环境内分泌干扰物的作用机理及其生物检测方法

常见的微生物检测方法

常见的微生物检测 方法

摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同

时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法：

在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中双酚A等4种内分泌干扰物

DOI :10.11895/j.issn.0253-3820.140892 在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法 测定乳制品中双酚A 等4种内分泌干扰物 张品1,2 张晶1,2 陈洁君3 段鹤君2 邵兵*1,2 1 (首都医科大学公共卫生学院,北京100058)2(北京市预防医学研究中心,食物中毒诊断溯源技术北京重点实验室,北京100013)3(中国生物技术发展中心,北京100039) 摘 要 建立了乳制品中三氯生二三氯卡班二双酚A 和壬基酚4种内分泌干扰物的在线固相萃取超高压液相色谱-串联质谱(On-line SPE LC-MS /MS)检测方法三液态乳制品或奶粉样品中加入乙酸缓冲液,目标物经β-葡糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶酶解后,用乙腈提取,冷冻离心10min 后,取上清液,用水稀释,在线固相萃取串联质谱法测定三样品溶液经Xbridge C 8柱富集,BEH C 18色谱柱分离,甲醇和水梯度洗脱,三重四极杆质谱电喷雾负离子模式下采集数据,同位素内标法定量三4种目标化合物的线性范围为0.005~5.0μg /L,相关系数R 2>0.99;方法的定量限为0.03~1.0μg /kg,3个添加水平的平均加标回收率为80.2％~106.7％,RSD<15％三本方法快速二简单二灵敏度高,适用于乳制品中4种内分泌干扰物的同时检测三应用本方法对原料乳和北京市售液奶样品进行了分析,结果表明,壬基酚的检出率最高三 关键词 乳制品;三氯生;双酚A;壬基酚;在线固相萃取;液相色谱-串联质谱 2014-09-24收稿;2014-10-07接受本文系质检总局公益性行业科研专项(No.2012104003-03)和国家自然科学基金(No.21177014)资助项目*E-mail:shaobingch@https://www.360docs.net/doc/9d12771436.html, 1 引 言 环境内分泌干扰物也称为环境激素,是能够干扰生物体内分泌系统的外源性化学物质三流行病学研究显示,某些动物和人类的生殖发育系统和行为异常以及肿瘤发生率上升,与环境内分泌干扰物有关三三氯生(Triclosan,TCS)与三氯卡班(Triclocarban,TCC)作为广谱的抗菌剂,广泛用于沐浴露二牙膏等日用品中三已有的研究表明,TCS 会影响蝌蚪时期甲状腺激素相关基因的表达[1],能够降低雄性大鼠的精子数量与激素水平[2];TCC 可协同增强雌二醇和睾酮的生物活性[3,4]三这些潜在的内分泌干扰效应引发了公众对TCS 危害人体健康影响的担忧三双酚A(Bisphenol A,BPA)和壬基酚(Nonylphenol, NP)是广受关注的酚类内分泌干扰物,具有弱雌激素效应[5~8]三食品中的内分泌干扰物的污染问题是当前的研究热点之一三由于使用的广泛性及较高的亲脂性,NP 和BPA 被发现在水产品二肉制品二乳制品及谷物等多种食物中广泛存在[9~11],三氯生在母乳中的检出率也很高[12]三为了满足食品中相关物质检测的需要,许多分析方法相继建立起来,包括气相色谱质谱法[13]二高效液相色谱法[14]二液相色谱串联质谱法[15~17]三气相色谱质谱法通常需要衍生化,步骤繁琐;液相色谱法灵敏度较低,不适合复杂基质中的痕量污染物检测三此外,这些方法多采用液/液萃取或离线固相萃取技术对食品中的目标物进行富集和净化,会耗费大量有机溶剂,且操作较为复杂,耗时费力三 在线固相萃取技术是近年来发展起来的全自动样品处理技术,在饮用水检测领域应用较多三本研究利用双三元超高压液相色谱,实现了乳制品中TCS二TCC二NP 和BPA 4种内分泌干扰物的同时在线固相萃取,结合三重四极杆串联质谱建立了原料乳二奶粉等样品中目标物的痕量检测方法三 2 实验部分 2.1 仪器和试剂Ultimate TM 3000UHPLC 双三元超高压液相色谱系统(配备DGP 3600M 双三元梯度泵二SRD 3600溶第42卷 2014年12月 分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第12期1811~1817

