组织培养实验四-生根培养
壮苗生根培养实验报告
一、实验目的1. 掌握植物组织培养技术，特别是壮苗和生根培养的方法。
2. 了解植物激素对植物生根的影响。
3. 探讨不同培养基配比对植物生根的影响。
二、实验材料1. 植物材料：本实验选用小麦为实验材料。
2. 培养基：MS培养基、1/2MS培养基、1/4MS培养基。
3. 激素：生长素（NAA）、细胞分裂素（BA）、生长素类似物（IBA）。
4. 实验仪器：超净工作台、移液器、培养箱、显微镜等。
三、实验方法1. 准备培养基：分别配置MS培养基、1/2MS培养基、1/4MS培养基，加入不同浓度的生长素和细胞分裂素。
2. 取小麦种子，进行表面消毒后接种于不同培养基中。
3. 将接种后的培养皿放入培养箱中，培养温度为25℃，光照时间为12小时/天。
4. 观察并记录小麦种子的生长状况，包括生根数量、生根长度、植株高度等。
四、实验结果与分析1. 培养基对小麦生根的影响：实验结果显示，1/2MS培养基中生根数量最多，生根长度最长，植株高度最高；1/4MS培养基次之；MS培养基中生根数量最少，生根长度最短，植株高度最低。
这说明低浓度的MS培养基有利于小麦生根。
2. 激素对小麦生根的影响：实验结果显示，加入生长素和细胞分裂素的培养基中，小麦生根数量和长度均优于未添加激素的培养基。
其中，添加NAA和IBA的培养基中生根数量最多，生根长度最长；添加BA的培养基中生根数量次之，生根长度次之。
这说明生长素和细胞分裂素对小麦生根有促进作用，且生长素和细胞分裂素的组合效果优于单一激素。
3. 不同激素配比对小麦生根的影响：实验结果显示，NAA/BA=1:1的配比中，小麦生根数量最多，生根长度最长；NAA/BA=1:2的配比中，小麦生根数量次之，生根长度次之；NAA/BA=1:4的配比中，小麦生根数量最少，生根长度最短。
这说明NAA 和BA的最佳配比为1:1。
五、实验结论1. 1/2MS培养基有利于小麦生根，是小麦壮苗生根的理想培养基。
植物组织培养实验报告
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师）年级13级学号17130208 组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6指导老师实验名称植物组织培养综合实验一、实验目的1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法；3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法；4.了解组织培养的基本程序；5.掌握接种的方法和材料的培养过程；6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术；7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体；8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别二、实验原理1.植物细胞的全能性一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。
植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。
2.植物细胞表现出全能性的条件1.离体状态；2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）；3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型3.无菌条件把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。
用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。
在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。
组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。
4.脱分化与愈伤组织已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。
脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。
所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。
5.培养基植物组织培养常用的培养基为MS培养基。
