骨组织脱钙方法的比较

成标本的惟一标识条码，大大提高了病理科在标本验收环节的准确性，因为用条码激光扫描的方法比 人眼核对要可靠得多。同样，山该系统自动生成和分配给每一例标本的条码式病理号也增加了标本大 体检查进一步核对时的方便性和可诱性。 病理科的重要性不言而喻，病理科的质景管理事关重大。通过ＩＳ０９０００与信息化系统的引进，给 病理科的管理带来了新生，为病理科的发展提供了保障，病理信息学与现代质晕管理学已经逐步与分 予生物学一起成为了当代病理学发展的重要支柱。
微小病理标本制作体会
李春梅（哈尔滨医科大学附属肿瘤医院病理科
１ ５ ００４ Ｏ）
随着临床检查技术的提高及各种检杏仪器的广泛应用，病理科收到的微小病仰。‘二冬明显增加，如 Ｂ超ＣＴ引导下的各种细针穿刺标本、各种窥镜的钳取标本等。据我２００８年小完全统汁，微小标本近３０００ 例，占总病检量大约五分之一。如此大晕的微小标本，增加了制作切片的难度。我的体会是： 一、严格遵守操作流程 微小标本一般在卜２ ｍｍ３左右，送检时均山洒精同定于小药瓶中，我们的操作流程是： 核对标本、登记、编ｕ．，对标本大小、块数进行描述；脱水透明、浸蜡 先倾倒掉原同定
２００９年全国病理学技术进展和应用研讨会
骨锯将其锯成厚度不超过０．５ｃｍ的骨片，剥去骨组织周嗣的软组织。经１０％中性福尔马林液同定１２ｈ～ ２４ｈ后，分别放入以下三种脱钙液中： １．１取１５ｍｌ盐酸，取氯化钠７．５ｍｌ加蒸馏水至ｌＯＯｍｌ，即为含盐酸脱钙液（Ｖｏｎ Ｅｂｎｅｒ氏液）。 １．２取ｌＯｍｌ甲酸，取ｌＯｍｌ甲醛加蒸馏水至１００Ｍ，即为甲酸一福尔马林液脱钙液（Ｇｏｏｄｉｎｇ和Ｓｔｅｗａｒｔ 氏液）。 １．３取ｌＯｍｌ硝酸，取ｌＯｍｌ甲醛加蒸馏水全ｌＯＯｍｌ，即为福尔马林一硝酸脱钙液（Ｃｌａｙｄｅｎ氏液） 方案（１）：将已固定１２ｈ～２４ｈ的骨片组织分别以１：３０的比例分别放入以上三种脱钙液中，置入 恒温箱中３７℃过夜，或５０℃６ｈ～８ｈ，或６０℃４ｈ～６ｈ加温并更换液体２次，最终使组织变软用针 轻刺可进入而不感到阻力为宜。脱钙后的组织经流水冲洗后，再行常规石蜡制片。 方案（２）：将已同定１２ｈ～２４ｈ的骨片组织以１：３０的比例放入福尔马林一硝酸液脱钙液中，放在 振荡器上振荡３ｈ’６ｈ并更换液体２次，最终使组织变软用针轻刺可进入而不感到阻力为宜。脱钙后的组 织经流水冲洗后，再行常规石蜡制片。 ２、结果 骨组织标本用盐酸脱钙液处理后切片质量欠佳，用甲酸脱钙溶液处理后的切片质量尚可，但需时间 较长，而用福尔马林一硝酸脱钙液经振荡技术处理后的骨组织切片效果明显优于前二者，切片完整，切 片厚度可达３ 鲜明。 ３、讨论 传统脱钙的方法是将标本取材后直接放入单纯的含酸脱钙液中进行脱钙，一般需３天～７天的较长 时间。强酸溶液在对组织脱钙的同时也会对组织酸化，骨组织在酸性｜悦钙液中浸入时间过长会影响后续 切片及染色的效果。而且未经同定的骨组织在酸性脱钙液中会受到更大的损伤，所以先将骨组织同定１２ 小时～２４小时后再放入脱钙液内，能较好的保持骨组织的细胞形态结构。采用以上三种脱钙液处理骨组 织，使溶液既能起到固定的作用又能达到脱钙的目的。其中甲醛可部分抑制酸的浸软作用，可适当保护 组织不受酸的损害，不妨碍后续的染色技术，能保证切片ＨＥ染色的质量。 骨组织过厚则需适肖延长脱钙时问，如脱钙不完全，组织切片时不仅损坏刀刃，而且切片偏厚，染 色时组织易出现脱片现象。镜下观察可见骨组织结构模糊，骨基质欠平整，大部分区域折叠卷曲，骨细 胞核皱缩而影响诊断。因此骨组织取材大小一定要控制在约ｌｃｍ