环境中微生物的地检测和分离纯化

环境中微生物的检测和分离纯化 姓名：王韬 班级：生76 组号：7-2组 同组人：袁堂谧 实验日期：2009-11-12 一、实验目的： 1.熟悉常用微生物培养基配置方法。 2.联系无菌操作技术。 3.学习单菌落划线分离法。 4.通过实验认识环境中微生物的分布。 二、实验原理： 1.微生物的分离与纯化：从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的 过程称微生物的分离与纯化。常用的是平板分离法。为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、温度和氧的条件要求不同，而供给他们适宜 的培养条件，或加入某些抑制剂造成一支其他菌生长而利于此菌生长的环境。 2.平板菌落计数法：平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释，使其中的微生物充分 分散成单个细菌，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长 繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品的一个单细胞。该计数法 最大的优点是可以获得活菌的信息。 三、实验材料： 土壤悬液（稀释100倍），未知菌菌落平板，无菌水，取液器，培养箱，培养皿，无菌涂棒，接种环，接种针，酒精灯。 四、实验步骤： (一)培养基的制备（提前准备）： 肉汤蛋白胨培养基： 牛肉膏 2g 蛋白胨 4g NaCl 2g 蒸馏水 400mL 琼脂 8g 1.称量：按上述配方称量各类物质。 2.溶解：在400mL水中溶解牛肉膏、蛋白胨和NaCl，混合加热溶解。 3.调pH值：调至7.2-7.4 4.过滤（本实验无需过滤） 5.加凝固剂：加入称量好的琼脂，混合均匀。 6.分装 7.包扎和灭菌 8.倒平板 (二)从土壤中分离微生物 1.采土样（已事先准备）：选择较肥沃的土壤，铲去表层土，挖5-20cm深度的或

环境内分泌干扰物危害及作用机制研究

环境内分泌干扰物危害及作用机制研究 姓名：付东 所在学院：中医药学院 所学专业：中西医临床医学 年级：2015级 学号：2015223790

一、前言 环境内分泌干扰物，Environmental Endocrine Disruptors 简称EEDs，又称环境激素、内分泌活性化合物、内分泌干扰化合物，所谓环境内分泌干扰物系指一种外源性物质，该物质会导致未受损伤的有机体发生逆向健康影响，或使有机体后代的内分泌功能发生改变。潜在的内分泌干扰物则是一种可能导致未受损伤的有机体内分泌紊乱的物质。 如今环境污染导致环境质量日益恶化，对人类健康构成严重威胁，开展环境与人类健康的基础研究是科学与医学共同面对的课题。在当今全球性环境问题中，化学污染占70%左右，其中以EEDs对环境质量和人类健康影响最广，危害最大。 EEDs表现出拟天然激素或抗天然激素的作用，通过干扰机体的内分泌功能引起中毒或在比较低的接触水平即对心、肺、肝、肾、性腺等器官产生危害，即通过内分泌系统改变人的内环境而致病。人和脊椎动物具有相同的内分泌系统，如脑垂体、甲状腺、胸腺、胰腺、性腺等。这些腺体分泌的物质仅在体内起作用，不排除体外，故称之为内分泌腺体，其分泌物称为激素，能调节生物体的成长、代谢、和正常的生理功能。激素在体内的水平非常低，但有极大的功效，如胰岛素分泌不足会发生糖尿病，分泌过多则会发生低血糖。EEDs正是通过改变激素在体内的正常水平而对人体产生影响和危害的。 与其他环境污染物相比，EEDs对人体健康的影响有以下显著特点：

1.低剂量长期作用，具有慢性毒性效应； 2.对人体生长，发育，生殖产生影响，对后代影响影响巨大；； 3.与人体各系统重大疾病有密切，危害巨大； 4.采用常规的方法不易被筛选和检测。 因此，开展EEDs与人类健康的基础研究具有重大意义。 二、环境内分泌干扰物的类型 1.干扰雌激素作用的类群： 1)多氯联苯类化合物（Polychlorinated biphenyl, PCBs） 2)烷基酚类（Alkylphenol ,APs） 3)邻苯二甲酸酯类（Phthalate Esters ,PAEs） 4)二苯烷烃类（Diphenylkanes） 5)双酚化合物（Biphenols,BPs） 6)有机氯杀虫剂 7)除草剂 8)植物雌激素（phyto-estrogens, PEs）、真菌雌激素 9)某些重金属（铅、镍、汞） 2.干扰睾酮作用的类群： 1)氟他胺（Flutamide） 2)利谷隆（Linuron） 3)苯乙烯（Styrene） 4)二硫化碳（Carbonsulfide）

《典型污染物在环境各圈层中的转归与效应》重点习题及参考答案

《典型污染物在环境各圈层中的转归与效应》 重点习题及参考答案 1．为什么Hg 2+和CH 3Hg +在人体内能长期滞留？举例说明它们可形成哪些化合物？ 这是由于汞可以与生物体内的高分子结合，形成稳定的有机汞络合物，就很难排出体外。此外，烷基汞具有高脂溶性，且它在生物体内分解速度缓慢（其分解半衰期约为70d ），因而会在人体内长期滞留。 Hg 2+和CH 3Hg + 可以与羟基、组氨酸、半胱氨酸、白蛋白形成络合物。甲基汞能与许多有机配位体基团结合，如—COOH 、—NH 2、—SH 、 以及—OH 等。 2．砷在环境中存在的主要化学形态有哪些？其主要转化途径有哪些？ 砷在环境中存在的主要化学形态有五价无机砷化合物、三价无机砷化合物、一甲基胂酸及其盐、二甲基胂酸及其盐、三甲基胂氧化物、三甲基胂、砷胆碱、砷甜菜碱、砷糖等。

