Connexin43及Cajal间质细胞在先天性巨结肠结肠壁的分布的研究
黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞缝隙连接蛋白43表达的影响
黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞缝隙连接蛋白43表达的影响林锐珊;赵平;吴绍锋;罗海燕;伍趣京;苏宁【期刊名称】《安徽中医学院学报》【年(卷),期】2013(032)006【摘要】目的研究黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)中缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达的影响.方法将体外培养的大鼠GMC分为6组:低糖组,高糖组,黄芩苷低、中、高剂量组,蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂组.培养72 h后,收集细胞并提取细胞总蛋白,Western-blot 法检测黄芩苷对高糖环境下GMC中PKC和Cx43表达的影响,用划痕标记染料示踪技术检测黄芩苷对GMC缝隙链接通讯功能(gap junction intercellular communication,GJIC)的影响.结果 Western-blot结果显示,与低糖组比较,高糖组中PKC蛋白表达量显著增加(P<0.01),Cx43蛋白表达量显著减少(P<0.01);黄芩苷呈剂量依赖性降低PKC蛋白表达水平,升高Cx43蛋白表达水平.划痕标记染料示踪实验结果显示:与低糖组比较,高糖组GMC的GJIC功能缺乏,未向邻近细胞传输;与高糖组比较,PKC抑制剂组罗氏黄荧光染料向划痕两侧邻近细胞传输的层数较黄芩苷各剂量组明显增多,黄芩苷各剂量组呈剂量依赖性地增加传递的层数.结论黄芩苷可剂量依赖性地抑制高糖环境下GMC中PKC的异常活化,从而上调Cx43表达,恢复GJIC的功能.【总页数】4页(P74-77)【作者】林锐珊;赵平;吴绍锋;罗海燕;伍趣京;苏宁【作者单位】广州中医药大学西医基础公共实验室,广东,广州,510006;广州益善医学检验所,广东,广州,510663;广州中医药大学西医基础公共实验室,广东,广州,510006;广州中医药大学西医基础公共实验室,广东,广州,510006;广州中医药大学西医基础公共实验室,广东,广州,510006;广州中医药大学西医基础公共实验室,广东,广州,510006【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响 [J], 林锐珊;吴寿海;苏宁;2.黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖的影响 [J], 林锐珊;苏宁;赵平;吴绍锋3.黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响 [J], 林锐珊;吴寿海;苏宁4.浆细胞瘤异位基因1表达下调对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖的影响及机制[J], 李敏;吴汪丽;彭云;肖一平5.黄芩苷下调NF-κB表达抑制高糖环境下肾小球系膜细胞增殖的作用 [J], 赵平;林锐珊;佘燕玲;苏宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胃肠道肌层巨噬细胞在胃肠运动调节中的作用
·综述·胃肠道肌层巨噬细胞在胃肠运动调节中的作用*王艳高祥悦林琳汤玉蓉#南京医科大学第一附属医院（江苏省人民医院）消化内科（210029）摘要近年研究在胃肠道发现了一类特殊的巨噬细胞肌层巨噬细胞（MMs ），其可与肠神经元（EN ）、Cajal 间质细胞（ICC ）、平滑肌细胞（SMC ）等相互作用，共同维持肠道运动功能。
在肠道菌群改变、炎症或应激状态下，MMs 可发生表型等变化，通过多种机制作用于EN 、ICC 或SMC ，最终影响胃肠运动功能。
本文就胃肠道MMs 调节胃肠运动的机制及其在胃肠运动障碍性疾病中的作用作一综述。
关键词肌层巨噬细胞；胃肠活动；肠神经系统；Cajal 间质细胞；平滑肌细胞Role of Gastrointestinal Muscularis Macrophages in Regulation of Gastrointestinal Motility WANG Yan,GAOXiangyue,LIN Lin,TANG Yurong.Department of Gastroenterology,the First Affiliated Hospital of Nanjing MedicalUniversity (Jiangsu Province Hospital),Nanjing (210029)Correspondence to:TANG Yurong,Email:*****************AbstractRecent studies have found a special class of macrophages,muscularis macrophages (MMs),in thegastrointestinal tract,which interacts with enteric neuron (EN),interstitial cells of Cajal (ICC),and smooth muscle cells (SMC)to maintain normal intestinal motility.MMs can undergo phenotypic and other changes