嗅黏膜嗅鞘细胞的实验研究概述(精)
嗅黏膜嗅鞘细胞的实验研究概述
【关键词】嗅鞘细胞
嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells ,OECs) 在功能上是介于施万细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊的胶质细胞 ,具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘作用等，为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移的特性，使其成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。
嗅鞘细胞同胶质细胞、施万细胞在表现型上有共同点，它们都能促进轴突的再生，主要区别在于嗅鞘细胞不但存在于中枢神经系统，也存在于外周神经中。
嗅黏膜中的神经元是唯一的生后才生长并在成年时继续分化的神经元，寿为 4～12 周，随着新细胞的生长，又建立了新的神经支配关系。
嗅鞘细胞存在于嗅神经及嗅球的神经层上，沿嗅神经的全长，从周围神经系统到中枢神经分布。
成年哺乳类嗅黏膜中的嗅觉神经元具有终生更新的特点,由此说明嗅黏膜中存在神经干细胞。
嗅黏膜由源于外胚层的嗅板及位于其底部的间充质发育、分化而来,由上皮和固有层组成。
上皮内的嗅细胞是初级嗅觉神经元,成体嗅黏膜内的嗅细胞终生处于不断凋亡、更新之中,新生嗅细胞的轴突进入固有层由嗅鞘细胞包绕形成嗅神经,经筛孔进入嗅球与僧帽细胞形成突触,在轴突的生长和突触的重建过程中,嗅鞘细胞具有重要的诱导作用［1～3］。
1 嗅鞘细胞的研究现状
嗅鞘细胞从被发现到体外培养成功,再到能够用于动物实验研究及应用于临床研究,经历了漫长的时间。
Devon和Doucete［4］于1992年首次证实嗅鞘细胞可在体外培养条件下形成髓鞘。
嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤是近10年发展起来的。
Li等［5］报道嗅鞘细胞移植到受损的成年大鼠皮质脊髓束可以促进轴突再生,脊髓功能得以改善。
2000年Barnet［6］首次报道用术中切除的嗅球在体外培养并扩增人类嗅鞘细胞,并证明这些细胞生理功能良好,植入啮齿动物脱髓鞘区域能髓鞘化轴突,且无致瘤性。
近年从嗅黏膜中提取、纯化培养嗅鞘细胞，以其独特优势和临床应用价值，越来越受到重视。
2 嗅鞘细胞的实验取材方法
成年SD大鼠体重250～300g,腹腔麻醉后,消毒面部皮肤。
经一侧鼻孔沿鼻腔向上至内眦部剪开皮肤及鼻骨,暴露鼻中隔黏膜,用虹膜枪和眼科剪分离、剪取鼻中隔后三分之一嗅黏膜。
可见鼻中隔最后上部的嗅区,呈黄色与呼吸道黏膜有较明显的区别。
将此嗅区鼻中隔(嗅黏膜和骨质)完整取下,在显微镜下
将两侧的嗅黏膜自骨片上完整刮下,立即放入冰的DMEM抗生素液中(青霉素和链霉素各100IU/L)。
有学者从后鼻孔和直接开颅进入鼻中隔，分离嗅黏膜。
3 嗅黏膜细胞的体外培养
嗅黏膜取出后用F12培养基漂洗3次去除血迹后移至0.25%胰酶中,用
眼科剪充分剪碎并用吸管吹打,制成嗅黏膜混合细胞悬液,用培养基终止消化,离心、清洗去除胰酶，用含10%胎牛血清的F12培养基将细胞浓度调至1×106/ml,接种于无包被的玻璃培养皿,置CO2培养箱内(37℃,5%CO2)培养。
每2～3天换液一次。
当将离体嗅黏膜制成细胞悬液后,细胞之间的平衡即被打破,接触抑制及反馈调节机制亦被解除。
细胞悬液中的神经干细胞在其他细胞分泌的细胞因子和细胞外基质的作用下,将进入细胞分裂、增殖周期。
整个培养过程,更换培养液也十分关键。
嗅黏膜OECs贴壁生长时间较晚,一般在培养第5～6天才开始,不像嗅球OECs 24h后就大量贴壁生长。
所以在这段时间内换液应十分小心,尽量不要晃动培养液,以保持细胞沉淀,根据情况最好行1/3量换液或根据培养液的颜色添加培养液,以免丢失细胞。
纯化：按改良Nash差速贴壁法在培养36～48h后,将培养液吸出,重新种植于包被多聚右旋赖氨酸的24孔细胞培养板内,进行纯化培养。
纯化培养液中可加入20μmol/L的Forskolin和20μg/ml的BPE(bovine pituitary extract)以促进细胞的生长培养14天,其间观察细胞生长情况,间或摄片。
成纤维细胞的生长可机械刮除亦可用5μmol/LAra c处理24h来控制。
