牛结核病诊断方法研究进展
１ 细 菌学检查法
目前 ，国 内实验 室对 牛结 核病 的诊 断主要 采用 涂 片镜
检法和细菌培养法 。涂片镜检法具有简单、快速、价廉等 优势 ，对牛结核病 的早期诊断具有重要意义 ，因此被广泛 应 用于 牛结 核病 的快 速诊 断 。细菌 培养 法具有 较高 的灵 敏 度 ，可 以用 于检测 到 含有 少量 牛分 枝杆 菌 的样 品 。但是 ， 其 检测 所需 时 间较长 ，需 培养 ４～ ８ 周 才能在 固体 培养 基 上观察到牛分枝杆菌菌落 ， 此外进行药验实验还需要 ３～４ 周的时间 ，这远远不能满足临床诊断的需求。
次接触结核分枝杆菌时，致敏的淋巴细胞就会释放大剂 量的 ＾ ｙ干扰素 （ Ｉ Ｆ Ｎ 一 ），释放 的 干扰 素与牛结核 分枝杆菌之间存在一定 的相关性 ，通过 Ｉ Ｆ Ｎ 一 检测手段
２ 分子生物学 方法
２ ． １ 聚合 酶 链式 反应 法 聚合 酶链 式反 应法 ，因其 具有 灵敏 、高效 和快 断 、 检测和鉴 定等方 面 。
注射牛型结核分枝杆菌 Ｐ Ｐ Ｄ，经 ７ ２ ｈ 后 观 察 炎 症 反应 ， 对疑似反应牛进行二次皮 内注射 ， 再经 ７ ２ ｈ 观察反应结果。 牛 结 核分 支 杆 菌 Ｐ Ｐ Ｄ皮 内 变态 反 应 虽然 对 操 作 技 术要 求 不高 ，但是操作繁琐、检测时间长而且具有较高 的非特 异性 ，经 常造成误杀 ，因此在牛结核病的实际临床诊断 中效果 不佳 。 ３ ． ２ 间接 酶联 免疫 吸 附法 （ 间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 ） Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法是使酶标记 的抗原抗体反应在 固相表面进 行 ，通过 显 色 反 应 来 检 测相 应 的抗 原 或 抗 体 的 技 术 ，该 方法具有快速、简便 、灵敏性 高、特异性强等优势 ，可 以大 规 模 的 应用 于流 行 病 学 的 临 床诊 断 。 目前 ，国 内外 已将 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 成 功应 用 于检 测 牛 结 核 分枝 杆 菌 。但 是 ， 结 核 杆 菌 的抗 原 性 较 弱 以及共 同抗 原 决 定 簇 的存 在都 会 对 检 测 结 果 产 生 干 扰 ，影 响 临 床 诊 断 。 目前 ，此 法应 用 广 泛 ，是 较理 想 的临床 诊 断方法 之一 。
３ ． ３ 干扰 验 实验 法
张跃建 ，采用加卡介苗模拟临床检测样本，以分枝杆菌编 码 １ ６ ｓ Ｒ Ｎ Ａ基因和 ２ ３ ｓ Ｒ Ｎ Ａ基 因间的 Ｉ Ｔ Ｓ 序列为扩增靶序列
进 行扩 增 ，并 运用 实时荧 光 Ｐ Ｃ Ｒ法 对奶 牛乳液 中 的结 核分 支 杆菌 复合群进 行检测 ，其灵敏 度高 升乳液 中可 检测 １ ０ 个 ／ ｍ Ｌ结核分枝杆菌 ，灵敏度和特异性都得到极大的提高。 ２ ． ２ Ｄ ＮＡ指 纹 图谱 技术
＾ ｙ干扰素 （ Ｉ Ｆ Ｎ 一 ＾ ｙ ） 是 由被有丝分裂原或特异性抗原
