氧化酶试验
实验 血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
实验血糖测定（葡萄糖氧化酶法）【目的】体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。
【临床意义】葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。
通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。
葡萄糖含量增高见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。
葡萄糖含量减少见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。
【原理】样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
【器材】紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管【药品】葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度：【样本】新鲜无溶血血清。
【步骤】将10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。
空白管校准管样品管工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml蒸馏水0.01 ml ————校准液——0.01 ml ——样品————0.01 ml分别混合均匀，37℃水浴10～15分钟（避免太阳光直射），用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A）值。
【计算】【参考值】血清/血浆：3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。
此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。
【参考文献】1．全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王敏三，1997，P616.2．Trinder P. Ann Clin Biochem，1969，6: 24-27.血糖测定实验所需器材：1.紫外分光光度计（比色杯光径1.0cm），2.恒温水浴箱（能调温度的，37℃），3.移液器（枪）（规格1.0ml 6个，20µl 6个），枪头各100个4.试管50支，6个试管架5.烧杯100ml一个，50ml（或25ml）6个6.记号笔6支7.蒸馏水1瓶。
肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐含量的方法学评价
肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐含量的方法学评价关键词：肌酐；酶学测定；苦味酸法；血清［摘要］目的：评价肌氨酸氧化酶法(简称酶法)检测血清中肌酐含量的准确度、特异性和精确度。
方法：在设制好参数的前提下，取样本，于日立7170全自动生化分析仪上，进行重复、回收、干扰等一系列试验，同时用苦味酸法(Jaffe 法)进行相同实验，对比其结果。
结果：酶法测定肌酐的批内变异系数(CV)为0.67%，批间CV为0.83%，线性范围0 μmol/L～8 840 μmol/L，胆红素(≥165.5 μmol/L)和溶血(Hb<1 g/L )干扰接近零，回收率为101.7%。
准确度、精确度和特异性均较Jaffe法高。
结论:酶法抗黄疸干扰力强，操作简单、准确、重复性好，可作为常规测定方法。
［关键词］肌酐；酶学测定；苦味酸法；血清To Evaluate the Enzymatic Method for Assaying Creatinine in Serum Abstract：Objective To evaluate the precise、accurate and specific of enzymatic method for assaying creatinine in serum. Methods Both Enzymatic method and Jaffe’s method were used in HITACHI7170A automatic analyzr. After the pare meter of it was build them compared those results. Results The method affords a simple. Rapid and sensitive assay with good precision， extended linearity much better in clinical needs. Conclusion The method is easily automated and is suitable for routine work in clinical laboratories.Key words:Creatinine;Enzymatic assay;Jaffe’s assay;Serum肌酐是肌酸代谢的最终产物，它是由磷酸肌酸通过脱磷酸基并闭合成环而形成的内脱水物。