under altered intestinal microbiota,inflammation,or stress,and act on EN,ICC,or SMC through multiple mechanisms,ultimately affectinggastrointestinal motility.This article reviewed the mechanism of gastrointestinal MMs regulating gastrointestinal motility and role in gastrointestinal motility disorder diseases.Key wordsMuscularis Macrophages;Gastrointestinal Motility;Enteric Nervous System;Interstitial Cells of Cajal;Smooth Muscle CellsDOI ：10.3969/j.issn.1008‑7125.2022.07.007*基金项目：国家自然科学基金（81870378）#本文通信作者，Email:*****************巨噬细胞为一种主要的免疫功能细胞，在全胃肠道均有分布，主要位于固有层、黏膜下层和肌层，通过吞噬和清除病原体行使防御功能，亦可增强机体对食物或细菌等抗原的耐受性。
上皮细胞转化大肠发展
上皮细胞转化大肠发展当前,大肠癌已是欧洲排名第2位的肿瘤致死性疾病,占肿瘤致死性疾病的10%左右.引起大肠癌发生的原因众多,如基因突变引起的家族性腺瘤性息肉病(familialadenomatouspolyposis,FAP)、DNA错配修复基因(MMR)突变引起的遗传性非息肉性结肠癌(herediarynonpolyposiscol-orectalcancer,HNPCC)、Crohn''''s病、溃疡性结炎、上皮细胞内癌基因激活和抑癌基因失活等均与大肠癌的发生发展密切相关1.上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)是指在生理或病理情况下发生细胞上皮-间质转变,同时伴随细胞形态与相关基因表达的改变.EMT在胚胎形成以及组织器官发育过程中也起着重要作用(如中胚层和神经冠结构形成以及心脏形态发生过程2),但也可引起器官纤维化和参与肿瘤形成过程,在此过程中上皮细胞顶-底极性改变、桥粒等紧密连接结构消失、细胞骨架重组,波形蛋白表达上调、角蛋白表达下调,从而使细胞离体、获得迁移水平,并能抵抗细胞凋亡3.近来研究发现EMT在大肠癌发生发展过程中起着重要作用,并与肿瘤细胞的浸润和转移有着非常密切的关系.1EMT在炎症促动大肠癌发生发展中的作用慢性炎症被认为是包括大肠癌在内的很多种人类肿瘤疾病的原因之一,流行病学和临床研究均证实两种主要的炎症性肠病(inflammatoryboweldisease,IBD)：溃疡性结肠炎和Crohn''''s病4发展成大肠癌的风险明显升高.慢性炎症能够通过诱导细胞DNA修饰导致肠上皮细胞发育不良,此外还可通过DNA甲基化和组蛋白修饰等作用影响肠上皮发育过程5.Bataille等6在Crohn''''s病瘘管形成过程中发现肠道上皮标志物E-cadherin和?-catenin表达降低(?-catenin 在EMT的起始阶段合成增加,而在EMT最终阶段合成明显减少7);间质标志物?-integrin表达增多(TGF-?激活EMT的过程依赖于?-integrin,然后通过Smad3依赖性的转录过程或者非Smad3依赖性、p38MAPK激活和GTP酶调节的信号传导途径8),而该蛋白随着EMT的进展逐渐由胞膜向胞质、胞核转移,?-catenin移位被认为是Crohn''''s病发展过程中EMT的关键分子步骤.在肿瘤相关炎症(cancerrelatedinflammation,CRI)相关分子中发现一些重要的始动因子,包括NF-?B、STAT39、IL-1?、IL-6、IL-10和TNF-?等.NF-?B是一种关键的内源性炎症/免疫调节因子10.Douglas等在大肠癌细胞中发现了异常的NF-?B调节,且证实在结肠肿瘤起始和发展中NF-?B和CRI之间存有密切联系,通过靶向灭活IkappaB使肿瘤浸润白细胞中NF-?B失活抑制了炎症相关大肠癌的发生,从而为结肠肿瘤中NF-?B和炎症细胞的作用提供了基因水平证据.IL-6是NF-?B激活的一个主要效应分子,并且与STAT3存有密切关系,他具有促动生长和抗凋亡水平11.研究发现IL-6能保护正常肠上皮细胞和癌前细胞免受凋亡,并促动肿瘤起始细胞增殖,在此过程中NF-?B-IL-6-STAT3通路起着重要作用.Lee等12发现大肠癌中NF-?B的活化状态需要STAT3维持,提示STAT3是肿瘤细胞增殖和存活的关键因子,并调控了c-Myc、Mcl-1、CyclinD和Bcl-2表达13.抑制因子从不同水平上调控NF-?B信号通路,Tir8是表达于肠黏膜上IL-1R家族的一员,他能够通过阻止IRAK-1和TRAF-6,抑制信号从IL-1R/TLR复合物传导14.在小鼠大肠癌肿瘤模型中发现NF-?B下游分子CCL2、CCL3、IL-1和IL-6能够促动炎症相关的肿瘤形成,并发现NF-?B激活过程中Tir8的缺失直接导致了大肠癌形成15.肿瘤相关巨噬细胞(tumorassociatedmacrophages,TAM)分泌的TNF通过抑制GSK-3?促动了Wnt/?-catenin信号传导,促动了结肠上皮细胞向间质转化,此过程在大肠癌发展中起着重要作用16.此外,炎症细胞中NF-?B激活也造成了COX-2和ROS水平升高,ROS能诱导DNA损伤、DNA甲基化、转录后修饰和肿瘤抑制基因突变等7;控制炎症反应和诱导肿瘤细胞凋亡的TGF-?