2019版高考生物一轮总复习模拟创新题：专题26 克隆技术 含解析
高考生物专题复习-专题二十六细胞工程与胚胎工程-考点二动物细胞工程-高考真题练习(附答案)
专题二十六细胞工程与胚胎工程考点二动物细胞工程1.(2022山东,15,2分)如图所示,将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子,在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体,简称双抗。
下列说法错误的是()A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞答案D双抗是由两种单抗解偶联后重新偶联制成的,具有双特异性,可同时与2种抗原发生特异性结合,筛选时也需用相应的2种抗原进行检验,A、C正确;抗体可与抗原特异性结合,据此可利用双抗将蛋白类药物运送至靶细胞,B正确;同时注射2种抗原可使B 细胞分化形成2种浆细胞,进而产生2种抗体,通常,1种浆细胞只能产生1种抗体,D错误。
2.(2022湖北,7,2分)某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究,结果发现其培养的原代神经元生长缓慢,其原因不可能的是()A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封C.血清经过高温处理后加入培养基D.所使用的培养基呈弱酸性答案A来自小鼠胚胎的脑组织神经元细胞分化程度低,生长较快;将培养瓶密封会导致神经元细胞缺氧而生长缓慢;高温会使血清含有的促进细胞生长和增殖所需要的营养物质失活,而使神经元细胞生长缓慢;人的细胞外液pH近中性,弱酸性的环境会导致神经元细胞生长缓慢,故A项不是导致培养的原代神经元生长缓慢的原因。
3.(2022湖北,15,2分)纳米氧化亚铜是一种纳米材料。
为了探究纳米氧化亚铜对贴壁生长细胞活性的影响,研究者在培养基中添加一定量的纳米氧化亚铜,8小时后观察到细胞萎缩,体积变小,细胞核变大,细胞膜内侧出现纳米氧化亚铜富集现象,培养瓶中大量贴壁细胞脱落,出现细胞悬浮。
根据该实验现象,能得出的正确结论是()A.纳米氧化亚铜改变了细胞的贴壁生长习性B.纳米氧化亚铜对该细胞生长有抑制作用C.纳米氧化亚铜能通过自由扩散进入细胞D.纳米氧化亚铜不影响细胞的新陈代谢答案A细胞贴壁生长会使细胞由于不断增殖产生接触抑制,而纳米氧化亚铜会使贴壁细胞脱落,出现细胞悬浮,因此纳米氧化亚铜改变了细胞的贴壁生长习性,A正确;根据题意可知纳米氧化亚铜促进了细胞的衰老,B错误;由此题干信息“细胞膜内侧出现纳米氧化亚铜富集现象”,说明纳米氧化亚铜能进入细胞,但不能由此推断是通过自由扩散进入细胞的,C错误;纳米氧化亚铜会促进细胞衰老,即影响了细胞的新陈代谢,D错误。
最新-高考生物真题与模拟类编：专题(22)克隆技术
专题22 克隆技术考点六十五植物细胞工程高考试题1.(2013年重庆理综,T5,6分,★★☆)某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。
下列有关叙述,错误的是( )A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞C.出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控D.生根时,培养基通常应含α萘乙酸等生长素类调节剂点睛:本题考查植物组织培养相关知识,涉及外植体的消毒、植物体细胞杂交、细胞分化及植物生长调节剂对组织培养的影响等内容,意在考查考生的理解能力以及运用所学的知识分析问题和解决问题的能力。
解析:消毒主要是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害,A项正确;植物细胞融合是指经纤维素酶和果胶酶处理后得到的原生质体的融合,带有细胞壁的愈伤组织细胞不能诱导融合形成染色体加倍的细胞,B项错误;出芽和生根都是细胞再分化的结果,其实质是基因的选择性表达,C项正确;α萘乙酸为生长素类似物,可诱导愈伤组织生根,D项正确。
答案:B2.(2011年江苏单科,T14,2分,★☆☆)关于现代生物技术应用的叙述,错误的是( )A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C.植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育点睛:本题考查了现代生物技术的应用。
考查学生的综合应用能力。
解析:体细胞杂交技术应该属于植物细胞工程,有两步:先是植物细胞融合,再是植物组织培养。
作为动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体,但不能用于克隆动物,故B错误。
答案:B3.(2013年新课标全国理综Ⅱ,T40,15分,★★☆)甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。
某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
2019版高考生物一轮总复习模拟创新题：专题24 生物技术在其他方面的应用 含解析
全国新课标区模拟精选题：根据高考命题大数据分析，重点关注基础题1，2，能力题4。
模拟精选题1.(2018·河南南阳期末)生物技术实践与人们生产和生活密切相关，请回答下列有关问题：(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌污染，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________灭菌和________灭菌。
(2)在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决方法是________________________。
