环境内分泌干扰物实验研究的思路与方法
环境内分泌干扰物检测与分析方法研究进展
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｏｃｃｕｐａｔｉｏｎａｌ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ
Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｂｅｉｊｉｎｇ
１０００５０，Ｃｈｉｎａ
ｗｅｒｅ
ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ
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ｒｅｖｉｅｗｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｆｕｔｕｒｅ’Ｓ
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ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｍｅｔｈｏｄ
ｔａｌｋｅｄ ａｂｏｕｔ ａｌｓｏ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＥＤＣｓ ｅｆｆｅｃｔ ｍａｉｎｌｙ
ｔｏ
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ｎｅｗ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ
ｏｆ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｐｏｌｌｕｔｉｏｎｓ ｗｈｉｃｈ
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ｇｌｏｂａｌｌｙ
ｃｏｎｃｅｍｅｄ．Ｔｈｅｙ
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ｍａｙLeabharlann ｃａｕｓｅａｄｖｅｒｓｅ
ｔｈｅ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ
ａｎｄ
２．２液相色谱法（ＬＣ）和液相色谱．质谱法（ＬＣ－ＭＳ）
固体样品
从固体样品中提取内分泌干扰物常用的方法有溶剂萃 取、索氏提取等，这些萃取技术比较简单而且便宜，不论极性 溶剂还是非极性溶剂都能使用，然而这需要消耗大量的萃取 溶剂和时间。近年来一些先进的样品提取方法如超声波萃取 技术、压力流体萃取（ＰＬＥ）和微波辅助萃取技术（ＭＡＥ）等得到 发展，并逐渐应用于固体样品中的内分泌干扰物质的检测。 超声波萃取技术是利用超声空氏原理，通过改变超声温 度和时间，对样品中的目标化合物进行提取。该技术简单快 速，而且可以减少溶剂用量。容慧等选择二氯甲烷作为溶剂， 利用超声波萃取的方法提取ＰＶＣ塑料中的５种增塑剂，得到 良好的效果，并与索氏提取进行比较，结果显示二者提取效率 接近，但超声波提取操作简单快速№１。 压力流体萃取（ＰＬＥ）是利用在高温、高压下保持萃取溶 剂的液体状态而对样品进行提取和净化，从而可以减少溶剂 用量和萃取时间，而且提取效率较高。Ｄｉｎｇ等应用压力流体 萃取技术提取了河流底质中的４一ＮＰ，通过系统地研究影响压 力流体萃取的因素（温度、压力、溶剂流速、静态／动态萃取时 间等），发现用甲醇做溶剂，在１００℃、１００ａｒｍ压力下采用静态 （１０ｍｉｎ）／动态（１５ｍｉｎ）步骤，４－ＮＰ可以几乎达到完全萃取，回收 率可达到９８％…。 微波辅助萃取技术（ＭＡＥ）就是利用微波加热的特性对物 质中的目标成分进行选择性萃取的方法。通过调节微波加热 的参数，可有效加热目标成分，以利于目标化合物的萃取和分 离。“ｕ等采用微波辅助萃取技术成功地对河流底质中的１７． ０雌二醇、雌激素酮、４．壬基酚、双酚Ａ等７种内分泌干扰物同 时萃取，通过对影响萃取效果的微波参数进行研究，结果显示 用甲醇作为溶剂，萃取温度为１１０“（２，保持１５ｍｉｎ的条件下，目 标化合物回收率较高（＞７４％），而且重现性较好旧１。
