脐带间充质干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化症的疗效分析
高中生物新教材选择性必修三同步讲义 第2章 第2节 第1课时 动物细胞培养
第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养[学习目标] 1.阐明动物细胞培养的条件和过程。
2.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
一、动物细胞培养的条件和过程1．动物细胞工程(1)常用技术：动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等。
(2)基础：动物细胞培养。
2．动物细胞培养(1)概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
(2)培养条件①营养a．合成培养基：将细胞所需的营养物质(糖类、氨基酸、无机盐、维生素等)按种类和所需量严格配制而成的培养基。
b．天然成分：使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，原因是血清中含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质。
c．培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。
②无菌、无毒的环境a．对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。
b．在无菌环境下进行操作。
c．培养液需定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
③温度、pH和渗透压a．温度：以36.5 ℃±0.5 ℃为宜。
b．pH：以pH为7.2～7.4为宜。
c．适宜的渗透压。
④气体环境a．组成：动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。
b．不同气体的作用O2：是细胞代谢所必需的。
CO2：维持培养液的pH。
c．培养容器：通常采用培养皿或松盖培养瓶。
d．培养仪器：含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱。
(3)培养过程①②过程(4)相关概念①细胞贴壁：悬液中分散的细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。
②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常停止分裂增殖的现象。
③原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。
④传代培养：分瓶后的细胞培养。
特别提醒区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。
用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细胞后进行培养，为原代培养；细胞培养过程中出现接触抑制，用胰蛋白酶处理使其从瓶壁上脱离下来分散成单个细胞，然后再用离心法收集，之后，将收集的细胞制成细胞悬浸，分瓶培养，为传代培养。
肌萎缩侧索硬化症护理教查房