砷的生物甲基化反应和生物还原反应是砷在环境中转化的重要过程。主要转化途经如下： 3．试述PCDD是一类具有什么化学结构的化合物？并说明其主要污染来源。 （1）PCDD这类化合物的母核为二苯并一对二噁英，具有经两个氧原子联结的二苯环结构。在两个苯环上的1，2，3，4，6，7，8，9位置上可有1－8个取 代氯原子，由氯原子数和所在位置的不同可能组合成75 种异构体，总称多氯联苯并一对二噁英。其结构式如右： （2）来源：①在焚烧炉内焚烧城市固体废物或野外焚 烧垃圾是PCDD的主要大气污染源。例如存在于垃圾中 某些含氯有机物，如聚氯乙烯类塑料废物在焚烧过程中可能产生酚类化合物和强反应性的氯、氯化氢等，从而进一步生产PCDD类化合物的前驱物。除生活垃圾外，燃料（煤，石油）、枯草败叶（含除草剂）、氯苯类化合物等燃烧过程及森林火灾也会产生PCDD类化合物。②在苯氧酸除草剂，氯酚，多氯联苯产品和化学废弃物的生产、冶炼、燃烧及使用和处理过程中进入环境。③另外，还可能来源于一些意外事故和战争。

实验3-环境微生物的检测

实验三环境微生物的检测 一、实验目的 1.了解周围环境中微生物的分布情况。 2.懂得无菌操作在微生物实验中的重要性。 3.了解四大类微生物的菌落特征。 二、实验原理 在我们周围的环境中存在着种类繁多的、数量庞大的微生物。土壤、江河湖海、尘埃、空气、各种物体的表面以及人和动物体的口腔、呼吸道、消化道等都存在着各种微生物。由于它们体积微小，人们用肉眼无法观察到它们个体的存在。但是只要稍加留意，我们就可以在发霉的面包、朽木上看到某些微生物群体。这些现象表明，自然界只要有微生物可以利用的物质和环境条件，微生物就可以在其上生长繁殖。据此，我们在实验室里就可以用培养基来培养微生物。 培养基是用人工配制的、适合微生物生长繁殖和产生代谢产物用的混合养料。其中含有微生物所需要的六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、生长因子、气体和水分。此外，根据不同的微生物的要求，在配制培养基时还需用酸液或碱液调节至适宜的pH。配制好的培养基必须进行灭菌。所谓灭菌是指采用各类的物理或化学因素，使物体内外的所有微生物丧失其生长繁殖能力的措施。经过灭菌后的物体是无菌的。消毒是与灭菌完全不同的概念，它是指用较温和的物理因素杀死物体表面和内部病原微生物的一种常用的卫生措施。 灭菌的方法较多，广泛使用的是高温灭菌，其中最常用的是高压蒸汽灭菌法。此法是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的。在1.05kg/cm2的蒸汽压力下，温度可达121℃。一般只要维持15~20min，就可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子。 微生物的接种技术是生物科学研究中的一项最基本操作技术。为了确保纯种不被杂菌污染，在整个接种过程中，必须进行严格的无菌操作。在实验过程中必须牢固树立无菌概念，经常保持实验台及周围环境的清洁，严格无菌操作，避免杂菌的污染，这是保证实验成功的必要条件。