环境内分泌干扰物危害及作用机制研究---精品管理资料
环境内分泌干扰物危害及作用机制研究姓名：付东所在学院：中医药学院所学专业：中西医临床医学年级：2015级学号：2015223790一、前言环境内分泌干扰物,Environmental Endocrine Disruptors 简称EEDs,又称环境激素、内分泌活性化合物、内分泌干扰化合物，所谓环境内分泌干扰物系指一种外源性物质，该物质会导致未受损伤的有机体发生逆向健康影响，或使有机体后代的内分泌功能发生改变。
潜在的内分泌干扰物则是一种可能导致未受损伤的有机体内分泌紊乱的物质。
如今环境污染导致环境质量日益恶化,对人类健康构成严重威胁，开展环境与人类健康的基础研究是科学与医学共同面对的课题.在当今全球性环境问题中，化学污染占70％左右，其中以EEDs对环境质量和人类健康影响最广，危害最大。
EEDs表现出拟天然激素或抗天然激素的作用，通过干扰机体的内分泌功能引起中毒或在比较低的接触水平即对心、肺、肝、肾、性腺等器官产生危害，即通过内分泌系统改变人的内环境而致病。
人和脊椎动物具有相同的内分泌系统，如脑垂体、甲状腺、胸腺、胰腺、性腺等。
这些腺体分泌的物质仅在体内起作用，不排除体外，故称之为内分泌腺体，其分泌物称为激素，能调节生物体的成长、代谢、和正常的生理功能.激素在体内的水平非常低，但有极大的功效，如胰岛素分泌不足会发生糖尿病,分泌过多则会发生低血糖。
EEDs正是通过改变激素在体内的正常水平而对人体产生影响和危害的。
与其他环境污染物相比，EEDs对人体健康的影响有以下显著特点：1.低剂量长期作用,具有慢性毒性效应;2.对人体生长,发育,生殖产生影响,对后代影响影响巨大；；3.与人体各系统重大疾病有密切,危害巨大;4.采用常规的方法不易被筛选和检测。
因此，开展EEDs与人类健康的基础研究具有重大意义。
二、环境内分泌干扰物的类型1.干扰雌激素作用的类群：1)多氯联苯类化合物（Polychlorinated biphenyl, PCBs）2)烷基酚类(Alkylphenol ，APs）3)邻苯二甲酸酯类（Phthalate Esters ,PAEs）4)二苯烷烃类（Diphenylkanes)5)双酚化合物(Biphenols，BPs)6)有机氯杀虫剂7)除草剂8)植物雌激素（phyto-estrogens，PEs）、真菌雌激素9)某些重金属（铅、镍、汞)2.干扰睾酮作用的类群：1)氟他胺（Flutamide）2)利谷隆（Linuron）3)苯乙烯（Styrene)4)二硫化碳（Carbonsulfide）5)邻苯二甲酸酯（PAEs）6)林丹（lindane）7)铅3.干扰甲状腺素作用的类群:1)二硫代氨基甲酸酯类（Dithiocarbamate，DCs)2)多卤芳烃类（Polyhalogenocarbons，PHAHs)4.干扰内源性激素代谢酶及激素转运功能的类群：有研究表明多卤芳烃类和多溴联苯能够影响血清中甲状腺素（T3、T4）水平，并降低大鼠促甲状腺素对T3、T4的调节作用。
环境内分泌干扰物壬基酚快速生物检测技术研究的开题报告
环境内分泌干扰物壬基酚快速生物检测技术研究的开题报
告
一、研究背景
环境污染已成为影响人类健康的重要因素之一。
近年来，各种化学物质在环境中的存在越来越引起人们的关注。
其中，环境内分泌干扰物（Endocrine Disrupting Chemicals, EDCs）是一类能够干扰内分泌系统的化学物质，其对人类健康的影响日益受到关注。
壬基酚（NP）是EDCs的一种，广泛存在于环境中，对人类产生危害。
因此，快速、高效的壬基酚生物检测技术的开发是非常必要的。