(3)进行兰花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、外植体消毒、________、培养、移栽、栽培。
花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是________。
培养过程中若控制离体组织细胞能分裂但不分化，常用的两种激素及使用顺序为________________________________________________________________。
(4)橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为该方法会导致原料________和有效成分________等问题。
答案(1)干热高压蒸汽(2)用果胶酶处理(3)接种醋酸洋红法先使用生长素，后使用细胞分裂素(4)焦糊水解2.(2018·山东淄博一模)请分析回答下列生物技术实践问题：(1)用胡萝卜进行植物组织培养时，胡萝卜根经清洗、消毒、切块处理后选取带有形成层的小块作为组织培养的________，接种到MS培养基上培养。
该培养基除必要营养成分外，还需添加________。
(2)用新鲜胡萝卜提取胡萝卜素时，在干燥处理过程中控制温度和时间的原因是________________________。
胡萝卜素萃取剂宜选用不溶于________的有机溶剂，萃取过程的加热采用________法。
(3)鉴定胡萝卜素粗品的常用方法是________，鉴定过程需与________进行比对。
高考生物总复习 32 克隆技术 新人教版
x3-2 克隆技术一、选择题1．下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体的叙述，不正确的是 ( )A．给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞B．B细胞与骨髓瘤细胞混合培养，是为了获得融合细胞C．杂交瘤细胞进行体外培养，是为了获得单克隆抗体D．杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎解析杂交瘤细胞的培养有体内培养和体外培养，其目的都是为获得单克隆抗体，不是获得产生单克隆抗体的胚胎。
答案 D2．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养解析动物细胞在培养过程中有接触抑制现象，细胞在培养瓶中会贴壁生长，形成一层细胞，相互接触后停止生长。
克隆培养法培养过程中，仅有极少数细胞的基因型会发生改变。
二倍体细胞的传代培养一般传至10代后就不易传下去了。
恶性细胞系的细胞具有不死性，可以进行传代培养。
答案 D3．下列过程中不涉及植物组织培养技术的是 ( )A．由马铃薯的茎尖培育出无病毒植株B．白菜和甘蓝经体细胞杂交过程培育出杂种植株C．转入抗卡那霉素基因的烟草细胞培育出转基因植株D．二倍体水稻的种子经秋水仙素处理后培育出四倍体植株解析用二倍体水稻的种子培育出四倍体植株属于个体发育的过程，不涉及植物组织培养。
答案 D4．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不相符的是( )A．植物组织培养和单克隆抗体——细胞的全能性B．纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁——酶的专一性C．原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖解析植物组织培养的原理是细胞的全能性，单克隆抗体制备的原理是细胞膜的流动性；植物细胞壁的成分包括纤维素和果胶，根据酶的专一性可利用相关酶分解细胞壁；原生质体融合和动物细胞融合的原理是细胞膜具有一定流动性；紫草细胞培养和动物细胞培养的原理都是细胞的增殖。
2019高考总复习优化设计1轮生物人教课时规范练38 克隆技术(附答案)
课时规范练38克隆技术1.下图为植株人工繁殖的四种方式示意图。
请回答下列问题。
(1)图中单倍体植株通常的获取方式是。
若图中单倍体细胞含2个染色体组,A有4个染色体组,则①过程所用化学试剂的作用是。
(2)若想在③过程中获得突变体,进而培育成新品种植株,应用物理诱变或化学诱变的方法处理。
若要获得水稻的“人工种子”,则应选用图中的结构,该结构与正常受精卵形成的有类似的结构和发育过程。
(3)若D为胡萝卜—羊角芹,④过程最常用的诱导剂是,融合依据的原理是。
在融合细胞的培养过程中,培养基的成分通常包括琼脂、无机营养成分、有机营养成分和等。
2.细胞融合技术有着广泛应用。
下图为细胞融合的简略过程,请据图回答相关问题。
(1)若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr的两个玉米品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。
科学家分别将它们的花粉除去细胞壁,然后诱导其融合,再把这些融合细胞进行培养,培育出了玉米新品种。
①这两个品种的花粉可用化学诱导剂诱导融合,共可产生种基因型的融合细胞(仅考虑两两融合),这些融合细胞经过脱分化形成,再经培养可以得到种不同于亲本表现型的玉米新品种。
②若想培育出基因型为yyRR的玉米植株,也可直接用yyRr植株的花粉培养,再经过处理并筛选获得,这种方法叫做。
(2)若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞,请据图回答下列问题。
①在“番茄—马铃薯”的培育过程中,运用了植物细胞工程中的技术。
②a、b细胞融合之前,要用到的酶是,用酶处理后得到。
(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞,请据图回答下列问题。
为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点,经特殊处理,在促细胞融合因子的作用下,使两种细胞发生融合,形成图中的d细胞,d细胞的特点是。