微生物生化和血清学试验标准操作规程
触酶试验标准操作规程1.目的规范触酶试验标准操作规程。
2．原理具有触酶(过氧化氢酶)的细菌，能催化过氧化氢，放出新生态氧，继而形成分子氧，出现气泡。
3．试剂3％过氧化氢溶液。
4．质控金黄色葡萄球菌ATCC 25923阳性，肺炎链球菌ATCC 4961 9阴性。
5．操作步骤取3％过氧化氢溶液0．5 ml，滴加于不含血液的细菌琼脂培养物上，或取1～3 ml滴加入盐水菌悬液中。
6．结果判断培养物出现气泡者为阳性。
7．注意事项7．1细菌要求新鲜。
7．2不宜用血琼脂平板上的菌落作触酶试验，因红细胞内含有触酶，可能出现假阳性。
7．3需用已知阳性菌和阴性菌作对照。
8．临床意义在革兰阳性球菌中，链球菌触酶试验阴性，葡萄球菌及微球菌均阳性，因此可用于革兰阳性球菌的初步分群。
氧化酶试验标准操作规程1．目的l规范氧化酶试验标准操作规程。
{2.原理氧化酶（细胞色素氧化酶）是细胞色素呼吸酶系统的酶。
具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色的醌类化合物。
3 . 试剂盐酸二甲基对苯二胺(或四甲基对苯二胺)0.1g，加蒸锱水10ml，置于棕色瓶内可用一周。
冰箱保存，或分装于棕色瓶内密封。
4. 质控铜绿假单胞菌ATCC27853阳性，大肠埃希菌ATcc 25922阴性。
5.操作步骤去洁净的滤纸一小块，蘸取菌苔少许，加1滴10g／L盐酸二甲基对苯二胺溶液于菌落上，观察颜色变化。
6．结果判断立即呈粉红色并迅速转为紫红色者为阳性。
7. 注意事项7．1 试剂在空气中易氧化，故应经常更换新试剂，或配置时试剂内加入0．1％维生素c以减少自身氧化。
7. 2 不宜采用含葡萄糖培养基上的菌落(葡萄糖发酵可抑制氧化酶活性)。
7．3实验时应避开含铁的培养基等含铁物质，因本实验过程中，遇铁时会出现假阳性。
8 . 临床意义8. 1 用于奈瑟菌属﹑非发酵等细菌的鉴定。
如果肠杆菌科不进行本试验，则可能将氧化8．2所有的革兰阴性菌均应进行氧化酶试验，如果肠杆菌科不进行本试验，则可能将氧化酶阳性的嗜水气单胞菌错误地鉴定为大肠埃希杆菌或沙雷菌。
细菌鉴定技术生化实验报告
细菌鉴定技术生化实验报告实验目的：本实验旨在通过生化实验方法，对细菌进行鉴定，以确定其种属特征，为细菌分类和研究提供科学依据。
实验原理：细菌的生化特性是其代谢活动和酶系的反映，不同的细菌具有不同的生化反应模式。
通过测定细菌对特定生化底物的代谢能力，可以鉴别出细菌的种类。
常用的生化实验包括氧化酶试验、触酶试验、糖发酵试验、硝酸盐还原试验等。
实验材料：1. 待鉴定的细菌菌株2. 生化试剂盒（包括氧化酶试剂、触酶试剂、糖发酵基、硝酸盐还原试剂等）3. 无菌操作器材4. 培养基（如LB培养基）5. 显微镜6. pH计7. 其他必要的实验室设备和耗材实验步骤：1. 细菌培养：将待鉴定的细菌菌株接种于LB培养基中，37°C恒温培养箱中培养24小时。
2. 氧化酶试验：取培养好的细菌菌液，滴加氧化酶试剂，观察颜色变化，记录结果。
3. 触酶试验：取细菌菌液，滴加触酶试剂，观察是否产生气泡，记录结果。
4. 糖发酵试验：将细菌接种于含有不同糖类的发酵基中，37°C培养一定时间，通过pH计测定pH变化，记录结果。
5. 硝酸盐还原试验：将细菌接种于含有硝酸盐的培养基中，观察是否产生亚硝酸盐，记录结果。
6. 数据分析：根据生化试验结果，结合细菌的形态学特征，进行综合分析，确定细菌的种类。
实验结果：1. 氧化酶试验结果：[具体结果]2. 触酶试验结果：[具体结果]3. 糖发酵试验结果：[具体结果]4. 硝酸盐还原试验结果：[具体结果]实验讨论：根据生化实验结果，结合细菌的形态学特征，可以初步判断细菌的种类。
在实验中，氧化酶和触酶试验是快速筛选细菌的重要手段。
糖发酵试验和硝酸盐还原试验则可以提供更多的代谢信息，有助于进一步的细菌鉴定。
需要注意的是，生化实验结果应结合其他实验数据和文献资料进行综合分析，以提高鉴定的准确性。
结论：通过本次生化实验，我们对[具体细菌名称]进行了鉴定。
实验结果显示，该细菌具有[具体生化特性]，符合[具体细菌种类]的生化特性。