刺 激 而 活化 的 Ｃ Ｄ ４ Ｔ ｈ ｌ 细胞 、Ｃ Ｄ ８ Ｔ细 胞及 Ｎ Ｋ细 胞 等 产 生 的一 种 重 要 的 细胞 因子 ，具 有抗 病 毒 、抗 肿 瘤 活 性 以及 免 疫 调 节 功 能 ，是 机 体 防 御 系统 的重 要 组 成 部 分 。 干扰验实验法 的原理是 ：当动物感染牛结核分枝杆菌 后 ，其淋 巴细胞会对结核分枝杆菌产生过敏反应 ，当再
摘
要 ：牛结核病是一种严 重的人 畜共患病 ，不仅对 畜牧业 生产有较 大的影响 ，而且还严重威胁人类健康 。因此 ．
结核病的早期诊 断在 防止疫情 蔓延 ，降低 经济损 失及人员伤 害等方 面起 着重要作 用。近年 来 ，随着科学技术 的不 断 发展 ，牛 结核病诊 断方法的研究也取得 了突飞猛进 的进展。文文对 目前应 用较广 泛的牛结核 病诊 断方法进行概述 ， 以期为牛结核病 的防治与诊 断提 供科 学依据 。 关键词 ：牛结核病 ；诊 断方法 ；研究进展 中图分类号 ：￥ ８ ５ ８ 文献标识码 ：Ａ Ｄ Ｏ Ｉ ：１ ０ ． １ １ ９ ７ ４ ／ ｎ ｙ ｙ ｊ ｓ ． ２ ０ １ ５ ０ ５ ０ １ １ ５ ９
１ ９ ０ ２ ０ １ ５ ， Ｖ ｏ １ ． ３ ５ ， Ｎ ｏ ． １ ０
农 业 与技 术
※ 畜牧科学
牛 结 核 病 诊 断方 法研 究进 展
唐 绿 娟 ，颜 丽 芳
（ １ ． 广 西桂 林 全 州 县 水 产 畜 牧 兽 医局 ， 广 西 桂 林 ５ ４ １ ５ ０ ０ ；２ ． 广 西 桂 林 全 州县 绍 水 镇 水产 畜牧 兽 医 站 ，广 西 桂 林 ５ ４ １ ５ ０ ０）
Ｄ Ｎ Ａ指纹 图谱技术检测结核分枝杆菌 的机制是将结 核分枝杆菌染色体 Ｄ Ｎ Ａ上分离出来的限制性片段与带标 记的 Ｄ Ｎ Ａ探 针 杂 交 ，利 用 标 记 的 Ｄ Ｎ Ａ探 针 检 测 出与 其 同源的限制性片段。Ｄ Ｎ Ａ指纹 图谱具有多位点性 、高变 异性 、简单而稳定的遗传性 等特点 ，可有 的地鉴定结核 分 枝 杆 菌 ，已被 成 功 应 用 于 检 测 结 核 分枝 杆 菌 。周 琳 ， 以Ｉ Ｓ ６ １ １ ０ 序列为模板 ，设计外向引物，采用 Ｄ Ｎ Ａ指纹技 术对 ２ ２ ０ 株 耐 多药 结核 分枝 杆 菌进 行分 析 ，结果 显 示 ２ ２ ０ 株菌株都具有特征 Ｄ Ｎ Ａ指纹图谱 ，而且所有菌株的 Ｄ Ｎ Ａ 指 纹 图谱 之 间存 在 明显 的变 异性 ，说 明 Ｄ Ｎ Ａ指 纹技 术 可 用于结核分枝杆菌的检测 。但是 ，目前 Ｄ Ｎ Ａ指纹图谱技 术只适合对分离菌株进行基因分型。 ２ － ３ 噬菌 体测 定 法 噬菌体测定法又称噬菌体生物扩增法 ， 是在适宜条件 下使噬菌体感染活的结核分枝杆菌 ，采用增殖 的方法形成 清晰的噬菌斑 ，这样就可以间接的区分样本中结核分枝杆 菌 是死 菌还 是活 菌 。
奶牛结核病的实验室诊断技术
杆菌 （ 牛型 ） 、 结核分枝杆菌 （ 人型） 和禽分枝杆菌 （ 禽型 ） 。该
病病原主要为牛型 ， 人型 、 禽型也可引起本病 。 此外还有 冷血 动物型和 鼠型 ， 但对人畜都无致病力。 结核杆菌 的形态 ， 不同 的型稍有差异 。人 型结核菌是直 的或微 弯的细长杆菌 ， 呈单