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较前■者好，是一种优质的脱钙剂。特别是骨组织在此脱钙液中利用振荡器的振动、摩擦、碰撞， 使脱钙剂与组织中的钙盐反府加快，产生周期性的缩张运动，使甲醛一硝酸溶液迅速穿透组织，从而 达到既快速同定又快速脱钙的目的。骨密度较高的如股骨１天～２天即能完成彻底脱钙。密度较低的如 病变的松质骨骨组织４小时～６小时即能完成彻底脱钙。显微镜下见骨组织结构完整，细胞核染色清晰， 染色埘比鲜明。我们通过多次反复实验摸索，认为福尔马林一硝酸脱钙液合并振荡技术处理骨组织标本， 是一种较高效实用的脱钙方法，具有很好的应用价值。其缺点是形成砸硝酸而使溶液颜色变黄即迅速影 响脱钙速度，且组织的黄染会妨碍随后的染色反应。？。ｊ组织中仍有钙质时，一定晕的钙离予会溶于脱钙 液中，狮阂的钙会干扰脱钙作用的完成。冈此每Ｕ应更换新鲜溶液，最好早晚各一次，这样既弃去钙盐， 又增加脱钙强度。脱钙的组织为了不影响ＨＥ染色效果，最好先流水沈去组织中经硝酸浸渍后过多的酸， 再进行组织脱水。骨组织不仅脱钙要彻底，脱水也应允分，方能制作出优质的骨组织切片。
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有活动都成为电了数据，
非常易于畲找、分析和进行数据的再次挖掘，４ｉ仅为病理诊断、科研和教
学提供了良好的Ｔ作平台，也显示出其在质晕管理的各个层次中所发挥的重要作用，使病理诊断能够 更加安全和有效。 ２、在病理科质景管理中的作用 （１）在病理科档案管理中的作用 病理信息系统目ｌｊｉ『已实现了切片的电了核埘归档，切片制作完
凡送检的微小标奉，患者均急切等待病理结果以待确定治疗方案。为了保质保鼍，及早发出报告， 我们将脱水机脱水改为人Ｔ操作，并且每一步骤均进行加温，增加了浸透性，缩短了脱水时间。而且切 片质鼍受到诊断医生的好评。当天上午１０：００前送到的标本，下午１４：００即可出片，诊断报告当天即 可发出。一般的微小标本第■天上午均可发出报告，大大方便了临床和患者。许多患者均看好我们出报 告快而来我院就诊。 三、加强责任心，力争精益求精 制作微小组织的病理切片，４ｉ仅需要严格操作流程，更主要是操作人员要有较强的Ｔ作责任心， 一丝小苟，精益求精。这样一张完美的微小病理组织切片就会展现在我们面前。
ห้องสมุดไป่ตู้
骨组织脱钙方法的比较
黄毅峰陈艳华陈莹（江汉大学病理诊断中心４
３００５ ６）
骨组织、骨肿瘤及钙化病：｝ｌ：里存有大晕的钙盐和无机盐，会妨碍使用常规方法制作切片，必须先 用酸将钙盐除去使组织软化后，才能进行常规制片。骨组织制片中脱钙是一重要环节，也是技术难 点。我们运用以下三种脱钙液合并加温及振荡技术对升ｉ同的骨组织进行脱钙制片，经比较发现该方法 在彳ｉ损伤骨组织细胞结构或纤维组织及影响染色的同时，缩短了脱钙时问，保证了切片质罩，为镜下 阅片观察提供了方便。现将方法介绍如下。 １、材料与方法 选取本病理诊断中心的ｌ临检标奉如股骨头、牙齿、病变骨、碎骨组织等。钊‘对小同的标本用骨钳或
