食品中菌落总数的测定方法
菌落总数测定
食品安全菌落总数测定菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
菌落总数检验工作中会遇到各种实验平板的菌落计数工作，如倾注法平板，螺旋接种平板，3M菌落总数测试纸片，滤膜法平板等。
因此要高效准确的进行各类平板的菌落计数并保存所有实验数据和图片，必须要求采用的自动计数仪器支持各类平板的自动分析。
迅数菌落分析仪器采用了菌落放大图象拍摄，高分辨率的1000万像素CCD数字成像技术和Colonfast 菌落智能识别技术。
在菌落自动计数方面，仪器可以快速完成包含细菌、霉菌、酵母菌等样品的各类倾注法平板、涂布法平板、滤膜法平板、空气沉降法平板、螺旋接种平板、3M纸片的菌落自动计数和浓度计算，这个功能可以促进我们食品卫生检验中“菌落总数”测定项目的自动化；自动计数菌落的速度高于500个菌落/秒，最小可以分辨的菌落直径可达 0.01mm；可构建专用计数模板以适应复杂实验室环境，计数误差控制在10%以内。
“迅数”是采用最多的菌落仪品牌。
食品行业适用标准：GBT 4789.2-2008 食品卫生微生物学检验菌落总数测定需要进行菌落计数的行业有：疾病控制，卫生检验中心检验检疫局质量技术监督局大学：食品科学与工程微生物发酵免疫医学检验公共卫生科学院，研究机构环境监测部门自来水公司制药企业：生物制药，化学制药，抗生素企业化妆品企业食品企业：饮料、饮用水、乳品、保健食品、糕点糖果、膨化食品、食品添加剂、粮食及其制品、酒类、调味品、微生态、保健食品消毒剂、消毒器械：消毒剂；消毒器械；生物指示剂；化学指示剂；灭菌包装物一次性使用医疗用品：输注类；导管类；诊断、治疗器具类；透析器具类；麻醉器具类；手术巾、敷料类；护理器材类卫生用品：卫生巾；尿布；皮肤、粘膜卫生用品；隐形眼睛护理用品；其他的一次性卫生用品●大肠菌群计数传统的大肠菌群最可能数(MPN)法必须经过：初发酵实验，复发酵证实试验。
食品中菌落总数和大肠菌群的检测
(——培养基由营养琼脂改为平板计数琼脂；
7
——菌落总数计算公式进行了修改；
8
——增加了第二法“菌落总数PetrifilmTM测试片法”；)-2008
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GB/T 4789.2-2010
3.设备和材料
3.1 恒温培养箱：36℃±1℃ 30℃±1℃。 3.2 冰箱：2℃～5℃。 3.3 恒温水浴箱：46℃±1℃。 3.4 天平：感量0.1g。 3.5 均质器 3.6 振荡器 3.7 无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及其吸头。 3.8 无菌锥形瓶：容量为250mL、500mL。 3.9 无菌培养皿：直径为90mm。 3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 3.11 放大镜或/和菌落计数器或PetrifilmTM自动判读仪。 3.12 无菌刀、剪子、镊子等。
另取1mL无菌吸管或微量移液器吸头，按上述操作顺序，做10倍递增样品匀液，如此每递增稀释一次，即换用1次1mL灭菌吸管或吸头。
根据对样品污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），分别在做10倍递增稀释的同时，吸取1.0 mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时分别取1mL稀释液加入两个无菌平皿作空白对照。
4 培养基和试剂
4.1 平板计数琼脂培养基 (Plate count agar PCA)，见附录A中A.1。 pH ＝7.0±0.2 4.2 磷酸盐缓冲稀释液，见附录A中A.2。 pH ＝7.2 4.3 无菌生理盐水,见附录A中A.3 ：称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。 (4.4 1 mol/L 氢氧化钠（NaOH）：称取40g氢氧化钠溶于1000mL水中。 4.5 1 mol/L 盐酸（HCl）：移取浓盐酸90mL，用蒸馏水稀释至1000mL 4.6 PetrifilmTM菌落总数测试片（aerobic count plate）和压板。) 4.7 75%乙醇。
落菌总数实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握落菌总数测定的原理和方法。
2. 学习使用平板计数法进行落菌总数测定。
3. 了解实验过程中可能遇到的问题及解决方法。
二、实验原理落菌总数是指在一定条件下，每克或每毫升样品中生长的细菌总数。
它是衡量食品、饮用水等样品卫生质量的重要指标。
本实验采用平板计数法，通过在培养基上培养样品中的细菌，统计菌落数量，从而计算出样品的落菌总数。