和低氧诱导因子-1(hypoxia-induciblefac-tor-1,HIF-1)同样是炎症微环境中促使上皮细胞发生间质转化的潜在诱导因子17.Grivennikov等17证实IL-6与其受体sIL-6?结合后停留在细胞表面并能借助胞内TGF-?通路促动结肠上皮向恶性转化;IL-10激活STAT3(信号传导蛋白-转录激活物)后通过与IL-6相似的途径介导细胞恶性转变18.TGF-?作为炎症因子可造成包括肠道在内的多器官自身免疫性疾病,且可激活多种信号通路如Erk、c-Jun、JNK、PI3K和RhoA等19,也能诱导某些转录因子和转录调节因子在EMT 中的表达,包括?EF1、SIP1和Snail等,从而有利于结肠上皮EMT的发生20.TNF-?在IBD发病机制中是一种重要的炎症因子,在炎症相关大肠癌(colitisas-sociatedcolorectalcancer,CAC)中也起着重要作用21,TNF-?在CAC中主要依赖激活胞内转录因子NF-?B实行信号传导,通过NF-?B的多向性转录激活作用(NF-?B能够结合至靶基因MMP-9、IL-8、uPA、VEGF、CXCR4、骨桥蛋白等的启动子或增强子之上实行调控22)诱导结肠上皮细胞向肿瘤细胞分化、增殖,并抑制细胞凋亡、促动肿瘤侵袭和转移23.此外,其他炎症因子如IL-12、IL-13和INF-?等在慢性大肠炎发展过程中也参与了肿瘤形成过程,而TGF-?、IL-10则能在此过程中发挥协同作用24.当前已证实上述参与炎症发生和发展的各种细胞因子如,TGF-?、TNF-?和NF-?B等均是EMT信号通路的关键因子,可见EMT参与了炎症促动大肠癌发生和发展的相关过程,但是EMT在此过程中的详尽机制尚待进一步研究.2EMT在腺瘤性息肉病相关的大肠癌发生发展中的作用FAP在结肠腺瘤性息肉疾病中占有主要地位,相关研究证实位于染色体5q21的APC突变失活是FAP的主要原因25,APC突变被认为启动了大肠癌发生的多步骤过程,最终FAP往往发展成为大肠癌26.与FAP相同的是绝绝大多数散发大肠癌病例起源于结肠腺瘤且同时伴有APC突变.Vécsey-Semjén等27证实小鼠敲除APC外显子exon14后可导致结肠腺瘤发生,免疫组织化学检测该模型结肠上皮细胞中可见Wnt信号通路的关键因子?-catenin在胞质和胞核中积累,且编码C-Myc和CyclinD1的mRNA也显著增加.APC是一种肿瘤抑制基因,能够作为Wnt/?-catenin的负性调控因子,在正常结肠上皮细胞APC/?-catenin复合物被丝氨酸-苏氨酸激酶(GSK3?)磷酸化,导致?-catenin降解,而在APC突变失活及Wnt信号转导通路开启时GSK3?的磷酸化作用被抑制28,使其不能诱发?-catenin降解,从而造成胞质内的?-catenin持续累积,后者作用于靶基因C-Myc和CyclinD1等,最终导致Wnt通路介导的EMT 发生,正常结肠黏膜上皮向间质转化,最终结肠上皮细胞发生恶性转化29,30.Lochter等31利用COGA-8结肠上皮细胞培养发现CyclinD1与CDK4、CDK6结合,诱导生成CyclinA和CyclinE,再与CDK2结合从而使结肠上皮细胞从G1期进入S期.C-Myc启动子区域有?-catenin结合位点,所以C-Myc表达能够被Wnt通路上调,C-Myc过表达使其结合至CyclinD2启动子特定的DNA序列并促动CyclinD2的转录过程32.Wnt通路还能直接上调CyclinD1,因为CyclinD1启动子区域包含LEF-1结合位点,而该位点被认为是Wnt通路的直接作用靶点33.?-catenin在胞核内与淋巴细胞增强子结合因子1(LEF-1)和T细胞因子-4(Tcf-4)结合并作为转录共激活子启动下游基因(Slug、Cdx-1、Id2和ENC1等)表达.APC上?-catenin结合位点的减少水准与Wnt通路中?-catenin/LEF-1/Tcf-4复合物增加的水准呈负相关34,而?-catenin/LEF-1/Tcf-4的增加导致了结肠上皮细胞间紧密连接蛋白ZO-1减少、胞间桥粒等连接蛋白降解、细胞骨架重组、细胞离体和获得迁移水平35,还能够直接作用于AP-1转录因子复合物中c-jun和fra-1的启动子部位使该转录复合物增多、上调uPAR转录36.此外,该复合物还能上调ZEB1表达(高表达于FAP腺瘤、结肠腺癌上皮细胞,且与胞核?-catenin水平呈正相关37),而ZEB1能抑制E-cadherin生成38,且该转录激活复合物参与了腺瘤转变为腺癌甚至肿瘤转移的全过程39.以上过程最终使结肠上皮细胞经历EMT过程(如细胞间连接蛋白降解、细胞迁移水平增强和获得间质表型等)并向恶性转化.另外,CK2?是一种高度保守的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶,能够磷酸化多种底物并在多种生理病理过程中起重要作用40.正常结肠上皮细胞逐渐演变成腺瘤或腺癌的过程被认为与EMT及E-cadherin、Vimentin和?-catenin等基因表达改变紧密相关.Zou等40发现CK2?表达于正常结直肠上皮细胞和结直肠腺瘤/腺癌细胞,通过调节参与细胞周期的癌基因c-myc和抑癌基因p53和p21等影响了大肠癌的演变过程.CK2?敲除或转染CK2?SiRNA后上皮标志物E-cadherin表达显著升高、间质标志物vimentin表达降低,还能造成细胞中转录因子Snail1、Smad2/3和癌基因c-myc的表达下降,以上结果说明CK2?能够对上皮间质转变起到某种水准的抑制作用,但是CK2?