常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。
植物组织培养实验指导
生物技术大实验第一部分植物组织培养实验一、母液的配制和保存（3学时）一、实验目的通过配制MS培养基母液，掌握贮备液的配制和保存方法。
二、原理配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存。
使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
以MS培养基为例，所需配制的母液为：大量元素母液（母液Ⅰ，浓缩10倍）、微量元素母液（母液Ⅱ，浓缩100倍）、铁盐母液（母液Ⅲ，浓缩100倍）和有机化合物母液（母液Ⅳ，浓缩100倍）等。
三、实验仪器设备和试剂冰箱，天平，酸度计，烧杯（50ml，100ml，500ml，1000ml），量筒(1000ml，100ml，25ml)，容量瓶(1000ml，500ml，100ml)，磨口试剂瓶(100ml，500ml，1000ml)，药勺、称量纸、滴管、玻璃棒，电炉，微波炉NH4NO3, MnSO4.4H2O, KNO3, ZnSO4.7H2O, CaCl2.2H2O, Na2MoO4.2H2O, MgSO4.7H2O, CuSO4.5H2O, KH2PO4, CoCl2.6H2O, H2BO3，Na2•EDTA•2H2O，KI, FeSO4.7H2O，烟酸，甘氨酸, 盐酸硫胺素, 肌醇, 盐酸吡哆醇, 蒸馏水四、实验方法1、MS大量元素母液的配制配制时先用量筒量取蒸馏水大约350ml，放入500ml的烧杯中，按照配方表中用量依次分别称取：NH4NO3 ,KNO3 ,KH2PO4 ,MgSO4.7H2O ,CaCl2.2H2O，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入500ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至500ml，然后，倒入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。
2、MS微量元素母液的配制按照配方表中用量用电子天平分别依次称取MnSO4•4H2O，ZnSO4•7H2O ，H2BO3，KI ，NaMoO4•2H2O，CuSO4•5H2O，CoCl2•6H2O，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容，装入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。
分化生根实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 探究不同浓度生长素类似物对植物插条生根的影响。
2. 确定生长素类似物促进插条生根的最适浓度。
3. 分析生长素类似物对植物插条生根的机理。
二、实验原理生长素类似物是一类具有植物生长素生理活性的化合物，能够促进植物生长和发育。
在植物组织培养中，生长素类似物可以诱导愈伤组织的形成和分化，进而促进插条生根。
本实验通过设置不同浓度的生长素类似物溶液，研究其对植物插条生根的影响，旨在为植物繁殖和培育提供理论依据。
三、实验材料1. 植物材料：选取生长旺盛的一年生枝条，如月季、杨、加拿大杨等。
2. 生长素类似物：萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）、2,4-D等。
3. 实验用品：蒸馏水、天平、量筒、容量瓶、滴管、试剂瓶、烧杯、玻璃棒、矿泉水瓶等。
四、实验方法1. 设置生长素类似物浓度梯度：将生长素类似物母液分别配成0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L等不同浓度的溶液，分别放入矿泉水瓶中，深约2cm。
再取一矿泉水瓶，加入等量的清水，作为对照。
2. 制作插条：将准备好的枝条剪成长约5cm的插条，插条的形态学上端为平面，下端要削成斜面，增加吸收水分的面积，促进成活。
每一枝条留2个芽，所选枝条的条件应尽量相同。
3. 分组处理：将制作好的插条，分成5组（每组不少于10个枝条），分别将其基部浸泡在盛有不同浓度生长素类似物溶液的矿泉水瓶中，浸泡时间为24小时。
4. 插条生根培养：将处理好的插条放入生根培养箱中，保持适宜的温湿度，培养7天后观察生根情况。
五、实验结果与分析1. 生长素类似物对插条生根的影响（1）生根数量：随着生长素类似物浓度的增加，插条生根数量逐渐增多。
在1.0mg/L的生长素类似物溶液中，插条生根数量最多，说明该浓度对插条生根具有促进作用。
（2）生根长度：在1.0mg/L的生长素类似物溶液中，插条生根长度最长，说明该浓度对插条生根具有促进作用。