Ara c对OECS的生长也有抑制作用，故有学者也不主张使用。
是否纯化的观点：有部分学者认为根据嗅黏膜细胞的社会学特性,即各种细胞之间存在着相互依存、相互诱导、相互制约的调节机制。
嗅黏膜神经干细胞和嗅鞘细胞体外培养时,不宜过早地纯化细胞,混合细胞培养更有利于各细胞成分的分裂、增殖尤其是有利于神经干细胞克隆球的形成。
Shou等［7］将
嗅上皮细胞与其基底细胞共培养发现,后者能促进神经前体细胞的增生,其实验结果从另一侧面证明了上述观点。
4 嗅黏膜细胞的免疫细胞化学染色
目前常用的染色方法主要有：Nestin染色、NSE染色、GFAP及p75NGFR 染色等，体外培养的时间不同，免疫反应阳性细胞形态亦不相同，成熟的嗅鞘细胞大多为梭形双极细胞,突起细长,其走向具有明显的方向性,细胞排列成束。
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嗅鞘细胞移植促进脊髓损伤修复的研究进展
以及与其他神经胶质细胞、神经轴突的整合能力，研
究发现掀起了神经再生修复研究的热潮。Ｒｏｍｏｎ 等【２副构建大鼠脊髓横断损伤模型，在两断端脊髓内 移植ＯＥＣｓ，术后３—７个月，观察到ＯＥＣｓ能促进轴
突长距离的再生，并穿越了胶质瘫痕区，进人脊髓远
断端后可生长３ ｃｍ，再生轴突周围表达髓鞘碱性蛋 白，截瘫的大鼠感觉、运动反射和运动功能明显恢复。 ＯＥＣｓ移植联合其他手段也是脊髓损伤修复的重 要研究领域，尹国栋等瑚１将人胚胎ＯＥＣｓ与ＮＳＣｓ联
合移植到大鼠脊髓全横断处，观察发现联合移植组具
有更多的成熟神经突触，用ＢＢＢ评分观察显示大鼠 肢体运动功能明显改善。ＯＥＣｓ和ＮＳＣｓ联合移植在 脊髓损伤修复中的可能作用机制有：在脊髓微环境中 ＯＥＣｓ对ＮＳＣｓ的增殖、分化具有促进作用；能诱导生 成更多神经元；有效支持脊髓神经元的再生和神经元 间突触结构的生成；改善由于损伤造成的上行和下行 神经元之间的联系。Ｓａｓａｋｉ等‘３０１将ＧＦＰ基因修饰的 ＯＥＣｓ移植至ＳＣＩ动物模型脱髓鞘区，不但发现髓鞘
Ｅ—ＮＣＡＭ（ｔｈｅ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｆｏｒｍ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｕｒａｌ ｃｅｌｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ
脊髓损伤是重要的致残因素，常遗留严重的残
疾，包括运动功能丧失（瘫痪）、感觉障碍、膀胱排尿
功能紊乱、肌痉挛、关节挛缩、疼痛、褥疮、心理障碍、 性功能不全、甚至呼吸障碍。长期以来，国内外研究
人员对脊髓损伤洽疗手段的开发进行了大量的基础
ｃｏｌｌａｇｅｎ
ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ
ｆｉｂｍｂｌａｓｔｓ［Ｊ］．Ｊｐｎ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９２，６０（２）：
［３］
肖
静．醋酸曲安奈德注射液治疗瘢痕６６例的疗Байду номын сангаас分
嗅鞘细胞对神经细胞轴突生长的促进作用
哺 乳 动 物 嗅 觉 系 统 具 有 终 生 再 生 能 力 ， 伤 的 嗅感 觉 神 经 损
元 （ｌ ｃ ｒ ｃｐ ｒ ｅｒｎ ， Ｒ ｓ 发 生 凋亡 ， 生 的 Ｏ Ｎ ｏａｔ ｙｒ ｅｔ ｕ ｓ Ｏ Ｎ ） ｆ ｏ ｅ ｏｎ ｏ 新 Ｒ ｓ由
嗅神经 的 Ｏ Ｃ Ｅ ｓ比取 自嗅球的 Ｏ Ｃ 更能促进神经生长 。 Ｅｓ １ ３ 中枢 神经 系统 神 经元 中枢 神经 系统 特 别是 脊髓 损伤 ． 后， 不能沿着原来 的通 路与 断端 建立连 接 ， 导致该 神经支 配 区
完全横断 ，５ｄ后再把 Ｏ Ｃ 移植 到损伤处 ， ４ Ｅｓ １个月后通 过大 鼠
的行走试验和 比较移植前后损伤 区的电生理结果 显示 ， 完全横 断的神经恢 复 了部分功能 。以上揭示 Ｏ Ｃ Ｅ ｓ可促进离断 神经纤 维的生长。Ｖ ｎｄｎＰ ｌ Ｓｎａｅ ｉ Ｏ Ｃ ａ ｅ ｏ 和 ａｔｒｌ ” 将 Ｅ ｓ与小脑 的神 经 ｌ 元共培养 ， 发现该组 神经元 的轴 突生 长明显 比 Ｏ Ｃ 条件 培养 Ｅｓ 基 组和其他底物组长 ， 可见 Ｏ Ｃ 有促 进 中枢 神经 系统 神经 元 Ｅｓ 细胞轴突生长的作用 。