二、研究目的
本研究拟开发一种能够快速、高效检测环境中壬基酚的生物检测技术，为环境监测、食品安全等方面提供技术支持。
三、研究内容
1.筛选壬基酚高效的生物指示物质。
2.建立适用于壬基酚快速生物检测的生物传感器系统。
3.优化壬基酚生物检测技术，提高分析灵敏度和准确度。
四、研究方法
1.筛选高效的生物指示物质，利用分子对接技术和实验验证相结合，确定壬基酚的最优指示物质。
2.采用生物传感器技术，建立壬基酚生物传感器系统，包括函数化生物材料的制备、生物元件修饰等步骤。
3.优化壬基酚生物检测技术，包括优化检测条件，建立标准曲线，评估检测灵敏度和准确度等步骤。
五、研究意义
建立快速、高效的壬基酚生物检测技术，可用于环境监测、食品安全等领域。
同时，此项研究可为其他环境有害物质的快速生物检测技术的开发提供一定的借鉴和参考。
化学环境毒理学和环境内分泌干扰物的研究
化学环境毒理学和环境内分泌干扰物的研究化学环境毒理学是研究化学物质在环境中的行为、效应及其对生物和生态系统的影响的科学。
它涉及到化学物质的来源、迁移、转化、毒性机制、风险评估和污染治理等方面。
环境内分泌干扰物是指那些能够干扰生物体内分泌系统的化学物质，包括激素类似物、激素拮抗剂和激素合成抑制剂等。
它们可能对生物的生长发育、生殖功能和生态系统平衡产生负面影响。
化学环境毒理学的研究内容包括：1.化学物质的来源和释放：研究化学物质在工业、农业、生活等领域的来源和释放途径，以及突发事件（如事故、泄漏等）对环境的影响。
2.化学物质的迁移和转化：研究化学物质在环境介质（如水、土壤、空气）中的迁移规律和转化过程，以及生物体内外的代谢和积累机制。
3.化学物质的毒性机制：研究化学物质对生物体的毒性效应，包括急性毒性、慢性毒性、致癌性、致畸性和生殖毒性等，以及毒性作用的分子机制。
4.环境内分泌干扰物的识别和评估：研究环境内分泌干扰物的特征、来源和效应，建立相应的检测和评估方法，以识别和评估环境中的潜在内分泌干扰物。
5.风险评估和污染治理：研究化学环境污染对生物和生态系统的影响，采用风险评估方法确定污染程度和风险水平，并提出有效的污染治理技术和策略。
环境内分泌干扰物的研究内容包括：1.环境内分泌干扰物的定义和特征：研究环境内分泌干扰物的概念、来源、特性及其与生物体内分泌系统的相互作用。
2.环境内分泌干扰物的分类和效应：根据化学结构和生物效应，对环境内分泌干扰物进行分类，研究其对生物生长发育、生殖功能、神经系统和免疫系统等的影响。
3.环境内分泌干扰物的检测和评估：建立和完善环境内分泌干扰物的检测方法，开发相应的评估模型，以准确监测和评估环境中的内分泌干扰物水平。
4.环境内分泌干扰物的来源和释放：研究环境中内分泌干扰物的来源、释放途径和迁移规律，以揭示其在大气、水体、土壤和生物体内的分布特征。
5.环境内分泌干扰物的治理和预防：研究有效的环境内分泌干扰物治理技术，如降解、吸附、转化等，以及制定相应的预防措施，降低其对环境和生物的影响。
内分泌干扰物在环境中的寻找和评估
内分泌干扰物在环境中的寻找和评估近年来，关于环境中存在的内分泌干扰物（EDCs）的问题引起了越来越多的关注。
内分泌干扰物是指那些能够干扰内分泌系统正常功能的物质，包括人类和动物激素、药物、农药、化学品等。
在环境中存在的EDCs，不仅会对生态环境造成影响，同时会危害人类健康。
因此，对于环境中的EDCs的寻找和评估，具有重要的现实意义。
在环境中寻找EDCs是一个非常复杂的过程。
一方面，EDCs 的种类非常多，来源和排放方式也各不相同，因此要对所有的EDCs进行寻找是不现实的；另一方面，环境中存在的EDCs的浓度很低，需要通过先进的技术手段才能够有效地寻找出EDCs。
因此，目前主要使用的是分子筛选、生物检测和化学分析等多种方法。
其中，分子筛选是一种非常有效的方法。
其原理是利用EDCs 与生物内分泌受体的结合作用来筛选出目标物质。
这种方法不仅操作简单，还能够快速地找到目标物质。
