体内小鼠实验方案
细菌接种小鼠实验报告
一、实验目的1. 掌握细菌接种小鼠的基本操作方法。
2. 观察细菌在小鼠体内的生长繁殖情况。
3. 了解细菌感染小鼠后对小鼠的影响。
二、实验原理细菌接种小鼠实验是微生物学实验中常用的实验方法之一。
通过将细菌接种到小鼠体内，观察细菌在小鼠体内的生长繁殖情况，可以了解细菌的致病性、毒力以及小鼠的免疫反应等。
三、实验材料1. 实验动物：昆明小鼠10只，体重20-25g。
2. 细菌：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
3. 培养基：肉汤培养基、琼脂培养基等。
4. 实验仪器：无菌操作台、接种环、接种针、酒精灯、温箱、显微镜等。
四、实验方法1. 细菌接种（1）将细菌从培养基中取出，用接种环挑取适量细菌，接种到肉汤培养基中，置于37℃温箱培养18-24小时，观察细菌生长情况。
（2）将培养好的细菌用接种环挑取适量，接种到琼脂培养基中，置于37℃温箱培养18-24小时，观察细菌生长情况。
2. 小鼠接种（1）将小鼠置于无菌操作台，用酒精棉球消毒小鼠的腹部，暴露出腹部皮肤。
（2）用接种针挑取适量细菌，将细菌接种到小鼠的腹部皮肤上。
（3）用无菌棉球覆盖接种部位，避免细菌污染。
3. 观察与记录（1）观察小鼠接种细菌后的生长情况，记录小鼠的体重、食欲、活动能力等。
（2）定期观察小鼠的腹部皮肤，观察是否有红肿、溃烂等症状。
（3）取小鼠的血液、内脏等组织，进行细菌培养，观察细菌的生长情况。
五、实验结果1. 细菌生长情况（1）大肠杆菌在肉汤培养基中生长良好，形成浑浊的菌液。
（2）金黄色葡萄球菌在琼脂培养基上形成圆形、黄色、表面光滑的菌落。
2. 小鼠接种细菌后的生长情况（1）接种大肠杆菌的小鼠，体重逐渐下降，食欲减退，活动能力下降。
（2）接种金黄色葡萄球菌的小鼠，腹部皮肤出现红肿、溃烂等症状。
3. 细菌培养结果（1）接种大肠杆菌的小鼠，血液、内脏等组织培养出大肠杆菌。
（2）接种金黄色葡萄球菌的小鼠，血液、内脏等组织培养出金黄色葡萄球菌。
六、实验结论1. 大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有致病性，可导致小鼠感染。
动物实验设计方案
动物实验设计方案背景动物实验是科学研究中常用的手段之一，可以帮助科学家们了解动物行为、生理机制以及疾病的发展等方面。
设计一个合理的动物实验方案是确保实验结果准确可靠的关键步骤。
本文档旨在介绍一个典型的动物实验设计方案，涵盖实验目的、实验材料与方法、数据记录与分析等内容，旨在帮助研究人员设计和实施动物实验、整理数据及分析结论。
实验目的本实验的目的是研究X因子对小鼠行为和生理的影响。
通过观察小鼠在不同处理下的行为变化和生理指标变化，评估X因子对小鼠的影响程度，探索其可能的作用机制。
实验材料与方法1. 实验动物选取健康、年龄相近的雄性C57BL/6小鼠作为实验对象。
体重范围控制在20-30g之间。
2. 实验组设计将小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
实验组接受处理a，对照组接受处理b。
3. 实验条件•温度：22±2℃•相对湿度：40%-60%•光照：12小时日光/12小时黑暗4. 实验处理实验组接受处理a，对照组接受处理b。
具体处理细节如下：•实验组：给予小鼠X因子处理。
•对照组：给予小鼠生理盐水处理。
