果蝇的饲养

2.果蝇的生活史观察 2.果蝇的生活史观察
果蝇的生活史从 受精卵开始， 受精卵开始，经历幼 虫 ( 一至三龄 ) 、蛹 和成虫阶段， 和成虫阶段，是一个 完全变态过程 。
生活史观察： 生活史观察：
成熟的雌蝇交尾后2 将卵产在培养基的表层。 ①卵 ：成熟的雌蝇交尾后 ～ 3d 将卵产在培养基的表层。用解剖针针尖 挑取一点培养基将其置于载玻片上， 滴清水， 挑取一点培养基将其置于载玻片上，滴1 滴清水，用解剖针将培养基展开后 放在显微镜低倍镜下仔细进行观察。果蝇的卵为椭圆形， 放在显微镜低倍镜下仔细进行观察。果蝇的卵为椭圆形，长约 0.5mm ，腹 面稍扁平，前端伸出的触丝可使卵附着在培养基表层而不陷入深层。 面稍扁平，前端伸出的触丝可使卵附着在培养基表层而不陷入深层。 幼虫： 受精卵经过1d的发育即可孵化为幼虫 的发育即可孵化为幼虫。 ②幼虫： 受精卵经过 的发育即可孵化为幼虫。幼虫在培养基内及瓶壁上 都有，培养基内的幼虫一般要小一些。 都有，培养基内的幼虫一般要小一些。果蝇的幼虫从一龄幼虫开始经两次蜕 形成二龄和三龄幼虫，长大的三龄幼虫往往爬到瓶壁上来化蛹， 皮，形成二龄和三龄幼虫，长大的三龄幼虫往往爬到瓶壁上来化蛹，长度可 幼虫一端稍尖为头部，黑点处为口器。 达 4 ～ 5mm 。幼虫一端稍尖为头部，黑点处为口器。 的发育开始化蛹。蛹一般附着在瓶壁上，淡黄色。 ③蛹： 幼虫经过 4 ～ 5d 的发育开始化蛹。蛹一般附着在瓶壁上，淡黄色。 随着发育颜色逐渐加深，最后为深褐色。 随着发育颜色逐渐加深，最后为深褐色。瓶壁上看到的几乎透明的蛹是已经 羽化完而遗留的蛹的空壳。 羽化完而遗留的蛹的空壳。 刚羽化出的果蝇虫体较长，翅膀也没有完全展开， ④成虫 ：刚羽化出的果蝇虫体较长，翅膀也没有完全展开，体表未完全几 丁质化所以成半透明透乳白色。随着发育，身体颜色加深， 丁质化所以成半透明透乳白色。随着发育，身体颜色加深，体表完全几丁质 后开始交配， 化。羽化出的果蝇在 8 ～ 12h 后开始交配，成体果蝇在 25 ℃ 条件下的寿 命为 37d 。
香蕉饲料
50
1.6 50 1.4 0.5-1
培养基配制方法：
取应加水量的一半，加入琼脂和蔗糖，煮沸，使充分溶解。 取应加水量的一半，加入琼脂和蔗糖，煮沸，使充分溶解。 取另一半水混和玉米粉，加热煮熟，调成糊状。 取另一半水混和玉米粉，加热煮熟，调成糊状。 玉 米 粉 糖 琼脂
将上述两者煮沸混匀，待稍冷后分装。 将上述两者煮沸混匀，待稍冷后分装。 最后加入酵母粉及丙酸。 最后加入酵母粉及丙酸。
• 果蝇具有丰富的外表型态差异， 果蝇具有丰富的外表型态差异，包 括眼色、眼形、翅形、翅脉横隔、 括眼色、眼形、翅形、翅脉横隔、刚毛 形状与数目、体色等。 形状与数目、体色等。
果蝇几种常见的突变类型
突变性状 • 白眼 • 棒眼 • 黑檀体 • 黑体 • 黄身 • 残翅 • 焦刚毛 • 小翅 基因符号 性状特征 复眼白色 W 复眼纵条形 B 体呈乌木色，黑亮 e 体呈深黑色 b 体呈浅黄色 y 翅退化，部分残留 vg sn 刚毛卷曲如烧焦状 m 翅较短，仅至腹端
（3）果蝇的继代培养