三、实验材料1. 样品：实验样品为市售某品牌鲜牛奶。
2. 仪器：电子天平、无菌培养皿、无菌移液管、酒精灯、恒温培养箱等。
3. 试剂：营养琼脂培养基、无菌生理盐水、75%酒精、无菌水等。
四、实验方法1. 样品处理：取5g鲜牛奶，加入95ml无菌生理盐水中，搅拌均匀，制成1:20的样品稀释液。
2. 稀释：取1ml样品稀释液，加入9ml无菌生理盐水中，制成1:100的样品稀释液。
3. 接种：用无菌移液管取1ml 1:100的样品稀释液，加入无菌培养皿中，均匀涂布。
4. 培养基制备：按照营养琼脂培养基的配方，准确称取各组分，加入蒸馏水，煮沸溶解，调节pH值至7.2-7.4，分装于无菌培养皿中，待凝固后，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
5. 计数：观察培养皿中菌落生长情况，选取菌落数在30-300之间的培养皿进行计数。
6. 计算落菌总数：根据公式：落菌总数（CFU/g）=（C1×C2）/m×1000，其中C1为稀释倍数，C2为菌落数，m为样品重量。
五、实验结果1. 样品稀释倍数：1:1002. 菌落数：100个3. 样品重量：5g4. 落菌总数：10CFU/g六、实验讨论1. 本实验中，样品的落菌总数为10CFU/g，符合国家标准要求。
2. 在实验过程中，应注意无菌操作，避免样品污染。
3. 实验过程中，应严格控制培养条件，确保实验结果的准确性。
4. 平板计数法是一种常用的落菌总数测定方法，但其结果受多种因素影响，如培养基成分、培养时间、温度等。
泡菜水中菌落总数的测定实验
食品中菌落总数的测定实验1 实验目的了解稀释平板计数的原理2 实验原理平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后，其中的微生物充分分散为单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低。
为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位(colony-forming units，cfu)而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。
3 实验材料3.1 仪器恒温培养箱：（36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。
）均质器或振荡器无菌吸管：1 ml（0.01 ml 刻度）、10 ml（0.1 ml 刻度）或微量移液器及吸头无菌锥形瓶：容量250 ml、500 ml、无菌培养皿：直径90 mm菌落计数器2.样品1）平板计数琼脂（plate count agar，PCA）培养基：蛋白胨5.0 g 、酵母浸膏2.5 g 、葡萄糖1.0 g 、琼脂15.0 g、蒸馏水1 000 ml、pH 7.0±0.2。
2）无菌生理盐水：氯化钠（NaCl）5.875g 蒸馏水(纯净水) 500ml 称取5.875ｇNaCl溶于500ml蒸馏水中，121 ℃高压灭菌20min。
3.器材100ml无菌水、9ml无菌水、无菌平皿、天平、称样瓶、记号笔、酒精灯等。
4 实验步骤1.样品的稀释：25 g(ml)样品+225 ml 稀释液，均质。
10倍系列稀释。
每递增稀释一次，换用1 次1 ml 无菌吸管或吸头。
（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面）选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液，各取1 ml分别加入无菌培养皿内。
吸取 1 ml 空白稀释液作空白对照。
食品微生物检验技术GB4789.2-2010 菌落总数测定
(4) 按 (3) 操作程序，制备 10 倍系列稀释样品匀 液。每递增稀释一次，换用 1 次 1 mL 无菌吸管 或吸头。 (5) 根据对样品污染状况的估计，选择 2 个～3 个 适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液）， 在进行 10 倍递增稀释时，吸取 1 mL 样品匀液 于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时， 分别吸 取 1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内 作空白对照。 (6) 及时将 15 mL～20 mL 冷却至 46 ℃的平板计 数琼脂培养基（可放置于 46 ℃±1 ℃恒温水浴 箱中 保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