两组小鼠接受处理后，观察以下指标的变化：•行为观察：通过视频记录小鼠在特定任务下的活动情况。
•生理指标：如血压、心率等。
5. 数据记录对实验过程中所观察到的数据进行记录，包括但不限于以下内容：•每只小鼠的体重•小鼠在特定任务下的运动情况•血压、心率等生理指标的变化6. 数据分析对实验数据进行统计分析，并采用适当的统计方法进行处理。
实验步骤1.准备工作：清洁实验设备、准备实验所需材料。
2.小鼠处理：将小鼠随机分为实验组和对照组，按照实验处理方式进行处理。
3.观察记录：在特定的任务下，观察小鼠的行为变化，并利用视频记录仪记录小鼠的活动情况。
4.生理指标测定：测量小鼠的血压、心率等生理指标。
5.数据记录：详细记录每只小鼠的体重、行为变化和生理指标等数据。
6.数据分析：对实验数据进行统计分析，得出结论。
小鼠实验报告
小鼠实验报告一、引言小鼠实验一直是科研领域中常用的实验方式之一。
通过对小鼠进行实验，可以帮助研究人员更深入地了解生物学、医学、心理学等领域的相关知识。
本文将从实验设计、操作步骤、实验结果和讨论等方面探讨小鼠实验的重要性和应用。
二、实验设计在进行小鼠实验之前，首先需要明确实验目的和假设。
通过明确实验目的，可以有针对性地设计实验方案，选取合适的小鼠种类和数量。
在设计实验时，需要考虑到实验组和对照组的设置，以及实验时长和操作流程等因素。
三、实验操作小鼠实验的操作过程较为复杂，需要严格按照标准操作流程进行。
首先，需要准备合适的实验设备和材料，如小鼠笼、饲料、水等。
然后，将小鼠转移到实验环境中，进行适应性训练和处理，以保证实验结果的可靠性。
接下来，根据实验设计设置实验组和对照组，给予不同的处理，比如不同药物的给予或环境刺激等。
在实验进行过程中，需要记录和观察小鼠的行为、生理指标等重要数据。
四、实验结果实验结果是小鼠实验的核心和关键。
通过对实验过程中收集到的数据进行统计和分析，可以得到相关结论和推论。
其中，数据统计和分析可以采用多种方法，如方差分析、t检验、回归分析等。
通过这些统计分析的结果，可以验证实验假设，得出科学结论。
五、讨论实验的讨论环节是对实验结果的解释和深入研究。
通过对实验结果的讨论，可以探索实验结果的可能原因和机制。
同时，还可以比较实验结果与已有研究成果的一致性和差异性，进一步加深对问题的认识和理解。
在讨论中，需要充分考虑研究中的局限性和不确定性，并提出可能的解决方案和改进措施。
六、应用与展望小鼠实验在科研中具有广泛的应用价值。
通过对小鼠进行实验，可以为新药开发、疾病治疗、行为学研究等提供重要的依据和参考。
未来，随着科技的不断进步，小鼠实验将会借助新的技术手段不断发展和完善，为科学研究提供更多可能性。
七、结论综上所述，小鼠实验是科研领域中常用的实验方式之一。
通过合理的实验设计和严格的实验操作，可以获得可靠的实验结果。
小鼠实验设计方案
小鼠实验设计方案小鼠实验设计方案实验目的：本实验的目的是通过对小鼠进行实验观察和分析，从而得出某种药物对小鼠行为的影响及其机制。
实验材料：1.音箱和水平调节的台架2.药物样品3.小鼠（同龄、同性别、同品系）4.实验笼5.摄像机6.食物和水实验设计：1.实验组和对照组：将小鼠除了药物以外的条件保持一致，将小鼠随机分组成实验组和对照组。
实验组给予药物处理，对照组不给予任何处理作为对照。
2.实验流程：首先，将小鼠放置在笼子中，让其适应环境。
然后对小鼠进行体重、性别、年龄等信息的记录。
接下来，打开音箱，调节音量和频率，以确保音乐的条件一致。