与普通血清抗体相比较,由d细胞产生的抗体具有等特点。
3.为研究小鼠皮肤愈合机理,现将小鼠皮肤进行分离培养,过程如下图所示,请回答下列有关问题。
(1)在对小鼠皮肤组织进行培养过程中,过程甲中要对实验小鼠进行处理,过程乙必须用处理,使之分散成单个细胞。
2019年高考生物二轮复习基础保分专题十二选修③——基因工程与克隆技术
基础保分专题十二选修③ 基因工程与克隆技术［课前循图忆知］丘用「桂驅因动、梢将的培肯 一匚皿同I .程脚物、堆凶沁疔考点一 基因工程与蛋白质工程［做真题明方向］1. （2018全国卷I ）回答下列问题：（1） _____________________________________________________ 博耶（H.Boyer ）和科恩（S.Cohen ）将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠 杆菌细胞中进行了表达。
该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了 _____________________________________________ （答出两点即可）。
（2） 体外重组的质粒可通过 __ Ca 2+参与的方法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA 通常需与 ______________________ 组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的 噬菌体DNA 导入宿主细胞。
在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞 的是。
（3）真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。
为防止蛋白质被降解，在实验中应选用 ___________________________ 的大肠杆菌作为受体细胞，在蛋白 质纯化的过程中应添加 ______________ 的抑制剂。
解析：（1）将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌中，该过程利用的技 术是转基因技术。
该研究除了证明质粒可作为载体外， 还证明了体外重组的质粒可以进入受体细胞，真核生物的基因可在原核细胞中表达等。
（2）重组质粒导入大肠杆菌细胞可采用Ca 2+参与的转化方法；体外重组噬菌体要通过将体外重组的噬菌体DNA 和外壳蛋白（或噬菌体蛋白）进行组装获得；因为噬菌体是专门寄生在细菌中的病毒，所以宿主细胞选用细菌。
⑶为防止蛋白质被降解，在实验中应选用蛋白酶缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞;我休一n 的堆闵的抚取一 J 些因衷站嶽体的榊SE- 4 将目的朕闵导入燹偉细胞一 *冃的斯闵的检测与鬆定一操杵程序基因工程込-蚩白和程可产杆燃界财一的資白慣厠胱产物的工厂化生产一1匹*细站殖 #込获符新如胞，不形痕牛体 整*动物册科核的全能性 空*就得克陲动前牛博竝*纽胞脛的流动性述生物理法、比学法、生物祛 首要歼X绘小M n.JW 抗is 所寄舸检L 已免疫的［1沛巴细胞和骨说擒圳曲_ 融合成的垦交楣甸胞JK 杯灼H 辿，产生专-抗侔的朵愛捕细胞动输细盹驻合单見隆蒂休的制各攜■柞工具在蛋白质纯化过程中，为防止目的蛋白质被降解，需要添加蛋白酶的抑制剂。
【创新设计】2019版生物二轮专题复习(江苏版)应用题组集训7-3-考点2 克隆技术
考点二克隆技术再悟高考1．判断正误(1)组织培养、细胞杂交、显微注射、核移植均为培育草莓脱毒苗所采用的技术(2018·广东，2改编) (×)提示只有组织培养为培育脱毒苗采用的技术。
(2)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性(2018·江苏，22C)(×)提示判断是否体现细胞全能性的依据是能否发育成新个体。
(3)去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理(2008·全国Ⅰ，5B)(√)提示前者用纤维素酶和果胶酶处理；后者用胰蛋白酶处理。
2．(2018·重庆卷，2)如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。
下列有关叙述正确的是( )。
A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群解析①是获得的已经免疫的B淋巴细胞，A项错误；胰蛋白酶使得组织块分散为单个细胞，B项错误；③同时具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性，C项错误；④是经筛选后获得的能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D项正确。
答案 D3．(2018·福建卷，33)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。
科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。
其技术流程如图：(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。
可以根据Rag2基因的________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。
用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。
为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________________酶的酶切位点。
2019届高考生物第一轮复习训练