2. 培养 (1) 待琼脂凝固后，将平板翻转，36 ℃±1 ℃培养 48 h±2 h。水产品 30 ℃±1 ℃培养 72 h±3 h。 (2) 如果样品中可能含有在琼脂培养基表 面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂 表面覆盖一薄层 琼脂培养基（约 4 mL）， 凝固后翻转平板，按 36 ℃±1 ℃培养 48 h±2 h（水产品 30 ℃±1 ℃培养 72 h±3 h）条件进行培养。
GB 4789.2-2010 食品安全国家标 准 食品微生物学检验 菌落总数测定
一、设备和材料 二、培养基和试剂 三、检验程序 四、操作步骤 五、结果与报告
一、设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和 材料如下： (1) 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。 (2) 冰箱：2 ℃～5 ℃。 (3) 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。 (4) 天平：感量为 0.1 g。 (5) 均质器。 (6) 振荡器。 (7) 无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。 (8) 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL。 (9) 无菌培养皿：直径 90 mm。 (10) pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸。 (11) 放大镜或/和菌落计数器。
酱油中菌落总数的测定
酱油中菌落总数的测定二、试验原理酱油样品经过稀释后，采纳混菌法与平板计数琼脂培养基混匀制备平板，待琼脂凝固后，将平板置于(36±1)℃培养(48±2)h 后，计数。
三、仪器与试材 1．仪器与器材超净工作台、生化培养箱、天平、振荡器、pH计、放大镜、培养皿(90mm)、吸管、锥形瓶、试管等。
2．培养基与试剂平板计数琼脂(PCA)培养基、无菌生理盐水。
3．试验材料 3～4种不同品牌与包装的酱油，各100mL。
四、试验步骤 1．检验流程 2．样品稀释 (1)以无菌操作分离取25mL混合匀称的酱油样品，放于盛有225mL无菌生理盐水的500mL锥形瓶内(瓶内预置适量的玻璃珠)，充分振荡，制成1：10的稀释液。
(2)用1mL无菌吸管吸取1：10的样品稀释液1mL，沿试管壁缓缓注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，振摇昆匀，制成1：100的稀释液。
(3)另外，取lmL无菌吸管，按相同操作，制成1：1000的稀释液。
(4)如此10倍递增稀释至1：10000的样品稀释液。
每递增稀释一次必需换一支无菌吸管。
3．制平板 (1)按照GB2717--2003的规定，酱油中菌落总数应小于等于30000cfu／mL，所以挑选10～10“三个稀释度的样品稀释液lmL于无菌平皿中(可以在制作稀释液的同时举行)，每个稀释度做2个平皿。
(2)将冷却至45～50℃的平板计数琼脂培养基(约15mL)注入上述含有稀释液的平皿中，转动平皿，混合匀称后，制成平板。
同时，将平板计数琼脂培养基倾人含lmL无菌生理盐水的两个无菌平I【lL中，作空白对比。
4．培养待琼脂凝固后，翻转平板，置(36±1)℃培养(48±2)h。
5．计数 (1)平皿菌落计数时，挺直以肉眼观看，须要时用放大镜检查，以防遗漏。
菌落计数以菌落形成单位(colonyformingunits，cfu)表示。
(2)选取菌落数在30~300cfu之间的平板计数菌落总数。
菌落总数国标
菌落总数国标简介菌落总数是一种常见的微生物分析方法，用于评价食品、水源、空气等样品中微生物的污染情况。
通过统计菌落总数，可以了解样品中存在的细菌、真菌和其他微生物的数量，进而进行适当的卫生措施和监测。
在国际上，每个国家或地区都有自己的菌落总数标准。
本文主要介绍中国的菌落总数国标，即GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验检验菌落总数》。
GB 4789.2-2016GB 4789.2-2016是中国食品安全领域的一个国家标准，于2016年开始实施。
它规定了食品检验中菌落总数的检测方法及其评估标准。
适用范围GB 4789.2-2016适用于各类食品中菌落总数的检测，包括肉、禽、水产品、豆制品、果蔬制品等。
该标准主要用于食品生产企业的自检和卫生监督机构的抽检。
检测方法GB 4789.2-2016规定了两种菌落总数的检测方法，即总数平板法和膜过滤法。
以下是这两种方法的简要步骤：总数平板法1.准备含有适宜营养成分的琼脂平板。
2.将样品适当稀释，然后分别在琼脂平板上均匀涂布。