环境内分泌干扰物及其危害

环境内分泌干扰物危害及作用机制研究 杜磊1，李勃2,3*，马瑜2,3，王长晔4 （1 西安市第五医院陕西西安710082； 2 陕西师范大学生命科学学院陕西西安710062；3陕西省微生物研究所陕西西安710043；4西安市莲湖区北院门庙后街社区卫生服务中心陕西西安710002）摘要：近年来，环境内分泌干扰物（EDCs）因其在环境中广泛存在和对生物及生态环境的严重危害而受到日益关注，并已成为毒理学、生态学、系统发育学、医学等诸多科学领域的研究热点。本研究基于近年来国内外研究成果和科学实践，着重介绍了目前EDCs的主要类型，对生物的危害及其作用机制，并就当前该领域研究中存在的问题以及未来的发展方向进行了探讨。 关键词：环境内分泌干扰物，内源性激素，作用机制，危害 The hazard and mechanism of the Environmental Endocrine Disruptors Du Lei1，Li Bo2,3*，Ma Y u2,3，Wang Changye4 1 Xi’an No. 5 Hospital, Xi’an 710082, China 2 Institute of Life Science, Shaanxi Normal University, Xi’an 710062, China 3 Shaanxi Microbiology Institute, Shaanxi Academy of Science, Xi’an 710043, China 4 Xi'an Lianhu District Beiyuanmen & Miaohoujie Community Health Center, Xi’an 710002, China Abstract: The Endocrine disrupting chemicals (EDCs) are natural or man-made agents widely presenting in the environment that interfere in someway with normal endocrine function and caused serious damage on the biocenosis and entironment. As a result, the effect and function of the EDCs has become a hot topic in many research fields such as Toxicology, Ecology, Development biology and so on. The present paper reviewed the researches on the hazard and mechanism of action of the EDCs and its main types. The development prospect and strategy are also discussed. Key words: Environmental endocrine disruptors, Endogenous hormones，interaction mechanisms，hazard 环境内分泌干扰物（Environmental endocrine disruptors, EDCs）是一类存在于环境中的能够干扰生物体内源激素的合成、释放、转运、结合、作用以及清除，从而影响生物体的机 基金项目：国家自然科学基金资助项目(130770243); 陕西省科学院重点项目（2010ZD01） 通讯作者(Corresponding author)，E-mail:libo@https://www.360docs.net/doc/9d12771436.html,

微生物检验(完整版)

微生物检验（完整版） 名解 微生物：是一群个体微小结构简单肉眼不能看见的微小生物的总称 种：亲缘关系较近的微生物群体在进化发育阶段上有一定的共同形态和生理特征 微生物学：生物学的一个分支是研究微生物在一定条件下的形态结构生理生化遗传变异特性及微生物的进化分类生态等生命活动规律以及微生物之间与人类动植物自然界互相关系的一门科学 抗生素：是由某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭某些其他微生物和肿瘤细胞的微量生物活性物质 细菌素：是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质 条件致病菌：正常菌群在宿主体内具有相对稳定性一般不致病 消毒：指杀死物体上的病原微生物但不一定能杀死细菌芽孢的方法 灭菌：指杀灭物体上所有的微生物的方法 防腐：指防止或抑制微生物生长繁殖的方法 无菌：指没有货的微生物的存在 质粒：是细菌染色体外的遗传物质也是环状闭合的双联DNA分子比染色体小存在于细胞质中可自主复制 突变：是指细菌遗传物质的机构发生突然而稳定的改变所致的变异现象可遗传给后代 基因转移：外源性物质由供体菌转入受体细胞内的过程 基因重组：供体菌的基因进入受体菌细胞并在其中自行复制与表达或矛受体菌DNA整合在一起的过程 病毒：是一类个体微小结构简单只含一种核酸只能在活的易感细胞内以复制方式增殖的

非细胞型微生物 复制周期：病毒的增殖被人为分成吸附穿入脱壳生物合成装配成熟与释放七个步骤的完整过程 缺陷病毒：是指因病毒基因组不完整或因基因某一点改变而不能进行正常增殖的病毒 顿挫感染：病毒进入宿主细胞若细胞缺乏病毒复制所需的酶能量和必要成分等则病毒无法合成自身成分不能够装配和释放子代病毒的现象 干扰现象：两种病毒感染同一种细胞时可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象 人工自动免疫：是将疫苗等免疫原接种于人体刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答使机体获得特异性免疫力 人工被动免疫：是指注射含某种病毒特异性中和抗体的免疫血清等一系列细胞因子是机体立即获得特异性免疫 干扰素：是由病毒或干扰素诱生剂作用于中性粒细胞成纤维细胞或免疫细胞产生的一种糖蛋白 致病性：一定种类的病原微生物在一定的条件下能在特殊的宿主体内引起特定疾病的能力半数致死量：在规定时间内通过一定途径能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感染需要的最小病原体数量或毒素量 急性感染：发作突然病程较短一般是数天或数周 局部感染：病原体侵入机体后局限就在一定部位生长繁殖引起病变的一种感染类型 毒血症：致病菌侵入宿主体后只在机体局部生长繁殖病菌不进入血液循环但其产生的外毒素入血引起特殊的毒性症状 败血症：致病菌侵入血流后在其中大量繁殖并产生毒性产物引起全身性毒性症状 内毒素血症：革兰阴性菌侵入血流并在其中大量繁殖崩解后释放出大量毒素也可有病灶

