仪器分析-色谱分离度
仪器分析学习 第6章 色谱法导论-气相色谱
* 用时间表示 单位: s或cm
（1）保留时间 tR
试样从进样开始到柱后出现峰极大点
时所经历的时间(O´B)
（2）死时间
t 0
不被固定相吸附或溶解的气体（如：空
* 用体积表示 单位：mL
（1）保留体积 VR
从进样开始到出现峰极大所通过的
载气体积。 VR=tRF0 F0:柱出口处载气流速 mL/min
精选ppt
2）评价柱效的参数
理论塔板数(n)
n5.5(4tR )21(6tR)2
W 1/2
W
理论塔板高度（H） 有效理论塔板数
H L n
n有效 5.54 (W tR '1
)2
16 (tR ' )2 W
2
有效理论塔板高度
注意事项：
L H 有效 n有效
（1）n大，柱效高，分离好，前提是两组分分配系数K应有差
H A B /u C gu C luA B /u Cu
由此可知:流动相线速u一定时，仅在A、B、C较小时，塔板高 度H才能较小，柱效才较高；反之柱效较低，色谱 峰将展宽。
这一方程对选择色谱分离条件具有实际指导意义，它指出 了色谱柱填充的均匀程度，填料颗粒的大小，流动相的种 类及流速，固定相的液膜厚度等对柱效的影响。
3) 塔板之间无分子扩散（忽略试样 的纵相扩散）
4) 组分在所有塔板上的分配精选系ppt 数保 持常数
精馏塔示意图
精选ppt
2、塔板理论之推导结论
1) 当组分进入色谱柱后，在每块塔板上进行两相间的分配， 塔板数越多，组分在柱内两相间达到分配平衡的次数也越 多，柱效越高，分离就越好。
n L H
n50 流出曲线呈基本对称的峰形； 当 n 达 103－106 流出曲线趋近于正态分布；
仪器分析化学 第一章 色谱基本理论
n理5.54 (Yt1R /2)216 (tYR)2
n有效
5.54( tR' Y1/ 2
)2
16(tR' Y
)2
H有效
L n有效
（二） 塔板数和塔板高度
组分在固定相中的浓度 K 组分在流动相中的浓度
一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢； 试样一定时，K主要取决于固定相性质； 选择适宜的固定相可改善分离效果； 试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础； 某组分的K = 0时，即不被固定相保留，最先流出。 同一条件下，若两组分的K值相等，则色谱峰重合， 差别越大，色谱峰的距离越大
三. 速率理论-影响柱效的因素
（一）. 范.弟姆特（Van Deemter）方程式－ 气相色谱速率理论
H = A + B/u + C·u
H：理论塔板高度， u：载气的线速度(cm/s)
减小A、B、C三项可提高柱效； 存在着最佳流速； A、B、C三项各与哪些因素有关？
A─涡流扩散项（eddy diffusion）
（四） 分配比与保留时间的关系
tR = tM(1+k) tR’=ktM
（五） 分配比、分配系数与选择性因子的关系
a = t´R（2）/ t´R（1）= k2 /k1= K2 /K1
讨论：如何使A、B组分完全分离
浓
度
A
B
A
B
组分A、B在沿柱移动时不同位置的浓度轮廓
1.两组分的分配系数必须有差异 2.区域宽度的扩展速度应小于区域分离的速度 3.在保证快速分离的前提下，提供足够长的色谱柱
提高色谱仪检测分离度
提高色谱仪检测分离度摘要：本文旨在探讨如何提高色谱仪检测中的分离度。
我们指出了色谱仪检测中最关键的因素是参数优化，选择合适的检测参数和正确的操作流程。
此外，介绍了几种常用的液相色谱（LC）技术，包括普通液相色谱、衍生色谱和老式液相色谱，用于提高检测分离度。
最后，我们还分析了使用相同参数时，不同液相色谱技术在分离度方面的性能差异，为提高色谱仪检测分离度提供了有用的参考信息。
关键词：色谱仪；检测分离度；参数优化；液相色谱（LC）技术正文：目前，色谱仪技术已经广泛应用于各种测定分析和生物识别，尤其在有机合成中，色谱仪技术已取得重大进展。
然而，由于色谱仪技术本身的特性，检测分离度往往是影响检测准确率的重要因素。