在一定的音乐声或静音期后，使用视频摄像机记录小鼠的行为。
通过记录小鼠的活动情况，包括运动、呼吸、摇尾巴等行为，比较实验组和对照组的差异。
在进行行为观察时，可以根据实际情况进行时间的分段观察，例如，记录小鼠在音乐开始前、音乐进行过程中以及音乐结束后的行为变化。
3.实验参数的监测：饮食观察：记录小鼠的饮食情况，比较实验组和对照组之间的差异。
运动监测：使用红外传感器或摄像机等设备，记录小鼠的运动情况，如活动距离、运动速度等。
呼吸监测：使用呼吸频率测量仪或其他设备，记录小鼠的呼吸情况。
4.实验数据的统计分析：对实验所得数据进行统计和分析，比较实验组和对照组之间的差异，并进行显著性分析。
可以使用t检验、方差分析或非参数分析等方法对数据进行处理。
实验安全：1.实验过程中，要注意小鼠的饮食和生活环境的卫生，确保小鼠的健康和安全。
2.实施实验过程中要注重伦理，遵守实施实验的国家和地方的法律和规定，确保小鼠的使用符合伦理要求。
实验结果分析和结论：根据实验所得结果，对实验组和对照组的差异进行分析和研究，得出药物对小鼠行为的影响及其机制，提出相应的结论。
实验思考和展望：结合实验结果，进一步思考实验中的问题，并提出下一步研究的方向和展望，为进一步的研究提供参考。
以上就是小鼠实验设计方案，通过实验观察和分析，可以深入了解某种药物对小鼠行为的影响及其机制，为进一步的研究提供实验基础。
体内小鼠实验方案
实验报告抗肿瘤药物体内活性研究一、实验原理聚合物胶束的粒径约为0-200 nm，可以利用肿瘤组织的增强渗透保留效应(EPR)，选择性地透过肿瘤血管并积累在肿瘤组织，实现被动靶向；被特定官能团修饰的聚合物胶束则能响应部位的物理化学变化，实现靶向部位的载体聚集和药物定点释放。
抗肿瘤药物的反复使用容易导致肿瘤细胞产生多药耐药性(MDR)，肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药性后，对结构与作用机制不同的其它抗肿瘤药产生交叉耐药的现象极大的限制了化疗药物的疗效。
纳米药物传递系统如脂质体、胶束、纳米粒等作为MDR逆转策略越来越引起关注。
胶束能通过EPR效应使药物选择性地在肿瘤部位累积和释放，增加细胞内药物浓度，缓控释药物，并通过靶向细胞上特异受体对应的配体修饰，达到主动靶向，从而逆转肿瘤细胞耐药。
盐酸阿霉素(DOX·HCl)，属于蒽环类抗生素，能够抑制癌细胞遗传物质核酸的合成，具有广谱的恶性肿瘤的治疗效果，广泛用于宫颈癌细胞、卵巢癌、乳腺癌、恶性淋巴瘤、肺癌、肝癌等的治疗。
然而，阿霉素的急性和慢性毒副作用限制了其在临床上的广泛应用，急性毒副作用包括恶心、呕吐、骨髓抑制和心率失常;慢性毒性表现为肝脏、大脑和肾脏的损伤，对心脏具有不可逆的剂量依赖性的损伤。
用聚合物构建新型药物胶束传递系统，提高对疏水性药物的包载能力和药物稳定性;通过小分子修饰实现被动和主动靶向。
此外,通过相关实验考察作为药物载体的聚合物胶束的耐药能力，以此来证明聚合物胶束的生物安全性好、稳定性高、载药量高、响应性强、靶向性准、缓控释性能好。
二、实验目的1.运用抗肿瘤药物在小鼠体内评价方法，筛选出具有高表达、特异性、高亲和力的主动/被动靶向、无细胞毒性、抗肿瘤效果好的聚合物胶束。
2.动物体内抑瘤实验基于活体成像技术，建立药物抗肿瘤效果活体动物影响研究方法。
三、实验内容1.动物模型将状态良好的细胞消化，用培养液稀释至1×106 cells/mL细胞密度，吹匀后于每只小鼠加入细胞悬液100 μL，培养。
体内外抗肿瘤实验设计方案