选修3 第3讲 一、选择题。 1．(2018年广东改编)下图为培育转基因山羊生产人β—酪蛋白的流程图。下列叙述正确的是( )
A．过程①所用的人β—酪蛋白基因可用PCR技术在DNA聚合酶及DNA解旋酶的作用下获得 B．过程②可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植 C．过程③可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体 D．过程④人β—酪蛋白基因在细胞质中进行转录、翻译 【答案】C 【解析】过程①表示基因表达载体的构建，所用的人β－酪蛋白基因用PCR技术获得，不需要使用DNA解旋酶，A错误；过程②可选用桑椹期或囊胚期的胚胎进行移植，B错误；过程③可使用核移植技术或胚胎分割技术扩大转基因山羊群体，C正确；过程④是人β－酪蛋白基因在细胞核内进行转录、在细胞质内进行翻译，D错误。 2．(2018年重庆)生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述，错误的是( ) A．应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 B．当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆 C．反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性别设计婴儿 D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 【答案】D 【解析】在获得转基因植物时，要严格选择目的基因，避免产生对人类有害的毒性蛋白或过敏蛋白等物质，A正确；当今社会的普遍观点是禁止有关人类的生殖性克隆，但不反对治疗性克隆，B正确；反对设计试管婴儿的原因之一是有人将此技术用于设计婴儿性别，C正确；生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂及经过基因重组的致病菌等，干扰素不属于生物武器，D错误。 3．(2018年江苏)杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，相关叙述正确的是( )
A．为了获得更多的卵母细胞，需用雌激素对雌性杜泊羊进行处理 B．从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精 C．为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂 D．为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎 【答案】D 【解析】为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对雌羊进行 处理，A错误；从卵巢中采集的卵母细胞，都需要在体外经人工培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；代孕绵羊与供体绵羊为同种动物，所以代孕绵羊对移入子宫的同种外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，C错误；胚胎分割技术可提高胚胎的利用率，扩大繁殖规模，D正确。 4．(2018年江苏)下列关于转基因生物安全性的叙述中，错误的是( ) A．我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度 B．国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能的危害 C．开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提 D．目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上 【答案】B 【解析】本题考查了转基因生物安全性的有关知识。目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性两个方面；因对转基因生物的安全性还处于争论阶段，故不可能在转基因食品标签上警示性注明可能的危害；我国已对转基因食品和农产品强制实施了产品标识制度，以维护消费者对转基因产品的知情权和选择权；开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提。 二、非选择题 5．(2018年安徽)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其 技术路线如下图。 (1)由过程①获得的A为______________________。 (2)在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是______________________。受体应选用__________期卵母细胞。 (3)进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生________________________，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。 (4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为_______________________________________________。 【答案】(1)含目的基因的表达载体 (2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞 MⅡ (3)免疫排斥反应 (4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养 【解析】(1)分析图示可知，过程①构建的A为含目的基因的表达载体。(2)核移植以前，必须去掉受体卵母细胞的核，目的是保证核遗传物质全部来自含目的基因的成纤维细胞。受体应该选用处于MⅡ期的卵母细胞。(3)在进行胚胎移植时，受体即代孕母羊对移入子宫的外来胚胎基本上不会发生免疫排斥反应。(4)转基因体细胞克隆产生的重组细胞具有全能性，培养产生的含目的基因的成纤维细胞可进行传代培养，因此理论上可获得无限个转基因绵羊。 6．(2018年山东)治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下： (1)过程①采用的是细胞工程中的________________技术，过程②采用的是胚胎工程中的__________________________技术。 (2)体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2
