为每种酵母菌都有其专有的性质和特性，需要根据我们的应用目的选择。
高耐性酿酒酵母的筛选及耐受性分析
分析 检测高耐性酿酒酵母的筛选及耐受性分析 牟来庆 张奏娟 山东工业技师学院现在世界上最主要的生活和工业能源就是石油，但是，石油属于不可再生资源，其存在储备量的限制。
因此，研制出一种能够代替石油的新能源已经成为一项急需解决的问题。
酒精已经被公认为是一种可以代替石油的可再生资源，相比石油来说，酒精的最大优势就是污染小、可再生，被国际公认为是最环保的可再生能源之一。
对浓醪酒精进行发酵，不仅可以在最大限度上节省生产成本，还可以降低设备的闲置率，而且产生的酒糟处理方式比较简单，这类酒精生产技术的应用价值非常巨大。
酿酒酵母的筛选对于微生物尤其是工业生产上使用的酵母菌来说，对其进行筛选以及保持其活性，是生产中最基本的条件。
本文中所涉及到的酿酒酵母就是一种工业生产发酵菌，其在工业酒精生产中使用的优势在于，它的造价低、生物量大、安全性高以及生长旺盛，在各个领域的应用都比较广泛，如食品发酵、酒精生产发酵、医药发酵等。
其在工业酒精生产中会受到各种因素的影响，这些不利因素会直接威胁到酿酒酵母的生长和发酵，会对发酵工艺和设备产生直接影响，进而提高生产成本。
下面就通过几个方面对酿酒酵母的各项耐受性进行分析：酿酒酵母的耐受性酿酒酵母的耐酒精性。
在酿造高浓度酒精的时候，由于沉着物过多酵母的发酵功能也就越强，所酿造的酒精浓度也就越高，当酒精浓度高到一定程度是，就会对酿酒酵母本身造成影响，会让酵母细胞的发酵功能、发酵活性以及存活率受到抑制。
并且，随着酒精浓度越来越高，酿酒酵母的存活率和发酵速度逐渐降低，如果酒精的浓度还在持续升高，酵母菌的发酵功能会持续降低，最终导致停止发酵。
因此，酒精度越高其蒸馏能耗越低，在发酵过程中应该最大限度的提高成熟醪中的酒精含量，而酒精浓度在很大程度上会影响酵母菌的生长，通常情况下当酒精浓度达到百分之十一左右就会完全抑制普通酵母的发酵，因此，在进行高浓度酒精发酵时，应该选择高耐性的酿酒酵母。
酿酒酵母的耐渗透性。
酵母菌、乳酸杆菌的分离筛选
姓名:温迪雅学号：10991367 专业：环境科学乳酸杆菌的分离筛选及鉴定一、材料与方法：1、菌种：新鲜乳酸饮料（标记只含有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌）2、试剂：脱脂奶粉、蔗糖、1.6%溴甲酚绿乙醇溶液(溴甲酚绿、无水乙醇)、酵母膏、琼脂、革兰氏染液（结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇、沙黄）、75%乙醇、香柏油、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、碳酸钙；0.4gNaOH固体、4.2ml 浓HCL(分析纯) 、20gCaCO3固体、酵母膏20g 、琼脂30g、香柏油、脱脂奶粉100g 、蔗糖10g；3、仪器：高压蒸汽灭菌锅、恒压干热灭菌箱、超净工作台、光学显微镜、培养箱、pH试纸、酸乳瓶、培养皿（φ9或φ12）、试管、300ml三角瓶（带玻珠）、移液管、天平、牛角匙、电炉、量筒、漏斗、漏斗架、玻璃棒、棉塞、吸管、线绳、标签、500ml锥形瓶、250ml锥形瓶、250ml烧杯、酒精灯、石棉网、接种针（环）、擦镜纸4、方法：（1）无菌操作倒平板、十倍稀释、划线分离，恒温培养（2）菌落观察与镜检（3）筛选生产用菌株二、实验步骤1、分离(1)配制BCG牛乳培养基，分装三角瓶，包扎，灭菌备用。
BCG牛乳培养基配制：A溶液：脱脂乳粉100g,水500ml，加入1.6%溴甲苯酚绿（BCG）乙醇溶液1ml，80℃灭菌20min。
（1.6%溴甲苯酚绿（BCG）乙醇溶液用1.6g溴甲酚绿加入20ml无水乙醇中，再加水至100ml制成）B溶液：酵母膏10g，水500ml，琼脂20g，PH6.8，121℃湿热灭菌20min。
以灭菌操作趁热将A溶液和B溶液混合均匀后倒平板。
（2）样品的处理按照无菌操作要求，从市售新鲜酸乳中吸取10ml检样，放入装有90ml无菌水的三角瓶内，振摇混匀。
（3）分离方法①倒培养基在无菌室，先用紫外线照射半小时把表面菌灭了，在通风10min后，每培养皿倾注约15ml左右已溶化的BCG牛乳培养基，立即放在桌上摇匀，冷却凝固后即成平板。
酸面团中酵母菌筛选及发酵特性的研究
15.段立,黄卫宁,堵国成提高冷冻酸面团中乳酸菌抗冻性的研究[期刊论文]-食品科学 2006(10)
16.王海鸥,姜松质构分析(TPA)及测试条件对面包品质的影响[期刊论文]-粮油食品科技 2004(03)
引用本文格式:潘向辉酸面团中酵母菌筛选及发酵特性研究[学位论文]硕士 2011Biblioteka 酸面团中酵母菌筛选及发酵特性研究
作者:潘向辉
学位授予单位:河北农业大学
被引用次数:5次
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