长 ， 究 还 发 现 Ｏ Ｃ 与 Ｏ Ｎ 分 离 培 养 和 接 触 培 养 对 轴 突 生 研 Ｅｓ Ｒ ｓ
２ ＯＥ ｓ促进 神经 细胞 轴 突生长 的机 制 Ｃ
２ １ 营 养 因子 及 相 应 受 体 Ｗｏｄａｌ ． ｏｈｌ 等 培 养 新 生 ２ ｄ Ｗｉａ大鼠嗅球 内 Ｏ Ｃ ， ｓｒ ｔ Ｅ ｓ采用细胞免疫 化学检测生 长因子蛋 白 和相应受体 ； 收集 Ｏ Ｃ 的条件 培养液 ， Ｅｓ 通过酶联免疫吸 附和逆 转 录聚合 酶 链 反 应 分 析 神 经 营 养 因 子 的 分 泌 ， 现 培 养 的 发
元 （ｌ ｃ ｒ ｃｐ ｒ ｅｒｎ ， Ｒ ｓ 发 生 凋亡 ， 生 的 Ｏ Ｎ ｏａｔ ｙｒ ｅｔ ｕ ｓ Ｏ Ｎ ） ｆ ｏ ｅ ｏｎ ｏ 新 Ｒ ｓ由
嗅神经 的 Ｏ Ｃ Ｅ ｓ比取 自嗅球的 Ｏ Ｃ 更能促进神经生长 。 Ｅｓ １ ３ 中枢 神经 系统 神 经元 中枢 神经 系统 特 别是 脊髓 损伤 ． 后， 不能沿着原来 的通 路与 断端 建立连 接 ， 导致该 神经支 配 区
完全横断 ，５ｄ后再把 Ｏ Ｃ 移植 到损伤处 ， ４ Ｅｓ １个月后通 过大 鼠
的行走试验和 比较移植前后损伤 区的电生理结果 显示 ， 完全横 断的神经恢 复 了部分功能 。以上揭示 Ｏ Ｃ Ｅ ｓ可促进离断 神经纤 维的生长。Ｖ ｎｄｎＰ ｌ Ｓｎａｅ ｉ Ｏ Ｃ ａ ｅ ｏ 和 ａｔｒｌ ” 将 Ｅ ｓ与小脑 的神 经 ｌ 元共培养 ， 发现该组 神经元 的轴 突生 长明显 比 Ｏ Ｃ 条件 培养 Ｅｓ 基 组和其他底物组长 ， 可见 Ｏ Ｃ 有促 进 中枢 神经 系统 神经 元 Ｅｓ 细胞轴突生长的作用 。
长 ， 究 还 发 现 Ｏ Ｃ 与 Ｏ Ｎ 分 离 培 养 和 接 触 培 养 对 轴 突 生 研 Ｅｓ Ｒ ｓ
２ ＯＥ ｓ促进 神经 细胞 轴 突生长 的机 制 Ｃ
２ １ 营 养 因子 及 相 应 受 体 Ｗｏｄａｌ ． ｏｈｌ 等 培 养 新 生 ２ ｄ Ｗｉａ大鼠嗅球 内 Ｏ Ｃ ， ｓｒ ｔ Ｅ ｓ采用细胞免疫 化学检测生 长因子蛋 白 和相应受体 ； 收集 Ｏ Ｃ 的条件 培养液 ， Ｅｓ 通过酶联免疫吸 附和逆 转 录聚合 酶 链 反 应 分 析 神 经 营 养 因 子 的 分 泌 ， 现 培 养 的 发
嗅鞘细胞移植对实验性变态反应性脑脊髓炎髓鞘修复及运动功能的影响
ｅ ｃｐ ａｏ ｅ ｔ／ Ｏ Ｓ ｏ ｇ ｎ ，ＪＮ ｅ ｇ Ｗ Ａ Ｇ Ｃ ｕ ｊａ ， ｅ ｉ￣ ｈｎ ｓ Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｅ ａ ｉｔｔ ｎ ｎ ｅ ｈ ｌｍｙｆｉＧＵ ｉｓ ｈ ｕ ａ ｇ Ｉ Ｆ ｎ ， Ｎ ｈ ｎｕ ｎ ｔ ａｄＣ ｉｅｅ ｏ ｒ ａ ｏ Ｒ ｈ ｂｌａｉ ｉ ｏ
Ｍｅ ｉ ｎ ， ０ ， （）１ － ２ ｄ ｃ ｅ ０ ７２ １ ：８ ０ ｉ ２ ２
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ห้องสมุดไป่ตู้
关 键 词 嗅鞘 细胞 ： 植 ； 验 性 变 态 反 应性 脑 脊 髓 炎 移 实 中图 分 类 号 ：４ ．Ｒ ７ ． １ Ｒ ９ ３ ３３ ＋ 文 献标 识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ １ １４ （ ０ ）０ — ０ ８ ０ １０ — ２ ２２ ７一 １ ０ １－ ３ ０
Ｅｆｅ ｔ ｆ ｆ ｃ ｏ ＯＥＣｓ ｔ ａ ｓ ｌｎ ａ ｉ ｎ ｏ ｍ ｙ ｌ ｅ ｅ ａ ｒ ｎ ａ ｄ ｍｏ ｏ ｆ ｎ ｔ ｎ ｏ ｅ ｐ ｒｍｅ ｔ ｌ ｌ ｒ ｉ ｒ ｎ ｐａ ｔ ｔ ｎ ｏ ｅ ｉ ｒ ｐ ｉ ｍｅ ｔ ｎ ｎ ｔ ｒ ｕ ｃ ｉ ｆ ｘ ｅ ｉ ｎ ａ ａ ｌ ｇ ｃ ｏ ｅ
ｈ ｒｐｕｉ ｅｅ ｔｏ Ｅ ｓ ｔ ｓｌ ａｏ ｎ ｅｐｒ ｅ ｔ ｌ ｒｉ ｅ ｃｐ ａ ｙｌｉ Ｅ Ｅ．Ｍ ｔｏ ： Ｅ ｓ ｔｅ ｔｅａ ｅｔ ｆ ｃ ｆ Ｏ Ｃ ｒｎｐａｔｔｎ ｏ ｘｅ ｍ ｎａ ａ ｅｇ ｎｅ ｈｌｍ ｅｉｓ （Ａ ） ｅｈ ｄ Ｏ Ｃ ｈ ｃ ｆ ａ ｎ ｉ ｉ ｌ ｌ ｃ ｏ ｔ
α晶体蛋白促进大鼠嗅鞘细胞存活的体外研究