环境内分泌干扰物与人体健康

环境内分泌干扰物与人体健康 管理学院营销1002 徐盛宇学号：3100806049 摘要：环境内分泌干扰物系指一种外源性物质，该物质会导致未受损伤的有机体发生逆向健康影响，或使有机体后代的内分泌功能发生改变。潜在的内分泌干扰物则是一种可能导致未受损伤的有机体内分泌紊乱的物质。本文着重阐述了环境内分泌物干扰物的研究历史；常见的环境内分泌干扰物种类；对人体健康的影响；环境内分泌物的防治对策。 关键词：环境内分泌干扰物人体健康研究历史种类影响防治对策 在目前人类生活、工作及活动的环境中,存在着大量化学物质。其中有 些是有害物质,是环境污染的主要因素之一,其化学成份复杂,门类繁多,毒性各异,造成对人类健康及生存的威协,不可乎视,广泛存在于大气、土壤、水系、粮食、蔬菜、水果、禽、蛋、肉、奶、鱼、虾等畜牧水产品、衣物家俱、建筑材料、装修物、汽车等交通工具、塑料制品中。分布在人类衣、食、住、行及工作的各种环境中。其中具有对人体自生激素的产生、分泌、代谢、消减作用的一类化学物质称之为环境内分泌干扰物。能影响人体的各种内分泌器官有如脑垂体、甲状腺、胸腺、胰腺、性腺等各种内分泌器官激素的生理功能对各种疾病的发生、发展、人体的生长、发育、生育及后代产生重要影响,其中不少的种类也属于环境诱变剂的范畴,同时具有致突变、致畸、致癌作用,但也有的与环境诱变剂不尽相同,包括范围较广,其毒性主要 作用于内分泌系统 1.环境内分泌干扰物的研究历史 1930s；实验室证实二强联苯具有雌激素活性，以后相继合成多种具有 雌激素活性的药物。 1970s：日本在对“水俣病”和“痛痛病”的病因学研究中提出“环境 激素”的概念。 1980s：日本、英国、美国许多地方同时发现具有精囊和卵巢的鱼、贝类，以及雄鱼雌性化。 1995：Minnesota的学生发现畸形青蛙。同年，成立了内分泌干扰物工作组；美国环境与自然资源委员会将内分泌干扰物研究列为五个最优先项目之一。 1996：Theo Colborn由于在EEDs研究领域的杰出工作而被授予Rachel Carson Leadership Award。同年5月，OECD成立EEDs筛选和研究专家 组。

环境内分泌干扰物与自身免疫性疾病详细内容(一)

环境内分泌干扰物与自身免疫性疾病详细内容(一) 关键词]自身免疫性疾病健康网讯:环境内分泌干扰物是指干扰生物体内维持自稳及调节发育过程中激素的产生、释放、代谢、结合、排泄、交互作用的外源性物质。本文介绍了环境内分泌干扰物的定义、分类、人群暴露方式以及环境内分泌干扰物对生物体免疫系统的危害;目的在于探讨环境内分泌干扰物与人类自身免疫性疾病的关系。1996年3月，TColbor，DDumanopskiJPMyers编著，由美国副总统戈尔作序的环境著作《OurStolenFuture》出版。该书对人工合成化学品在环境和食品中的残留、积累以及对人类内分泌、免疫系统等的干扰提出了警告，引起了公众对这类化学物质的强烈关注。研究发现，20世纪后期，野生动物和人类的内分泌系统、免疫系统、神经系统等出现了各种各样的异常现象，人类内分泌系统异常的突出表现是生殖异常。最早发现一些鱼类的生殖器官始终不能发育成熟，雌雄同体率增加，雄性退化，种群退化。类似的现象也出现在人类。20世纪60年代，美国女性一生中乳腺癌的发生几率仅为1/20，而20世纪90年代上升为1/8。而且近50年来男性的睾丸癌发生率增加了〔3〕几倍，前列腺癌增加了2倍〔1〕。大量调查资料表明环境中存在多种能模拟和干扰动物及人类内分泌功能的物质。这些外源性化学物进入机体后，干扰体内内分泌物质的合成、释放、运输和代谢等过程，并且能够激活或抑制内分泌系统的功能，从而破坏机体内环境的稳定，导致或加速自身免疫性疾病的发生。学术界将这一大类物质称为环境内分泌干扰物（endocrinedisrupters/endocrinedisruptˉingchemicals，EDCs）。更有学者认为:“环境内分泌干扰物”已成为继“温室效应全球变暖”和“臭氧层破坏”之后又一严重的全球性环境公害问题，属第三代环境污染物〔1，2〕。自身免疫性疾病（autoimmunedisease）是临床上常见的疾病，发病因素不仅决定于外环境多因素的变化和体内免疫功能的失调，内分泌激素的分泌和调节也产生了重要的影响。Wilder根据流行病学调查显示类风湿关节炎、系统性红斑狼疮和甲状腺炎患者中的女与男比例分别为3:1，9:1和19:1〔3，4〕。同时，育龄期女性在妊娠期及产后激素水平出现明显波动时其自身免疫性疾病的发病率有明显的增加趋势，使人们逐渐地认识到内分泌激素对自身免疫性疾病发生的影响。美国变态反应学家Randalph 认为:新的医疗模式应该充分考虑患者的发病与他所处的生活环境的关系。人类自身的遗传因素是人类变态反应性疾病发生的内在因素，但环境因素可能直接触发疾病的发生〔5〕。由于B和T细胞表达的特异性总库是随机产生的，其中必定有许多细胞是对自身成分特异的。因此，机体必须建立自身耐受机制，以区别自己与非己决定簇，从而避免自身反应性的发生。然而，任何机制都有崩溃的危险，自身识别机制也不例外。人类在急剧变化的环境因素影响下，可导致环境性免疫功能失调，终致发生各种变态反应性疾病〔6〕。环境内分泌干扰物是否会对人的自身耐受机制造成威胁，从而打破人类的自身耐受机制呢?1环境内分泌干扰物的名称和定义环境内分泌干扰物（enviromentalendocrinedisˉruptors/Eds或endocrinedisruptingchemicals/EDCs）也叫环境荷尔蒙/激素（enviromentalhormonals）、环境雌激素（enviromentaloestrogens），还有人将它称为“雌激素类似物（EstrogenMimics，OestrogenChemicals）”或者“外源性雌激素（Xenoestrogens）”。作为第三代环境污染物，其名称及定义都很多，美国EPA内分泌干扰物审查和试验咨询委员会（EDSTAC）将环境内分泌干扰物定义为:干扰生物体内维持自稳及调节发育过程中激素的产生、释放、代谢、结合、排泄、交互作用的外源性物质〔7〕。2环境内分泌干扰物的种类和来源随着人类社会的发展，工业化程度日益提高，被人类利用的化学品有成千上万种，而有很多物质被证明与人类疾病相关。自从环境内分泌干扰物问题得到各国政府和研究机构的重视以来，已有上百种化学物质被证明是环境内分泌干扰物或具有雌激素效应。笔者依据其用途和来源将目前已认知的或怀疑的环境内分泌干扰物分为以下几大类:2.1工业用化学品（1）多氯联苯类（PCBs，PolyˉchlorinatedBiphenyls），用于电容器、油墨等，是一类难降解、难代谢脂溶性环境激素。可经胎盘到胎儿体内，蓄积在肝肾中;（2）二英类（DioxinlikeChemiˉcals），是具有高环境