因此，如何提高色谱仪检测中的分离度已成为行业关注的焦点。
首先，在提高色谱仪检测分离度方面，参数优化至关重要。
参数优化是调节色谱仪行为和性能的关键。
优化后的参数可以最大程度地提高色谱仪检测中的分离度，使检测结果更加准确可靠。
此外，还需要注意选择合适的检测参数，以及正确进行操作流程。
其次，介绍几种常用的液相色谱（LC）技术，可用于提高检测分离度。
其中，普通液相色谱（LC）技术是一种用于直接分离和测定混合物中各种成分的技术；衍生色谱技术则是一种将分子空间中化学反应产物呈现在检测系统中的技术；老式液相色谱（LC）技术则是一种将混合物中的相对分布以及分子结构交叉影响呈现在检测系统中的技术。
以上技术的采用，可以最大程度地提高检测分离度。
最后，我们还分析了使用相同参数时，不同液相色谱技术在分离度方面的性能差异，为提高色谱仪检测分离度提供了有用的参考信息。
综上所述，本文介绍了提高色谱仪检测分离度的各种方法，为行业提供了有用的参考信息。
其次，所用的物质也是影响检测分离度的重要因素。
选用的实验材料性质要求合理、特性明确，否则将对选择合适的色谱仪参数和正确的操作流程产生影响。
例如，在用于液相色谱（LC）技术分离检测有机物时，样品中不同成分的相对浓度差异需要考虑；在用于色谱仪检测生物样品时，不同生物样品的浓度等特性也需要考虑。
《仪器分析》——平面色谱法
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（三）高效薄层法（high performance thin layer chromatography；HPTLC）
• 在现代色谱理论指导下，以经典薄层色谱法为基 础发展起来的一种薄层色谱技术。
• 特点
分离效率高 分析速度快 检测灵敏度高等
高效薄层色谱法与经典薄层色谱法比较见表19-3
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二、吸附薄层色谱的吸附剂和展开剂
(2)吸附剂
不活泼
活泼
B’ B
非极性
A’ A
极性
(3)展开剂 C
C’
非极性
极性
(1)被分离物质
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三、薄层色谱操作方法
（一）薄层板的制板 选择 5cm 20cm 、10cm 20cm、 20cm 20cm
涂布 活化
不加粘合剂 加粘合剂如5~15%石膏 或 0.25~0.75%CMC-Na
涂布
晾干
0.2～0.3mm
光物质；在254nm波长紫外光下呈强烈黄绿色荧光 背景
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（二）展开剂
展开剂的选择
根据被分离物质的极性、吸附剂的活度和展开 剂的极性三者的相对关系进行选择
先用单一溶剂展开，然后根据分离效果进行调 整，经常使用混合展开剂
分离酸碱组分时，展开中加入少量酸、碱
常用混合展开剂 表19-3
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化合物极性、吸附剂活度和展开剂极性间的 关系
2. 相对比移值（Rr）
R =R /R =L /L
r
f(i)
f(s)
is
定性参数
纯物质加入试样中
同样条件下测定
或试样中某已知组分
i
s
Li Ls
s＋i
在一定程度上消除系统误差
仪器分析考点整理
仪器分析考点整理一、概念部分1、色谱法：借助于在两相间分配原理而使混合物中各组分分离的技术，称为色谱分离技术或色谱法2、基线：当色谱柱后没有组分进入检测器时，在实验操作条件下，反映检测器系统噪声随时间变化的线称为基线3、分配系数：在一定温度下组分在两相之间分配达到平衡时的浓度比称为分配系数K4、分离度：相邻两组分色谱峰保留值之差与两个组分色谱峰峰底宽度总和之半的比值：5、分配过程：物质在固定相和流动相（气相）之间发生的吸附、脱附和溶解、挥发的过程叫做分配过程。