影响结肠腺瘤向大肠癌转变的具体机制尚未完全明确.3microRNAs介导的EMT在大肠癌发生发展中的作用microRNAs是一类长度在18-25nt的单链寡核糖核苷酸的非编码RNA,具有高度的保守性、组织特异性和发育时序性41,在转录后水平通过负向调节mRNA发挥其功能,与mRNA的靶向识别以与3''''末端UTR互补性结合为基础42.mi-croRNAs翻译水平的抑制作用常伴随由poly(A)尾加速脱腺苷化和后续核酸外切消化导致的靶mRNA水平减少43,而且microRNAs控制其靶点特异性的关键区域在5''''末端2-7个碱基对的种子序列44,能够在细胞增殖、分化、凋亡、新陈代谢及胚胎发育等过程中起调控作用45,部分microRNAs通过调控癌基因和肿瘤抑制基因的表达;部分通过直接作为癌基因或肿瘤抑制基因参与了大肠癌的病理过程46.虽然microRNAs参与大肠癌发生发展的相关研究较多,但相关microRNAs在大肠癌中介导EMT的研究仍较少.研究证实在很多原发肿瘤及相对应转移瘤中存有不同水准的microRNA表达,在蛋白络氨酸磷酸酶(PTP)Pez诱导MDCK的细胞系中发现了TGF-?参与EMT的过程,因为在该细胞系中发现了细胞间连接缺失和间质表型过表达.此外通过RT-PCR还发现miR-200家族(miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141和249)及miR-205表达的下调,而稳定的miR-200s过表达能够阻止TGF-?诱导的EMT,提示miR-200s是EMT的关键调控因子,且miR-200s是通过抑制ZEB1和SIP1的翻译来调控EMT的47.关于miR-200家族、ZEB1和SIP1,我们推测上皮细胞和间质细胞表型之间的转化是由ZEB1和SIP1的水平决定的.ZEB1和SIP1结合至目的基因如上皮细胞关键基因E-cadherin启动子成对的ZEB样E-Boxs(CACCTG)上从而抑制这些基因的转录48.以上证据提示miR-200s的丢失可能导致肿瘤的侵袭性增强,甚至造成远处转移.TGF?、TNF?由浸润的炎症细胞或肿瘤细胞产生,已被证实能够诱导结肠癌细胞发生EMT,在结肠癌SW480细胞系中通过miRNA表达分析发现稳定敲除ZEB1能够导致胞间连接蛋白E-cadherin表达上调、细胞迁移和侵袭的水平下降,而miR-141、miR-200b和miR-200c的表达水平明显升高,且miR-141、miR-200c的表达上调最为明显.此结果也被RT-PCR检测所证实,提示这两种miRNA参与了结肠癌EMT过程49.而Colwell50利用TGF?/TNF?诱导LIM1863大肠癌细胞发生EMT的过程中发现miR-21和miR-31表达水平明显升高;蛋白定量分析发现miR-21和miR-31促动了TGF?诱导的EMT的过程,与miR-200抑制EMT上游调控因子ZEB1/2不同,miR-21和miR-31主要作用于EMT下游因子T淋巴瘤侵袭转移蛋白1(TIAM1),后者是一种RacGTPase交换因子51.此外,miR-9和miR-335通过直接抑制E-cadherin和SOX4合成促动了大肠癌细胞转移.以上结果说明某些microRNA能够在TGF-?信号通路的下游发挥作用从而促动结直肠癌的发生和转移.启动子超甲基化和肿瘤抑制基因沉默是肿瘤形成的重要分子标志.Davalos等52通过大肠癌原发肿瘤微切除证实5''''-CpG岛超甲基化相关的miR-200b/200a/429和miR-200c/141多顺反子转录沉默是调节EMT和MET转变的重要步骤,也是大肠癌肿瘤进展的关键,并发现miR-200超甲基化和ZEB1/ZEB2上调与CDH1、CRB3和LGL2表达下调相关;TGF?诱导的EMT中miR-200超甲基化失活伴随着E-cadherin丢失和Vimentin增加53;Twist基因启动子获得CpG岛超甲基化后即可诱导结肠上皮细胞发生间质转化.此外,其他组蛋白修饰基因,如LSD1、CREB结合蛋白、SIRT1等也参与了EMT过程.deKrijger等46发现36%的大肠癌原发肿瘤中miR-34a表达下降,部分归因于TP53的突变,部分是因为启动子甲基化;EMT激活因子TGF?上调也促动了miR-21和miR-31表达,后两者在大肠癌中促动了TGF?诱导的EMT过程.此外,miR-373、miR-126和miR-196a转染的大肠癌细胞则显示出明显肺转移潜能.Sreekumar等54证实E-cadherin表达受miR-9直接调控而转录抑制,miR-199和miR-218则是间质特征性蛋白N-cadherin的潜在直接调控mi-croRNA.miR-138、miR-488和miR-151能够在EMT过程中调节FAK的表达水平从而影响大肠癌肿瘤细胞的迁移水平.4大肠癌中EMT的相关信号通路在EMT介导大肠癌发生发展过程中伴随着众多信号通路的激活,将胞外信号传导入胞内引起E-cadherin、Vimentin等异常、表型改变、基底膜降解、上皮细胞向间质转变和细胞迁移等一系列变化,最终导致正常结肠上皮细胞转变为大肠癌细胞.4.1Wnt/?-catenin和FGF信号传导通路Wnt信号需要通过标准和非标准的信号通路传导,FGF信号通过PI3K-AKT、MAPK和PLC?通路传导.GSK3?是Wnt标准信号传导通路和FGF依赖性PI3K-AKT信号传导通路的关键分子.标准的Wnt信号通路决定细胞的分化方向,非标准的信号通路控制细胞的极性和运动潜能,前者通过卷曲家族受体(Frizzled)和LRP5/LRP6受体实行信号转导,后者通过Frizzled和ROR1/2共同受体实行信号传导.LRP5和LRP6是LDL家族的蛋白分子,胞外有Wnt结合位点,胞内有Axin模体结构.除Wnt信号外,?-catenin为实现在蛋白化及蛋白酶体介导的降解而与GSK3?