微生物检测标准

微生物取样方法、微生物检测标准 举例一： 一、空气采样及检验方法 1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制 2采样（空气沉降法） 2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。 2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。 2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养：于37℃培养24小时。 4检测频率：每周 空气质量标准： 生车间、熟车间、成品车间：低于100个 半成品库、成品库：低于10个 二、设备的采样与检验方法 根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。 1采样方法 1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面） 取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面） 将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。 2检验方法 2.1细菌总数的检验 将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。 结果计算 表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×2 2.2致病菌的检验 沙门氏菌，参照GB4789.4进行 金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行 4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2， 5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2 一般区域：细菌总数≤100个∕cm2 三、人员手表面细菌污染情况的检验

微生物检测手段及注意事项

微生物检测手段及注意事项

微生物检测手段及注意事项 微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而

测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 1. 微生物计量法 1.1 体积测量法 又称测菌丝浓度法，通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10 mL）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5 min）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法 可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

空气微生物污染检验方法

空气、物表、器械、医务人员手微生物检测参考标准 一、空气微生物污染检验方法 采用平板暴露法操作 结果计算：按平均每皿的菌落数报告：CFU/(皿·暴露时间)。 结果判断： Ⅱ环境： 手术室、供应室、计生手术室、产房、眼科治疗室 、婴儿室、 ≤4.0cfu/皿（15min ） Ⅲ环境 各科治疗室、处置室、ICU 、胃肠镜室、儿科病房、妇科检查室、急救室、 化验室血库、口腔科。 ≤4.0cfu/皿（5min ） 二、物体表面微生物污染检查方法 检测方法： 把采样管充分震荡后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml ，接种平皿，将冷至40℃~45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15~20ml,36℃±1℃恒温培养箱48h ，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。（采样面积都为100cm 2） 结果计算： 物体表面菌落总数（CFU/cm 2）= 结果判断： Ⅱ环境： 手术室、供应室、计生手术室、产房、眼科治疗室 、婴儿室。 ≤5.0cfu/cm 2 平均每皿菌落数×采样液稀释倍数 采样面积（cm 2)

Ⅲ环境各科治疗室、处置室、ICU、胃肠镜室、儿科病房、妇科检查室、急救室、化验室血库、口腔科。≤10.0cfu/cm2 三、消毒医疗器材的检验方法 检验方法： 把采样管充分震荡后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml，接种平皿，将冷至40℃~45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15~20ml,36℃±1℃恒温培养箱48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。 检验标准 1、高度危险性医疗器材应无菌 2、中度危险性医疗器材的菌落数应≤20 CFU/件（CFU/g或CFU/100cm2）,不得检 出致病性微生物。 3、低度危险性医疗器材的菌落数应≤200 CFU/件（CFU/g或CFU/100cm2）,不得 检出致病性微生物。 （1）、高度危险性物品： 手术器械、穿刺针、腹腔镜、活检钳、心脏导管、植入物等。 （2）、中度危险性物品： 胃肠道内镜、气管镜、喉镜、肛表、口表、呼吸机管、麻醉机管道、压舌板、肛门压力测量导管、直肠压力测量导管等。 （3）、低度危险性物品： 听诊器、血压计、袖带、病床围栏、床面以及床头柜、被褥、墙面、地面、痰盂（杯）和便器等。 四：医务人员手卫生

