糖类脂肪蛋白质检测

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还原糖(葡萄糖、 脂肪 麦芽糖、果糖) 实 验 材 料 含糖量高的生物组 织或器官,颜色为 白色或无色。 如:苹果或梨匀浆、 白色甘蓝叶、白萝 卜。 还原糖与斐林试剂 反应生成砖红色沉 淀 (还原糖中游离的 醛基或羰基将斐林 试剂中的 Cu2+还原 成 Cu2O 沉淀。 ) 斐林试剂 (或班氏试剂) 砖红色沉淀 富含脂肪的种子 如:花生种子(浸 泡 3-4h) 、花生种子 匀浆
淀粉遇碘变蓝
化学 试剂 实验 现象
碘液
Baidu Nhomakorabea紫色
蓝色
斐林试剂 组 成
甲液:0.1g/mL 的 NaOH 溶液; 乙液:0.05g/mL 的 CuSO 4 溶液。
双缩脲试剂
A 液:0.1g/mL 的 NaOH 溶液; B 液:0.01g/mL 的 CuSO 4 溶液。 在 碱 性 溶 液 ( NaOH ) 中 , 双 缩 脲 ( H 2 NCO NH CONH2 ) 能与 Cu
蛋白质 富含蛋白质的生 物组织 如: 豆浆、 鲜肝提 取液、鸡蛋清
淀粉 富含淀粉的生 物组织 如: 马铃薯匀浆
实 验 原 理
脂肪被苏丹Ⅲ染液 蛋白质与双缩脲 染成橘黄色(或被 试剂发生紫色反 苏丹Ⅳ染成红色) 应, 。 (双缩脲试剂 中的 Cu2+在碱性 条件下与蛋白质 中的肽键结合成 紫色络合物) 苏丹Ⅲ染液 (苏丹Ⅳ染液) 橘黄色(或红色) 脂肪颗粒(显微镜 下看到) 双缩脲试剂
2
甲液和乙液混合后产生
Cu(OH) 2 沉 淀 ,

原 理
Cu(OH) 2 与含醛基(—CHO)或羰基的可溶性
还原糖,在加热条件下反应,将 Cu(OH) 2 还 原为砖红色的 Cu 2 O 沉淀。
应,形成紫色络合物。由于蛋白质分子中含有 许多与双缩脲结构相似的肽键 (—CO—NH—) , 因此,蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而 使溶液呈现紫色。
使 用 方 法 颜 色 变 化
现配现用、等量混合、水浴加热
现配现用,先向待测组织液中加 1mLNaOH 溶液 形成碱性环境,再滴加少量 CuSO 4 溶液。
浅蓝色→棕色(混合色)→砖红色
无色→浅蓝色( Cu 2 )→紫色。
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