肌萎缩侧索硬化症护理教查房1.肌萎缩侧索硬化的临床表现都有哪些？2.肌肉萎缩是否就是肌萎缩侧索硬化？不要盲目相信不科学的治疗3.肌萎缩侧索硬化是哪种病？4.肌萎缩侧索硬化肌萎缩侧索硬化5.肌萎缩侧索硬化的造成的原因都有哪些呢？肌萎缩侧索硬化的临床表现都有哪些？肌萎缩侧索硬化症在临床上是属于痿症疾病的一种，而痿症的发病特征是肢体的筋脉非常的弛缓，没有力气，不能随意的运动，因此肌萎缩侧索硬化症的发生给患者带来了极大的危害，那么下面就由专家来为大家具体介绍一下肌萎缩侧索硬化症在发病后的症状表现。
肌萎缩侧索硬化症有哪些表现1.肌萎缩侧索硬化症患者感觉上会出现障碍，而这种障碍往往是由于脊髓病损所引起的。
在临床上比较多见的症状是针刺感觉，麻木感觉，同时也有束带感觉，灼烧的感觉，寒冷的感觉，或者是疼痛性的感觉不正常。
疼痛的部位通常为后辈，小腿，上肢。
2.患者的情绪非常的不稳定，非常容易激动，或者是使劲哭使劲效。
记忆力也会随着下降，认识和智力也会下降，在病症晚期时会变成痴呆。
3.患者会出现运动上的障碍，例如痉挛性的瘫痪、小脑共济出现失调现象。
在发病初期患者会出现手变的很笨以及颤抖，脚下容易拌蒜而摔倒。
或者是说话困难，咬字不清楚，疼痛性强直性肌痉挛。
想必各位肌萎缩侧索硬化症患者通过上述的介绍已经对其发病后的症状表现有了相应的了解，希望对您在治疗肌萎缩侧索硬化症时能有所帮助。
专家提醒您，如发现自身患有肌萎缩侧索硬化症后，应及时到正规医院接受治疗。
肌肉萎缩是否就是肌萎缩侧索硬化？不要盲目相信不科学的治疗肌萎缩侧索硬化症的患者，一定要认真的了解医生的治疗工作，配合医生的治疗，同时要多吃一些富含维生素的食物，比如说新鲜的蔬菜，这些蔬菜能够补充患者身体所需的各种微量元素以及维生素，同时要多吃一些易于消化的蛋白质，补充身体所需的各种营养，那么肌萎缩侧索硬化症如何饮食好呢?肌萎缩侧索硬化症的患者要做好饮食的护理工作，平时应该多吃一些富含，维生素的食物，比如说新鲜的蔬菜以及水果，同时也可以适量饮用一些葡萄酒啤酒之类的饮品，不能够过量也不要暴饮暴食，同时也要注意，避免吃一些高糖饮食如果出现周期性的瘫痪，那么患者就会出现非常明显的并发症，通过饮食的方法来调理能够让患者的病情得到有效的控制。
骨髓间充质干细胞治疗再生障碍性贫血的观察与护理
ｌＯ 内， Ｅ Ｏｍ１ 马 送到病房后立即回 输给患者。 ） （ 有少数患者回输后出现寒战、 ２
态度， 此， 因 做好患者及家属的心理护理是很重要的。２管床医生及责任护 （ ） 士向患者及家属讲解疾病的基本常识、 护理要点 ， 交代治疗的大概费用及预
《 求医问药 ＞ 下半月千 Ｓ ｅ Ｕ ｅｋＭｅｉ ｌ ｎ ｓ Ｔ ｅ ｄｃ ｅ ０ ２ ｄｃ Ａ ｄＡ ｋ ｈ Ｍｅｉｎ ２ １ 年第 １ ａ ｉ Ｏ卷 第 ５ 期
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｝ 与治疗前比｛Ｐ＜０ 叭 交 ． 后， 在治疗过程中可能出现的不良反应及并发症 ， 要有一定的思想准备， 介绍 成功的病例， 增强患者及家属对新治疗的方法有售 ０ （） 。３保持良好的医患关 系， 对患者一视同仁， 视患者为 自己的朋友、 亲人去关心他们， 交谈时多了解 患者 的想法 ， 当患者 出现负性 隋绪时 ， 患者学 会倾诉 ， 会 自我调 节 ， 指导 学 必 要 时向有 关人士 求助 ， 避免意 外发生 。
力撞击鼻部， 指导患者用软毛牙 刷刷牙， 忌用牙签剔牙 ， 一定要用时牙签可用