独或平行相聚排列 ， 多为棍棒状 ， 间有 分 枝 状 。 牛 型结 核 菌 比
且检测快 ， 便 于操 作 。
者将奶 牛结核病实验室诊断技术作将如下综述 。
１ 细 菌 检 测
３ ． ３
一干扰 素试验
添加特异性 Ｐ Ｐ Ｄ至牛血样淋 巴细胞
中， 经 １ ６ — ２ ４ ｈ培养后 ， 致敏淋 巴细胞 ， 可释放 一干扰素 ， 因 此， 通过 Ｉ Ｎ Ｆ 一 一 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ， 可实现定量测定 。在研究结核杆 菌 与非结核分枝杆菌分子 生物学的过程 中 ， 结核杆菌 复合体 与 少部 分致病性 分枝杆 菌 中 ， 可见 Ｅ Ｓ Ａ Ｔ 一 ６蛋 白 ， 大部 分分支 杆菌并不见 Ｅ Ｓ Ａ Ｔ 一 ６ 蛋 白。因此 ， 检测血样 品中 Ｉ Ｎ Ｆ 一 水平 时， 刺激抗原 可选用 Ｅ Ｓ Ａ Ｔ 一 ６蛋 白， 用于奶牛结核病诊 断。经 免疫学试验研究表示 ， Ｅ Ｓ Ａ Ｔ 一 ６蛋 白不仅包含 Ｔ细胞 ， 而且存 在 Ｂ细胞抗原表位 ， 对较强 的细胞免疫及体液免疫应答 具有 诱导 作用 ， 可见 ， Ｅ Ｓ Ａ Ｔ 一 ６蛋 白在诊 断奶牛结 核病方 面 ， 具有 较高 的应用价值。
３ ． ２ 酶联免疫吸 附试验
酶联 免疫吸附试验 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） ， 通过
抗原抗体反应 ，对 牛结 核分枝杆 菌抗原 的循 环抗体进行 检 测 ，其 中 ， Ｌ Ｐ Ｓ（ 脂多糖 ） 、 Ａ ｇ ８ ５ 、 Ｌ Ａ Ｍ（ 脂 阿拉 伯甘露聚糖 ） 、 Ｍ Ｐ Ｂ ５ ９ 、 Ｃ Ｆ Ｐ １ ０ 、 Ｅ Ｓ Ａ Ｔ 一 ６等是常用 的检测抗原 。Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ中， 可 配合免疫过氧化物酶 ， 相较 于传统 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 ， 该方式成本低 ，
奶牛结核病实验室诊断技术研究进展
品传 染 给 人 和 其 他 动 物 ． 害 严 重 ． 世 界 动 物 卫 生 危 被
组 织 （ Ｉ 列 为 Ｂ类动物 疫病 ． 国将 其列 为二 类动 物 Ｏ Ｅ） 我
２１ 传 统 的结核 菌素 皮 内变 态反 应 （ ＴＰ Ｄ） ． Ｏ ，Ｐ ０ Ｔ是 老 式皮 内变态 反应 ．Ｐ Ｐ Ｄ是 目前 公 认最 有 效
通 讯 作 者 ： 文平 。 李
此 类方 法均 是 利用 抗 原抗 体反 应 检测 针对 牛 结核
分 枝杆 菌抗 原 的循 环抗 体 ［ 目前 用 于检 测 的抗 原有 ６ １ 。
Ｐ Ｄ Ｅ ＡＴ一 Ｐ１ Ｐ Ｓ ６ ＣＦ ０ ＭＰ ５ Ｂ ９ ＭＰ ６ Ｂ ４ ＭＰ ７ Ｂ８ 、 Ｂ ０ ＭＰ ０
４ ２０ ； ２ ５ ９
３湖南株 洲市 畜牧水产 局 ， 洲 ． 株