体内外抗肿瘤实验设计方案肿瘤是一种严重的疾病，对人类的健康造成了极大的威胁。
为了研究肿瘤的发生机制和寻找有效的治疗方法，科学家们进行了大量的体内外抗肿瘤实验。
本文将介绍体内外抗肿瘤实验设计方案。
一、体内抗肿瘤实验设计方案1. 动物模型的选择动物模型的选择是体内抗肿瘤实验的关键。
一般来说，小鼠是最常用的动物模型，因为它们的基因组和人类的相似度很高，并且易于饲养和操作。
2. 肿瘤细胞的注射在体内抗肿瘤实验中，肿瘤细胞的注射是必不可少的。
一般来说，可以将肿瘤细胞注射到小鼠的皮下或者腹腔中。
注射的细胞数量需要根据具体实验来确定。
3. 给药方案的制定在体内抗肿瘤实验中，给药方案的制定十分重要。
一般来说，可以选择化学药物、靶向药物、免疫治疗等方式进行治疗。
给药的剂量和时间需要根据具体实验来确定。
4. 肿瘤负荷的检测在体内抗肿瘤实验中，需要定期检测小鼠的肿瘤负荷。
一般来说，可以通过观察肿瘤的大小和质地、测量小鼠的体重等方式进行检测。
二、体外抗肿瘤实验设计方案1. 细胞系的选择体外抗肿瘤实验中，细胞系的选择是非常重要的。
一般来说，可以选择肿瘤细胞株或者癌细胞系进行实验。
细胞的来源需要根据具体实验来确定。
2. 细胞的培养在体外抗肿瘤实验中，需要将细胞进行培养。
培养的条件包括培养基、CO2浓度、温度等需要根据细胞的特性来确定。
3. 给药方案的制定在体外抗肿瘤实验中，给药方案的制定也是非常重要的。
一般来说，可以采用化学药物、靶向药物、免疫治疗等方式进行治疗。
给药的剂量和时间需要根据具体实验来确定。
4. 细胞的检测在体外抗肿瘤实验中，需要定期检测细胞的生长状态。
一般来说，可以通过观察细胞的形态、测量细胞的增殖率等方式进行检测。
体内外抗肿瘤实验设计方案需要考虑到许多因素，包括动物模型的选择、肿瘤细胞的注射、给药方案的制定、肿瘤负荷的检测等。
只有在全面考虑这些因素的情况下，才能设计出有效的实验方案，为肿瘤的治疗和研究做出贡献。
连体共生小鼠实验方法
以下是连体共生小鼠实验方法的主要步骤：
1. 麻醉：抓取连体小鼠放置在体重秤上称重，按照1ul/g体重，腹腔注射1%戊巴比妥钠。
同时因为小鼠多次进行麻醉和手术，其对麻药的耐受减弱，麻药致死率增高，所以此次手术的麻药剂量相比以前手术的基础上再适当减量。
2. 备皮：用动物剃毛刀将连体共生小鼠连接处的毛发全部剃除干净，上下范围为小鼠耳后至后腿膝关节，左右范围为小鼠腹中线至背部的脊柱旁。
3. 维持术中小鼠的体温：将连体共生小鼠放置于温控仪的加热板，然后插入温控仪的肛温探头，调节温控仪的旋钮，使得小鼠体温可保持在36.8\~37.2℃之间。
4. 术前消毒：备皮后严格按照外科消毒方法对将进行手术的区域进行消毒。
5. 切开皮肤：备皮区域，用已高压灭菌和酒精浸泡的手术器械剪开皮肤。
如不小心损伤血管，尽早止血。
请注意，以上步骤需要在专业人士的指导下进行，以确保实验的安全和有效性。
同时，应严格遵守动物实验伦理和法规，确保动物的福利和权益。
小鼠肺脏组织采集方案
小鼠肺脏组织采集方案一、引言肺脏是呼吸系统的重要器官，其组织学研究对于了解肺脏疾病的发生机制以及药物治疗的效果具有重要意义。
为了获得高质量的小鼠肺脏组织样本，本文将介绍一种可行的采集方案。
二、材料与方法1. 实验动物选取健康、年龄相近的小鼠作为实验动物。
确保动物的品系、体重和性别等因素的一致性，以减少可能的干扰。
2. 麻醉与剖胸使用合适的麻醉方法使小鼠进入无痛苦状态，如使用乙醚或异氟醚进行麻醉。