牙线。 ｔ避免食用煎炸、 带刺或含骨头的食物、 带壳的坚果类食品以及质硬 的水果（ 如甘蔗） 进食时要细嚼慢咽， 等， 避免口 腔黏膜损伤； ） （ 高热患者禁 ５ 用酒精擦浴降温， 避免加重皮下组织出血， 保证充足睡眠 ， 避免剧烈运动 ， 避 免情绪激动、 剧烈咳嗽。 ２ 心理护理 （ 由 ． ５ １ 于病 ） 程长、 重、 病情 疗效不显著， 治疗费用 高等因素， Ａ Ａ 患者常出现焦虑、 抑郁、 甚至绝望等负陛 绪， 这些负性情绪会影响患者的治 疗及护理行为， 从而影响治疗的效果 ， 有部分患者对新的治疗方法挣 疑的
发热等不适， 给予其抗过敏药物， 没有出现不适者就不需抗过敏治疗。 ） Ｇ 回 输时要严格三查七对制度， 避免查错事故的发生 。 严格执行无菌操作， 预防 污染细胞 ， 免引起感染 等严重并发症 。４输Ｍｓ 避 （， Ｃ时要用输血器 ， 因输液 器
肌萎缩侧索硬化症SOD1基因突变特点_卢锡林
ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ， ＳＯＤ１） 基因突变有关［１］。之后 欧 洲 和 北 美 许 多 国 家 陆 续 发 现 ＳＯＤ１ 基 因 点 突 变 引起 ＦＡＬＳ。目前世界上已发现 １００ 多种点突变［２］， 约 ２５％的 ＦＡＬＳ 和少量 ＳＡＬＳ 是由 ＳＯＤ１ 基因突变 所致［３］。但是， 几乎所有的 ＳＯＤ１ 突变的报道均来自 欧美， 亚洲只有日本和韩 国 有 报 道 ， ［４，５］ 国 内 仅 报 道 一例 ＳＯＤ１ 突变［６］。为了了解中国 ＦＡＬＳ 和 ＳＡＬＳ 患 者 ＳＯＤ１ 基因点突变的情况， 我们应用聚合酶链反 应－ 单链构象多态性（ ＰＣＲ－ ＳＳＣＰ） 分析技术对 ４ 个 家系的 １５ 例 ＦＡＬＳ 患者， 以及 ５６ 例 ＳＡＬＳ 患者和 ４６ 例正常对照的 ＳＯＤ１ 基因第 １～５ 号外显子进行
图 １ ＳＯＤ１ 基 因 第 １－ ５ 号 外 显 子 ＰＣＲ 扩 增 Ｆｉｇ．１ ＰＣＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｒ ｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＳＯＤ１ ｇｅｎｅ ｏｆ ｅｘｏｎｓ １－ ５
Ｍ：１００ ｂｐ ＤＮＡ ｍａｒｋｅｒ； Ｌａｎｅ１，３，５，７，９： ｂｌａｎｋ ｃｏｎｔｒｏｌ； Ｌａｎｅ ２： ｅｘｏｎ １； Ｌａｎｅ ４： ｅｘｏｎ ２； Ｌａｎｅ： ６： ｅｘｏｎ３； Ｌａｎｅ ８： ｅｘｏｎ ４； Ｌａｎｅ １０： ｅｘｏｎ ５
和正常对照者有无不同。所有患者和正常对照均重 复三次单链构象多态性分析。
２结果
ＳＯＤ１ 基 因 第 １ 号 外 显 子 的 ＰＣＲ 扩 增 产 物 长 度 为 １５８ ｂｐ， ２ 号 外 显 子 的 ＰＣＲ 扩 增 产 物 长 度 为 ２０８ ｂｐ， ３ 号 外 显 子 的 ＰＣＲ 扩 增 产 物 长 度 为 ４９８ ｂｐ， ４ 号 外 显 子 的 ＰＣＲ 扩 增 产 物 长 度 为 ２３５ ｂｐ， ５ 号外显子的 ＰＣＲ 扩增产物长度为 ２２２ ｂｐ （ 图 １） 。 ＳＯＤ１ 基因的 ５ 个外显子， 经 ＳＳＣＰ 分析未发现异 常泳动（ 图 ２） 。
对人工气道患者护理的临床分析
３ 结 果
４ 结论