中 图分类号 ：８ ８２ ． ２ 文献 标识 码 ： 文 章编号 ：０ ４ ４ ６ （０ ９ ０ — ０ ８ ０ ￥５ ． １ ３＋ Ａ １０ — ２ ４ ２ ０ ）４ ０ ３ — ２ 牛结 核病 （ ｏｉｅＴ ｂｒｕ ｓ ） 由牛 分枝 杆 菌 引 Ｂ ｖ ｕ ｅｅ ｌ ｉ 是 ｎ ｏｓ 起 的 一种慢 性 传染 病『 ｌ １ 。该病 传染 性 强 ． 且能 通 过奶 制 有 １％～ ０ ０ ２ ％的病 例结 核菌 培养 失败 同时 由于各种条 件 的影 响 ． 阳性 率较难 提 高
疫病 。牛结核病 的诊断大体上可归为两类 ： 一是 临床症状
诊断 ； 二是 实验 室诊 断 ， 括 细菌 学检 测 ， 涂 片镜检 、 包 如
的方 法 。 也是 被世 界 动物 卫生组 织 （ Ｉ 确定 的法定 检 Ｏ Ｅ）
疫方 法 。 被世界各 国接受 和采用 的方 法翻 。它主要是用 提
牛结核病的临床诊断及关键防治措施分析
牛结核病的临床诊断及关键防治措施分析牛结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染性疾病，主要影响牛及其它哺乳动物，同时对人类健康也构成一定威胁。
牛结核病的及时诊断和有效防治对于农牧业生产和公共卫生具有重要意义。
以下将对牛结核病的临床诊断及关键防治措施进行分析。
牛结核病的临床诊断主要依靠以下几个方面：1. 临床症状：牛结核病是一种慢性疾病，常见的症状包括消瘦、食欲不振、发热、乳房肿胀、咳嗽、呼吸困难等。
但这些症状并不特异，容易与其它疾病混淆，因此仅凭临床症状不能确定是否为牛结核病。
2. 皮内反应：结核菌蛋白皮内试验是诊断牛结核病的重要方法之一。
该试验能够检测牛体内对结核分枝杆菌的免疫反应，阳性反应表示牛体内存在结核分枝杆菌。
但该试验在实施过程中需要注意抗原的选择和读取结果的准确性。
3. X光检查：X光胸透可以检测牛肺部的结核病变，包括肺内结节、浸润、钙化等。
但该方法无法确定结核病变的性质和程度，只能作为辅助诊断手段。
4. 病理组织学检查：通过活体组织或尸体组织的病理学检查，可以直接观察结核分枝杆菌在组织中的存在情况，确定是否为结核病变。
但该方法需要进行组织切片和染色等复杂操作，同时对于非临床工作人员来说具有较高的技术要求。
关键的牛结核病防治措施主要包括以下几个方面：1. 强化养殖管理：加强牛场的卫生管理，保持饮水和饲料的清洁，定期对牛进行消毒和检查，及时发现和隔离疑似病例。
2. 严格实施动物禁令：对确诊牛结核病的患牛要及时淘汰，不得再投入生产。
同样，对牛场周围的野牛、野猪等野生动物也要加强管理，防止疫情传播。
3. 进行肉品检测：对于屠宰牛的肉品要进行检测，确保不带有结核分枝杆菌的肉类进入市场。
4. 执行兽医药物管理：针对牛结核病，可以选择使用结核菌素、吗啉达、异烟肼等抗结核药物进行防治。
但要严格按照兽医药物管理的规定进行使用，避免产生耐药菌株。
牛结核病的临床诊断需要结合临床症状、皮内反应、X光检查和病理组织学检查等多个因素进行研判。
牛结核病诊断技术研究概况
便 ，是 发现 和防治 结核病 传染 源的重要 诊断依 据 。但是 ，该 方 法缺 乏特异 性 ，不能准 确地鉴 定 出结 核分枝 杆菌 和非典 型 分 枝杆菌。另外 ，结核杆菌生长缓慢 ，在 ３ ７℃或 不含 Ｃ ， Ｏ 的环 境 下培养 ４～８ 周才 能生长 。引进 先进设 备可进 行结 核菌快 速 培 养 ，但 费用 昂贵 ，不易 推广普及 ，而且检 出率低 ，敏感 性