菊花的组织培养(实验报告)
菊花的组织培养实验报告单班级：____________ 实验日期：______________指导教师：___________ 学生姓名：_____________ 小组成员有：_____________实验原理1.植物细胞表现出全能性需要经历脱分化和再分化过程。
2.细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、影响脱分化和再分化的关键激素，激素浓度和比例会影响植物细胞发育的方向。
目的要求1.了解植物组织培养的基本原理。
2.了解生长素和细胞分裂素的浓度、用量的比例对菊花愈伤组织形成和分化的影响。
3.尝试进行植物组织培养。
材料用具1.材料：幼嫩的菊花茎段、培养基、体积分数为70%的酒精、质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液和无菌水等。
各种培养基的配制参见本书附录1。
2.用具：50mL锥形瓶（或植物组织培养瓶）、烧杯、酒精灯、超净工作台（或接种箱）、高压蒸汽灭菌锅、培养箱、封口膜、滤纸、标签、消毒用酒精棉球、培养皿、解剖刀和镊子等。
方法步骤1.外植体消毒酒精擦拭双手和超净工作台台面。
将流水充分冲洗后的外植体用酒精消毒30 s，然后立即用无菌水清洗2~3次；再用次氯酸钠溶液处理30 min后，立即用无菌水清洗2~3次。
2.外植体的接种将消过毒的外植体置于无菌的培养皿中，用无菌滤纸吸去表面水分。
用解剖刀将外植体切成0.5~1cm长的小段。
在酒精灯火焰旁，将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织的培养基中。
用封口膜或瓶盖封盖瓶口，并做好标记。
3.愈伤组织培养将接种外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于18～22℃的培养箱中培养。
培养过程中，定期观察和记录愈伤组织的生长情况。
4．生芽、生根培养培养15～20d后，将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上。
长出芽后，再将其转移到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗。
5．炼苗、移栽移栽前先打开封口膜或瓶盖，让试管苗在培养箱内生长几日。
用流水清洗掉根部的培养基后，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长大后再移栽入土。
植物组织培养实验
取后各放入50-100ml的烧杯中，加蒸馏水约
50ml溶解，然后混合定容于500ml容量瓶中，
转移到储液瓶中，贴好标签保存于4℃冰箱。
配制培养基时，每配制1000ml培养基取此液
10ml。
表2 MS培养基微量元素的称量及定容（50×） MnSO4.4H2O 22.3 1115 ZnSO4.7H2O 8.6 430 CuSO4.5H2O 0.025 1.25 H3BO3 6.2 310 Na2MoO4.2H2O 0.25 12.5 KI 0.83 41.5 CoCl2.6H2O 0.025 1.25
培养基配制
移母液 确定配方 称取蔗糖、琼脂 二次定容 定 容 培养基熬制 调pH值
接
种
灭
菌
扎
口
分
装
母液吸取量的计算
公式1：
配制培养基的升数 母液吸取量= 母液体积×———————— 母液浓缩倍数 公式2： 培养基要求的含量 母液吸取量= —————————— 母液每ml的含量
调pH值：
•ｐH影响培养基的硬度 ｐH ＞6.5 ｐH ＜5.0 培养基会变硬 培养基不易凝固
容于500ml重蒸馏水中。
表1 MS培养基大量元素的称量及定容（5×） KNO3 1900 9500 NH4NO3 1650 8250 KH2PO3 170 850 MgSO4.7H2O 370 1850 CaCl2.2H2O 440 2200 定容于500ml重蒸馏水中，最后加入 CaCl2.2H2O，每升培养基取此液100ml
表3 MS培养基铁盐母液的称量及定容（100×） FeSO4.7H2O Na2-EDTA.2H2O 27.8 37.3 2780 3730
定容于500ml重蒸馏水中，每升培养基取
植物组织培养快繁技术—组培苗生根培养
3、植物生长调节剂
对于大多数植物来说，诱导生根需要有适当的生长素，其中最常用的是 NAA和IBA，质量浓度一般为0.1-10mg/L。通常的使用方法是将植物生长调节 剂预先加入到培养基中，然后再接种组培苗诱导生根。
4、培养条件
不同植物对光照和温度的要求不同。光照强度和光照时间对生根影响十 分复杂。
二、影响组培苗生根的因素