但是，由于生物内分泌系统非常复杂，因此分子筛选仅仅是寻找EDCs的一种手段，还需要与其他方法相结合才能够寻找到全部的EDCs。
另一种方法是生物检测。
生物检测是通过观察生物的反应来判断环境中是否存在EDCs。
其优点是能够快速地判断环境中EDCs的危害程度，但其缺点是需要建立一套完整的生物检测系统，且对实验条件要求较高。
最后是化学分析。
化学分析是目前应用最广泛的一种方法，其可以通过对环境样品进行分析，找出其中的EDCs。
值得注意的是，化学分析也存在一些问题。
例如，化学分析需要对样品进行前处理，会对分析结果造成影响。
同时，环境中存在大量的复合污染物，化学分析需要进行大量的分别分析才能够找到目标物质，难度较大。
在找到EDCs之后，需要进行评估。
EDCs的评估是一个非常重要的过程，是决定其是否对环境和人类健康造成危害的重要依据。
EDCs的评估主要包括毒性评估和流行病学评估两个方面。
毒性评估是评估EDCs对生物体毒性的程度。
包括急性毒性、慢性毒性、致突变性、致癌性、致畸性等方面。
环境内分泌干扰物毒理学研究
环境内分泌干扰物毒理学研究随着环境污染日益严重，环境内分泌干扰物成为了人们的焦点。
这些化合物干扰人体正常激素分泌，可能影响生长发育，甚至导致生殖系统疾病。
为了更好地了解这一新型污染源，本文将探讨环境内分泌干扰物毒理学研究的重要性。
环境内分泌干扰物（EDCs）是一类具有相似化学结构和生物活性的化合物，主要来源于工业生产、农药使用、塑料制品等多种渠道。
这些化合物通过食物链进入人体，对激素分泌产生干扰作用。
研究表明，环境内分泌干扰物可能导致乳腺癌、前列腺癌等生殖系统疾病，以及儿童生长发育异常等问题。
为了探究环境内分泌干扰物的毒性，毒理学研究成为了关键。
该领域的研究包括动物实验和体外实验等方法，以检测这些化合物对生物体的损害。
在动物实验中，科学家通过给予受试动物不同剂量的环境内分泌干扰物，观察其生理、生化及组织学等方面的变化。
体外实验则利用人体细胞或组织培养物，研究环境内分泌干扰物对细胞生长、凋亡和基因表达的影响。
这些研究为评估环境内分泌干扰物的风险提供了重要依据。
环境内分泌干扰物的作用机制主要涉及激素受体、信号转导通路及基因表达水平的改变。
这些化合物与人体激素分子结构相似，能够与激素受体结合并激活或抑制其功能，进而影响激素调节的生理过程。
环境内分泌干扰物还可能影响细胞增殖、凋亡及分化等过程，导致组织损伤和功能障碍。
尽管已经取得了一定的研究成果，但环境内分泌干扰物毒理学研究仍面临许多挑战。
未来研究需要深入探讨环境内分泌干扰物在人体内的代谢过程、作用靶点以及与其他环境因素的相互作用关系。
还需要加强流行病学调查，以揭示环境内分泌干扰物对人类健康的影响，并制定更加科学有效的防控措施。
我们需要对环境内分泌干扰物毒理学研究的重要性有充分的认识。
只有通过深入探究这些污染物的毒性和作用机制，我们才能更好地了解它们对人类健康的潜在威胁。
这将为政策制定者提供科学依据，推动相关法律法规的完善，以保护公众健康和维护生态环境。
环境内分泌干扰物炔雌醇的危害、污水处理厂去除及微生物降解研究进展
环境内分泌干扰物炔雌醇的危害、污水处理厂去除及微生物降解研究进展环境内分泌干扰物炔雌醇（Ethynylestradiol，EE2）是一种广泛存在于环境中的内分泌干扰物，它对生物体产生许多负面影响。
污水处理厂是主要源头之一，通过适当的处理方法可以有效地去除EE2。
此外，微生物降解也是EE2处理的一种有效方法。
本文将介绍EE2的危害、污水处理厂去除和微生物降解的研究进展。
首先，EE2对环境和生态系统具有广泛的危害。
EE2主要来自于避孕药的使用和排泄，它进入环境后，会影响水生生物的性别发育和繁殖能力。
研究发现，EE2可以干扰鱼类的生殖系统，导致雄性鱼类产生卵子，雌性鱼类则出现虚弱或不育的情况。
此外，EE2也会对水生植物的生长和发育产生负面影响，破坏水生生态系统的平衡。
针对EE2的处理，污水处理厂是最主要的控制点之一。