牛结 核病 （ ｏｉｅｔｂ ｒｕｏｉ，Ｂ Ｂ）主要是 由牛型分枝 Ｂ ｖｎ ｅｃ ｌ ｓ Ｔ ｕ ｓ 杆菌 （ ｙｏａｔ ｉ ｏｉ） Ｍ ｃｂｃ ｒ ｍ ｂｖ 引起 的一种严 重的人畜共患慢性 ｅｕ ｓ 传染 病 ，以在 多种组 织器 官形成结 核结节 ，继 而结节 中心 干 酪样 坏死 或钙 化为病 理特征 ；病 牛不 出现 明显 的临床 症状或 者 出现一 些非 特异症状 包括 贫血 、消瘦 、体虚 乏力 、精神萎 靡不振 和生产力下 降等 。世界动物卫 生组 织 （ Ｉ Ｏ Ｅ）将牛结核 病列为Ｂ 类动物疫 病 ，我 国将 牛结 核病列为二类 动物疫病 。 目
１ 细 菌学检查法
敏感性 较高而倍受欢迎 。在早期 的研 究 中，Ｅ ＩＡ ＬＳ 采用 的检测
结核 病 的细 菌学 检 查包 括 涂 片镜 检 、细菌 培 养等 。临 抗 原有牛分 枝杆 菌Ｐ Ｄ、老结 核菌Ｏ Ｐ Ｔ、牛分 枝杆菌 原生质抗
床和死 亡样 品 中的牛结核 分枝 杆菌可 通过涂 片抗酸 染色 ，镜 原 以及氯化 钾浸 出抗原 ，但 以Ｐ Ｄ Ｅ ＩＡ较好 ，敏 感性 和特 Ｐ — ＬＳ 检并通 过培养 确认 ，涂 片染色 法所需设 备简单 ，操 作方 法简 异性分别可 达到７ ％～９ ％和７ ％ ９ ％【 ０ ０ ０ ５ ３ ］ 。由于Ｐ Ｄ Ｐ 是一种成
武威市奶牛结核病免疫学诊断的调查研究
ｃ ｌｓｓ ｔｓ ａ ｏ ｄ ｃ ｅ ｌ ｃ ｔ ｅｆ ｒ ｆ ｕ ｅ ｉ ｅ ｏ ｉａｌ ｉ ｈ ｔ ｏ ｓｏ ｕ ｏ ｉ ｅ ｔｗ ｓｃ ｎ ｕ ｔ ｄ ｉ ａ ｌ ａｔ ａ ｍｓｏ ｗ ｉ ｔ ｐ ｒ ｄ ｃ ｌ ｗ ｔ ｔ ｅ ｍｅｈ ｄ ｆ ｍｍｕ ｏｏ ｉａ ｉｇ ｏ ｉ ，ｐ ｓｔ ｅｃ ｓ ｓｗ ｒ ｎ ｌ ｗ ｃｙ ｉ ｙ ｈ ｉ ｎ ｌｇ ｃ ｌｄａ ｎ ｓ ｓ ｏ ｉ ｖ ａ ｅ ｅ ｅ ｉ
６
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｉ ｌ ｃｅ ｃ ｎ ｔｒ ａｙ Ｍｅ ｉｉｅ ｏ ｒ ａ ｆＡｎｍａ ｉｎ ｅ ａ ｄ Ｖｅｅｉ ｒ ｄｃｎ Ｓ ｎ
Ｖｏ． ０ １３
Ｎ ． ｏ５
Hale Waihona Puke ２ １ ０ １武威 市 奶 牛 结 核 病 免 疫 学诊 断 的调 查 研 究
黄爱芳 王学明 祁小红 冯志华 ， ， ，
关 键词 ： 结核 病 ； 免疫 学诊 断 ； 牛 奶
［ 中图分类号］ ￥５ ． ［ ８２４ 文献标识码 ］ Ａ ［ 文章编号］ １０ － ０ （０ １ ０ － ０ － ０４６ ４ ２ １ ）５ ０６ ２ ７ ０ ０
Ｉ ｍ ｕ ｌ ｇ ｃ ｌＤｉ ｇ ｏ ｉ ｎｖ ｓｉａ ｉ ｎ ｏ ｉｙ Ｃａ ｔｅ ｍ ｎｏｏ ｉａ ａ ｎ ｓｓＩ ｅ ｔｇ ｔｏ ｎ Ｄａ ｒ ｔｌ
２ Ｗ ｗ ｉ ｎｍ ｌ ｕｂｎ ｒ ｎ ｅ ｒ ａｙＢ ｒａ ） ． ｕ ｅ Ａ ｉａ Ｈ ｓａ ｙ ａ ｄＶｔ ｎ ｒ ｕｅ ｕ ｄ ｅ ｉ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｗ ｉ ｅ ｄ ｖ ｌｐ ｎ ｆ ａｒ ａｔ ｄ ｓｒ ，ｉ ｒ ｅ ｎ ｕ ｅ ｔ ｅ ｓ ｆｔ ｆｍｉ ｒ ｄ ｃｉ ｎ ｆｒｃ ｎ ｕ ｒ ，ｔ ｅｔ ｂ ｒ ｓｒ ｃ ： ｔ ｔ ｅ ｅｏ ｍｅ ｔｏ ｉ ｃ ｔ ｅ ｉ ｕ ｔ ｈｈ ｄ ｙ ｌ ｎ ｙ ｎ ｏｄ ｒ ｏ ｅ ｓ ｒ ｈ ａｅ ｙｏ ｌ ｐ ｏ ｕ ｔ ｏ ｓ ｍｅ ｓ ｈ ｕ ｅ・ ｔ ｋ ｏ ｏ