非发酵菌的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握非发酵菌的基本概念及分类；2. 熟悉非发酵菌的鉴定方法；3. 提高实验室操作技能，培养科学思维和严谨的工作态度。
二、实验原理非发酵菌是一类不发酵或不分解糖类的革兰氏阴性杆菌，主要包括假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、黄杆菌属等。
非发酵菌的鉴定主要通过观察菌落特征、进行生化试验、动力与鞭毛观察等手段。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）非发酵菌菌种：假单胞菌、不动杆菌、产碱杆菌、莫拉菌、黄杆菌等；（2）培养基：普通琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、动力半固体培养基、氧化酶试验培养基等；（3）试剂：葡萄糖、乳糖、酵母提取物、酚红指示剂、氧化酶试剂等；（4）实验仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、无菌操作台等。
2. 实验仪器：（1）显微镜：用于观察菌落特征；（2）恒温培养箱：用于培养菌种；（3）酒精灯：用于无菌操作；（4）无菌操作台：用于无菌操作。
四、实验方法与步骤1. 菌落观察（1）将菌种接种于普通琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板，分别于30℃、37℃培养24小时；（2）观察菌落特征，如菌落大小、形状、颜色、边缘、表面、透明度等；（3）记录观察结果。
2. 动力与鞭毛观察（1）将菌种接种于动力半固体培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种在半固体培养基中的生长情况，如是否有鞭毛、菌落是否呈指状、螺旋状等；（3）记录观察结果。
3. 氧化酶试验（1）将菌种接种于氧化酶试验培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种是否产生氧化酶，即菌落周围是否出现绿色；（3）记录观察结果。
4. 氧化-发酵（O/F）试验（1）将菌种接种于氧化-发酵试验培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种是否产生酸，即菌落周围是否出现红色；（3）记录观察结果。
5. 麦康凯琼脂平板生长情况（1）将菌种接种于麦康凯琼脂平板，30℃培养24小时；（2）观察菌种在麦康凯琼脂平板上的生长情况，如是否生长、生长速度等；（3）记录观察结果。
抗坏血酸氧化物酶和多酚氧化酶活性的测定
儿茶酚＋O2
儿茶醌＋H2O
儿茶醌+抗坏血酸→儿茶酚＋脱氢抗坏血酸
三、实验材料
梨果肉
四、实验步骤
1．酶液提取 2．酶活性的测定（按下表配制反应体系）
瓶 号 1 2 3 4 5 6
缓冲液 4 4 4 3 3 3
抗坏血酸 焦儿茶酚 偏磷酸 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1
酶溶液 2 2 2 2 2 2
偏磷酸 (保温一定时间后) 1 1 1 1 1 1
五、试验结果
(1)抗坏血酸氧化酶活性按下式计算： 抗坏血酸氧化酶活性[氧化抗坏血酸毫克数/(克鲜重· 分)] =[ V′-( V 1- V 2)] ×0.44 (V/a)/(w×a) 式中：V′=滴定3号空白所用去的碘液毫升数； V1=滴定1号瓶所用去的碘液毫升数； V2=滴定2号瓶所用去的碘液毫升数； 0.44=每毫升5/6mmol碘液氧化抗坏血酸毫克数； V=提取液总体积（ml）； a=测定时所用提取液的ml数 w＝样品鲜重(g) t＝测定时间(分)。
抗坏血酸
CH2OH
脱氢抗坏血酸
利用碘液滴定剩余抗坏血酸
O
C HO HO H HO C C C C H O + C O C C C C H O O
I2
O H HO
+
2HI
CH2OH 抗坏血酸
CH2OH 脱氢抗坏血酸
利用单位时间内单位植物材料抗坏血酸的氧化量 利 用 间接表示多酚氧化酶的活性：
多酚氧化酶
抗坏血酸氧化ihoho利用碘液滴定剩余抗坏血酸儿茶酚o多酚氧化酶儿茶醌抗坏血酸儿茶酚脱氢抗坏血酸利用单位时间内单位植物材料抗坏血酸的氧化量间接表示多酚氧化酶的活性
抗坏血酸氧化物酶和多酚氧化 酶活性的测定
抗氧化酶活性等测定方法