ｉ ｎ ｏ Ｌ —ｅ ｙｓ ｒ ｔ ａ Ｕ ｉ ｎ ｒｏ ｇ ｕ ｐ ｔ ｈ ａ ｎ ｉ ｎ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｒｏ ｇ ｕ ｐ ．Ｃｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ Ｌ —ｃ ｒ ｙ ｓ ｔ ａ ｌ ｌ ｉ ｎ ｐ ｒ ｏ ｍｏ ｔ ｅ ｓ ＯＥ Ｃｓ ｓ ｕ ｖｉ ｒ ｖ ａ ｌ ａ ｎ ｄ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ．
【 关键词 】 Ｏ ． ／ 晶体蛋 白； 嗅鞘 细胞 ； 增殖 【 中国图书分类号 】 Ｒ ７ ７ ６
Ａｌ ｐ ｈａ—ｃ ｒ ｙ ｓ ｔ ａ ｌ ｌ ｉ ｎ ｐ ｒ ｏ ｍｏ ｔ ｅ ｓ ＯＥＣｓ ｓ ｕｒ ｖ ｉ ｖ ａ ｌ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ
Ｗ ＡＮＧ Ｙａ ｎ ｈ ｕａ ， Ｗ ＡＮＧ Ｄｏ ｎｇ ｗｕ ，ａ ｎ ｄ ＹＩ Ｎ Ｚｈ ｅ ｎｇ ｑｉ ｎ ． １ ． Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎｔ ｏ ｆ Ｏｐｈ ｔ ｈａ ｌ ｍｏ ｌ ｏ ｇ ｙ， Ｇｅ ｎｅ ｒ ｌ Ｈｏ ａ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｃｈｉ ｎ ｅ ｓ ｅ
３１ ６
武警医学
２ ０ １ ３年 ４月
第２ ４卷
第 ４期
Ｍ ｅ ｄ Ｊ Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｐ ＡＰ Ｆ ，Ｖ ｏ １ ． ２ ４ ， Ｎ ｏ ． ４， Ａ ｐ ｉ ｒ ｌ ， ２ ０ １ ３
仪晶体 蛋 白促 进 大 鼠嗅 鞘细 胞 存 活 的体 外 研 究
王艳 华 ， 王 东武 ， 阴正 勤
Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ ’ Ｓ Ｌ ｉ ｂ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ａ ｒ ｍ ｙ ，Ｂ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ １ ０ ０ ８ ５ ３ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ２ ．Ｔ ｈ ｅ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｃ ｏ ｒ ｐ ｓ ８ ６ ５ ０ ，ｔ ｈ ｅ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ ’ Ｓ Ａ ｍｅ ｒ ｄ Ｐ ｏ ｌ ｉ ｃ ｅ Ｆ ｏ ｒ ｃ ｅ ｓ ，
【 关键词 】 Ｏ ． ／ 晶体蛋 白； 嗅鞘 细胞 ； 增殖 【 中国图书分类号 】 Ｒ ７ ７ ６
Ａｌ ｐ ｈａ—ｃ ｒ ｙ ｓ ｔ ａ ｌ ｌ ｉ ｎ ｐ ｒ ｏ ｍｏ ｔ ｅ ｓ ＯＥＣｓ ｓ ｕｒ ｖ ｉ ｖ ａ ｌ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ
Ｗ ＡＮＧ Ｙａ ｎ ｈ ｕａ ， Ｗ ＡＮＧ Ｄｏ ｎｇ ｗｕ ，ａ ｎ ｄ ＹＩ Ｎ Ｚｈ ｅ ｎｇ ｑｉ ｎ ． １ ． Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎｔ ｏ ｆ Ｏｐｈ ｔ ｈａ ｌ ｍｏ ｌ ｏ ｇ ｙ， Ｇｅ ｎｅ ｒ ｌ Ｈｏ ａ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｃｈｉ ｎ ｅ ｓ ｅ
３１ ６
武警医学
２ ０ １ ３年 ４月
第２ ４卷
第 ４期
Ｍ ｅ ｄ Ｊ Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｐ ＡＰ Ｆ ，Ｖ ｏ １ ． ２ ４ ， Ｎ ｏ ． ４， Ａ ｐ ｉ ｒ ｌ ， ２ ０ １ ３
仪晶体 蛋 白促 进 大 鼠嗅 鞘细 胞 存 活 的体 外 研 究
王艳 华 ， 王 东武 ， 阴正 勤
Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ ’ Ｓ Ｌ ｉ ｂ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ａ ｒ ｍ ｙ ，Ｂ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ １ ０ ０ ８ ５ ３ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ２ ．Ｔ ｈ ｅ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｃ ｏ ｒ ｐ ｓ ８ ６ ５ ０ ，ｔ ｈ ｅ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ ’ Ｓ Ａ ｍｅ ｒ ｄ Ｐ ｏ ｌ ｉ ｃ ｅ Ｆ ｏ ｒ ｃ ｅ ｓ ，
嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植对阿尔茨海默病大鼠海马生长相关蛋白-43表达的影响
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ・
９７ ・ ６
堕垫盘 查
，１ ０月第 ４ 卷第 １ 期上半月 Ｓ ａｘ Ｍｅ ， ｃ ｂｒ ０２Ｖ １ １Ｎ ．０ ｈ ｉ ｔ １ ｏ ｈｎｉ ｄ Ｏ ｔ ｅ ２ １， ｏ Ｊ ｏ ．４ ， ０１ ｅ ｒ ｔ Ｆｓ
实验 研 究 ・
嗅成鞘细胞 与神经干细胞共移植对 阿尔茨海默病 大 鼠海 马生 长 相 关 蛋 白一３ 达 的影 响 ４表
基 础 医学 院
医学（０暴 药￣４０ ４０ ２）
教 务 处
【 摘 要】 目的
探讨 嗅成 鞘 细胞 （ Ｅ ｓ与 神 经 干 细 胞 （ Ｃ ） 移 植 对 阿 尔 茨 海 默 病 （ Ｄ） 鼠海 马 生 Ｏ Ｃ） ＮＳ ｓ共 Ａ 大 雄性 Ｓ Ｄ大 鼠双 侧 穹 隆 一 海 马 伞 切 断 ， 立 ＡＤ大 鼠 模 型 。实 验 动 物 建
［ ｓｒ ｃ］ Ｏｂｅ ｔ ｅ Ｔｏｉｖ ｓｉａｅｔ ｅｅｆｃ ｆｃ—ｒｎ ｐａ ｔｔｏ ｆＯｌａ ｔｒ ｓ ｅ ｔ ｉｇ Ｃｅｌ（ Ｃｓ Ａｂ ｔａ ｔ ｊｃｉ ｖ ｎ ｅｔｇ ｔ ｈ ｆｅｔｏ ｏ ｔａ ｓ ｌｎａ ｉｎ ｏ ｆｃｏ ｙＥｎ ｈ ａｈｎ ｌ ＯＥ ） ｓ
察 各 组 大 鼠行 为学 、 主 脑 海 马 Ｇ 一３和 Ｎ 宿 ＡＰ４ ＯＳ阳性 神 经 元 表 达 的 变 化 。结 果 ① ＮＳ ｓ与 ＯＥ ｓ 移 植 组 潜 Ｃ Ｃ 共 伏 期 明 显 缩 短 、 过 平 台 次 数 明 显 增 加 ， ＮＳ ｓ 植 组 、 通 与 Ｃ移 ＡＤ模 型 组 差 异 有 统 计 学 意 义 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。② 反 转 录 聚 合 酶链 反 应 （ Ｔ Ｐ Ｒ） Ｗ ｅｔｒ ｌｔ 析 ， Ｃ Ｒ —Ｃ 与 ｓｅｎＢｏ 分 ＮＳ ｓ与 ＯＥ ｓ 移植 组 宿 主脑 海 马 ＧＡ 一３ｍＲ Ｃ共 Ｐ ４ ＮＡ 和 ＧＡＰ４ 一３蛋
９７ ・ ６
堕垫盘 查
，１ ０月第 ４ 卷第 １ 期上半月 Ｓ ａｘ Ｍｅ ， ｃ ｂｒ ０２Ｖ １ １Ｎ ．０ ｈ ｉ ｔ １ ｏ ｈｎｉ ｄ Ｏ ｔ ｅ ２ １， ｏ Ｊ ｏ ．４ ， ０１ ｅ ｒ ｔ Ｆｓ
实验 研 究 ・
嗅成鞘细胞 与神经干细胞共移植对 阿尔茨海默病 大 鼠海 马生 长 相 关 蛋 白一３ 达 的影 响 ４表
基 础 医学 院
医学（０暴 药￣４０ ４０ ２）
教 务 处
【 摘 要】 目的
探讨 嗅成 鞘 细胞 （ Ｅ ｓ与 神 经 干 细 胞 （ Ｃ ） 移 植 对 阿 尔 茨 海 默 病 （ Ｄ） 鼠海 马 生 Ｏ Ｃ） ＮＳ ｓ共 Ａ 大 雄性 Ｓ Ｄ大 鼠双 侧 穹 隆 一 海 马 伞 切 断 ， 立 ＡＤ大 鼠 模 型 。实 验 动 物 建
［ ｓｒ ｃ］ Ｏｂｅ ｔ ｅ Ｔｏｉｖ ｓｉａｅｔ ｅｅｆｃ ｆｃ—ｒｎ ｐａ ｔｔｏ ｆＯｌａ ｔｒ ｓ ｅ ｔ ｉｇ Ｃｅｌ（ Ｃｓ Ａｂ ｔａ ｔ ｊｃｉ ｖ ｎ ｅｔｇ ｔ ｈ ｆｅｔｏ ｏ ｔａ ｓ ｌｎａ ｉｎ ｏ ｆｃｏ ｙＥｎ ｈ ａｈｎ ｌ ＯＥ ） ｓ