在麻醉后，将小鼠置于无菌操作台上，并用70%酒精消毒小鼠胸部。
使用手术剪刀剖开小鼠胸腔，注意避免损伤肺脏。
3. 肺脏固定与取样将剖开的小鼠胸腔迅速固定在10%中性缓冲福尔马林中，固定时间约为24小时。
固定后，取出肺脏，并用无菌PBS缓冲液冲洗数次，以去除福尔马林。
4. 组织处理与包埋将冲洗后的肺脏组织用组织切片机进行切片，切片厚度一般为4-6μm。
将切片浸入甲醇中进行脱水处理，然后依次浸入乙醇和蜡中进行透明化和包埋处理。
5. 切片与染色将包埋后的组织切片取出，用切片机制备薄切片，厚度约为4-6μm。
然后，将切片放置在载玻片上，用热水浴或热板加热，使切片与载玻片紧密结合。
最后，使用适当的染色方法对切片进行染色，如血液染色以观察血管结构、免疫组化染色以检测特定蛋白的表达等。
三、结果与讨论通过上述采集方案，我们可以获得高质量的小鼠肺脏组织样本。
这些样本可以用于进一步的组织学研究，如观察肺组织的形态学结构、病理变化以及蛋白表达等方面。
此外，该采集方案还可以应用于其他相关实验，如分子生物学研究、基因表达分析等。
四、结论小鼠肺脏组织采集是肺脏研究的基础，本文介绍的采集方案能够有效地获得高质量的肺脏组织样本。
在实际操作中，需要注意动物的选择、麻醉方法的合理使用以及组织处理的细致操作。
希望这一方案能够为肺脏研究提供一定的参考，并对相关领域的进一步发展做出贡献。
小鼠实验方案范文
小鼠实验方案范文引言：小鼠实验是研究许多疾病和药物的动物模型之一、通过小鼠实验，可以深入了解疾病机理、评估新药的疗效以及研究可能的毒副作用。
本方案将介绍一种常见的小鼠实验方案，包括实验设计、实验材料和方法、实验数据处理和分析等方面的内容。
一、实验设计：1.实验目的：明确研究目的，例如评估药物的治疗效果、疾病模型的建立等。
2.小鼠品系和数量：选择适合实验的小鼠品系，确定所需实验的小鼠数量，一般建议使用同源、同性别小鼠，并尽量减少动物数量，以符合伦理要求。
3.实验组和对照组设置：设计不同的实验组和对照组，以对照组和实验组进行比较分析。
4.随机分组和盲法：使用随机方法将小鼠分为实验组和对照组，并采用盲法，使得实验操作员和数据分析者对实验组和对照组的情况不知晓。
5.倍数重复：对每个实验条件进行多次重复，以提高结果的可信度和统计学意义。
二、实验材料和方法：1.小鼠饲养和管理：根据小鼠品系提供合适的饲料和饮水，确保小鼠的良好健康状态。
2.疾病模型建立（可选）：若需要建立疾病模型，则按照相关方法对小鼠进行相应处理，例如药物注射、基因敲除等。
3.药物处理（可选）：按照实验设计，在实验组小鼠中给予药物处理，对照组给予相同剂量的溶剂。
4.制备样品：根据实验要求，对小鼠进行标本采集和处理，例如血液、组织样品等。
5.实验测定：采用合适的实验方法对样品进行测定，如酶活性、蛋白质表达、基因水平等。
6.数据记录：详细记录实验过程中的操作步骤、实验时间、实验地点等信息，以及所有获取的数据。
三、实验数据处理和分析：1.数据统计和计算：将实验数据录入电子表格软件，并进行统计和计算，如均值、标准差、方差等。
2.数据分析：使用合适的统计分析方法，比较实验组和对照组的差异，如t检验、方差分析等，并分析差异是否具有统计学意义。
3.结果展示：将数据处理和分析的结果进行可视化展示，例如制作条形图、散点图、曲线图等。
四、实验伦理和安全：1.伦理审批：在进行小鼠实验前，必须获得相关机构的伦理审批，并按照相关伦理准则进行实验。
小鼠实验方案