转移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶： 转移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶： 取一新 培养瓶，略为松动棉塞，放置于右手侧， 培养瓶，略为松动棉塞，放置于右手侧，取欲 转移果蝇培养瓶于左手侧，以左手握住瓶颈， 转移果蝇培养瓶于左手侧，以左手握住瓶颈， 两指轻扣棉塞顶部， 两指轻扣棉塞顶部，以右手轻拍瓶底使果蝇掉 落于培养基表面，左手拔起棉塞以两指夹住， 落于培养基表面，左手拔起棉塞以两指夹住， 右手两指夹住棉塞新培养瓶棉塞， 右手两指夹住棉塞新培养瓶棉塞，并将新培养 瓶倒扣于旧培养瓶上， 瓶倒扣于旧培养瓶上，再以左手握住两瓶口相 接处，翻转使新培养瓶位于下方， 接处，翻转使新培养瓶位于下方，然后以右手 掌心轻拍旧培养瓶瓶底， 掌心轻拍旧培养瓶瓶底，使果蝇掉落于新培养 瓶内，迅速盖上各瓶棉塞。 瓶内，迅速盖上各瓶棉塞。
果蝇的饲养及形态性状观察
一、实验目的
1.了解果蝇生活史及各个阶段形态特征； 2.掌握果蝇成虫雌雄性别鉴定方法; 3.了解果蝇常见的突变型; 4.掌握果蝇的饲养方法。
二、实验原理
果蝇（Drosophila melanogaster ） 果蝇（ 中文名：黑腹果蝇（2n=8） 中文名：黑腹果蝇（2n=8） 属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、 属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇 果蝇属。 科、果蝇属。
再麻醉
– 观察或计数过程中，果蝇可能苏醒，可准备 观察或计数过程中，果蝇可能苏醒， 一玻璃培养皿，内以胶带贴一小块棉球， 一玻璃培养皿，内以胶带贴一小块棉球，滴 入适量乙醚，培养皿口朝下置于一旁备用， 入适量乙醚，培养皿口朝下置于一旁备用， 如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下， 如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下，盖于 果蝇上方待其麻醉后再移开。 果蝇上方待其麻醉后再移开。
六、注意事项
1、 麻醉剂的使用：乙醚有毒, 挥发性强，使 用时，要注意随时盖好瓶盖,防止乙醚挥发。 2、麻醉深度：麻醉果蝇时，要防止麻醉过度， 影响继代培养。 3、雌雄果蝇的准确识别。
3.果蝇的麻醉 3.果蝇的麻醉
麻醉剂： 麻醉剂：乙醚
麻醉方法： 麻醉方法：
取一麻醉瓶，瓶口与培养瓶大小相仿， 取一麻醉瓶，瓶口与培养瓶大小相仿， 取一棉花塞，在塞入瓶口的一面滴加3滴乙醚，将果 取一棉花塞，在塞入瓶口的一面滴加 滴乙醚， 滴乙醚 蝇转入麻醉瓶内，翻转麻醉瓶使瓶口朝上， 蝇转入麻醉瓶内，翻转麻醉瓶使瓶口朝上，迅速将滴 有适量乙醚的棉塞盖住麻醉瓶口， 有适量乙醚的棉塞盖住麻醉瓶口，约1min左右果蝇 左右果蝇 倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。 倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。
果蝇（ 是遗传学的重要实验材料，可用来进 果蝇（ fruit fly ）是遗传学的重要实验材料 可用来进 行三大定律及连锁互换、三点测交、 行三大定律及连锁互换、三点测交、唾腺染色体观察等多 方面的研究。果蝇 方面的研究。果蝇是一种模式生物，具有许多优点： 完成一个世代。 （1）生活史短，20-25℃条件下， 12-15d完成一个世代。 ）生活史短， ℃条件下， 完成一个世代 （2）繁殖率高，一对果蝇可产卵 ）繁殖率高，一对果蝇可产卵400-500只。 只 3）饲养方便，来源广泛。 （3）饲养方便，来源广泛。 （4）染色体数少，只有 4 对。 ）染色体数少， （5）突变性状多，且易于识别。 ）突变性状多，且易于识别。