抗氧化酶活性等测定方法叶绿体得提取一、试剂配置1、PBS提取液:每L水依次加入MES(195、2×0、05=9、76g)、山梨糖醇(0、33×182、2=60、126g)、NaCl(0、010×58、5=0、585g)、MgCl(0、002×95=0、19g)、EDTA(292、25×0、002=0、5845g)、KH2PO4(200×0、0005=0、1g);使用时加入ASA-Na(198、1×0、002=0、3962g);2、悬浮液:将PBS提取液中得MES换为238、3×0、05=11、915g得HEPES(238、3×0、05=11、915g);3、80%Percol:80ml原液+20ml水;40%Percol:40ml原液+60ml 水;实际配制:PBS提取液2000ml(3个处理*2个品种*3个重复*20ml*3次=1080ml),悬浮液100ml(3个处理*2个品种*3个重复*1ml*3次=54ml);80%Percol 200ml; 40%Percol 200ml、(3个处理*2个品种*3个重复*3ml*3次=162ml)二、提取步骤1、10g鲜样加20ml提取PBS(50mM MES PH6、1,含0、33M 山梨糖醇,10mM NaCl,2mM MgCl2,2mM EDTA,0、 5 mMKH2PO4,2mM ASA-Na,ASA-Na使用前现配现加)2、快速研磨,使叶片碎成绿豆粒大小,4层纱布过滤,去除残渣(注意过滤时不可用力挤压,以免叶绿体膜破碎)3、滤液2000g 3min,小心倒出上清液,将离心管放入离心机后,使离心机得加速很快上升到预定值(水平转头,加速度调到9),约经30s后很快使其下降停止,整个离心持续大约2-3min左右完成;4、沉淀用1ml提取液漂洗表面悬浮物;5、用1ml悬浮液(50mM HEPES pH 7、6,含0、33 mM山梨糖醇,10mM NaCl,2mM MgCl2,2mM EDTA,0、5 mMKH2PO4,2mM ASA-Na,ASA-Na使用前现配现加)将沉淀悬浮,在分散叶绿体时宜用毛笔轻轻刷,或者用手握住离心管在冰块之间搅动,使叶绿体由于震动分散开来,不要用棉球吸滤,以防被膜压破。
氧化酶反应
氧化酶反应
试剂
1%盐酸二甲基对苯二胺溶液
1%α-萘酚－乙醇溶液
试验方法
取37℃(或低于37℃)培养20小时的斜面培养物一支，将两种试剂各2至3滴，从斜面上端滴下，并将斜面略加倾斜，使试剂混合液流经斜面上的培养物。
如系平板培养物，则可用试剂混合液滴在菌落上。
或者如下图，用滤纸在配制好的溶液中浸湿，待滤纸干燥后，用滤纸轻贴平板上的菌落，让适量菌落附着在滤纸上，观察颜色变化。
结果
于1分钟内呈现蓝色者为阳性。
阳性培养物大多数于30秒钟内出现强阳性反应，2分钟以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果。
测定葡萄糖氧化酶活力的一种简便方法
测定葡萄糖氧化酶活力的一种简便方法周建芹1,陈韶华2,王剑文1(1.苏州大学医学部药学院,江苏苏州 215123;2.苏州大学医学部实验中心,江苏苏州 215123)摘 要:利用靛蓝胭脂红褪色分光光度法测定葡萄糖氧化酶催化葡萄糖溶液产生的过氧化氢浓度,经过标准曲线转换得到葡萄糖氧化酶的活力。
研究了缓冲液p H 值、水浴温度、靛蓝胭脂红用量等对葡萄糖氧化酶活力测定的影响。
结果表明:利用靛蓝胭脂红褪色分光光度法测定葡萄糖氧化酶活力时,缓冲液最佳p H 值为4、最佳水浴温度为100 、靛蓝胭脂红最佳用量为1.3mL 。
此方法的重现性较好,反应系统较稳定。
关键词:葡萄糖氧化酶;活力;褪色中图分类号:R 331 文献标识码:B 文章编号:1002-4956(2008)12-0058-03A sm i ple and conven i entmet hod to deter m i net he acti vit y of gl ucose ox i daseZHOU Jian -qin 1,C H EN Shao -hua 2,WANG Jian -w en1(1.School of Pha r m acy ,Soocho w U n i ve rs i ty ,Suzhou 215123,Chi na ;2.Experi m ent Center of M edical Co lleg e ,Soochow U n i versity ,Suzhou 215123,Ch i na)Ab stract :In th i s study ,a novelm ethod based on t he fadi ng o f isa ti n is proposed to determ i ne the g l ucose ox i dase ac -tivity .The e ffects of bu ffer p H value ,te m pe rature o f w ater bath and isa tin dosage on de ter m i ning process are ana -l yzed .T he results show that t he best bu ffer p H va l ue is 4,the best te m pe ra t ure o f wa ter ba t h 100 and the