(3年模拟精选)高考生物 第单元 专题 克隆技术(全国通用)
【大高考】（三年模拟精选）2016届高考生物第十一单元专题二十六克隆技术（全国通用）A组基础巩固1.(2015·江苏如皋模拟)植物组织培养技术被广泛应用于培育无病毒植株、育种及获得植物次生代谢产物等生产生活实际。
下图为番茄植株的培育过程。
分析回答：(1)①过程中使用了____________酶，获得植物细胞原生质体，此处使用的溶液浓度不宜过小，以防止细胞原生质体____________。
(2)铺平板类似于微生物接种，该过程必须在________旁进行操作。
平铺板中添加蔗糖的目的除了提供营养外，还有________作用(3)同一番茄植株不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因________(填“相同”、“不相同”或“不一定相同”)；图中属于再分化的过程是________(填序号)。
(4)多倍体番茄植株所结果实中维生素含量更高，若想培育多倍体番茄，可选择在图中的过程③中添加________进行处理，也可以选择在过程⑥中添加________进行处理。
解析(1)①过程中使用了纤维素酶和果胶酶，获得植物细胞原生质体，此处使用的溶液浓度不宜过小，以防止细胞原生质体吸水涨破。
(2)铺平板类似于微生物接种，该过程必须在酒精灯火焰旁进行操作。
平铺板中添加蔗糖的目的除了提供营养外，还有调节渗透压作用。
(3)同一番茄植株不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同，如花粉细胞和体细胞培养形成的植株愈伤组织的基因型不同。
图中属于再分化的过程是⑨⑩。
(4)多倍体番茄植株所结果实中维生素含量更高，若想培育多倍体番茄，可选择在图中的过程③中添加聚乙二醇进行处理，也可以选择在过程⑥中添加秋水仙素进行处理。
答案(1)纤维素酶和果胶(答“纤维素酶”也可) 吸水涨破(2)酒精灯火焰调节渗透压(3)不一定相同⑨⑩(答⑨或⑩也可)(4)聚乙二醇秋水仙素2.(2014·湖北七市联考)育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。
2019年高考生物二轮专题复习基础保分专题十二选修③——基因工程与克隆技术Word版含解析
基础保分专题十二选修③——基因工程与克隆技术[课前循图忆知]考点一基因工程与蛋白质工程[做真题·明方向]1．(2018·全国卷Ⅰ)回答下列问题：(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。
该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了_______________________________________________________________(答出两点即可)。
(2)体外重组的质粒可通过Ca2＋参与的________方法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA通常需与______________组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。
在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是________。
(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。
为防止蛋白质被降解，在实验中应选用______________的大肠杆菌作为受体细胞，在蛋白质纯化的过程中应添加________的抑制剂。
解析：(1)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌中，该过程利用的技术是转基因技术。
该研究除了证明质粒可作为载体外，还证明了体外重组的质粒可以进入受体细胞，真核生物的基因可在原核细胞中表达等。
(2)重组质粒导入大肠杆菌细胞可采用Ca2＋参与的转化方法；体外重组噬菌体要通过将体外重组的噬菌体DNA和外壳蛋白(或噬菌体蛋白)进行组装获得；因为噬菌体是专门寄生在细菌中的病毒，所以宿主细胞选用细菌。
(3)为防止蛋白质被降解，在实验中应选用蛋白酶缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞；在蛋白质纯化过程中，为防止目的蛋白质被降解，需要添加蛋白酶的抑制剂。
答案：(1)体外重组的质粒可以进入受体细胞；真核生物基因可在原核细胞中表达(2)转化外壳蛋白(或答噬菌体蛋白)细菌(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶2．(2018·全国卷Ⅱ节选)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。
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全国新课标区模拟精选题：根据高考命题大数据分析，重点关注基础题3，4，能力题3。
模拟精选题