研究表明，传统的生物处理方法在去除EE2方面效果有限。
因此，研究人员已经开始探索新的处理技术。
一种被广泛应用的方法是采用活性炭吸附。
活性炭能够吸附有机污染物，包括EE2，从而有效地去除它们。
此外，一些研究还使用电化学氧化、超滤等方法对污水中的EE2进行去除。
这些新的处理方法在EE2去除方面具有潜力，但还需要更多的研究来确定其适用性和效果。
此外，微生物降解也是一种有效去除EE2的方法。
研究人员已经发现一些特定的微生物能够降解EE2并将其转化为无害的物质。
这些微生物通常存在于土壤中，并具有降解EE2的酶系统。
研究人员通过分离这些微生物并研究其降解的机制，为EE2的治理提供了新的思路。
此外，一些研究还探索了利用微生物共生体系来提高EE2的降解效率，通过相互作用和协同作用，提高EE2的降解活性。
总之，环境内分泌干扰物炔雌醇对生态环境和生物体具有广泛的危害。
污水处理厂是EE2的主要来源之一，通过适当的处理方法，可以有效地去除EE2。
目前，活性炭吸附等新的处理技术正在被研究和应用。
此外，微生物降解也是一种有效去除EE2的方法，相关研究为EE2的治理提供了新的思路。
内分泌干扰物污染环境下的危害与防治研究
内分泌干扰物污染环境下的危害与防治研究一、引言“内分泌干扰物”(ERCs)是指能够影响内分泌系统的化学物质，包括一类环境化学物质和天然植物激素。
ERCs在环境中广泛存在，如塑料、染料、草甘膦等，对人和动物的健康造成危害。
ERCs的危害性，引起了人们的广泛关注。
本文将从ERCs的形成原因、危害机理和防治方案几个方面，进行详细地探讨。
二、ERCs的形成原因ERCs来源于许多物质，其中包括人工合成和天然物质。
ERCs的来源主要包括以下几类：1、塑料制品：大量生产和使用的塑料制品，会释放出一种叫做邻苯二甲酸酯(Phthalates)的ERCs。
Phthalates是一种增塑剂，主要用于增加塑料的柔韧性和强度。
Phthalates会从塑料制品中渗出，并随着时间的推移，会逐渐释放到环境中。
2、人工合成化学物质：人们使用的许多化学物质和产品都含有ERCs，如清洁剂、染料、涂料等。
这些化学物质在使用、存储和运输过程中，可能会发生挥发、泄漏、排放等情况，导致ERCs释放到环境中。
3、天然物质：一些天然植物激素也可以成为ERCs，如萘乙酸(NA)和萘酚衍生物(PAs)等。
这些物质可能会在植物生长环境中，受到污染物质的污染而生成。
4、药物：一些药物中含有ERCs，如雌激素等。
三、ERCs的危害机理ERCs会影响内分泌系统，引起人和动物的生殖、免疫和代谢等方面的问题。
ERCs的危害机理主要表现在以下几个方面：1、激素水平异常：ERCs可以缓慢地、持续地影响内分泌系统中各种激素水平，从而导致代谢异常。
例如，高浓度的Phthalates 会干扰胎儿的睾丸变异(undifferentiation)，从而导致男性生殖系统的发育受到影响。
2、影响细胞信号传导：ERCs有可能影响细胞内多种信号传导通路，修改细胞表面受体的构象及其相应功能，导致细胞发育和分化异常。
例如，高浓度的雄性激素受体拮抗剂(anti-androgen)可以干扰雄性激素的作用，从而对雄性性征产生影响。
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。有学
[ 10]