环境内分泌干扰化学物的甄别方法和评价体系

?述评? 作者单位:610041成都,四川大学华西公共卫生学院环境卫生、营养与食品卫生教研室 环境内分泌干扰化学物的甄别方法和评价体系 张立实　吴德生 环境内分泌干扰化学物(environmental endocrine disrupting chemicals ,EEDCs )对人类和野生动物健康的危害已是不争的事实。从预防医学的观点出发,对环境中各种化学物的内分泌干扰活性进行甄别(screening and testing ),以确定该化学物(或混合物)是否具有干扰生物机体内分泌活性的作用,即是否属于内分泌干扰物?这对于制定保护生态环境和人类健康的预防措施和决策具有重要意义。在环境内分泌干扰物的甄别方法研究中,目前尤其应注意的是:(1)随着研究的不断深入和扩大,EEDCs 的作用已不仅仅局限于由激素受体介导的对激素功能的激活或阻遏,还应当包括对整个内分泌腺轴内稳态的破坏,以及对激素的产生、分泌、合成、代谢、转运和排泄等过程的干扰等。因此用“环境激素”或“环境类激素”来代表整个这一类化学物就显得不够准确;(2)在目前对动物实验要求实施三 “R ” (refine/replace/reduce )呼声很高的环境氛围中,如何建立我们自己的、可靠和实用的环境内分泌干扰物甄别方法和评价体系。 一、环境内分泌干扰物甄别方法的范围 环境化学物内分泌干扰活性的甄别是指应用科学的方法来鉴定某种化学物是否具有EEDCs 的各类效应特征,以确定该化学物是否属于EEDCs 。这是识别、研究和控制EEDCs 污染和保障人类健康的前提,也是目前EEDCs 研究中最急需解决的问题。环境内分泌干扰物的甄别和评价方法目前至少应包括以下几方面:(1)环境化学物模拟或拮抗生物体内主要激素如雌激素、雄激素、甲状腺素活性的甄别和评价方法;(2)环境化学物对生物体内上述激素的产生、分泌、转运、代谢、排泄等活动过程干扰的甄别和评价方法;(3)环境内分泌干扰物对人类健康 整体效应(尤其是下丘脑-垂体-腺轴)的评价方法;(4)环境内分泌干扰物的生态效应评价方法;(5)多种环境化学物(混合物)内分泌干扰活性(联合 作用)的评价方法。 目前人类所接触的环境化学物种类仍在不断增加,其中较重要的有农药和兽药(包括活性组分和非活性组分)、化肥、工业化合物、药物、化妆品、食品添加剂和营养补充剂、其他环境和食品污染物等。在这些化学物中,已对其内分泌干扰活性作过初步评价者仅占少数,做过较全面的评价者更属凤毛麟角。因此,对数量庞大的环境化学物的内分泌干扰活性进行甄别和评价,工作量是极其巨大的,发展快速和可靠的甄别和评价方法,其意义也是不言而喻的。 二、目前美国和欧共体采用的甄别方法及评价体系 快速、灵敏、经济的甄别方法是鉴别、评价和研究EEDCs 的前提条件。因此,美国和欧共体等发达国家十分重视发展对环境内分泌干扰物的甄别方法。目前主要是发展快速、简易、经济、可靠且适合批量、低浓度的甄别方法,如甄别雌激素干扰化学物的酵母雌激素甄别法、雌激素受体竞争抑制法、卵黄蛋白原法及芳香化酶抑制剂甄别法等。甲状腺素干扰物的甄别方法近年来也有较快发展。 11美国国会1996年通过两项立法(食品质量 保护法和安全饮水法),敦促美国环境保护局(EPA )加强内分泌干扰物的甄别方法研究。 21EPA 提出的环境内分泌干扰物甄别方法体 系:包括第一层次的筛选(T1S )和第二层次的实验(T2T )。 (1)第一层次的筛选(tier 1screening ,T1S ):T1S 作为初筛实验,可判定某化学物或混合物属于: ①可能的雌、雄激素或甲状腺激素干扰物,从而进入T2T 实验组;②不是EEDCs 或可能性很小,除非在 特殊情况下才进入T2T 。即T1S 的目的是判定某