3.将涂布好的平板培养在适当的温度下，通常为30°C，时间为48小时。
4.统计菌落总数，并计算出菌落形成单位（CFU）。
膜过滤法1.准备含有适宜营养成分的琼脂膜。
2.将样品通过膜过滤器，将样品中的微生物过滤到琼脂膜上。
3.将琼脂膜放置在含有适宜营养成分的平板上，然后培养在适当的温度下，通常为30°C，时间为48小时。
4.统计菌落总数，并计算出菌落形成单位（CFU）。
评估标准GB 4789.2-2016根据菌落总数的大小，将食品分为三个级别：一级、二级和三级。
以下是各级别的评价标准：•一级标准：CFU/g或CFU/mL小于100。
•二级标准：CFU/g或CFU/mL介于100到100,000之间。
•三级标准：CFU/g或CFU/mL大于100,000。
根据菌落总数的级别，可以判断食品的卫生状况和微生物污染的程度。
培训课件：菌落总数的测定GB4789.2-2010-.
状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数； 若片状菌落不到平板的一半，而另一半平板菌落分 布又很均匀，则可以计算分布均匀的半个平板上的 菌落数，再乘以2，以代表一个平板的菌落数。
计数规则3： 当平板上出现菌落间无明显界限的链状生长时，
菌落计数 报告
四、 试验步骤
1 样品的稀释： 1.1固体和半固体样品：称取25g （mL）样品至盛有 225 mL磷酸盐缓冲稀释液或生理盐水的无菌均质杯内， 8000r/min～10000 r/min均质1min～2min，或放入盛有 225 mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1min～2min，制成1:10的样品匀液。
计数规则 1
选取菌落数在30cfu～300cfu之间、无蔓延菌落 生长的平板计数菌落总数。
低于30cfu的平板记录具体菌落数； 大于300cfu的可记录为多不可计； 每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
计数规则2： 有较大片状菌落生长的平板，不宜采用，应以无片
a 在GB4789.2-2010的培养条件下所得结果，只 包括一群在平板计数琼脂上生长的嗜中温需氧 或兼性厌氧菌的菌落总数。
b 按国家标准方法规定，即在需氧情况下， 36
±1℃培养48±2 h，能在平板计数琼脂上生长发育 的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、有特殊营 养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能 满足其生理需求，故难以繁殖生长。
1.3、用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL，沿
管壁徐徐注入含有9 mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓 冲液的试管内（注意吸管或吸头尖端不要触及稀 释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹 打使之混合均匀，制成1:100的稀释液。
ISO4833-2003菌落总数的检测方法
ISO与美国FDA的不同处食品微生物检验方法（FDA与ISO对比）内容提要：l 菌落总数检测l 大肠菌群及大肠杆菌检测l 金黄色葡萄球菌检测l 沙门氏菌检测l 单核细胞增生李斯特氏菌检测菌落总数测定——菌落总数的概念l 菌落总数是指在被检样品的单位重量（g）、容积（ml）或表面积（cm2）内，所含能于某种固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的菌落的总数。
菌落总数测定——卫生学意义l 判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。
l 及时反映食品加工过程是否符合卫生要求，为被检食品卫生学评价提供依据。
l 通常认为，食品中细菌数量越多，则可考虑致病菌污染的可能性越大，菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
FDA BAM 菌落总数测定流程检样xg/mL+9xml稀释液（磷酸盐缓冲液）适当十倍稀释样品选择2~3个连续适宜稀释度各取1mL分别加入灭菌平皿内（每个稀释度做两个平行）每皿内加入适量平板计数琼脂（PCA）35 ℃ 48 ± 2h菌落计数FDA BAM 菌落计数方法l 选择25~250CFU之间的菌落进行计数，计算公式如下：N=∑C/（1*n1+0.1*n2）*dl 所有平板的菌落数都不足25CFU，报告EAPC/ml（g）为＜25*1/d。