1.(2018·河北邯郸模拟)回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增
殖，这种现象称为细胞的________。此时，瓶壁上形成的细胞是________层。要使贴壁的细
胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是________。
(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现________现象；但极少数细
胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞，该种细胞的黏
着性________，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量____。
(3)现用某种大分子染料对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不被染色，原因
是_______________________________________。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用分裂________期的细胞在显微镜下
进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在________条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中________
的活性降低，细胞________速率降低。
答案 (1)相互接触 接触抑制 单(或一) 胰蛋白酶 (2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减
少 (3)活细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内(或死细胞的细胞膜丧
失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色) (4)中 (5)冷冻(或超低温、液氮)
酶 新陈代谢
2.(2018·山东临沂三模)我国科学家建立了小鼠哺乳动物单倍体胚胎干细胞系，为基因操作找到
了新的动物模型。下图为获得转基因动物模型及动物细胞培养的部分过程示意图。请据图回
答：
(1)目前常用的获取目的基因的方法有____________、利用PCR技术扩增和用化学方法人工合
成。
(2)在①过程中，科学家采用两种方法来获得小鼠的孤雄单倍体胚胎，一是将受精后获得的合
子的________去除；二是利用________技术将成熟精子的头部植入去核卵母细胞中。
(3)[④]________技术常用的诱导因素有____________________。动物细胞工程中常通过此技
术获得杂交瘤细胞，以制备特异性强的________。
(4)若切取部分早期胚胎进行细胞培养，需要先剪碎切块，然后用________处理使细胞分散，
制成B瓶中的细胞悬液。为保证无菌、无毒的环境，B、C、D瓶中的培养基需要添加一定量
的________，还需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的作用主要是________。
答案 (1)从基因文库中获取 (2)雌原核 细胞核移植
(3)动物细胞融合 灭活的病毒、聚乙二醇、电激 单克隆抗体 (4)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)
抗生素 维持培养液的pH
3.(2018·河南十所名校测试)科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植
株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃
薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示：
(1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有________________________________。
(2)过程①常用的酶是____________，细胞融合完成的标志是____________。
(3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂________诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显
微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到________种不同的原生质体，当观察到
________________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。
(4)过程③和过程④依次为____________，过程④中的培养基常添加的植物激素是
____________。
(5)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有
丝分裂后期含________条染色体。若杂种细胞培育成的“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则
此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________植株。
解析 (1)植物体细胞杂交包括原生质体融合和培育杂种植株两大步骤，两者的原理分别是细
胞膜的流动性和植物细胞的全能性。(2)去除细胞壁常用的酶是纤维素酶和果胶酶，细胞融合
完成的标志是形成新的细胞壁。(3)化学促融剂是聚乙二醇，两两融合的原生质体有三种：番
茄—番茄、马铃薯—番茄、马铃薯—马铃薯，其中杂种细胞的细胞表面有两种颜色的荧光。
(4)过程③和过程④分别表示脱分化和再分化，诱导细胞分化所用的植物激素主要是生长素和