6、相对保留时间：（α或r12）指某组分2的调整保留时间与另一组分1的调整保留时间之比：7、程序升温：程序升温色谱法，是指色谱柱的温度按照组分沸程设置的程序连续地随时间线性或非线性逐渐升高，使柱温与组分的沸点相互对应，以使低沸点组分和高沸点组分在色谱柱中都有适宜的保留、色谱峰分布均匀且峰形对称。
8、梯度洗脱：载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂，在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比，从而改变极性，通过载液极性的变化来改变被分离组分的分离因素，以提高分离效果。
9、顶空分析：顶空分析是取样品基质（液体和固体）上方的气相部分进行色谱分析。
10、共振吸收线：电子从基态跃迁至第一激发态所产生的吸收谱线。
11、化学干扰：指待测元素与其它组分之间的化学作用所引起的干扰效应，它主要影响待测元素的原子化效率。
12、谱线轮廓：原子群从基态跃迁至激发态所吸收的谱线并不是绝对单色的几何线，而是具有一定的宽度，称之为谱线轮廓。
13、基体效应：物理干扰是指试样在转移、蒸发和原子化过程中，由于试样任何物理性质的变化而引起的干扰效应。
14、锐线光源：能发射出谱线半宽度很窄的发射线的光源。
15、担体：是一种化学惰性、多孔性的固体颗粒，主要作用是提供一个大的惰性表面，以便涂上一层薄而均匀的液膜，构成固定相。
15、在气相色谱中，程序升温适于对宽沸程样品进行分析。
16、在使用气相色谱仪之前应检查仪器各部件是否处于正常状态，对气路部分来讲，首先应进行检漏。
仪器分析名词解释解答
1．色谱分离度：相邻两组分在色谱柱内分离效能的指标，定义为相邻两色谱峰保留值之差与两组分色谱峰缝底宽度之和一半的比值2．死体积:色谱柱在填充后柱内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪中管路和连接头间的空间以及检测器的空间总和。
3．程序升温:按一定的加热速率,温度做线性或非线性上升。
4．梯度洗脱：又称为梯度淋洗或程序洗脱。
在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。
5．极限扩散电流6．指示电极:电极电位与被测离子活度有关，又称待测离子电极或工作电极。
7．半波电位:扩散电流等于极限扩散电流一半时的汞电极的电位。
8．浓差极化：电解时，电极表面因浓度变化引起的极化现象.9．生色团 ;在饱和碳氢化合物中引入含ה键的不饱和基团,将这种化合物的最大吸收峰波长移至紫外及可见光范围内,这种基团叫生色团10．助色团：含有n电子的能使吸收峰波长向长波方向移动的杂原子基团.11．化学位移：由屏蔽作用引起的共振时磁感应强度的移动现象。
12．锐线光源:能发射出谱线半宽度很窄的发射线光源.13．基团频率：同一类型的化学基团，在红外光谱中的吸收频率总是出现在一个较窄的范围内,这种吸收谱带的频率称为基团频率14．贫然火焰:火焰温度低,助燃气量大于化学计算量，氧化性火焰．15．富燃火焰：燃气量大于化学计算量，还原性火焰。
16．基态:原子核外电子离核较近的处于最低能量状态17．激发态：当原子获得足够的能量后，就会使外层电子从低能级跃迁至高能级，这种状态称为激发态.18．激发电位：原子的外层电子由低能级激发到高能级时所需要的能量称为激发电位。
19．电离电位：使原子电离所需要的最低能量称为电离电位。
20．离子线: 离子外层电子跃迁时发射的谱线称为离子线。
21．共振线：由激发态向基态跃迁所发射的谱线。
共振线具有最小的激发电位，为该元素最强的谱线。
22．灵敏线、由较低级的激发态（第一激发态）直接跃迁至基态的谱线称为第一共振线，一般也是元素的最灵敏线。
一个新的色谱分离度公式
一个新的色谱分离度公式色谱分离是一种常见的分离和分析技术，它广泛应用于化学、生物化学和环境科学等领域。
色谱分离度公式是评价色谱柱分离能力的重要指标之一、本文将提出一个新的色谱分离度公式，并详细介绍其原理和应用。