察 各 组 大 鼠行 为学 、 主 脑 海 马 Ｇ 一３和 Ｎ 宿 ＡＰ４ ＯＳ阳性 神 经 元 表 达 的 变 化 。结 果 ① ＮＳ ｓ与 ＯＥ ｓ 移 植 组 潜 Ｃ Ｃ 共 伏 期 明 显 缩 短 、 过 平 台 次 数 明 显 增 加 ， ＮＳ ｓ 植 组 、 通 与 Ｃ移 ＡＤ模 型 组 差 异 有 统 计 学 意 义 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。② 反 转 录 聚 合 酶链 反 应 （ Ｔ Ｐ Ｒ） Ｗ ｅｔｒ ｌｔ 析 ， Ｃ Ｒ —Ｃ 与 ｓｅｎＢｏ 分 ＮＳ ｓ与 ＯＥ ｓ 移植 组 宿 主脑 海 马 ＧＡ 一３ｍＲ Ｃ共 Ｐ ４ ＮＡ 和 ＧＡＰ４ 一３蛋
嗅鞘细胞修复脊髓损伤的研究进展
成截瘫 的主要 原 因 ，多见 于 年 轻 人 ． 在 国 外 每 百 万人 中 约有 ３ ． ７ ２人 遭 受 Ｓ Ｉ Ｃ ，在 国 内每 百 万 人 中 约有 ｌ Ｏ人 因 Ｓ Ｉ Ｃ 而致残 ． 目前 Ｓ Ｉ的发病 率 不 断 Ｃ 上 升 ，呈 逐 年 升高 的趋 势 ． 严 重 的 Ｓ Ｉ 患 者 及 Ｃ为
ｙ ｒ ，ｗｈｉｈ ｍａ ｅ ｅｏ ｅ ｍｅｈ ｄ ｏ ｉ ｒ ｖ ｔ ｈ ｒ ｐ Байду номын сангаас ｉ ｆｉｉ ｎ ｙ． ｃ ｙ ｄ ｖ ｌｐ ｎ ｗ ｔ ｏ ｓｔ ｍｐ ｏ ｅ ｉｓｔ ｅ ａ ｅ ｔ ｅｆｃｅ ｃ ｃ
［ ｙｗ ｒｓ ｌｃ ｒ ｎｈａｈｎ ｅｓ Ｓｉａ ｃｒ ｊｒ； ｅｅｒｈｐｏｒｓ Ｋｅ ｏｄ ］Ｏ ａｔ ｅｓｅｔｉｇｃｌ ； ｐｎｌ ｏｄｉ ｕ Ｒ ｓａｃ ｒｇｅｓ ｆ ｏ ｙ ｌ ｎ ｙ 脊 髓损 伤 （ｐｎｌ ｏｄｉｊｒ，ｓ ｕ 是一 种致 ｓｉａ ｃｒ ｕ ｎｙ ｃ 残率很 高 的 中枢 神 经 系 统 损 害 ，严 重 的 Ｓ Ｉ 造 Ｃ 是
尤 为重要 ，成 为最 有 前 途 的方 法 ，其 中 嗅鞘 细胞
（ ｌ ｃｏ ｎ ｈａｈｎ ｅ ｓ Ｅ ｓ 移植 被 认 为 是 ｏ ａｌ ｅ ｓｅｔｉｇｃｌ ，Ｏ Ｃ ） ｆ ｒ ｙ ｌ 修复 ＳＩ Ｃ 最有 前景 的方 法 ．
其 家属 带来沉 重 的经 济 负 担 ，同时 由此 也 引 起许
嗅 鞘 细 胞 修 复 脊 髓 损 伤 的 研 究 进 展
许燕 飞 ，刘 劲松
（ 昆明 医学 院第 一 附属 医院骨科 ，云 南 昆 明 ６ ０３ ） ５０ ２
［ 摘要 ］对 嗅鞘 细胞 的生物学 特性及 其对 脊髓损 伤的研究 进展 进行 回顾 ，总结 嗅鞘 细胞 的研究 和应 用成
ｙ ｒ ，ｗｈｉｈ ｍａ ｅ ｅｏ ｅ ｍｅｈ ｄ ｏ ｉ ｒ ｖ ｔ ｈ ｒ ｐ Байду номын сангаас ｉ ｆｉｉ ｎ ｙ． ｃ ｙ ｄ ｖ ｌｐ ｎ ｗ ｔ ｏ ｓｔ ｍｐ ｏ ｅ ｉｓｔ ｅ ａ ｅ ｔ ｅｆｃｅ ｃ ｃ
［ ｙｗ ｒｓ ｌｃ ｒ ｎｈａｈｎ ｅｓ Ｓｉａ ｃｒ ｊｒ； ｅｅｒｈｐｏｒｓ Ｋｅ ｏｄ ］Ｏ ａｔ ｅｓｅｔｉｇｃｌ ； ｐｎｌ ｏｄｉ ｕ Ｒ ｓａｃ ｒｇｅｓ ｆ ｏ ｙ ｌ ｎ ｙ 脊 髓损 伤 （ｐｎｌ ｏｄｉｊｒ，ｓ ｕ 是一 种致 ｓｉａ ｃｒ ｕ ｎｙ ｃ 残率很 高 的 中枢 神 经 系 统 损 害 ，严 重 的 Ｓ Ｉ 造 Ｃ 是
尤 为重要 ，成 为最 有 前 途 的方 法 ，其 中 嗅鞘 细胞
（ ｌ ｃｏ ｎ ｈａｈｎ ｅ ｓ Ｅ ｓ 移植 被 认 为 是 ｏ ａｌ ｅ ｓｅｔｉｇｃｌ ，Ｏ Ｃ ） ｆ ｒ ｙ ｌ 修复 ＳＩ Ｃ 最有 前景 的方 法 ．
其 家属 带来沉 重 的经 济 负 担 ，同时 由此 也 引 起许
嗅 鞘 细 胞 修 复 脊 髓 损 伤 的 研 究 进 展
许燕 飞 ，刘 劲松
（ 昆明 医学 院第 一 附属 医院骨科 ，云 南 昆 明 ６ ０３ ） ５０ ２
［ 摘要 ］对 嗅鞘 细胞 的生物学 特性及 其对 脊髓损 伤的研究 进展 进行 回顾 ，总结 嗅鞘 细胞 的研究 和应 用成
嗅鞘细胞移植促神经元轴突生长的机制
均表明 Ｂ Ｎ Ｄ Ｆ是 促 进 轴 突 生 长 的 重要 神经 营养 因子 之 一 。 在 嗅上 皮 受 损 后 ， 嗅球 神 经 层 外 层 的 低 亲 和 力 神 经 生 长 因 子 受 体 Ｐ５表 达 会 上 调 ， 能 为 嗅 神 经 轴 突 提 供 趋 化 引 导 作 ７ 可
１ Ｏ Ｃ Ｅ ｓ移植
察 到辣 根 过 氧 化 物 酶 染 料 与 其 标 记 的 Ｏ Ｃ Ｅ ｓ出 现 在 嗅 球 中 ， ６
用； 将嗅球神经层外层 的 Ｏ Ｃ 与视网膜神经节细胞共培养 时， Ｅｓ