自己的Ｔ作列表，凡是未完成的报告均在列表中，并可跟踪诊断的过程。科室根据质罱管理要求确定 每一级医师的权限，如报告的补充和更改，免疫组化的申请等。此外在诊断系统中提供了公共模版，可 以促进病理报告的规范和统一，特别是肿瘤诊断报告不会遗漏必须提供的信息如肿瘤的大小、组织学 类型和分级，切缘和淋巴结转移的情况，与治疗和预后有关的分子标志物的表达情况等：也保留了建 立个人模版的功能，在允许的范围内可以体现报告的个性化。 （３）在病理科流程管理中的作用 由于病理信息系统实现了病理申请的数字化并由系统自动生
Ｘ Ｉｌ
ｍ～４
ｕ
ｍ，切片不易脱落，ＨＥ染色时骨组织结构完整，细胞核染色清晰，核浆对比
ｌｃｍ Ｘ
０．３ｃｍ，在不影响诊断的条件
下，应将骨组织周围的软组织全部剥离干净。如果切片目的在于观察骨髓病变或骨组织肿瘤，最好除去 一部分正常致密的骨组织，以利于脱钙和制片。 在常温下脱钙的速度较慢，远远彳ｉ能满足临床诊断的需要。加温脱钙的方法虽然速度快，但不易掌 握脱钙终点，特别是在６０℃加温时，应随时观察脱钙情况，一旦骨组织标本漂浮于液面，即引起组织过 分膨胀并迅速发生完全消融，骨细胞形态大部分被破坏，将导致切片染色细胞核着色不良，胞浆界限小 清，对比度筹，嗜碱性区域偏红，影响镜下观察。 根据组织的厚度和钙化程度，适？。’的脱钙速度至关重要，增加脱钙速度Ｊｌ能钮牺牲细胞微细结构来 获得。盐酸脱钙作用速度较快，但易使组织收缩。甲酸脱钙速度适？。１，组织损害小，可时问较长，骨组 织长时问浸于强酸中会引起组织膨胀。硝酸脱钙液脱钙作用迅速，对组织彳ｉ膨胀，对细胞的保存和染色
成经核埘确认后，资料室管理人员就能了解该切片的负责医师并能督促其按时归档。切片的借阅也可在 网上申请，山资料室管理员送全医师下中。系统设置的ＩＣＤ编码系统将能使病理诊断按照国际标准进 行编码，系统还可将电了登记簿中记录的全部信息导出为Ｅｘｃｅｌ表格形式，并设置了历史资料录入程 序，非常方便进一步的科研台询需求。网上申请，由资料室管理员送至医师下中。系统设置的ＩＣＤ编 码系统将能使病理诊断按照国际标准进行编码，系统还可将电了登记簿中记录的全部信息导出为Ｅｘｃｅｌ 表格形式，并设置了Ｊ力史资料录入程序，非常方便进一步的科研杏询需求。 （２）在病理科诊断管理中的作用 病理信息系统实现了科内医师的三级检诊。每一位医师都有
骨组织脱钙方法的比较
作者： 作者单位： 黄毅峰， 陈艳华， 陈莹 江汉大学病理诊断中心 430056
本文链接：/Conference_7201049.aspx
液，在原药瓶内注入９５％酒精，置入８０℃温箱中ｌ Ｏｍｉｎ，纯酒同样温度ｌｍｉｎ；二甲苯８０℃温箱内２０ｍｉｎ， 同温度浸蜡３０ｍｉｎ；包埋 切记要将组织块包埋于一个平面上，且不得遗漏组织于瓶中；切片缓慢进行 浸
蜡块修整，肉眼规切到最大面后，即可停ｌｆ＝修整，切出不同深度组织膜，捞于切片上；染色 入苏木素时间要严格监控，不能过染。蓝化时问一定要充足，以提高核浆的对比度。 二、改进脱水方法，提高组织脱水质量，缩短出片时间