牛结核病的研究概况
牛结核病的研究概况牛结核病是一种由分枝杆菌（Mycobacterium bovis）引起的慢性传染病，主要感染牛和其他家畜。
这种疾病对牲畜的健康和生产力产生负面影响，同时也对人类的健康构成威胁，因为人类可以通过与感染了结核病菌的牛接触而感染该疾病。
1.流行病学研究：研究人员通过调查感染牛的情况和动物之间的传播途径，以确定牛结核病的流行模式和风险因素。
这些研究可以帮助制定预防和控制策略，并提供更好的监测和诊断方法。
2.诊断技术的改进：为了确诊牛结核病，研究人员一直在努力改进诊断技术。
目前主要使用的方法包括皮内反应、结核菌分离和遗传学诊断等。
科学家们还致力于发展更快、更准确的诊断方法，以提高牛结核病的早期检测和治疗效果。
3.疫苗研发：疫苗是预防牛结核病的重要手段。
目前已经开发了一些候选疫苗，如巴氏疫苗（BCG）和DIVA（差异免疫诊断）疫苗。
这些研究的目标是研制出高效、安全的疫苗，以减少疾病在牲畜中的传播。
4.遗传学研究：研究人员使用基因测序技术对结核分支杆菌进行了广泛的基因组研究。
他们探索了不同的基因表达模式和调控机制，以及与菌株耐药性和毒力相关的基因。
这些研究有助于深入了解牛结核病的发生机制，并可能为新药物和治疗方法的开发提供依据。
5.控制和预防策略：研究人员还致力于开发有效的控制和预防策略，以减少牛结核病的传播风险。
这些策略包括隔离感染动物、测试和筛查有病牲畜，以及规范免疫和治疗方法。
此外，科学家们还试图提高公众对牛结核病的意识，以便更好地预防和控制该病。
总之，牛结核病的研究面临着多个挑战，如确诊方法、疫苗设计、流行病学认识和预防控制策略等方面。
尽管目前已经取得了一些进展，但我们需要进一步深入研究，以找到更好的方法来控制和消除这种疾病的传播。
IFN-γ体外释放法检测牛结核病
ｇ ， ＫＣ １ ０ ． ２ ｇ， Ｎａ ２ ＨＰ Ｏ ４’ １ ２ Ｈ２ ０ ２ ． ９ ｇ ， ＫＨ２ Ｐ Ｏ４ ０ ． ２ ｇ ，
ｍ Ｌ ， ｄ ｄ Ｈ ２ Ｏ ５ ０ ｍ Ｌ ， ４ ℃保存备用。
Ｔ ＭＢ母 液 ： ０ ． ２ ９ Ｔ ＭＢ干 粉 溶 于 １ ０ ０ ｍＬ无 水 乙 醇 中配 制 而成 ， ４℃保存 备用 。
杀阳性牛的国际通用政策 。由于结核菌素可能包含
有 与其 它 分枝 杆 菌 相 同 的非 特异 性 抗 原 组 份 ， 检 测 时 容 易 出 现假 阳 性 ， 因此 ， 结 核 菌 素皮 内变 态 反 应
１ ０ ｅ ｍ， 用卡尺测量术部 中夹皮皱厚度， 作好记录。 术
部用 酒精 棉球 消毒 ， 皮 内注入 ０ ． １ ｍＬ牛 提纯 结核 菌
还需大量数据支持。本研究利用原核表达的融合蛋
白Ｒ Ｖ ３ ８ ７ ２ 一Ｅ Ｓ Ａ Ｔ 一 ６ 一 Ｃ Ｆ Ｐ 一 １ ０ （ Ｒ Ｃ Ｅ） 刺 激 全血 ， 利 用 双抗 体夹 心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法 检 测 刺 激 的 全 血 上 清 中