ＭＳＣ 主要来源于骨髓和脐带血 ， 在体外具有多向分化的潜能， 可促 进造血重建， 使造血功能得到有效、 稳定的恢复 ， 而且无明显不 良反应。 我们采用ＭＳ Ｃ治疗２ 例ＡＡ患者 ， 例患者 的外周血细胞计数 、 ０ 有６ 骨髓细 胞学检查和活检结果全部恢复正常， 随访６ ２个月， ４ 外周血细胞数均在 正常 范 围 内 ， 一 例 复发 ，例 缓解 ，例进 步 ，例 死亡 ， 余 患者 的病 情 无 ５ ４ ２ 其 均有不同程度的改善， 表现为输血间隔时间延长， 出血症状明显好转 ， 感 染减轻。 治疗过程 中， 除个别患者出现轻度发热外， 无心肝肺肾等重要脏 器功能的损伤 ， Ｃ ＭＳ 治疗ＡＡ是有效的。 目前ＭＳ Ｃ治疗的费用比较高 ， 疗 程较长 ， 不是每个患者都能承受得了。 与免疫抑制疗法及骨髓移植的费 用相 比较 ， ＭＳＣ 与免疫抑制疗法的费用相差不远 ， 比骨髓移植 的费用
３ 骨髓 活检 情况 基本治 愈的６ ． ２ 例重型患者 治疗前骨 髓活检提 示脂肪 组 织大量增 加 ， 细胞减少 ， 造血 治疗后 可见大量 造血细胞增 生 。
３６．
３ 不良反应 ￣ ； Ｃ时， ． ３ ＭＳ 可见少数患者出现寒战、 发热， 体温在３ ．＂ ７５ Ｃ～ ３ ＂之间， ９Ｃ 输注前口服扑尔敏或非那根可预防。 治疗过程前、 出院前及出 中， 院后一个 月 ， 行肝 肾及心 功能检 查 ， 见异常 。 进 未
干细胞治疗工作流程图
干细胞治疗工作流程脐带血临床采集流程干细胞是一种未分化的细胞，具有自我更新、分化、发育再生各种组织器官和人体的潜在功能。
脐带血广泛的应用前景备受关注，脐带血本属于废弃物，但是医学技术的进步使得它的价值得到了空前的提升。
1989年，法国的鲁克罗曼教授用HLA 相合的同胞脐带血干细胞进行移植，成功地治疗了一例遗传性疾病—可尼贫血症，之后短短的15年的时间，医学界利用脐带血干细胞已成功治愈和改善了多种疾病，包括:血液系统疾病、免疫系统疾病、神经和血管系统疾病、脑部疾病、肿瘤、糖尿病等。
现在在儿童的干细胞移植方面，由于可以存在1-2个HLA位点的不配型，免疫排斥反应小等原因，脐带血干细胞已成为治疗一些重大疾病的有效手段。
同时，干细胞的进一步开发，还可用于抗衰老、器官修复、美容等保健领域。
干细胞技术和临床应用的飞速发展，给人类的健康带来了新的希望和保障。
但是作为采集脐带血最主要的工作人员，我们所需要的操作是非常简单的，但是对于术中操作之外，我们还是会遇到以下的问题。
解决这些问题，我们才能放心的采集，存储，备用。
但是真正合法，安全，便捷的让脐带血的干细胞移植到有需要的患者体，需要按以下流程操作：脐带血采集条件：以初产妇、年龄在45岁以或35岁以经产妇，身体健康者为宜。
脐带血安全流程1、传染病检查：孕妇在产前要做好身体检查。
这些检查包括:肝功能是否正常，有无梅毒螺旋体，艾滋病病毒(HIV )、乙型肝炎病毒(HBV )、丙型肝炎病毒(HCV)等病原体检测。
如果其中有一样是阳性的话，就不要再进行采集了。
2、采集和储存的无菌观念：在自然分娩的情况下，一定要注意消毒。
被厌氧菌和需氧菌污染，检测为阳性时都不能储存和使用。
在脐血被采集后，应该尽快保存在2-8℃的恒温箱中，并远离辐射源，不要让X射线照到。
这样的脐带血经科学实验证实，放置24小时或在-23℃以下48小时，其中的干细胞的活性是没有明显影响的，但最长不应该超过72小时。
干细胞分类及细胞治疗
一、干细胞的定义、来源、分类1、干细胞的定义：干细胞是一种具有自我复制和分化潜能的细胞。
干细胞的特性：多呈圆形或椭圆形，体积小，胞浆少，核/质比大。
增殖速度较慢，自稳性好，利于自我复制和维持，缓慢增殖使干细胞有充足的时间发现和纠正复制错误，防止自我突变，以便稳步进入特定的分化程序。