视 网膜 神 经 节 细 胞 的 轴 突 生 长 增 强 ， 当 通 过 免 疫 选 择 消 除 了 但 Ｐ ５阳性 的 Ｏ Ｃ 时 ， 种增 强 消 失 了 。 ７ Ｅｓ 这 神 经 肽 Ｙ仅 当轴 突与 靶 细 胞 之 间 形 成 突 触 时 ， 嗅球 神经 在 层 的 内层 表 达 ” 这 表 明 它 可 能 在 轴 突 生 长 的 最 后 阶 段 发 挥 ，
重要 的作用 ； 它还在胚胎 时期 嗅神经从 上皮到嗅球生长 的过程 中表达 ， 参与轴突的定 向生长 。
Ｏ Ｃ 分 泌 与 轴 突 生 长 相 关 的 载 脂 蛋 白 Ｅ 载 脂 蛋 白 Ｅ基 Ｅｓ 。
周后 实验组大 鼠的 嗅上皮细 胞明显 比对照组 多。有学者 将
Ｏ Ｃ 与 螺培 养 ， Ｅｓ ｓｉ ｌ ｎｌ ｎｃｌ ，Ｇ ｓ 共 ａｇ ｉ ｌ 发
移植可能具有促进神经元轴突再生的功能。Ｏ Ｃ 可通过分泌多种黏 附分子和营养因子 ， Ｅｓ 对再生轴 突发挥 趋化 引导作用 ； 调节脑信号蛋 白 ３ 神经纤毛蛋 白一 等神经生长抑制相关 因子及受体 的表达等多种 机制 ， Ａ、 １ 为轴 突的 再生提供了 良好 的环境 。
１ Ｏ Ｃ Ｅ ｓ移植
察 到辣 根 过 氧 化 物 酶 染 料 与 其 标 记 的 Ｏ Ｃ Ｅ ｓ出 现 在 嗅 球 中 ， ６
用； 将嗅球神经层外层 的 Ｏ Ｃ 与视网膜神经节细胞共培养 时， Ｅｓ
视 网膜 神 经 节 细 胞 的 轴 突 生 长 增 强 ， 当 通 过 免 疫 选 择 消 除 了 但 Ｐ ５阳性 的 Ｏ Ｃ 时 ， 种增 强 消 失 了 。 ７ Ｅｓ 这 神 经 肽 Ｙ仅 当轴 突与 靶 细 胞 之 间 形 成 突 触 时 ， 嗅球 神经 在 层 的 内层 表 达 ” 这 表 明 它 可 能 在 轴 突 生 长 的 最 后 阶 段 发 挥 ，
重要 的作用 ； 它还在胚胎 时期 嗅神经从 上皮到嗅球生长 的过程 中表达 ， 参与轴突的定 向生长 。
Ｏ Ｃ 分 泌 与 轴 突 生 长 相 关 的 载 脂 蛋 白 Ｅ 载 脂 蛋 白 Ｅ基 Ｅｓ 。
周后 实验组大 鼠的 嗅上皮细 胞明显 比对照组 多。有学者 将
Ｏ Ｃ 与 螺培 养 ， Ｅｓ ｓｉ ｌ ｎｌ ｎｃｌ ，Ｇ ｓ 共 ａｇ ｉ ｌ 发
移植可能具有促进神经元轴突再生的功能。Ｏ Ｃ 可通过分泌多种黏 附分子和营养因子 ， Ｅｓ 对再生轴 突发挥 趋化 引导作用 ； 调节脑信号蛋 白 ３ 神经纤毛蛋 白一 等神经生长抑制相关 因子及受体 的表达等多种 机制 ， Ａ、 １ 为轴 突的 再生提供了 良好 的环境 。
嗅鞘细胞移植对大鼠脊髓损伤运动功能恢复影响的系统评价
Ｐ ｂ ｅ ａａ ａｅ ｒｃ ｌ ｃｉｇｒｌｔ ｅｓｕ ｉｓｐ ｂｉｈ ｄｆｏ Ｊｎ ａ ９ ９ｔ ｃ ｍｂ ｒ ０ ９ Ｒａ ｄ ｍｉｅ ｏ ｔｏｌｄ ｕ Ｍ ｄｄ ｔｂ ｓｓｆ ｏｌ ｔｎ ｅａｉ ｔ ｄｅ ｕ ｌ ｅ ｍ ａ ｕ ｒ １ ８ ｏＤｅ ｅ ｅ ０ ． ｎ ｏ ｚｄｃ ｎｒ ｌ ｏ ｅ ｖ ｓ ｒ ｙ ２ ｅ
ｅ ｐ ｒｍｅ ｔ ｆ ｒａｉｇｒｔ Ｃ１ｗｉ Ｃｓｔａ ｓ ｌｎｔｔｏ ｒ ｎ ｌｄ ｄ Ｑｕ ｌｙｏ ｃｕ ｅ ｘ ｅｉ ｅ ｔ ｓａｓｓｅ ｘ ｅ ｉ ｎ ｓｏ ｅ ｔｎ ａｓＳ ｔ ＯＥ ｒｎ ｐ ａ ａｉｎ ｗｅｅｉ ｃｕ ｅ ． ａｉ ｆｎ ｌｄ ｄｅ ｐ ｒｍ ｎ ｓｗａ ｓｅ ｓｄ ｔ ｈ ｔ ｉ
ＣＨＥＮ Ｗ ｅｉ ＨＥ Ｌ— ａ’ Ｌ ｇ ， ＡＮＧ ’ ， ｉ ｎ ， Ｉ Ａｎ ’ ＬＩ Ｎａｎ
１ Ｇａ ｅ ０ ６ｆＣｉｉ ｌｃｏｌＣ ｅｇ ｕ ｄｃｌ ｏｅｅＣ ｅｇ ｕ６ ０８ ， ｈｎ； ． ｒｄ ２ ０ ｌ ｃ ｈ ｏ ｈｎｄ ｉ ｌｇ， ｈｎｄ １ ０３ Ｃ ｉａ ｏ ｎ ａＳ ， Ｍｅ ａ Ｃ ｌ ２Ｅ ｐ ｒ ｎ ｅｈ ｏｏｙＣｎｅ Ｃ ｅｇ ｕＭｅｉ ｌ ｏｌ ｅＣ ｅｇ ｕ６０ ８， ｈｎ ．ｘ ｅｉ ｔ ｃｎ ｌ ｅ ｔ ｏ ｈ ｎｄ ｄｃ ｌｇ， ｈｎ ｄ １０ ３Ｃ ｉａ ｍｅ Ｔ ｇ ｒ ｆ ａＣ ｅ
Ａｂ ｔ ｃ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｅｉ ｖｄ ｎ ｅ ｏ ｅ ｅ ｔ ｎｈｐｂ ｔ ｅｎｏｆｃｏｙｅ ｓｅｔｉｇｃｌ Ｏ Ｃ ） ｒｎ — ｓｒ ｔ ａ ｊｃｉ ｏｒｖｅ ｅｉｅ ｃｓ ｆｈ ｌ ｉ ｓｉ ｅｗ ｅ ｌ ｔｒ ｎｈ ａｈｎ ｅｓ（ Ｅ ｓ ｔ ｓ ｖ ｗ ｔ ｒ ａｏ ａ ｌ ａ ｐａｔｔ ｎａ ｄｍｏｏ ｎｔ ｎｌｅｔｕｉｎｏ ｓｉａ ｃｒ ｊｒ Ｓ ｔ Ｍｅｈ ｄ Ｗ ｅ ｅｒｈ ｄ ｈ Ｂ Ｃ ＩＶＩ ｎ ［ｎａｉ ｎ ｔｒｕ ｃ ｏ ａ ｒｓｔｔ ｆｐｎ ｌ ｏｄｉ ｕｖ（Ｃ ） ｔｏ ｓ ｏ ｆ ｉ ｉ ｏ ｎ ． ａｃ ｅ ｅ Ｍ， ＮＫ ， Ｐａ ｄ ｓ ｔ Ｃ
