007空气中菌落总数测定方法
国标菌落总数检测方法
国标菌落总数检测方法一、引言菌落总数是指在一定条件下，通过菌落计数方法，测定在样品中存在的微生物总数。
它是评价食品、水质和环境卫生状况的重要指标之一。
国标菌落总数检测方法是指根据国家标准规定的菌落总数检测方法进行微生物总数的测定。
本文将详细介绍国标菌落总数检测方法的原理、步骤及其应用领域。
二、原理国标菌落总数检测方法基于菌落形成的原理，通过将待测样品进行适当稀释，并在寒暖培养条件下培养一定时间，然后对形成的菌落进行计数。
根据国家标准，通常采用平板计数法和膜过滤法两种方法进行菌落总数的检测。
平板计数法是将适量的待测样品均匀涂布在含有适宜培养基的平板上，然后在适当温度下进行培养，最后对菌落进行计数。
该方法适用于微生物菌落较多的样品，如食品和水样等。
膜过滤法是将待测样品通过特定的膜过滤器，过滤到含有适宜培养基的培养皿中，然后在适当温度下进行培养，最后对膜上形成的菌落进行计数。
该方法适用于微生物菌落较少的样品，如空气和药品等。
三、步骤1. 样品制备：将待测样品按照国家标准要求进行适当稀释，以确保在培养过程中菌落呈现合适的数量。
2. 平板计数法：将稀释好的样品用无菌棉签均匀涂布在含有适宜培养基的平板上，然后倒扣放置在恰当温度下进行培养。
3. 膜过滤法：将稀释好的样品通过无菌膜过滤器过滤到含有适宜培养基的培养皿中，然后倒扣放置在恰当温度下进行培养。
4. 培养：根据国家标准要求，将培养皿或平板在适当温度下培养一定时间，以促使菌落的生长和形成。
5. 计数：在培养时间结束后，使用显微镜或菌落计数器对菌落进行计数，然后根据国家标准计算出菌落总数。
四、应用领域国标菌落总数检测方法广泛应用于食品、水质和环境卫生等领域。
在食品行业中，菌落总数的检测可以评估食品的卫生状况和微生物污染程度，有助于保障食品的安全性；在水质监测中，菌落总数的检测可以评估水质的卫生状况和微生物污染程度，有助于确保饮用水的安全性；在环境卫生监测中，菌落总数的检测可以评估环境卫生状况和微生物污染程度，有助于维护公共卫生和环境健康。
菌落总数的测定方法
2、菌落总数的快速测定方法
1. 适用范围用于各类食品及饮用水中菌落总数的测 定。
2. 方法原理 将培养基、凝胶和酶显色剂等加载在试纸片，经加样、
培养后，细菌菌落在纸片上显现出红色菌斑，通过技 数报告结果。 3. 操作方法 （1）无菌称取样品25g（或25mL）放入含有225mL无菌水 的玻璃瓶（均质袋）内，经充分振摇（均质）做成 1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL， 注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，用1mL灭菌吸管 反复吸吹制成1:100的稀释液、。以此类推，做出 1:1000等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌 吸管。
（二）仪器设备
培养基箱，恒温水浴锅，天平，三角瓶，灭菌培 养皿，灭菌皿试管，玻璃珠，均质机，灭菌刀，镊 子;酒精灯。
（三）培养基和试剂
1.营养琼脂培养基：按GB 4789.28中4.7规定。 2.磷酸盐缓冲稀释液：按GB 4789.28中3.22规定。 3.生理盐水。 4.75%乙醇。
(四)检验程序
一﹑菌落总数的概念
• 1.菌落总数
菌落：指细菌在固体培养基上生长繁 殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是 由数以万计相同的细菌集合而成。
菌落总数：指一定数量或面积的食品 样品，在一定条件下进行细菌培养，使每 一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落， 然后进行菌落计数所得的菌落数量。通常 以lg或1ml或lcm2样品中所含的菌落数量来 表示。
• (3) 另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀 释液,如此每递增稀释一次即换用1支1mL灭菌吸管。
• (4) 根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选 择2～3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即 以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每 个稀释度做两个平皿。
空气中细菌含量的检测
空气中细菌含量的检测
空气中细菌含量的检测有两种方法即：空气采样器法和平板暴露法。
（一）空气采样器法
用空气微生物采样器，在鸡舍内四周和中央采样，采样1或2分钟，然后将琼脂平板置于37℃温箱中培养24小时，观察并计数平板的菌落，求出5个采样点的平均菌落数。
计算公式为：
（二）平板暴露法
将普通琼脂平板或血液琼脂平板，水平地放在鸡舍内四角和中央各1个，将平皿盖打开，扣放在平皿底的底边，根据鸡舍内的污染程度，暴露10~20分钟，然后盖好平皿，将平皿放在37℃温箱中培养24小时，观察并计数平板上的菌落数，求出5个平板中的平均菌落数，据测试，5分钟内在100平方厘米面积上降落的细菌数，相当于10升空气中所含的细菌数，因此，可按下列公式计算：
A=平板面积（平方厘米）