者将淋巴细胞作为观察的靶细胞 , 同样应用细胞增生 实验的方法 , 便可观测 EEDs 对免疫系统的影响 。 细胞增生实验中最常用的细胞数检测方法为噻唑蓝 ( MTT )比色法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥 珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫 色结晶甲瓒, 并 沉积在细胞中。在一定细胞 数范围 内 , MTT 结晶形成的量与细胞 数成正比。用 有机溶 剂二甲基亚砜溶解细胞中的甲瓒 , 再用酶联免疫检测 仪在 490nm 波长处测定其光吸收值, 便可间接反映 活细胞数量 。 ( 3) 酵母筛选实验 : 酵母筛选实验 的基本方法是利用分子生物学技术将激素效应元件 的基本序列插入报告基因的上游 , 将报告基因置于基 因重组酵母细胞激 素受体的调控之下。当 EEDs 作 用于酵母细 胞时, 会使特定 的激素受体发生 变构效 应 , 进而激活激素效应元件 , 使报告基因得以表达 , 其 表达量与 EEDs的污染程度具有剂量效应关系 , 于是 便可通过检测报告基因的表达量反映 EEDs 的类激 素作用。重组基因酵母筛选法因其快速、 灵敏、 简易、 廉价、 和高通量等优点而成为较为广泛应用的 EEDs 筛选实验方法之一
环境内分泌干扰物 ( environm enta l endocrine dis ruptors, EEDs) 是指干扰生物体内维持内稳态及调节 生殖、 发育过程的天然激素的合成、 释放、 运输、 代谢、 结合、 以及消除等作用的外源性物质 , 又名内分泌干 扰化合物 ( endocrin e disrupting che m icals, EDCs) 、 环 境激素 ( env ironm ental hor m ones) 等 。其来源主要 是除草剂、 杀虫剂、 防腐剂、 杀菌剂、 塑料增塑剂、 洗涤 剂、 化妆品、 阻燃剂以及化工副产品等人类生产生活 当中接触到的多种化学制品。随着人类社会现代化 进程的不断加 快, 进入环境中 的化学性物质 越来越 多 , EEDs 对人类的影响也日益突显。 20 世纪 90 年 代以来 , 已有大量的研究资料表明, EED s与人类生殖 障碍、 发育异常、 代谢紊乱及某些癌症 ( 如乳腺癌、 睾 丸癌、 前列腺癌等 ) 的发生密切相关, 严重影响人类 健康。 EEDs现已受到学术界和公众的广泛关注, 成 为当今生物学、 医学、 环境科学、 农学、 毒理学等多领 域研究的热点。在众多有关 EED s的研究当中 , 应用 实验方法进行的研究因为可探讨的问题范围广 , 科学 论证强度高 , 可操作性强, 形式多样等特点 , 已成为目
∀ 134∀
是一种灵敏、 快速、 高效的 EEDs筛选方法, 其原理是 利用基因工程技术, 通过将已知的顺式调控序列即反 应元件剪接到报告基因的上游以控制报告基因的表 达并构建出基因重组质粒 , 转染至宿主细胞内。当环 境化学物作为细胞外信号与反应元件所对应的特定
[ 6, 7 ] [3 , 4]
JM ed R es , Jan 2011, V o . l 40 N o . 1
竞争性结合实验的原理是雌激素与雌激素受体的结 合引起雌激素反应, 通过体外测定外源性化学物与 雌激素受体的亲和力即可初步判定其类雌激素活性。 其基本过程包括从组织中分离雌激素受体 , 而后用已 知的外源性化学物同放射性标志物标记的雌激素的 竞争性替换实验来评估该外源性化合物的雌激素效 应等级。需要说明的是, 本方法只能表明某种外源性 化学物与雌激素受体的结合能力 , 不能反映其在生物 [ 8] 体内的代谢情况及对受体的 激活能力 。 ( 2) 细胞 增生实验: 细胞增生实验是通过检测靶细胞在指数增 长期接触受试物后的细胞增生数反映受试物生物学 效应的实验方法。目前最常用的是 的 E - screen 试 验 , 又称人乳癌 细胞 ( MCF - 7) 增生实验。 MCF - 7 是激素依赖性细胞系 , 雌激素可诱导该细胞的细胞增 生。 E - screen试验的基本方法是用活性炭 - 葡聚糖 处理实验动物血清, 以去除雌激素, 而后比较在含有 10 % 处理后血清的培养液中 , 加和不加雌激素以及不 同浓度的类雌激素物质培养后的细胞数量
Ideas and M ethods of E xperim enta l Study on E nv ironm enta l E ndocrine Interferents .