结合并被后者磷酸化55,标准的Wnt信号诱导Friz-zled-Dishevelled复合物与LRP5/LRP6-AXIN-FRAT结合,使?-catenin从GSK3?释放,最终在胞核中稳定的累积.?-catenin与TCF/LEF、BCL9/9L结合成TCF/LEF-?-catenin-Legless-PYGO复合物,作为Wnt信号通路的效应物56.非标准Wnt信号通路中ROR1和ROR2是受体型络氨酸激酶,胞外为Wnt结合位点,胞内为CKI?结合结构域,RhoA、c-JUN、N末端激酶(JNK)、Nemo样激酶(NLK)是非标准Wnt信号通路的效应物.FGF与受体结合后诱导受体二聚化、络氨酸激酶活化及受体自身磷酸化,FRS2、FRS3和PLC?与磷酸络氨酸残基相互作用被募集至FGF 受体,然后FRS2/3招募GRB2、SHP2,FRS2/SHP2/GRB2复合物募集GAB1激活PI3K,导致GSK3?活性下降、Snail-EMT级联反应激活、E-cadherin/?-catenin表达下调、结肠上皮细胞恶性转化,最终参与了大肠癌的发生发展过程57.基因分析发现Dishevelled是Wnt通路的正向调控蛋白,它发挥作用时处于受体下游、?-catenin的上游,能导致c-Myc和cyclinD基因在结肠癌细胞中出现扩增58.4.2Ras信号传导通路Ras蛋白在调节大肠癌发生发展的信号通路中起着重要作用.生长因子活化的受体激活后,活化的Ras通过Raf激酶激活MAPK激酶(MEK1、MEK2),导致胞外ERK1、ERK2激活59.ERKs位移至细胞核并激活核转录因子,如Elk-1、ATF-2、ETS1/2,使癌基因转录迅速开启.首先,BRAF是Raf家族的一员,他的突变与增强了的激酶活性相关,且在9%-11%的结直肠癌中发现此现象;其次,在30%-40%的腺瘤和76%的结直肠癌肿瘤中证实MEK磷酸化及激活;再次,结直肠癌中表现ERK的高度激活,且证实ERK1、ERK2活性在肠道肿瘤中明显升高;最后,试验证实阻断MEK/ERK抑制了结肠癌细胞的生长,表明ERK参与了结肠癌细胞的增殖.MEK1通过Egr-1、Fra-1增强Snail1/2表达而下调E-cadherin60.另有研究证实结肠上皮细胞表达活化的MEK1获得了向肿瘤细胞转变及转移的潜质.除MAPK途径外,Ras还可通过PI3K和RhoGTPase或与TGF-?协同诱导大肠癌EMT.PI3K激活后影响EMT过程的机制如前所述;此外,PI3K/Akt能够使RhoGTPase激活,也能与TGF?通路相互作用从而影响大肠癌EMT过程61.4.3PI3K信号传导通路磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)通路对正常细胞代谢、生长及肿瘤进展起着重要作用.PI3K的抑制因子PTEN缺失(10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源敲除)与结肠肿瘤相关,证实PI3K信号通路在大肠癌发生过程中起着重要作用.近年来研究提示66%-70%的大肠癌中PTEN表达下调,且与微卫星不稳定紧密相关.此外还证实TNF?造成了PTEN下调.IEC-6和HIE细胞敲除PTEN后?-catenin表达水平明显升高,大肠癌SW480细胞中V-catenin表达也有轻度升高,提示?-catenin的表达受PTEN调控.利用LY294002或Wortmannin抑制PI3K降低了c-Myc和cyclinD1表达,而在RIE-1细胞中敲除PTEN则显著上调了上述蛋白的表达;同样在IEC-6和HIE细胞中使PTEN沉默增加了c-Myc和cyclinD1的表达,说明PTEN丢失能够通过促动细胞增殖、抑制凋亡而影响大肠癌的发生62.Bowen等63发现在野生型PTEN结肠肿瘤细胞中Akt2过表达导致了肿瘤微转移的形成,提示Akt可能是作为TGF-?1下游调控因子发挥作用的.PI3K/Akt通路下游的效应分子mTOR激酶调控着CRC肿瘤的发生,且证实mTORC1和mTORC2通过RhoA和Rac1通路调控着结肠癌细胞的迁移水平.4.4Notch和Hedgehog信号传导通路Notch通路在胚胎发育和内环境稳定中发挥着重要作用,其异常激活参与了多种肿瘤的发展过程.该通路激活是由Notch配体(Jag1、Jag2、DLL1、DLL3和DLL4)结合至相对应受体上引起的.配体在细胞外被蛋白酶裂解、在胞内被?-分泌酶裂解64,使得Notch胞内结构域(NICD)转至细胞核,在胞核中与CSL和其他共刺激因子如Maml1、2、3构成转录激活复合物,最终激活Notch通路的靶基因Hes和Hey1,使上皮细胞恶性转化.研究显示大肠癌EMT的诱导因子ZEB1可通过抑制miR-200表达而稳定Notch通路的Jag1、Maml2和Maml3,并证实ZEB1通过提升Jag1的表达而增强Notch通路激活通路存有交互作用66.虽有研究67证实Hedgehog通路能诱导Snaill表达上调,但是尚未证实Hedgehog对Snaill有直接转录激活作用.另外Hedgehog能诱导JAG2表达上调、促动TGF?分泌68,TGF-?1激活使胞核内NF-?B调控的ZEB1和ZEB2表达上调,同样使Smad-Sp1调控的间质标志物Vimentin等表达上调从而促动大肠癌细胞迁移及侵袭.5结论在胚胎发育中EMT是必需的生理过程,而肿瘤组织诱导产生的EMT则是肿瘤浸润和转移的重要机制之一.当前,越来越多的证据表明EMT在与肿瘤发生、发展机制中起着重要的作用,随着对EMT作用机制的研究持续深入以及对其信号通路和关键分子的逐步了解,相关的研究结果为临床治疗肿瘤提供了重要的靶点与途径.因为EMT主要是由E-cadherin 的转录抑制因子诱发的,所以借助靶向抑制Snail等的治疗方法为防止肿瘤进展提供了可能.此外,EMT信号传导通路中的关键分子GSK-3?、PAK和TGF?等将来也有可能成为阻断EMT的重要靶点.虽然当前对EMT 发生机制的研究尚未完全清楚,但是随着相关研究的持续深入,人们对EMT的了解将会变得更加清晰.上皮细胞转化大肠发展。