T=平板暴露于空气中的时间（分）
N=平均菌落数
（三）鸡舍空气中细菌允许量
一般认为：在有鸡的情况下，鸡舍每立方米空气中微生物（细菌和霉菌）不应高于25~30万个，笼养雏鸡每立方米空气中微生物总数不应超过13万个，其中大肠杆菌群不应超过1900个。
否则，可引起临床大肠杆菌病，必须采取预防措施。
空气中细菌含量的测定
实验室空气中细菌含量的测定
一．实验目的
测定实验室空气中沉降菌的含量，了解实验室的洁净程度。
二．实验原理
空气中漂浮着各种微生物，将盛有无菌培养液的平民放于监测点上，暴露5min，空气中的细菌便会落在培养基上，然后在37摄氏度的恒温培养箱中培养24h，计数每个培养皿表面的菌落数，由于一个菌落是由一个细菌繁殖而来，菌落总数便可认为是细菌总数。
三．实验材料
琼脂，锥形瓶，无菌水，电热炉，培养皿，卧室灭菌锅，烘箱，37℃生化培养箱，超净工作台
四．实验方法
称取2.35g琼脂，加热溶解到100ml无菌水，存放于锥形瓶中，用封口膜和牛皮纸包装好锥形瓶。
准备五个培养皿，用牛皮纸包好，和锥形瓶一起放进卧室灭菌锅中灭菌，温度121℃，时间30min。
于无菌工作台上，每个培养皿倒进10ml培养基，待冷却凝固。
分别置于室内同一平面五个不同的点（四角加中央），打开皿盖，暴露15min,盖好平皿盖，37℃恒温箱中培养24h，
五．计算方法
按照奥梅梁斯基氏计算法，面积为100平方厘米的培养基表面5min沉降下来的细菌数相当于10L空气中所含菌落数来计算
细菌数（m³）=N*100/A*5/T*100/10=50000N/AT
(A:平板面积cm2、T平板暴露时间min、N：平板菌落数)。
菌落总数的检测方法
菌落总数的检测方法一、菌落总数介绍：菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。
当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。
菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。
按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。
二、检验方法菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。
基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。
国内外菌落总数测定方法基本一致，从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同，只是在某些具体要求方面稍有差别，如有的国家在样品稀释和倾注培养进，对吸管内液体的流速，稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。
检验方法参见：GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定》SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品菌落计数》三、说明（一）样品的处理和稀释：1．操作方法：以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。
菌落总数检测方法
菌落总数检测方法菌落总数检测是一种常见的微生物检测方法，它可以用于食品、饮用水、医药制品等领域的微生物质量控制。
菌落总数检测方法的准确性和可靠性对产品的质量和安全至关重要。
因此，了解菌落总数检测方法的原理和操作流程对于相关行业的从业人员至关重要。
菌落总数检测方法的原理是通过将待检样品进行适当稀释后，均匀涂布在含有适当培养基的琼脂平板上，然后在一定的温度下培养一定的时间，最后根据菌落的数量来计算样品中微生物的数量。
这种方法的优点是简单易行，不需要复杂的设备和技术，适用于大批量样品的检测。
菌落总数检测方法的操作流程主要包括样品的制备、琼脂平板的制备、涂布和培养、计数和结果分析等步骤。
首先，对待检样品进行适当的稀释，以确保在琼脂平板上形成可数的菌落。
然后，制备含有适当培养基的琼脂平板，并进行涂布和培养。
在培养结束后，对菌落进行计数，并根据计数结果进行样品的微生物数量统计和分析。
在进行菌落总数检测时，需要注意一些关键的操作技巧和注意事项。
首先，样品的制备和处理要严格按照相关标准和规定进行，以避免外界环境的污染。
其次，在琼脂平板的制备、涂布和培养过程中，需要严格控制温度、湿度和时间等因素，以确保菌落的正常生长和形成。
最后，在菌落计数和结果分析时，需要仔细进行，确保结果的准确性和可靠性。
除了传统的琼脂平板法外，菌落总数检测方法还有其他一些新的技术和方法。
比如，膜过滤法、光学密度法、生物发光法等，这些方法在一定的情况下可以替代传统的琼脂平板法，具有更快速、更灵敏的特点。
但无论采用何种方法，都需要严格按照相关标准和规定进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。
总之，菌落总数检测方法是一种常见且重要的微生物检测方法，它对于食品、饮用水、医药制品等领域的微生物质量控制起着至关重要的作用。
了解菌落总数检测方法的原理和操作流程，掌握关键的操作技巧和注意事项，对于相关行业的从业人员具有重要的意义。