isati n dosage 1.3mL .Besi des ,t he m ethod exh i bits good repea tab ilit y and stability .H ence ,it could therefore be a versatile m e t hod for dete r m ini ng t he activ i ty o f g l uco se ox i dase and w oul d have g reat pro m ise i n many fields .K ey w ords :g lucose ox idase ;acti v ity ;fad i ng收稿日期:2008-01-09 修改日期:2008-04-21作者简介:周建芹(1975 ),女,山东省泰安市人,硕士,讲师,主要研究方向:酶工程基金项目:苏州大学青年基金资助项目(Q3132531);苏州大学教改项目(31315728).葡萄糖氧化酶在自然界中普遍存在,在食品、医药和发酵等工业生产及分析检测中用途广泛,是高等院校生物化学、酶学和酶工程等相关实验课程中经常选用的一种重要的模式酶。
抗氧化酶活性等测定方法
叶绿体的提取一、试剂配置1、PBS提取液：每L水依次加入MES(195.2×0.05=9.76g)、山梨糖醇(0.33×182.2=60.126g)、NaCl （0.010×58.5=0.585g）、MgCl（0.002×95=0.19g）、EDTA（292.25×0.002=0.5845g）、KH2PO4（200×0.0005=0.1g）；使用时加入ASA-Na（198.1×0.002=0.3962g）;2、悬浮液：将PBS提取液中的MES换为238.3×0.05=11.915g的HEPES（238.3×0.05=11.915g）；3、80%Percol：80ml原液+20ml水；40%Percol：40ml原液+60ml水；实际配制：PBS提取液2000ml(3个处理*2个品种*3个重复*20ml*3次=1080ml),悬浮液100ml（3个处理*2个品种*3个重复*1ml*3次=54ml）;80%Percol 200ml; 40%Percol 200ml.（3个处理*2个品种*3个重复*3ml*3次=162ml）二、提取步骤1、10g鲜样加20ml提取PBS（50mM MES PH6.1，含0.33M山梨糖醇，10mM NaCl，2mM MgCl2，2mM EDTA，0.5 mMKH2PO4，2mM ASA-Na，ASA-Na使用前现配现加）2、快速研磨，使叶片碎成绿豆粒大小，4层纱布过滤，去除残渣（注意过滤时不可用力挤压，以免叶绿体膜破碎）3、滤液2000g 3min，小心倒出上清液，将离心管放入离心机后，使离心机的加速很快上升到预定值(水平转头，加速度调到9)，约经30s后很快使其下降停止，整个离心持续大约2-3min左右完成；4、沉淀用1ml提取液漂洗表面悬浮物；5、用1ml悬浮液（50mM HEPES pH 7.6，含0.33 mM山梨糖醇，10mM NaCl，2mM MgCl2，2mM EDTA，0.5 mMKH2PO4，2mM ASA-Na，ASA-Na使用前现配现加）将沉淀悬浮，在分散叶绿体时宜用毛笔轻轻刷，或者用手握住离心管在冰块之间搅动，使叶绿体由于震动分散开来，不要用棉球吸滤，以防被膜压破。
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氧化酶试验(oxidasetest)氧化酶又名细胞色素氧化酶、细胞色素氧化酶C或呼吸酶。
试验用于检测细菌/是否有该酶存在。
原理是氧化酶在有分子氧或细胞色素C存在时，可氧化四甲基对苯撑二胺出现紫色反应。
假单胞菌属、气单胞菌属等阳性，肠杆菌科阴性，可区别。
血浆凝固酶：由金黄色葡萄球菌致病性菌株产生。
能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固。
在感染部位由于凝固酶的产生，使体液中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白，沉积于细菌表面，可阻碍吞噬细胞对细菌的吞噬和杀灭作用。
凝固酶试验(coagulase test)原理：
致病性葡萄球菌→ 凝固酶→ 血浆中纤维蛋白原(液态) 纤维蛋白(固态) → 血浆凝固方法：
①玻片法：检测结合凝固酶
②试管法：检测游离凝固酶
应用：
作为鉴别葡萄球菌致病性的重要指标。
一、名词解释
汹涌发酵”现象——在牛乳培养基中，产气荚膜梭菌能分解乳糖产酸使酪蛋白凝固，同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲散形成蜂窝状，并将液面上的凡士林向上推挤，甚至冲开棉塞，气势凶猛，称为“汹涌发酵”现象，为本菌特征之一