环境微生物检测——采样方法 剧本

《环境微生物检测——采样方法》场景剧本题目：环境微生物检测——采样方法 主题曲、插曲待定 影片主要角色： 男1号梁总，25岁，业务主管（西装革履） 男或女2号小李，20岁，采样组组长（休闲） 女3号小黄，20岁，前台靓女（时尚的靓女） 男3号** 客户，25岁，（带领的衣服）（演成搞笑的土豪人物） 男或女4号：小王，19岁，某学校的顶岗实习生 第一场： 场景：公司前台（汇标公司的前台，甲在埋头做报表，乙在打电话和客户沟通，前台靓女在接水） 时间：上午 人物：前台靓女、客户，前台靓女以及同事两三个。 从门外来了一个大约25岁男性在张望。前台靓女赶紧走出来打开门。 前台靓女：您好。 客户：这里是汇标检测公司吗？ 前台靓女：是啊，有什么可以帮到您？ 客户：我是来自大中国建筑集团有限公司的××。最近我们一个大楼要竣工验收，需要对水质进行检测，你们能做吗？我们不差钱。 前台靓女指引客户坐下，倒一杯水。 前台靓女：这些业务我们做过很多。我们是第三方检测公司，有对该项目进行检测的资质，严格按照国家标准做的。 客户：对水质都监测什么呀？ 前台靓女：《建筑给水排水及采暖工程施工质量验收规范》GB50242-2002中明文规定：

“4.2.3 生活给水系统管道在交付使用前必须冲洗和消毒，并经有关部门取样检验，符合国家《生活饮用水标准检验方法》方可使用。 生活饮用水标准检验方法GB/T5750 – 2006，具体包括13个分项。包括水样采集和保存、感官性状和物理指标、有机物指标、消毒副产品指标、金属指标和微生物指标等等。 对建筑工程竣工验收水质检测，我们一般取pH、色度、浑浊度、臭味、肉眼可见物、总游离氯、耗氧量、菌落总数、大肠菌群等指标。 客户：听起来很专业，好！我信赖你们公司。 前台靓女：那麻烦您去我们主管办公室对签订合同有关事宜进行协商。 第二场： 场景：办公室 时间：某上午 人物：业务主管梁总、采样组组长小李 梁总：小李，这里刚接和大中国建筑集团有限公司签了一个合同。这可是一个大客户，你们要认真对待。你赶紧安排人过去采样吧。 小李：好的。我会尽快安排人过去采样。您放心吧。 第三场： 场景：公司走廊 时间：某上午 人物：采样组组长小李，实习生小王 小李：小王，我们明天要去广州海珠区琶洲那边对一个大楼的自来水进行采样，你准备一下。 小王：好的。我会马上去做。 第四场： 场景：实验室 时间：任意 人物：小李

环境内分泌干扰物危害及作用机制研究

环境内分泌干扰物危害及作用机制研究 名：付东姓 所在学院：中医药学院所学专业：中西医临床医学级：2015级年 2015223790 号：学 一、前言 环境内分泌干扰物，Environmental Endocrine Disruptors 简称EEDs，又称环境激素、内分泌活性化合物、内分泌干扰化合物，所谓环境内分泌干扰物系指一种外源性物质，该物质会导致未受损伤的有机体发生逆向健康影响，或使有机体后代的内分泌功能发生改变。潜在的内分泌干扰物则是一种可能导致未受损伤的有机体内分泌紊乱的物质。如今环境污染导致环境质量日益恶化，对人类健康构成严重威胁，开

展环境与人类健康的基础研究是科学与医学共同面对的课题。在当今全球性环境问题中，化学污染占70%左右，其中以EEDs对环境质量和人类健康影响最广，危害最大。 EEDs表现出拟天然激素或抗天然激素的作用，通过干扰机体的内分泌功能引起中毒或在比较低的接触水平即对心、肺、肝、肾、性腺等器官产生危害，即通过内分泌系统改变人的内环境而致病。人和脊椎动物具有相同的内分泌系统，如脑垂体、甲状腺、胸腺、胰腺、性腺等。这些腺体分泌的物质仅在体内起作用，不排除体外，故称之为内分泌腺体，其分泌物称为激素，能调节生物体的成长、代谢、和正常的生理功能。激素在体内的水平非常低，但有极大的功效，如胰岛素分泌不足会发生糖尿病，分泌过多则会发生低血糖。EEDs正是通过改变激素在体内的正常水平而对人体产生影响和危害的。 与其他环境污染物相比，EEDs对人体健康的影响有以下显著特点： 1.低剂量长期作用，具有慢性毒性效应； 2.对人体生长，发育，生殖产生影响，对后代影响影响巨大；； 3.与人体各系统重大疾病有密切，危害巨大； 4.采用常规的方法不易被筛选和检测。 因此，开展EEDs与人类健康的基础研究具有重大意义。 二、环境内分泌干扰物的类型 1.干扰雌激素作用的类群： 1)多氯联苯类化合物（Polychlorinated biphenyl, PCBs）