希望本文所述内容能够对菌落总数检测方法有所了解，为相关行业的微生物质量控制工作提供一些帮助。
公共场所空气中细菌总数检验方法
公共场所空气中细菌总数检验方法1 定义撞击法（impacting method）是采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使用空气通过狭颖或小孔而产生高整气流，使用悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经37°、48h培养后，计算出每m3空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。
自然沉降法（natural sinking method）是指直径9cm的营养琼脂平板在采样点暴露15分钟，经37°、48h培养后计数生长的细菌菌落数的采样测定方法。
2 仪器和设备2.1高压蒸汽灭菌器。
2.2干热灭菌器。
2.3恒温培养箱。
2.4冰箱。
2.5平皿（直径9cm）。
2.6制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等。
2.7撞击式空气微生物采样器。
3培养基3.1营养琼脂培养基3.1.1成分；蛋白胨牛肉浸膏10g氯化钠3g琼脂15～20g蒸馏水1000ml3.1.2制法将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，过滤分装，121℃20min高压灭菌。
用自然沉降法测定时，倾注约15ml于灭菌平皿内，制成营养琼脂平板。
撞击法参照采样器使用说明制备营养琼脂平板。
4操作步骤4.1撞击法4.1.1选择有代表性的位置设置采样点。
将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。
4.1.2样品采完后，将带核辐射营养琼脂平板置36±1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每m3空气中的菌落数，以CFU/m3报告结果。
4.1.3选择撞击式空气微生物采样器的基本要求。
（a）对空气中细菌捕获率达95%。
（b）操作简单，携带方便，性能稳定，便于消毒。
4.2自然沉降法4.2.1设置采样点时，应根据现场的大小，选择有代表性的位置作为空气细菌检测的采样点。
通常设置5个采样点，即室内墙角对角线交点为1采样点，该交点与四墙角连线的中点为另外4个采样点。
采样高度为1.2～1.5m。
空气中菌落总数测定方法
2.1生化培养箱37±1℃
2.2恒温水浴锅46±1℃
2.3培养皿
3、试剂
3.1 PCA培养基（121℃，灭菌15分钟）
4、检验程序
4.1把灭菌好的PCA平板记数琼脂倒在一次性平皿中，冷却后盖上盖子。
4.2将平皿放在托盘中带进要检区域。根据房间面积的大小，选点:
4.2.1小于50㎡的房间应设（1～3）个点；50㎡～100㎡设（3～5）个点；100㎡以上至少设5个点。在对角线上或梅花式均匀分布。
6菌落计数的报告：
菌落总数= 50000 N/AT
N-细钟
一直从事休闲食品功能保健食品生产配方工艺研究工作近16年熟悉国内外食品法律法规对新产品开发有较扎实功底熟悉sciso9001gmphaccpbrc等质量管理体系
***食品有限公司
文件编号
FW-QC-QI-007
版号
A1
文件名称：空气中菌落总数的测定
页次
1/1
生效日期
2009.04.01
1、范围
适用于平和坊食品有限公司室内空气中菌落总数的测定。
4.2.2采样点应避开通风口，离墙壁距离应大于0.5m。
4.2.3采样点的高度：距离地面0.5m～1.5m之间。
4.3打开平皿盖子放置10分钟，盖上盖子。
4.4将平皿放于37±1℃培养箱培养24±2小时。
5菌落计数方法：
可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出各平板平均菌落总数。
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2009.04.01
1、范围
适用于平和坊食品有限公司室内空气中菌落总数的测定。
2、设备与材料
2.ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ生化培养箱37±1℃
2.2恒温水浴锅46±1℃
2.3培养皿
3、试剂
3.1 PCA培养基（121℃，灭菌15分钟）
N-细菌个数,个
A-平皿的面积=63.6cm2，
T-放置时间=10分钟
4、检验程序
4.1把灭菌好的PCA平板记数琼脂倒在一次性平皿中，冷却后盖上盖子。
4.2将平皿放在托盘中带进要检区域。根据房间面积的大小，选点:
4.2.1小于50㎡的房间应设（1～3）个点；50㎡～100㎡设（3～5）个点；100㎡以上至少设5个点。在对角线上或梅花式均匀分布。
4.2.2采样点应避开通风口，离墙壁距离应大于0.5m。
4.2.3采样点的高度：距离地面0.5m～1.5m之间。
4.3打开平皿盖子放置10分钟，盖上盖子。
4.4将平皿放于37±1℃培养箱培养24±2小时。
5菌落计数方法：
可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出各平板平均菌落总数。
6菌落计数的报告：
菌落总数=50000N/AT