肥达反应——用已知伤寒菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门氏菌的标准液与病人血清做凝集试验，用于伤寒副伤寒的辅助诊断或用于流行病学调查的免疫凝集实验。
外斐试验——变形杆菌属的X19,X2.Xk菌株的菌体O抗原与斑疹伤寒立克次体和恙虫病立克次体有共同抗原，故可用OX19，OX2，OXk代替立克次体作为抗原与相应患者血清进行交叉凝集反应，此称外斐试验，辅助诊断立克次体病。
SPA——葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白成分，称为葡萄球菌A蛋白。
英文缩写为SPA
MRSA—是能产生β—内酰胺酶而破坏青霉素的β—内酰胺环而使青霉素失效而表现出耐药性的一类葡萄球菌。
胆汁溶菌试验——胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌，可能是由于胆汁降低细胞膜表面的张力，使细胞膜破损或使菌体裂解；或者是由于胆汁加速了肺炎链球菌本身自溶过程，促使细菌发生自溶。
血浆凝固酶试验——血浆凝固酶能使含有肝素等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质, 葡萄球菌中致病株大多数能产生, 是一种主要致病物质，是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。
也是区别金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌的主要指标，该酶可分结合凝固酶与游离凝固酶，前者可用玻片法检测，后者可用试管法检测
Nagler（奈格尔）试验：产气荚膜梭菌在卵黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈，是由细菌产生的卵磷脂（α-毒素）分解卵黄中的卵磷脂所致，若在培养基中加入α毒素的抗血清，则菌落周围不出现浑浊，为本菌特征之一，可用于产气荚膜梭菌的鉴定。
L型菌¬——是细菌、真菌等微生物的细胞壁缺陷型。
大多数细菌可在某些因素的影响下失去细胞壁变为L 型
氧化酶实验——氧化酶（细胞色素氧化酶）是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。
具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化，生成有色的醌类化合物。
常用有三种方法；细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色，为阳性。
主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前者为阴性，后者为阳性。
奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。
渺茫(413417227) 21:47:37
X因子----是一种耐热的存在于血红蛋白中的一种血红素及其衍生物，含铁卟啉，是细菌合成过氧化氢酶，过氧化物酶与细胞色素氧化酶的辅基
V因子-----是一种对热不稳定的vitB类物质，存在于血液和某些植物中，是脱氢酶的辅酶，在细菌的呼吸中起传递氢的作用。
卫星现象----把金黄色葡萄球菌与流感嗜血杆菌一起培养时，可见到流感杆菌的菌落较大，而远离金葡的流感杆菌菌落较小，这种现象称“卫星现象”。
其原理：因金葡能合成v因子释放到培养基中，从而促进流感嗜血杆菌的生长
病毒性疾病实验诊断的一般原则：特异、敏感、快速和简便。
首先根据流行病学和临床特点，初步判断可能感染的病毒；然后根据可疑病毒生物学特点、机体免疫应答和临床过程，以及病人当前所处的时机，确定实验诊断的方法。
目前病毒感染的检查主要依靠经典的方法和近来发展起来的分子生物学等方法。
前者主要包括病毒分离培养、鉴定及血清学实验；后者主要是核酸杂交与PCR及现代免疫学技术。
2.病毒的鉴定
(1)初步鉴定：
①根据病毒感染组织细胞的细胞病变效应(cytopathic effect CPE)对鸡胚的敏感性、对动物的感染范围或潜伏期与症状可初步判断病毒的存在与否、是哪类病毒；
②红细胞吸附试验；
③干扰作用：一种病毒感染细胞后，可干扰另一种病毒进入同一细胞增殖。
这种干扰现象可被相应病毒的特异抗体所抑制，称之为干扰抑制现象；
④理化性状测定：电镜观察大小和形态；乙醚敏感试验;耐酸试验。
(2)最后鉴定：血清学鉴定
采急性期和恢复期双份血清，同时测抗体的效价，观察抗体的动态变化，协助病毒性疾病的诊断。
若IgM↑，表示近期感染或疾病处于活动状态；
若IgG效价呈4倍以上升高，可作为一种辅助诊断指标。
常用的血清学方法：中和试验；补体结合试验；血凝抑制试验；免疫荧光试验；ELISA；乳胶凝集试验；间接血凝试验。