China A cademy of Chinese M ed ical S ciences , B eijing 100053, Ch ina Abstrac t Env ironm enta l endocrine interfe rents , because of the ir w idespread presence in the env ironm ent and hum an health haz a rds , has no w becom e a research ho t po int in m any scien tific fie lds . Exper i m enta l study , as one of the m a in fo r m s o f sc ientific research, has p layed an i m portant ro le in re lated stud ies on env ironm enta l endocr ine interferents . W ith literature / docum ents and sc ientific practice , the research ideas and m ethods o f screening , detection, contro,l treatm ent , and the mechan ism of tox ic ity o f the env ironm enta l endocr ine interferents we re discussed in th is pape r for gu idance of the sc ientific research o f env ironm en tal endocrine in terferents. K ey word s Env ironmenta l endocr ine interferen ts ; Exper i m ent ; Ideas and m ethods ; R ev ie w
医学研究杂志
2011 年 1 月
第 40 卷
第 1期
∀ 综述与进展 ∀
环境内分泌干扰物实验研究的思路与方法
倪
摘 要
青
姜
山
环境内 分泌干扰物因其在环境中的广泛存在和对人类健康的危害而受到广泛关注 , 现已成为多个科学 领域的研究
热点。实验研究作为科学研究 的主要形式之一 , 在环境内分泌干扰物的相关研究中 发挥着重要作用。本文结合文献 资料和科学 实践 , 对环境内分泌干扰物的筛选、 检测、 控制、 处理、 毒性观察以及作 用机制等 方面的研究 思路与方 法进行 论述 , 以期指 导环境 内分泌干扰物的科学 研究。 关键词 环境内 分泌干扰物 实验 思路与方法 述评 N i Q ing, J iang Shan. Guang ! AnM en H o s p ital of
∀ 133∀
( 2007BA C03A 11 , 2007BA C03A 11- 07) 作者单位 : 100053 北京 , 中国中医科学院广安门医院
∀ 综述与进展 ∀
( 1) 子宫增重法: 子宫增重法是用来评价外源化 学物的雌激素活性的传统体内实验方法, 其原理是雌 激素具有促进子宫内膜增生变厚而导致子宫增重的 生理效应。基本过程是选用大鼠或小鼠等啮齿类动 物 , 摘除卵巢后, 以暴露前后子宫重量以及子宫和体 重比值的变化等为指标 , 测定某种外源化学物是否 具有促进子宫 生长的作用, 以 此来评价其雌 激素活 性 。这种实验直接作用于雌激素效应器, 可以直 接显示化学物的雌激素样功能, 结合了内分泌系统的 各个方面 , 考虑了化学物的吸收、 代谢、 分布和排泄, 同时也考虑了影响内分泌的其他途径。但反应的灵 敏度、 反应性和实验终点的测定易受到个体差异、 动 物饮食和操作规范程度等因素的影响。 ( 2) 体内生物标志物法: 生物标志物是指反映机 体与环境因子物理的、 化学的或生物的交互作用所引 起的所有可测定的改变, 包括生化的、 生理的、 行为 [ 5] 的、 免疫 的、 细胞的、 遗传的等多方面的改变 。目 前所得的 EEDs 生物标志物基本上 是针对水生态环 境的, 以环境雌激素生物标志物研究较为成熟, 其中 一些生物标志物如卵黄蛋白原、 卵壳蛋白等已得到广 泛应用。卵黄蛋白原 ( V tg ) 是指示环境雌激 素暴露 最为敏感的分子生物标志物之一。 V tg 为 卵黄蛋白 的一种前体。成熟雌鱼体内的雌激素能够作用于肝 脏中的雌激素受体, 使肝脏合成 V tg。通过血液的运 输 , V tg 便 可到达卵 巢, 作 为卵黄 蛋白的 营养支 持。 雄鱼和幼鱼在正常情况下不合成 V tg , 但其肝脏中也 存在雌激素受体 , 于是在环境雌激素的作用下雄鱼和 幼鱼就可以 产生 V tg, 而由 于没有 卵巢有 效地 清除 V tg, 血液中 V tg 浓度会升高。因此 , 雄鱼和幼鱼体内 生成的 V tg 水平的变化可以作为一个敏感的环境雌 激素暴露指标。像卵黄蛋白原一样 , 卵壳蛋白 ( Z rp) 也是雌鱼在性成熟期受分泌的雌激素刺激 , 在肝脏诱 导合成的。通过血液循环系统 , Z rp 被运输到卵巢构 建卵壳。 Z rp是一种比 V tg 更灵敏的指示环境雌激素 暴露的 生 物标 志 物。 目前 , 经济 合 作 与发 展 组 织 ( OECD )已将 V tg 作为检测环境雌激素化学 物质的 生物标志物 , 且多将 V tg 和 Z rp 联合应用。测定 V tg 和 Z rp的方法主要是免疫印迹法和 EL ISA 法