３ ． ２ ． １ 牛 结核 菌素 皮 内变 态反 应
３ ． ２ ． １ ． １ 注射
保 定 好 牛只 ， 在颈 侧 中部 上 １ ／ ３处剪 毛 ， 直径 约
盒的研制具有重要意义 。 但 目前该法在 国内与皮 内
变 态 反应 开 展 的对 比试 验极 少 ， 其 敏 感 性 和特 异 性
使 用 曾使 许 多 国家 在 牛结 核 病 的 防控 上节 省 了大
牛结核病现状及诊断技术研究进展
摘要：牛结核病，在全球动物卫生组织疾病名录中被评为B级疾病，是当前牛饲养中一个普遍发生的人畜共患疾病，如果有牛发病不但会从家畜内部传播，而且会对牧民产生病毒感染，给牧民的健康造成严重威胁，而且也可能带来损失。
因此，我国动物疫病研究技术人员需要进一步加强对该疾病的诊断技术研究，提升对牛结核病的方式质量。
本文重点阐述了牛结核病现状及诊断技术研究进展，旨在为牛结核病防治工作的开展提供参考借鉴。
关键词：牛结核病；现状；诊断技术；研究进展牛结核病对爆发于奶牛、使役牛等牛群中，且具有较强的传染性，在临床表现上不同生长阶段被传染的病牛呈现病症也有所差异。
近些年，随着我国畜牧行业的不断发展，各地区相关部门对牛结核病的重视度越来越高，畜牧疫病防治技术人员也在积极对此疾病的治疗防治工作进行探究，从而为推进我国肉牛养殖行业的快速发展提供保障。
同时，为养殖户提供科学的防治管理措施，实现降低牛结核病发病概况，确保养殖户、养殖场经济收益不受损失。
1 牛结核病现状牛结核病，一种常见的人畜共患传染病，被我国列为二类动物疫病，该疫病的暴发及传染对牛养殖业的发展及民众身体健康带来极大威胁。
牛结核病从本质上分析，主要是因感染牛分枝杆菌、结核分枝杆菌而已引起传染性疫病，病毒可通过患病牲畜将疫病病毒传染给其他健康动物或人的群体中，当前每年因该疫病传染致死人数并不少，大部分暴发疫病感染的区域多为动物、人等群体较为集中且比较偏远的落后地区，牛结核病的传染暴发与当地居民的生活习惯有着直接关系。
因此，人口数量、人口流动性的增加都会对牛结核病传染创造有利条件。
新时期，随着我国社会经济的飞速发展，畜牧养殖的规模逐渐扩大，越来越多的人员选择投入到畜牧养殖行业中，以此来达到经济收益提升的目标，这也间接地为牛结核病的防治工作带来一定困难。
牛结核病的防治措施主要有检疫、扑杀等措施，这些措施能够较好地缓解牛结核病的疫病扩散，但我国仍需要面临较为严峻的疫病防治工作。
奶牛结核病检测方法
奶牛结核病检测方法奶牛结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，可以影响奶牛的健康和生产能力，还可以通过食用患有结核病奶牛的牛奶和肉类传播给人类。
因此，对奶牛结核病进行及早的检测和防控非常重要。
下面将介绍几种常用的奶牛结核病检测方法。
一、皮内试验皮内试验是目前最常用和经济实用的奶牛结核病检测方法之一。
这种方法通过在奶牛的皮肤下注射结核菌抗原，观察注射部位是否产生特异性的变应反应来判断奶牛是否感染结核菌。
结果的判断是根据注射后48~72小时观察注射部位是否有明显的硬结和红肿，硬结直径大于10mm者为阳性反应，表明该奶牛可能感染有结核菌。