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嗅鞘细胞移植治疗帕金森叠加综合征1例
【 ＷＷ． ｌｋ． ｍ／ｇｃ ｆｊｕ ｌ ｐ ｌｓ ８３／４一７ ９ｐ） ｄ】 Ｗ ｚ ｃｆ ｏ ｚ ｌｋ／ ｏ ｍａ ｕｆｅ／ —４３ｋ６ ９ （ｓｐ ｆ ｇ ｃ ｅ ／ｉ ０
０ 引言
帕金森叠加综合征特指一组神经 系统 的变性疾 患，病 因
不 清 。其 症 状 类 似 帕 金 森病 但 症 状 和 病 变 的范 围都 要 比 帕金 森 病 广 泛 。 主 要 包 括 进 行 性 核 上 性 麻 痹 和 多 系 统 萎 缩 两 大 类 。 目前 多 为 支 持 和 对 症 治 疗 【。作 者 在 移 植 治疗 晚 期 脊 髓 】 】
关键词 ： 帕金森叠加综合征； 细胞移植： 肌张力高； 功能恢 复
张 峰 ， 刘瑞 文 ，郗 海 涛 ，王 洪 美 ，黄 红云 ． 嗅鞘 细 胞 移 植 治 疗 帕 金 森 叠 加 综 合 征 ｌ 例 【】中 国 组 织 工 程 研 究 与 临 床 康 复 ， ２０ Ｊ． ０ ８，
１ （４ ：７ ９６ ０ ３ ） ９—８ ０ ２ ６
患 者住 院期 间 未 发现 任 何不 良事 件 。
术后２ ｈ患者诉右手可 以握拳 ，言语较术前清 晰 ，四肢 ，
肌 张 力 较 术 前 减 低 。术 后 第 ２ 双 侧 下 肢 肌 张 力 较 术 前 明显 天 减 低 。第 ３ 语 言 较 术 前 明 显清 晰 ，面 部表 情 较 术 前 丰 富 。 天 第 ７ 双 手 手 指 握 物 较 术 前 明 显好 转 。 前 和 术 后 １ 及 术 后 天 术 ４ｄ ３ ， 采 用 国 际 统 一 帕 金 森 病 评 定 量 表 评 价 比 较 总 分 由 １９ ０ｄ ０ 分 降 至 ９ 分 。 其 中 语 言 表 达 ２ １ ， 部 表 情 ４ 分 ， 直 项 ７ — 分 面 —３ 强 中 ：颈 ３ ２ 上 肢 ３ ２ 上 肢 ３ 右 下 肢 ３ １ 下 肢 ３ ２ — 右 — 左 —２ — 左 — ， 手 指 拍 打试 验 ：右 手 ４ ３ 手 ４ ３ — 左 — ，手 运 动 ：右 ４ ３ ４ ３ — 左 — 。
移植的嗅鞘细胞在大鼠正常和挫伤脊髓内的迁移
ｎ ｕ ｏ ｏ ｉ ｅ ｉ ｎ ｔ ｎ Ｊ ．Ｓ ｒ ｋ ，１ ８ ， ７ ３ ： ７ ． ｅ ｒ ｌｇ ｃ ｘｍｉａｉ ［ ］ ｔｏ ｅ ９ ６ １ （ ） ４ ２ ｏ ［ ］Ｊ ｈ ｎ ｓ ｎ Ｂ ５ ｏ ａ ｓｏ Ｂ， Ｂ ｌ ｈ ｎ ｏ Ｐ ｅ ｃ ｅ ｋ Ｖ． Ｎｅ ｒ ｎ ｌｐ ａ ｔ ｉ ｎ ｅ ｄｉｉ ｉ ｕ ｏ ａ ｌｓｉ ｔ ａ ｄ ｄ ｎ ｒ ｃ ｃｙ ｔ
１ ９８．
［ Ｏ Ｔｅ ｔ ｅ Ａ ， ｇ ｕ ｓ ｎＪ Ｃ ｏ ＣＭ ， ｔ １ ｎ ｉ ｎ ｎ ａ ｃ ｎ １ ］ ａ ｈ ｒＬ Ｍａ ｎ ｓ ｏ Ｅ， ｈ ｗ ｅ ．Ｅ ｖｒ ｍｅ ｔ １ ｏ ａ ｏ
ｄ ｔ ｎｓｉ ｌ ｅ ｅ ｈ ｐ ｃ ｍ ｐ ｓ ｄ ｐ ｎ ｅ ｔｂｅ ａ ｉ ｕ ｓ ａ ｄ ｂ ａ ｎ ｌ ｖ ｌ ｉｉ ｎｆｕ ｎｃ ｉ ｐｏ ａ ｏ ｕ — ｅ ｅ ｄ ｎ ｈ ｖ ｏ ｒ ｎ ｒ ｉ ｅ ｅｓ
６４９．
异 ， 明社 会 交 往 优 于 独 居 。提 示 丰 富 环 境 、 索 学 习 表 探
及 社 会 交 往 均 能 促 进 ＮＦ 的 表 达 ； 居 环 境 对 脑 缺 血 独
Ｌ ］ ｍａ Ｓ ，Ｆ ｉ ｒ ｈ Ｖ，Ｄｅ ｓ ｅ ｉ ７ Ｇａ Ｍ ｒ ｄｉ ｅ ｃ Ｇａ ｐ ｒ Ｒ，ｅ ａ．Ｈｕ ｎ ｍｉｓｚ ｅ — ｔ１ ｍａ ｄ ｉｅ ｎ ｕ
ｒ ｆｌ ｍ ｅ ｔｓ ｂ ｎ ｔ ｎ ｕ ｅ ｏ ｏ ｅ ｒ ｎ ｄ ｓ ａ ｅ ｉ ｒ ｎｓ ｅ ｃ ｍ ｉｅ ｏｉ ａ ｎ ｕ ｕ ｉ ｉ ｄ ｃ ｓ ｍ ｔ ｒ ｎ ｕ ｏ ｉｅ ｓ ｎ ｔ ａ ｇ ｎｉ ｃ
后 ＮＦ 的表 达 有 负 向 作 用 。 结 合 以 往 文 献 ， 鼠 脑 梗 大 死 后 给 予 丰 富 环 境 和 探 索 学 习 下 预 措 施 对 行 为 学 的 恢