EAPC：estimated aerobic plate countl 所有平板的菌落数都超过250CFU，但不足100/cm2 ，报告EAPC/ml（g）为最接近250CFU的平板菌落数的估计值，乘以相应的稀释度。
l 所有平板的菌落数都超过100/cm2 ，计算平板的面积（直径为90mm的平板面积为65cm2），估计最高稀释度每cm2的菌落数，乘以相应平板面积作为该稀释度的菌落计数结果，报告EAPC/ml（g）为＞65*100* 1/d。
l 无法计数的平板报告LA（Laboratory Accident）。
l 最终结果保留前两位有效数字。
按照4舍6入，5是奇进偶不进。
食品微生物学检验 菌落总数测定4789
食品安全国家标准食品微生物学检验 菌落总数测定１ 范围本标准规定了食品中菌落总数（Ａｅｒｏｂｉｃｐｌａｔｅｃｏｕｎｔ）的测定方法。
本标准适用于食品中菌落总数的测定。
２ 术语和定义２．１ 菌落总数 犪犲狉狅犫犻犮狆犾犪狋犲犮狅狌狀狋食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每ｇ（ｍＬ）检样中形成的微生物菌落总数。
３ 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：ａ） 恒温培养箱：３６℃±１℃，３０℃±１℃。
ｂ） 冰箱：２℃～５℃。
ｃ） 恒温装置：４８℃±２℃。
ｄ） 天平：感量为０．１ｇ。
ｅ） 均质器。
ｆ） 振荡器。
ｇ） 无菌吸管：１ｍＬ（具０．０１ｍＬ刻度）、１０ｍＬ（具０．１ｍＬ刻度）或微量移液器及吸头。
ｈ） 无菌锥形瓶：容量２５０ｍＬ、５００ｍＬ。
ｉ）无菌培养皿：直径９０ｍｍ。
ｊ） ｐＨ计或ｐＨ比色管或精密ｐＨ试纸。
ｋ） 放大镜或／和菌落计数器。
４ 培养基和试剂４．１ 平板计数琼脂培养基：见Ａ．１。
４．２ 菌落总数测试片：应符合ＧＢ４７８９．２８中平板计数琼脂培养基质量控制要求，且主要营养成分与平板计数琼脂培养基配方一致。
４．３ 无菌磷酸盐缓冲液：见Ａ．２。
４．４ 无菌生理盐水：见Ａ．３。
５ 检验程序菌落总数的检验程序见图１。
图１ 菌落总数的检验程序６ 操作步骤６．１ 样品的稀释６．１．１ 固体和半固体样品：称取２５ｇ样品置于盛有２２５ｍＬ无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌均质杯内，８０００ｒ／ｍｉｎ～１００００ｒ／ｍｉｎ均质１ｍｉｎ～２ｍｉｎ，或放入盛有２２５ｍＬ稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打１ｍｉｎ～２ｍｉｎ，制成１∶１０的样品匀液。
６．１．２ 液体样品：以无菌吸管吸取２５ｍＬ样品置于盛有２２５ｍＬ无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，或放入盛有２２５ｍＬ稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打１ｍｉｎ～２ｍｉｎ，制成１∶１０的样品匀液。
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食品中菌落总数的测定方法
食品中菌落总数的测定
一、实验目的
( 1) 学习与掌握测定食品中菌落总数的基本方法
( 2) 学会菌落总数的报告方式
二、实验材料
1、仪器与设备 : 恒温培养箱、托盘天平、电炉、吸管、三角瓶、平皿、试管、试管架、酒精灯、灭菌刀或剪 刀、 75%
酒精棉球、玻璃蜡笔。
2、 培养基与试剂：75%乙醇、0、85%生理盐水、琼脂培养基：胰蛋白胨5、0g、酵母浸膏2、5g、葡萄糖1
、
0g、琼脂 15、0g、蒸馏水 1000mL、pH 7、0±0、2
3、 检样 ： 利乐包装鲜牛奶 250ml
三、 实验方法与步骤
1
、检验程序
菌落总数检验程序
：
检样T做成几个适当倍数的稀释液T选择 2-3个适宜稀释度各以 1ml之量分别入灭菌平皿内T每皿内加入
46C 15-20ml营养琼脂T置36± 1 C恒温箱内培养(48 ± 2)h取出 T 菌落数T报告 2
、检样稀释及培养
(1) 以无菌操作，将检样包装打开，用吸管取25ml鲜牛奶，放于含有225ml灭菌生理盐水的 500ml
灭菌玻璃三 角瓶内
(瓶内预先置适当数量的玻璃珠 ), 经充分振摇做成 1：10
的均匀稀释液。
(2) 用 1ml 灭菌吸管吸取 1：10 稀释液 1ml， 沿管壁徐徐注入含有 9ml 灭菌生理盐水的试管内 (
注意吸管尖端不 要
触及管内稀释液 ， 下同)， 振摇试管混合均匀 ， 做成 1：100 的稀释液。
(3) 另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml
灭菌吸 管。
(4) 根据食品卫生检验标准要求与检样的菌落数量 ， 选择 3 个连续适宜稀释度即 10、 10－1、 10－2， 分别在作 10
倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移 1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。
⑸ 稀释液移入平皿后，应及时将凉至 46 C营养琼脂培养基注入平皿 15ml~20mL,
并转动平皿使与稀释检样混
合均匀， 同时将营养琼脂培养基倾入加有 1ml 稀释液 (不含样品 )的灭菌平皿内作空白对照。
(6)等琼脂凝固后，翻转平板，置36± 1C恒温箱内培养(48 ± 2)h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数 ，
即得
1mL
样品所含菌落总数。
四、 检样中细菌菌落总数的计算与报告
1
、菌落计算方法
(1)
菌落计数方法
做平板菌落计数时 ， 可用肉眼观查 ， 必要时用放大镜检查 ， 以防遗漏。在记下各平板的菌落数后 ， 求出同稀释
度 的各平板平均菌落总数。
(2)
菌落计数的报告
① 平板菌落数的选择
选取菌落数在 30〜300 CFU之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板 ，应采用两个
平板平均数
，
② 稀释度的选择
应选择平均菌落数在 30〜 300 CFU 之间的稀释度 ， 乘以稀释倍数报告之。
若有两个稀释度 ，其生长的菌落数均在 30〜300之间， 按以下公式计算
：
食品中菌落总数的测定方法
N =
样品中菌落数
工C =含适宜范围 CFU的平板菌落数之与
ni =第一稀释度（低稀释度）
平板个数
n2 =第二稀释度（高稀释度）平板个数 d =稀释因子（第一稀释度）_
若所有稀释度的平均菌落数均大于 300 CFU,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之
，
若所有稀释度的平均菌落数均小于 30 CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告
若所有稀释度及样品原液均无菌落生长 ，则以小于I乘以最低稀释倍数报告之，若所有稀释度的平均菌落数均
不在30〜300 CFU之间，其中一部分大于 300 CFU或小于30 CFU时，则以最接近30 CFU或300 CFU的平均菌 落数乘
以稀释倍数报告之。
③ 菌落数的报告
菌落数小于100 CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。
菌落数大于或等于 100 CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后 ，取前2位数字，后面用0代替位
数;也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。
若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。
若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。
称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。
3
、实验结果与记录
「落匚
10 10= 10_ 2
报告数
1
2
稀释液对照皿
空白皿
判定所检测样品菌落总数就是否符合国家标准
Phibro is required to respond to the FDA that Jianmin:
Is Prepared to add the following tests; light absorbing impurities, related substances and
particle size to their OTC COA;
Will provide a COA as evide nee that these tests have bee n con ducted and added to the COA;
Will update VMF 6023 to in elude the data and report to support validati on or verificati on
of the methods used to an alyze the tests cited above; and
Will provide us with a report or a statement to confirm that they have performed appropriate
validation or
verification of the methods
、
如有问题 ,请随时沟通。
食品中菌落总数的测定方法