需要注意的是，皮内试验属于间接试验，存在一定的假阴性和假阳性的可能性，因此在实际应用中需要与其他检测方法相结合来判断奶牛结核病的感染情况。
二、血清学检测血清学检测是通过检测奶牛血液中特异性抗体的存在来诊断奶牛结核病。
常用的血清检测方法包括血液凝集试验、酶联免疫吸附试验和胶体金试验等。
这些方法的原理是将感染结核菌的奶牛的血清与结核菌抗原进行反应，然后通过不同的检测方法观察血清的凝集、发色等反应，判断是否存在结核菌的感染。
相比于皮内试验，血清学检测方法具有操作简单、准确性高等优点，但也存在着一定的假阳性和假阴性的可能性，因此也需要与其他方法相结合来判断奶牛结核病的感染情况。
三、结核菌培养结核菌培养是通过在适当的培养基中培养样本中的结核菌，然后观察菌落的生长情况和形态特征来判断奶牛是否感染结核菌。
这种方法是目前诊断结核病的“金标准”，对确定结核病感染的确诊具有重要意义。
但是，结核菌培养的过程需要较长时间，通常需要培养4-6周才能得到结果，因此不太适合作为常规的奶牛结核病筛查方法。
此外，结核菌培养的操作较为复杂，需要较高的实验室技术和设备条件。
四、核酸检测核酸检测是通过检测奶牛体内结核菌的核酸（基因）来判断是否感染结核菌。
这种方法的优点是操作简便、结果快速，对于早期结核病感染的检测具有较高的灵敏度和特异性。
牛结核病的临床诊断及关键防治措施分析
牛结核病的临床诊断及关键防治措施分析牛结核病是一种由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病，对乳牛的生产性能和兽医公共卫生造成重大影响。
牛结核病的临床诊断和关键防治措施如下所述。
临床诊断：1. 病史询问：了解牛的病史，包括生产性能下降、体重减轻、咳嗽、消化不良等症状。
2. 体温测量：测量牛的体温，结核病患牛体温常常升高。
3. 体检：通过体检，观察牛的情况，检查有无淋巴结肿大、呼吸困难等症状。
4. 皮内试验：利用结核菌蛋白进行皮内感作试验，观察有无皮肤反应。
5. X线检查：对怀疑患有结核病的牛进行X光胸透，观察有无肺部病变。
关键防治措施：1. 疫苗接种：牛结核病主要通过呼吸道传播，牛群的疫苗接种是预防结核病的关键措施之一。
疫苗接种可提高牛的免疫力，减少感染风险。
2. 消毒和隔离：对于感染结核病的牛，应将其隔离，避免与健康牛群接触。
病房、饮水设施、饲料等也要定期进行消毒，防止病原菌的传播。
3. 严格的管理措施：包括定期进行乳牛体检，密切观察牛的健康状况，及时发现疑似感染牛并隔离治疗。
加强饲养管理，保障牛的饮食营养均衡，增强牛的抵抗力。
4. 消灭传染源：对已经确诊感染结核病的牛，应当进行淘汰，防止感染扩散。
同理，对于与感染牛接触过的牛，应予以观察和检测，必要时也要进行淘汰处理。
5. 兽医卫生防护：在进行结核病的诊断和治疗时，兽医人员应当采取相应的个人防护措施，避免感染风险，如佩戴口罩、手套和防护服等。
牛结核病的临床诊断主要依靠病史询问、体温测量、体检、皮内试验和X-ray检查。
关键的防治措施包括疫苗接种、消毒和隔离、严格的管理措施、传染源的消灭和兽医卫生防护。
这些措施的实施可以有效预防和控制牛结核病的传播，保障乳牛的生产性能和兽医公共卫生。