牛奶瓶、 牛奶瓶、大中型指管 或三角瓶
灭菌温度121℃ ℃ 灭菌温度 灭菌时间20min 灭菌时间
（2）培养基的配制
果蝇培养基成份（100ml） 蒸馏水 玉米粉 糖 琼脂
丙酸（苯甲酸）
酵母粉
80ml 8.5g 6.５g １.０g 0.5ml （0.25g） 少许
果蝇饲料的几种配方： 果蝇饲料的几种配方： 玉米饲料 米粉饲料 水（ml） 200 100 琼脂（g） 1.5 2 蔗糖（g） 13 10 香蕉浆（g） 玉米粉（g） 17 米粉（g） 8 麸皮（g） 8 酵母粉（g）1.4 避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表 面而粘着于培养基表面致死，可将培养瓶横放， 面而粘着于培养基表面致死，可将培养瓶横放，将麻 醉的果蝇倒于瓶壁，待其苏醒后再将培养瓶正立。 醉的果蝇倒于瓶壁，待其苏醒后再将培养瓶正立。 做好标记：新转移的培养瓶上需贴好标签， 做好标记：新转移的培养瓶上需贴好标签，注明继代 培养日期及实验者姓名。 培养日期及实验者姓名。
翅脉横隔
♦ 野生型，具有横隔脉，突变型，缺横隔脉 野生型，具有横隔脉，突变型，
体色
翅形
长翅 短（小）翅
残翅
眼色
红眼 朱红眼
墨黑眼
白眼
刚毛形态
果蝇常见突变型
野生型
残翅
棒眼
小翅
黑檀体
白眼
6.果蝇的雌雄鉴别 果蝇的雌雄鉴别
♀ ：腹部背面有五条黑条纹 腹部背面有三条黑条纹， ♂ ：腹部背面有三条黑条纹，
果 蝇 的 生 活 史
果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一 般来说， 果蝇不育或死亡， 般来说， 30 ℃ 以上温度能使 果蝇不育或死亡， 低温能使生活周期延长，生活力下降。 低温能使生活周期延长，生活力下降。饲养果蝇 的最适温度为 20 ～ 25 ℃。 果蝇在 25 ℃ 时，从 卵到成蝇需 10 d左右，成虫可活 26 ～ 33 d。 左右， 左右 。
果蝇转入麻醉瓶方法
死亡果蝇的标志
4.果蝇形态特征观察 4.果蝇形态特征观察
• • • • 果蝇成虫分为头、胸、腹三部分 头部有一对大的复眼，三个单眼和一对触角。 胸部有三对足，一对翅和一对平衡棒。 腹部背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器位 于腹面末端，全身有许多体毛和刚毛。
5.果蝇几种突变类型的观察 5.果蝇几种突变类型的观察
三、实验用品
1、仪器：显微镜、双筒解剖镜或放大镜、恒温培养箱、
高压灭菌锅、培养瓶、麻醉瓶、白磁砖、毛笔、石棉网、 棉花、纱布、吸水纸、滤纸片、牛皮纸、小镊子等。
2、材料：果蝇野生型及不同突变型果蝇 3、试剂：乙醚、玉米粉、糖、酵母粉、琼脂、丙酸
四、实验操作流程
1.果蝇饲养。
（1）培养瓶、棉塞灭菌
最后一条极宽， 最后一条极宽，并延伸到腹面
果蝇♀♂识别 果蝇♀♂识别 ♀♂
♀ ：无性梳 ♂ ：前腿跗节上有性梳
果蝇的雌雄鉴别
♀ 个体大小 腹背条纹 腹部末端 性梳 大 5 尖 无 ♂ 小 3 圆 有
五、结果分析
1、每人制备２瓶培养基 ． 每人制备２瓶 2、每人转移培养2瓶果蝇。要求每瓶至少３ 、每人转移培养2 对雌雄果蝇。 作业: 作业: 比较雌雄果蝇。