1、植物材料 2、培养基 3、植物生长调节剂 4、培养条件
1、植物材料
不同植物、不同基因类型、同一植株不同部位和不同年龄对分化生根都 有影响，一般木本比草本难，成树比幼树难，乔木比灌木难。
2、培养基
一般情况下矿质元素浓度较高时有利于茎、叶生长，浓度较低时有利于 生根，且根多而粗壮，发根也快，加铁盐则更好，因此生根培养可使用1/2MS 或1/3MS培养基；生根培养时通常使用的糖是蔗糖，其浓度一般为1%-3%； 组培苗的生根要求一定的pH值，一般为5.0-6.0。
3、育苗室管理 温度：28℃左右。 湿度：50-60%。 光照：暗培养一周左右，给予1500lux-2000lux光照。
4、注意事项 （1）培养基灭菌彻底。 （2）严守无菌操作规程。 （3）严守生根苗切分及接种要求。
任务三 组培苗生根培养
目录
01 组培苗生根培养的类型 02 影响组培苗生根的因素 03 组培苗生根培养过程
ห้องสมุดไป่ตู้
一、组培苗生根培养的类型
1、瓶内生根 瓶内生根是指将完成壮苗阶段的单苗，转接到生根培养基上，在培养瓶
内生根的方法。 2、瓶外生根
瓶外生根也叫活体生根。瓶外生根是将已完成壮苗培养的小苗，用生根 粉或海藻素处理后栽入疏松透气的基质中，经过合理养护形成根系的方法。
三、组培苗生根的过程
组培苗的增殖与生根培养的实验反思
组培苗的增殖与生根培养的实验反思本次实习，我接触到向往已久的组织培养技术，原本认为很高大上的技术，在老师的细心指导下也逐渐掌握要领。
这次，我们进行了麻竹初代繁殖体系的建立和容器苗的移植两项重要的工作。
实验的过程很繁琐，每一步都至关重要，每一步都需要我们付出十二分的细心和耐心才能获得最后的成功。
在配置培养基时，需要加入的母液种类繁多，我们的细心远远不够，每加入一种母液就核对一种母液的细心制度让我们深深折服。
另外，培养基的灭菌至关重要，这决定了之后工作的绝对成败。
通过，配置培养基这一基本但是至关重要的工作，我们学会了付出细心，用耐心收获成果。
另外，理论与实践是不可分割的，在理论学习的同时，我们还需要认真的进行实验。
在现代农业中，组织培养有着极其重要的作用，因此更需要我们在实验中认真的学习组培的技术。
根据细胞的全能性原理以及组培原理将离体的植物器官原生质体培养在人工配制的培
养基中，给与适当的条件，使其长成人类所需要的组织、器官和完整的植株的过程。
而自然下的植株是含有病毒的，这样会导致经济作物大量减产，为了克服这一困难在组织培养前对外植体进行脱毒，这不仅克服了经济作物的减产还提高了产量，大大提高了经济效益。
并切植物组织培养实现了高价植物种类的工厂化生产，为这些紧缺植物和植物体内各物质特别是次生代谢物的提取提供了更多的材料。
在本次实验中，我发现自身在做实验时还存在很多的不足，在理
论知识方面也有很多的欠缺。
这就要求我在以后的学习中，更加努力认真。
同时也感谢团队同学的包容与互助以及老师的指导和教导。
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实验四植物生根培养
一、目的要求
通过在超净工作台上进行无菌操作训练
掌握试管苗生根操作技术。
二、基本原理
试管苗增殖阶段要将增殖的嫩枝进行壮苗和生根培养。
多采用1/2MS。
本实验以菊花为例，学习生根培养的操作技术。
三、材料与用具
1．设备与用具超净工作台、70％的乙醇、95％的乙醇、盛有培养基的培养瓶、接种器械（主要指剪刀、镊子等）、酒精灯、无菌纸。
2．材料菊花的试管苗。
四、方法步骤
1．准备生根培养基，培养基为1/2MS+蔗糖+琼脂。
2．将接种需用的消毒剂、接种用具、酒精灯、烧杯、无菌水、无菌培养皿、培养基等置于超净工作台的接种台面；打开超净台的电源开关，打开鼓风开关（调节送风量），并打开紫外灯消毒20min，之后关掉紫外灯，继续送风20min，打开荧光灯开关，准备接种。
3．无菌操作前，将双手用70%乙醇棉球擦拭消毒，剪刀、镊子等金属工具在用酒精灯外焰灼烧灭菌，后置于支架上冷却备用。
4．无菌纸置于超净工作台，打开包纸，用镊子将无菌纸取出，置于操作人员的正前方。
5．在酒精灯火焰处打开外植体材料瓶，将植物材料用无菌的镊子取出置于无菌纸上。
6．一手持镊子，一手持剪刀，将植物材料按照要求切割。
切割时，应尽可能使单株上的茎、叶保持完整，切去原来的变褐根，仅留色白、幼嫩的根。
依照形态学上端向上，形态学下端向下的原则，将材料接种于生根培养基中，每瓶可适当多接材料，分布要均匀。
同时宜将大小较一致的材料接种于一瓶中，以便移栽时，每瓶中材料大小一致。
7．将接好的培养瓶暂时放在超净工作台上，材料接完后一块取出培养瓶。
在标签上写
上植物编号，日期、班级、学号，放于培养箱中进行培养。
8．接种结束后，关闭和清理超净工作台，并清洗用过的玻璃器皿等。
五、结果与分析（附图）。