酵母提取物对小鼠肝损伤保护作用试验方案酵母提取物抗氧化能力的测定概述：自由基是指是机体代谢的正常产物，在体内有很强的氧化反应能力，可以在细胞代谢的过程中不断地产生。
大量的研究结果证明，自由基是衰老的决定因素。
在生命活动过程中产生的各种自由基中轻自由基的作用最强，进攻性也最强，几乎可以和所有的生物分子、有机物或无机物发生不同类型的化学反应。
超氧阴离子不仅自身具有毒性，而且可以通过其他反应产生更多的氧自由基，进一步对生物体产生损伤作用。
试验拟采用DPPH自由基体系、超氧阴离子(O2-)自由基体系、羟自由基(HO-)体系以及还原力测定体系评价酵母提取物的抗氧化活性。
试验方法1）DPPH 自由基清除试验DPPH储备液配制：精密称取19.7 mg DPPH溶解于25 mL甲醇中，再吸取2.5 mL溶液，以甲醇补足体积至25 mL，得到200 µM DPPH母液，暗处保存备用。
药品及对照品储备液配制：酵母提取物采用甲醇溶解，得到终浓度为1 mM的母液。
再将母液加甲醇稀释至一定浓度梯度，加3 mL于比色管中（对照组加入3 mL甲醇或水），再加入1 mL DPPH母液，剧烈震荡后，与暗处保存30 min，以甲醇做空白，测其517 nm吸光值。
以Vc作为阳性对照，各组反应平行测定三次，DPPH自由基清除率按照下面公式计算：×100DPPH自由基清除率（%）=A0−A1A0式中A0代表对照组的吸光值；A1代表加药组的吸光值。
2）超氧阴离子(O2-)自由基清除试验采用NADH-PMS方法评估酵母提取物对超氧阴离子自由基的清除能力。
试管中依次加入1 mL NBT (81µM)溶液，1 mL NADH (468µM )溶液，1 mL不同浓度的待测溶液，0.4 mL PMS (88µM)溶液，充分混匀，静置5 min，在560 nm处测其吸光值。
用水代替待测溶液做阴性对照，水代替PMS做本底组对照，Vc做阳性对照。
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实验报告
抗肿瘤药物体内活性研究
一、实验原理
聚合物胶束的粒径约为0-200 nm,可以利用肿瘤组织的增强渗透保留效应(EPR)，选择性地透过肿瘤血管并积累在肿瘤组织，实现被动靶向；被特定官能团修饰的聚合物胶束则能响应部位的物理化学变化, 实现靶向部位的载体聚集和药物定点释放。
抗肿瘤药物的反复使用容易导致肿瘤细胞产生多药耐药性(MDR)，肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药性后，对结构与作用机制不同的其它抗肿瘤药产生交叉耐药的现象极大的限制了化疗药物的疗效。
纳米药物传递系统如脂质体、胶束、纳米粒等作为MDR 逆转策略越来越引起关注。
胶束能通过EPR 效应使药物选择性地在肿瘤部位累积和释放，增加细胞内药物浓度，缓控释药物，并通过靶向细胞上特异受体对应的配体修饰，达到主动靶向，从而逆转肿瘤细胞耐药。
盐酸阿霉素(DOX • HCI)，属于蒽环类抗生素，能够抑制癌细胞遗传物质核酸的合成，具有广谱的恶性肿瘤的治疗效果，广泛用于宫颈癌细胞、卵巢癌、乳腺癌、恶性淋巴瘤、肺癌、肝癌等的治疗。
然而，阿霉素的急性和慢性毒副作用限制了其在临床上的广泛应用，急性毒副作用包括恶心、呕吐、骨髓抑制和心率失常;慢性毒性表现为肝脏、大脑和肾脏的损伤，对心脏具有不可逆的剂量依赖性的损伤。
用聚合物构建新型药物胶束传递系统，提高对疏水性药物的包载能力和药物稳定性;通过小分子修饰实现被动和主动靶向。