色谱分离度是衡量色谱柱分离能力的指标，用于评估色谱柱在一定条件下分离不同组分的效果。
传统的色谱分离度公式常常基于理论模型，如Van Deemter公式、HETP公式等，这些公式在一定程度上可以解释色谱柱的分离能力。
然而，它们在实际应用中存在一些局限性。
我们提出的新的色谱分离度公式考虑了更多实际情况，以及分离过程中工艺和设备的影响。
该公式可以用于评估不同类型的色谱柱在不同分离条件下的分离效果，并提供更准确的预测结果。
我们的色谱分离度公式包括几个重要参数，如分离效率、分离因子和分离时间。
其中，分离效率是描述色谱柱分离性能的指标，通常通过峰宽进行定量。
分离因子是指待分离组分之间的相对迁移速率差异，它的大小决定了分离程度的高低。
分离时间是指在一定分离条件下，一些组分达到峰顶的时间。
我们的公式基于实验数据和统计分析，可以更好地解释色谱柱分离过程中不同因素的影响。
通过引入新的参数，我们可以更好地描述色谱柱的分离性能，并优化分离条件。
我们提出的色谱分离度公式有着广泛的应用前景。
首先，它可以用于评估不同类型的色谱柱，在新的分离条件下的分离性能。
其次，它可以用于优化分离条件，提高色谱柱的分离效果。
最后，该公式还可以应用于色谱柱的设计和制造，为色谱仪器的研发提供理论指导。
总之，我们提出的新的色谱分离度公式可以更好地解释和评估色谱柱的分离能力。
它考虑了更多实际因素的影响，可以提供更准确的分离效果预测。
我们相信，这个新的分离度公式将在色谱分离技术的应用和发展中发挥重要作用。
色谱柱分离度
色谱柱分离度
色谱柱分离度是指在色谱分离过程中，不同组分在色谱柱中的分离程度。
它通常通过分离因子或分离度来表示。
分离因子是指相邻两个峰的保留时间差异与它们的峰宽之和的比值，分离度则是指相邻两个峰的保留时间差异与峰宽之和的比值。
色谱柱分离度的大小取决于柱填料的特性、柱温以及流动相成分等因素。
高分离度可以有效地提高分析精度和检测灵敏度。
因此，在进行色谱分离时，需要优化操作条件，以获得较高的分离度。
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仪器分析-色谱分离度
色谱分离度是仪器分析中的一个重要指标，用于评价样品中各组分的
分离程度。
在色谱分析中，样品中的不同组分会在色谱柱中以不同的速度
进行分离，分离度能够反映样品中各组分之间的分离情况，有助于确定分
析结果的准确性和可靠性。
色谱分离度的计算方法有多种，常见的是以峰的宽度为基础进行计算。
峰的宽度可以通过色谱仪得到，一般以峰的半峰宽为计算标准。
半峰宽是
指峰的面积为峰高一半时的宽度，分离度=（两峰的距离-两峰的半峰宽度
的和）/两峰的距离。
以此计算的分离度值越大，说明样品中的各组分之
间的分离程度越好。
色谱分离度的大小与多个因素相关。
首先，色谱柱的选择对分离度有
很大的影响。
不同类型的色谱柱具有不同的分离性能，选择合适的色谱柱
可以提高分离度。
例如，如硅胶柱具有较好的分离能力，适用于生化分析
等领域；C18柱则适用于有机物的分离。
此外，色谱条件的选择也对分离
度有一定的影响，如流动相的选择、流速等都会影响样品的分离。
分析样品的性质也会影响色谱分离度。
样品中存在的杂质或者有色物
质可能会干扰样品分离，从而降低分离度。
在这种情况下，可以采取前处
理等方法，降低杂质的干扰，从而提高分离度。
此外，样品的浓度也可能会影响分离度。
当样品浓度过高时，可能会
导致峰的变形或者峰的重叠，从而降低分离度。
因此，在分析时需要合理
调整样品的浓度，以保证分离度的有效测量。
为了提高色谱分离度，可以采取一些措施。
例如，可以选择合适的色谱柱、优化色谱条件，合理选择样品的前处理方法等。
此外，还可以通过改进仪器设备，提高仪器的分离能力，以提高分离度。
总结起来，色谱分离度是仪器分析中的一个重要指标，用于评价样品中各组分的分离程度。
分离度的大小与色谱柱的选择、色谱条件、样品性质和浓度等因素密切相关。
提高分离度可以通过优化色谱柱和色谱条件、调整样品浓度等措施来实现。
色谱分离度的提高对于确保分析结果的准确性和可靠性具有重要意义。