cx43蛋白结构
cx43蛋白结构cx43蛋白是一种在细胞之间形成通道的蛋白质，它在细胞间的通信和信号传递中起着重要的作用。
本文将介绍cx43蛋白的结构及其功能。
首先，让我们来了解一下cx43蛋白的结构。
cx43蛋白是由单个蛋白分子组成的，每个蛋白分子由4个亚单位组成，形成一个四聚体。
每个亚单位包含4个跨膜螺旋和2个胞外环，这些结构特征使得cx43蛋白能够穿越细胞膜并形成通道。
这些通道允许离子和小分子在细胞之间快速传递，从而促进细胞之间的相互作用。
除了形成通道以外，cx43蛋白还具有其他的功能。
它能够与其他细胞蛋白相互作用，形成多种复合物，参与细胞的黏附、迁移和增殖等过程。
此外，cx43蛋白还可以通过调节细胞凋亡、细胞周期和细胞分化等细胞生理过程来影响细胞的功能。
cx43蛋白的功能对于维持机体的正常功能至关重要。
例如，在心脏和神经系统中，cx43蛋白的通道功能可以帮助细胞之间传递电信号和化学信号，从而协调心脏的收缩和神经传导。
此外，cx43蛋白在肾脏和肝脏等器官中也发挥着重要作用，参与物质的转运和代谢调节。
然而，cx43蛋白的异常表达或突变可能导致疾病的发生。
研究发现，cx43蛋白的突变与一些遗传性疾病的发生有关，如先天性心脏病和白色病等。
此外，cx43蛋白的表达异常也与一些肿瘤的发生和发展有关，如乳腺癌和前列腺癌等。
因此，深入研究cx43蛋白的结构和功能对于揭示其在疾病中的作用机制具有重要意义。
为了更好地理解cx43蛋白的结构和功能，科学家们利用了多种方法进行研究。
通过X射线晶体学、核磁共振和电子显微镜等技术，科学家们成功解析了cx43蛋白的高分辨率三维结构，并揭示了其通道的开闭机制。
与此同时，利用转基因动物模型和细胞培养系统，科学家们还研究了cx43蛋白在细胞间通信和信号传递中的作用。
综上所述，cx43蛋白是一种重要的细胞间通道蛋白，它通过形成通道和参与细胞的黏附、迁移和增殖等过程来发挥功能。
对于理解cx43蛋白的结构和功能，以及其在疾病中的作用机制，具有重要的意义。
2024CAH-X综合征研究进展(全文)
CAH-X综合征研究进展（全文）摘要CAH-X综合征是指先天性肾上腺皮质增生症（CAH）患者中，合并肌腱蛋白X（TNX）缺陷而出现埃勒斯-当洛综合征表型的特殊亚群，占CAH 患者的10%~15%。
TNX缺陷可导致一系列结缔组织症状，包括全身性关节活动过度、皮肤过度伸展、反复关节脱位、慢性疼痛、心脏缺陷等，严重影响患者生存质量。
CAH-X 综合征的遗传学病因是CYP21A2和TNXB基因的连续性缺陷，由于致病基因的复杂性，其分子诊断充满挑战。
现对CAH-X综合征研究进展进行综述，以提高临床医师对于这一新发现疾病的认识。
关键词先天性肾上腺皮质增生症；CAH-X综合征；埃勒斯-当洛综合征；TNXB 基因先天性肾上腺皮质增生症（congenital adrenocortical hyperplasia,CAH）是一类肾上腺类固醇合成酶缺乏的常染色体隐性遗传病，由CYP21A2基因缺陷所致的21-羟化酶缺乏症（21-hydroxylase deficiency,21-OHD）是CAH中占比约95%的主要类型，以肾上腺皮质功能不全和高雄激素血症为临床特征［1］。
埃勒斯-当洛综合征（Ehlers-Danlos syndrome,EDS）是一组异质性遗传性结缔组织病，以全身性关节活动过度、皮肤过度伸展和组织脆性为特点［2］。
一部分EDS是由于肌腱蛋白X（tenascin-X,TNX）缺陷所致，编码TNX的TNXB 基因与编码21-羟化酶的CYP21A2基因紧密连锁。
现已发现一种CYP21A2及TNXB基因的连续性缺陷，可同时引起21-OHD和EDS表型，称为CAH-X综合征。
自该综合征于2013年被命名以来，全球范围内累计报道的患者数量已近200例，但鲜有中文文献报道。
近年研究显示，CAH-X综合征在CAH患者中占比10%~15%［3-8］。
为提高临床医师对于这一新发现疾病的认识，现就CAH-X综合征研究进展进行综述。
莫沙必利联合米曲菌胰酶片对功能性消化不良模型小肠Cajal间质细胞的影响及其机制的研究
莫沙必利联合米曲菌胰酶片对功能性消化不良模型小肠Cajal 间质细胞的影响及其机制的研究李伟冬; 江舒曼; 贾林【期刊名称】《《重庆医学》》【年(卷),期】2019(048)019【总页数】5页(P3249-3252,3256)【关键词】消化不良; 莫沙必利; 米曲菌胰酶片; Cajal间质细胞【作者】李伟冬; 江舒曼; 贾林【作者单位】广东省广州市第一人民医院消化内科 510180【正文语种】中文【中图分类】R573.9Ⅳ诊断标准将功能性消化不良(FD)定义为起源于胃十二指肠的症状[1]，其病因复杂，病程迁延，复发率高，严重影响患者生存质量。
国内FD的发病率约20%，其门诊量占消化专科的60%～70%[2]。
国内外已有不少研究报道莫沙必利联合米曲菌胰酶片治疗FD，能够影响患者胃肠激素的表达水平，改善患者胃动力障碍，但关于其内在机制的研究报道极少。
有报道认为核因子-κB(NF-κB)的激活可以促进影响胃肠道损伤的炎性因子的表达水平上调，在FD的发病机制中起到了关键性的作用[3]。
本研究设想莫沙必利联合米曲菌胰酶片可通过影响NF-κB的表达，调控一系列促炎细胞因子及胃肠激素的表达水平，从而达到治疗FD的效果。
本研究构建了Cajal间质细胞(ICC)FD模型[4]，并检测了莫沙必利和米曲菌胰酶片单用及联用治疗前后细胞胃肠激素及NF-κB等促炎因子的表达变化，初步探索其作用机制，希望能为进一步的临床研究提供实验基础并为FD治疗提供新的治疗靶点，现报道如下。