一旦机体需要时，就可进入分化状态，此时增殖速度开场逐渐加快，以适应组织器官生长，发育和修复的需要。
2、干细胞的分类：干细胞根据分化潜能，可分为单能、多能和全能干细胞。
a、单能干细胞：指干细胞分裂产生的子细胞只能分化成单一功能类型的细胞。
如表皮干细胞只能分化产生角化表皮细胞，精原细胞只能分化产生精子。
b、多能干细胞：指可具有分化成一种器官的两种或多种组织潜能的干细胞。
如骨髓造血干细胞可分化产生定向干细胞，进一步分化后可产生红系、髓系、粒系等12种类型的血细胞，已用于治疗血液病。
c、全能干细胞：指具有无限分化潜能的干细胞。
如桑梓胚期、囊胚期胚胎干细胞可分为化成任何一种组织类型，可形成胚体、胚后期组织和器官，已用于转基因动物和克隆动物器官。
3、干细胞的来源包括成体干细胞和胚胎干细胞。
〔1〕成体干细胞〔Somatic Stem Cell〕：指自我复制和分化产生一种或一种以上子代组织未成熟细胞，可分布在成体组织或器官中，如血液及骨髓、皮肤、脂肪、神经等不同组织中，分别称造血干细胞、皮肤干细胞、脂肪干细胞、神经干细胞等。
在特定环境因素诱导下，通过增殖、分化可用于修复组织损伤和恢复缺损功能。
以下是分类解释：间充质干细胞(MSCs)：是属于中胚层的一类成体多能干细胞，主要存在于结缔组织和器官间质中，具有强大的增殖能力和多向分化潜能，在适宜的体内或体外环境下不仅可分化为造血细胞，还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。
造血干细胞〔hemopoietic stem cell〕：是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，是所有造血细胞和免疫细胞的起源，它不仅可以分化为红细胞、白细胞和血小板，还可跨系统分化为各种组织器官的细胞，具有自我更新、多向分化和归巢〔即定向迁移至造血组织器官〕潜能，因此属于一种多功能干细胞。
人脐带间充质干细胞治疗膝关节骨性关节炎的临床试验方案
《中国组织工程研究》Chinese Journal of Tissue Engineering Research·研究原著·杨子逸，男，1992年生，辽宁省抚顺市人，北京大学人民医院博士研究生在读，主要从事骨关节炎领域的研究。
通讯作者：林剑浩，北京大学人民医院关节病诊疗研究中心，北京市100044中图分类号:R394.2文献标识码:B稿件接受：2017-12-07Yang Zi-yi, Doctoral candidate, Arthritis Clinic & Research Center, Peking University People’s Hospital, Beijing 100044, ChinaCorresponding author:Lin Jian-hao, Arthritis Clinic & Research Center, Peking University People’s Hospital, Beijing 100044, China人脐带间充质干细胞治疗膝关节骨性关节炎的临床试验方案杨子逸，林剑浩，邢丹，王斌，侯云飞(北京大学人民医院关节病诊疗研究中心，北京市100044) DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0472ORCID: 0000-0002-6863-6393(杨子逸)文章快速阅读：文题释义：膝关节骨性关节炎：骨关节炎(osteoarthritis，OA)是一种严重危害人类健康的慢性骨关节疾病，其在关节病中数量最多，超过类风湿性关节炎、强直性脊柱炎等其他关节炎的总和。