此外,通过相关实验考察作为药物载体的聚合物胶束的耐药能力，以此来证明聚合物胶束的生物安全性好、稳定性高、载药量高、响应性强、靶向性准、缓控释性能好。
二、实验目的
1. 运用抗肿瘤药物在小鼠体内评价方法，筛选出具有高表达、特异性、高亲和力的主动/被动靶向、无细胞毒性、抗肿瘤效果好的聚合物胶束。
2. 动物体内抑瘤实验基于活体成像技术，建立药物抗肿瘤效果活体动物影响研究方法。
三、实验内容
1■动物模型
将状态良好的细胞消化，用培养液稀释至1 x 106 cells/mL细胞密度，吹匀后于每只
小鼠加入细胞悬液100丄，培养。
受试溶液每孔加入100此，每个浓度3-5个平行孔，每组10-15只裸鼠；对照组，即不加待测药液，单一补加100此生理盐水，培养。
2■体内抑瘤实验
给药后观察裸鼠体内肿瘤体积变化情况。
3■近红外成像的研丸
裸鼠在给药2和12天后处死，取血液、心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、肿瘤组织，置于近红外成像系统观察。
四、实验方案
1■动物模型的建立
通过MTT实验选取生物活性好、稳定性高、载药量高的聚合物纳米颗粒（NPs），为了考察不同给药剂量的DOX-NPs （阿霉素负载聚合物纳米颗粒）和DOX • HCl溶液的抗肿瘤效果，选取HeLa细胞常规培养，待细胞扩增至一定数量，且生长状态良好，取对数生长期的细胞用0.25%胰酶消化2 min, lOOOrpm离心5min,弃去上清液，用新鲜无血清的DMEM培养基重悬细胞沉淀，配制成1X106 个细胞/mL的细胞悬液。
然后用注射器吸取细胞悬液，排空气泡，注射于体重在20-22g左右的BALB/C 雌性裸鼠左腋皮下组织中，每只接种100 L，约含1X105 个细胞，大约共接种120只。
观察裸鼠肿瘤生长情况，并定期称裸鼠体重，测量肿瘤大小。
（实验期间动物正常饮食喝水。
）
2■给药及抑制肿瘤效果评价
当肿瘤体积长到100~150 mm3时，将裸鼠随机分成4组，每组10只裸鼠（n=4），分别为阴性对照组（生理盐水组），DOX • HCl，NPs和DOX-NPs。
阴性对照组通过尾静脉注射100此对照生理盐水。
DOX • HCl，NPs和DOX-NPs组分别通过小鼠尾静脉注射100此的用无菌生理盐水配制的DOX • HCl。
并记为第一天。
（给药剂量分别为:5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg）。
隔天给药一次，给药后小鼠正常饲养，每天观察小鼠的生存状况，每两天记录一次小鼠体重，并用游标卡尺测量小鼠肿瘤的长短径，根据公式计算肿瘤体积（V）和相对肿瘤体积（Relative tumor volume, RTV）,绘制时间-小鼠相对体重和时间-小鼠相对肿瘤体积变化曲线。
给药后第12天处死小鼠，摘取皮下肿瘤并称重。
肿瘤体积：V=aXb2/2 （a为肿瘤的最长径，b为肿瘤的最短径）公式1
相对肿瘤体积：RTV = V a/V o（V a为每日肿瘤体积，V o为起始肿瘤体积公式2 按照以下公式：计算各给药组的抑瘤率：
Tumor inhibiton ratio % = （1 —V test/V controi） 100% 公式3 其中，V test为第12天时给药组的相对肿瘤体积，V control为第12天时生理盐水组的相对肿瘤体积。
3■药物体内脏器分布实验
由于DOX • HCI自身具有红色荧光，故可通过近红外成像仪观察药物在裸鼠体内各脏器的分布情况。