1 材料与方法1.1 实验动物 Balb/c小鼠及SD大鼠由南方医科大学实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK(粤)2016-004。
培养在温度为22 ℃、湿度为60%～70%的环境中，每天12 h光照/黑暗交替，自由摄食。
1.2 方法1.2.1 原代小鼠小肠ICC培养、鉴定及分组选用Balb/c小鼠5只，雌雄不限，禁食24 h后处死；取出小肠，于显微镜下剥离小肠黏膜层后，将小肠组织剪成碎片；将Ⅱ型胶原酶(批号1202775，美国Gibco公司)加入盛有小肠碎片组织的烧杯中，于37 ℃消化30 min,离心，用Hank′s液(批号12350039，美国Gibco公司)重悬沉淀，过200目筛除去大块组织；用M199培养基(批号1302027，美国Gibco公司)培养细胞，放入5% CO2，37 ℃条件下培养，隔天换液，继续培养。
SOX10mRNA在先天性巨结肠肠壁中的表达
先天性巨结肠症（Ｈｉｒｓｃｈｓｐｒｉｎｇ’ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＨＤ）是小儿外科临床一种很常见的消化道发育畸形，是一种先天性疾病。
目前研究已表明，ＨＤ是由于多基因和环境因素共同作用的结果。
近年来，ＳＯＸ１０基因参与神经元的发育越来越受到人们的关注。
ＳＯＸ１０基因编码为ＳＲＹ（性别决定Ｙ基因）相关高可变区转录因子，位于染色体２２ｑｌ３，其首先在鼠体克隆成功。
ＳＯＸ１０基因编码产物为一个ＳＲＹ相关转录因子家族的成员，在ＥＮＳ始祖细胞迁移至消化管间质组织之前表达。
以前关于ＳＯＸ１０表达模式的研究主要是在胚胎时期［１］，近年来有关出生后组织中ＳＯＸ１０的细胞分布及表达已有报道［２］。
国内相关研究较少。
本文运用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测ＳＯＸ１０ｍＲＮＡ在散发性ＨＤ肠壁中的表达，进一步了解ＨＤ在分子基础上的发病机制，为临床提供参考。
材料与方法一、临床资料实验组：２００３年７月至２００４年７月共１２例ＨＤＳＯＸ１０ｍＲＮＡ在先天性巨结肠肠壁中的表达黄华１陈琦２曹振杰２侯广军１张二划１黄敏１杨启政２【摘要】目的研究性别决定区Ｙ基因相关高可变区基因１０（ＳＲＹｒｅｌａｔｅｄｈｉｇｈｍｏｂｉｌｉｔｙｇｒｏｕｐ－ＢｏＸｇｅｎｅ１０，ＳＯＸ１０）在先天性巨结肠（Ｈｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇ’ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＨＤ）肠壁中的表达情况，以进一步了解ＨＤ在分子基础上的发病机制。
方法分别取１２例先天性巨结肠病例的手术标本狭窄段、移行段及扩张段，随机取１２例非巨结肠手术病例（如结肠造瘘或关瘘手术）作为对照组，提取平滑肌组织总ＲＮＡ，应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增目的基因和看家基因片段，观察病变段和正常段ＳＯＸ１０ｍＲＮＡ的表达，并与看家基因（β－ａｃｔｉｎ）在病变段和正常段的表达比较，进行统计学分析。
结果ＳＯＸ１０ｍＲＮＡ在ＨＤ患儿痉挛段呈低表达，在扩张段及正常对照组呈高表达。
痉挛段ＳＯＸ１０ｍＲＮＡ的表达量与移行段、扩张段及正常对照组比较，差异均有统计学意义；而移行段、扩张段及对照组比较，差异无统计学意义。
cx43蛋白结构
cx43蛋白结构1.引言概述部分的内容可以从以下几个方面展开：1.1 概述cx43蛋白是一种跨膜蛋白，属于连接蛋白家族的一员。
它被广泛地表达在多种细胞类型中，包括心肌细胞、神经细胞、肾细胞等。
作为细胞间通讯的重要组成部分，cx43蛋白在维持细胞内外的信息传递和调控细胞功能方面起到关键作用。
cx43蛋白在细胞间通讯中具有两种主要形态：单体和连接形式。
单体形态主要存在于细胞质中，而连接形式则位于细胞膜上，形成了细胞间通道，促进细胞间的物质交换。
这种物质交换包括离子、细胞信号分子和小分子等。
通过对cx43蛋白的研究，科学家们发现了其特殊的结构特点。
cx43蛋白由约382个氨基酸组成，具有多个膜通道结构域，包括胞外环、胞内环和膜间融合区域等。
这些结构域的存在使得cx43蛋白能够在细胞膜上形成连接形态，从而实现细胞间通讯功能。
此外，cx43蛋白的结构与其功能密切相关。
一些突变体的研究表明，cx43蛋白的结构变化可能导致其通道功能的改变，甚至对细胞的功能和健康产生不良影响。
因此，深入了解cx43蛋白的结构特点对于揭示其功能和相关疾病的发病机制具有重要意义。
综上所述，cx43蛋白作为一种重要的细胞间通讯分子，在细胞间的物质交换和维持细胞功能方面发挥着关键作用。
通过对其结构特点的研究，我们能更好地理解其功能和相关疾病的发病机制，并为未来的临床治疗提供理论基础。
在接下来的部分，本文将对cx43蛋白的结构进行详细讨论，并总结其结构特点及研究方向。
1.2 文章结构本文的结构如下：第一部分是引言，主要包括三个方面内容：概述、文章结构和目的。
在概述部分，将简要介绍cx43蛋白结构的重要性和研究现状。
文章结构部分将详细介绍本文的组织结构和各部分的内容安排。
目的部分将明确本文的研究目标和意义。
第二部分是正文，主要包括两个方面内容：cx43蛋白的基本特征和cx43蛋白的结构。
在cx43蛋白的基本特征部分，将系统地介绍cx43蛋白的相关基本信息，如分子量、氨基酸序列、功能等。
Cx43基因对小鼠近端流出道隔心肌化过程的调控机制研究.doc