在病理水平，骨关节炎表现为关节软骨的破坏及骨赘的异常增生，以致临床上出现关节疼痛、活动受限及关节畸形等表现。
同时，骨关节炎是导致青壮年劳动力下降的最主要病因，造成重大经济负担。
人脐带间充质干细胞：脐带来源间充质干细胞可以从脐带的多个区域获取，包括内皮下层、血管周围、华通氏胶(Wharton’s jelly)、脐带内层和整个脐带。
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临床研 究 ・
２２ ４第 卷 １ ０年 月 ９第２侧 索硬化症 的 疗效分析
李 敏 滑 蓉蓉 于爱 学 张 芳芳 代 广 辉 王晓东 程 洪斌 安 沂华 武装 警察 部 队总 医院 神经 干 细胞 移植 科 ． 京 １ ０ ３ 北 ００ ９
【 中图分 类 号】Ｒ ４ ． ７ ６４
【 文献标 识 码】 Ａ
【 文章 编 号】 ６ ３ ７ １ ２ １ ０ （ ） ０ ５ — ３ １ ７ — ２ ０（０ ２） ４ ｃ 一 ０ ２ ０
Ａｎ ｌ ｓｓ ｏ ｕ ａ ｉ ｅ ｅ ｅ ｔ ｆ ｕ ｂ ｌ ａ ｏ ｄ ｍ ｅ ｅ ｃ ｙ ａ ｔ ｍ ｅｌｔ ａ ｓ ａｙ ｉ ｆ ｃ ｒ ｔｖ ｆ ｃ ｓ ｏ ｍ ｉ ｃ ｌ ｃ ｒ ｓ ｎ ｈ ｍ ｌｓ ｅ ｃ ｌ ｒ ｎ — ｉ
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【 要】 摘 目的 通 过对 临床住 院接 受 干细 胞治 疗 的 ９ 例 肌 萎 缩侧 索 硬 化症 患 者分 析 ，了解 干细 胞 治 疗肌 萎缩 侧 索 硬 ９
化 （ Ｓ 的效 果 ， ＡＬ ） 同时 对接 受 治疗 的患 者进 行跟 踪 随访 ， 而进 一 步判 断干 细胞 治疗 Ａ Ｓ的长 期 疗 效 。 方 法 采 集 从 Ｌ
证 明干 细胞 移 植 可 以改 善 ＡＬ ｓ患 者 的运 动功 能 （ Ｐ＜００ １ ， 是疗 效 维 持 时 间较 短 ， 院半 年 后 只 有 ２ ％的患 者 ．０ ） 但 出 ５ 症 状较 治 疗前 改善 。 结论 干细 胞 治疗 Ａ Ｓ是 有效 的 、 全 的 。 Ｌ 安
［ 键词】 带间 充质 干细胞 ； 关 脐 肌萎 缩侧 索硬 化 症
ｌｎ ｅ ｕ ａｉｅｅｆｃｓｏ ｔｍ ｅｌ ｎ ｔ ｅｔｅ ｔ ｎ ｆＡＬ ｈ ｏ ｇ ｏｌｗｉｇ ｕ ｒ ａｅ ａｉｎ ｓｍｅ ｎ ｉ ． ｅ ｈ ｄ ｏ ｇｔｒ ｃ ｒｔｖ ｆ ｔ ｆｓｅ ｃ ｌ ｉ ｈ ｒａｍｅ ｔｏ ｓ ｔｒｕ ｈｆｌｏ ｎ ｐ ｔ ｔｄ ｐ ｔ ｔ ａ ｗｈ ｌ Ｍ ｔ ｏ ｓ ｍ ｅ ｓ ｅ ｅ ｅ
脐 带 间充 质 干细 胞 并进 行 培 养 、 流式 鉴 定 、 菌 鉴 定 ； 无 临床 收 集 Ａ Ｓ病 例 ， 有 的 Ａ ｓ诊 断 均 符合 Ｅ ｓｏ ａ 诊 断 Ｌ 所 Ｌ １ ｃｒ ｌ Ｅ ｉ
标 准 ； 诊 的 Ａ Ｓ患者 均 给予 ４次腰 椎 穿刺 脐带 间充 质 干细 胞移 植 ． 确 Ｌ 移植 术前 及术 后 由 同一康 复 师使 用 Ａ Ｓ Ｒ Ｌ Ｆ Ｓ评 分 、ｌｉ ｋ Ｐａｔ ｓ评分 以及本 课题 改 良的 Ｐａｔｋ ａ ｌ ａｓ评分 进 行评 价 ， ｉ 最后 对 所得 数 据进 行 统计 分 析 。 结 果 三种评 分 方 法 都
ＡＮ ｈ ａ Ｙｉ ｕ
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