在尾静脉注射5mg/kg生理盐水、游离DOX • HCl、NPs和DOX-NPs组生理盐水溶液后，于第2、12天处死裸鼠，取血液、心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏以及肿瘤置于在体近红外成像系统观察，分析给药后阿霉素在各器官组织的分和悄况■:
4■组织切片分析
通过肿瘤以及心脏组织切片可以判断不同制剂对肿瘤的抑制作用以及阿霉素对心脏的损伤情况。
在尾静脉注射生理盐水、5mg/kg游离DOX • HCl、NPs
和DOX-NPs组生理盐水溶液后，在预设时间处死给药后的裸鼠，剖取心脏以及肿瘤组织，通过10%多聚甲醛对组织进行固定（12小时以上）。
依次经过50%酒精、70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精（两次）进行脱水处理（每级35-45分钟）。
100%酒精与二甲苯（1:1）透明处理30-40分钟，再移入二甲苯中15-20 分钟。
将透明后的组织块置于刚过溶点的融化石蜡中浸渍，取代组织中含有的透
明剂，将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中，石蜡凝固后，组织即被包埋在其
中。
修整蜡块，并进行切片。
经过苏木精-伊红染色（HE染色）或者醋酸铀和硝酸银染色后固定于铜网，通过近红外成像仪或荧光显微镜或TEM观察心脏受损
程度以及肿瘤纟旧也小伤怙况-
5.统计学处理
所有实验数据采用SPSS10.0统计软件分析处理。
数据X -S表示，组内和组间比较采用方差分析。
以P < 0. 05为差异有统计学意义。
五、实验预期结果
1. 通过体内小鼠实验，可以筛选出一种具有生物安全性好、稳定性高、载药量高、响应性强、靶向性准、缓控释性好的聚合物胶束。
2. 同等剂量下，载药胶束组裸鼠存活率大大提高，胶束包载药物后减小了药物的毒副作用，增加了动物的存活率。
3. 通过观察给药后裸鼠体内肿瘤体积变化情况，说明了聚合物胶束组取得了显著的抑瘤效果。
4. 肿瘤组织切片进一步证实了DOX-NPs 对肿瘤的杀伤能力明显优于游离药物, 说明了DOX-NPs 增强了普通聚合物胶束的抑瘤效果。
六、注意事项
1.聚合物纳米颗粒的选取，应考虑其生物安全性、稳定性、载药量、响应性、靶向性、缓控释性能。
2.在做肿瘤细胞的时候，往往要根据细胞生长速度以及药物的特性（有时间依赖性和浓度依赖性的药物）来确定培养时间是48 小时还是72 小时。
3. 要设置生理盐水组（阳性对照组）和实验组。
4. 小鼠要随机分组且每组数量不少于10 只，并观察其生存状况。
5. 样品采集时，必须迅速，大小要均匀，不能太大。
采集完后立即放入固定液中固定。
6. 新买的蜡，首次融化凝固后，也容易产生白点沉淀，不能用来包埋组织。
因此也要反复熔化-凝固，过滤，直到凝固的蜡，表面光亮，没有白点才能用。
在浸蜡过程中，在按照步骤所定的温度，除了调节温度和换蜡外，还有实时观察恒温箱中瓶中的腊，不能让其凝固。
假如凝固，升温将其熔化。
实验药品：HeLa细胞、BLAB/c雌性裸鼠、胰酶、DMEM培养液、NaCI、DOX HCl、10%多聚甲醛、乙醇、二甲苯、石蜡、苏木精-伊红染色液、蒸馏水、HCl、PBS 缓冲溶液
实验仪器：超净台、离心机、移液枪、荧光显微镜、近红外成像仪
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