Cx43基因对小鼠近端流出道隔心肌化过程的调控机制研究锥干部畸形是常见的复杂性先天性心脏病(先心病),是导致儿童死亡的主要原因之一。
近端流出道对锥干部的发育起着至关重要的作用。
近端流出道隔是指半月瓣水平及瓣下的流出道分隔,此隔起初是由心内膜嵴形成的一个间充质形式的垫组织。
在心脏发育过程中,近端流出道隔的间质成分被心肌成分取代,此过程称为“心肌化”。
心肌化过程是流出道发育过程中的一个重要事件,心肌化障碍可导致流出道的结构和功能异常,因此阐明流出道隔心肌化的形成过程将有助于进一步揭示流出道畸形的发病机制。
一些参与或影响心肌化过程的可能的细胞和分子机制被相继提出,其中心脏神经嵴细胞、细胞凋亡和转化生长因子(transforming growth factor, TGF)β2逐渐引起人们的注意。
近年来人们还发现间隙连接蛋白(Conecxin, Cx)43与胚胎心脏锥干部的发育密切相关。
Cx43缺失和过表达模型均显示了右室流出道畸形和梗阻,并且心脏神经嵴细胞可能参与了其发病机制。
因此,本课题利用Cx43基因敲除(knockout, KO)小鼠模型,旨在研究Cx43在心肌化过程中的作用及其可能的机制;进一步揭示Cx43KO小鼠锥干部畸形的发病机制。
第一部分正常小鼠心脏流出道隔的心肌化过程研究研究目的探讨心脏近端流出道隔心肌化过程的时空规律以及心脏神经嵴细胞、细胞凋亡在这一过程中的可能作用。
材料与方法成年2月龄C57/BL6小鼠交配,选用胎龄(embryonic day, E)11.5天(day, d)至出生后1d小鼠为研究对象。
采用免疫组化法测定横纹肌肌动蛋白α-SCA(α-Sarcomeric Actin),神经嵴细胞的标志物AP-2α(Activator protein-2a),凋亡相关分子Active Caspase-3的表达;采用TUNEL(terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dUTP nick end labeling)法原位检测细胞的凋亡程度。
CX43半通道在神经心肌保护和肿瘤发生中的研究进展解析
ｊｕｎｃｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈ
ｍｅｄｉａｔｅｓ ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｅｒｉａｌ ｅｘｃｈａｎｇｅｓ ａｎｄ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，ｉｓ
ｏｆ
ｅｏｎｎｅｘｉｎ（ＣＸ）ｆａｍｉｌｙ
ｅｍｂｅｄｄｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ．Ｂｅｓｉｄｅｓ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｎｇ ｇａｐ
Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
ｏｆ Ｐａｉｎ，Ｓｈａｎｇｈａｉ
Ｐｕｄｏｎｇ Ｎｅｗ Ａ
ｒｅａ
Ｇｏｎｇｌｉ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００１３５，Ｃｈｉｎａ（Ｘｕ Ｚ Ｗａｎｇ ｒ１）
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｘｕ
Ｊｉｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｄｊｘｘ０２＠１６３．ｃｏｒｎ
Ｇａｐ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ
称，６个ＣＸ单体汇聚形成同源六聚体，并相互包绕 形成亲水性通道。胞间两侧的膜相对，其各有一个 同源六聚体¨。，组合后即形成缝隙连接通道。如果六 聚体没有进行配对连接，其开口直接向外于细胞外 液，那么这个六聚体即称为半通道。在正常生理情 况下，缝隙连接是开放的，允许细胞间物质交换及 信息传递，但是半通道则始终处于关闭状态。
注的发生发展，与胶质细胞不同，心肌细胞的ＣＸ六
对神经保护有关的ＣＸ的研究主要围绕星形胶 质细胞膜上的ＣＸ４３展开。Ｒａｍｉ等［９ ３通过研究证实 在中枢神经系统损伤后，ＣＸ４３半通道处于开放状 态。但半通道在神经保护中的作用，现在存在截然 万方数据
聚体大部分时间均处于半通道状态，参与细胞内和 细胞外液小分子物质和水的转运。心肌细胞ＣＸ４３ 形成的半通道可能参与了心肌缺血／再灌注引起的
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1 04592 00612046100210001公开
文学论大位州学郑士
硕(科学学位)
Counexin43与Cajal间质细胞在先天性巨结肠结肠壁的分布的研究
院系学科专业作者导师姓名
名称:郑州大学第三临床学院门类:医学名称:外科学姓名:何智丽
、职称:陈琦教授
二零零九年五月郑州大学2009届硕士研究生毕业论文中文摘要
connexin43与cajal间质细胞在先天性巨结肠结肠壁的分布的研究
研究生何智丽导师陈琦郑州大学第三临床学院小儿外科河南郑州450052
摘要背景和目的先天性巨结肠(Hirsehsprung’5 diseas，HD)是小儿外科的常见病，临床症状主要为腹胀、便秘等肠动力障碍表现，以患儿的一部分肠壁缺失神经节细胞为特征表现，近几年有研究发现先天性巨结肠与Cajal间质细胞(interstitialeellsof eaja，ICC)减少和细胞间通讯功能障碍有关。ICC是胃肠道平滑肌细胞间的起搏细胞，它们可以产生自发性慢波并介导神经递质传递。ICC之间及 ICC与平滑肌细胞之间信号传递由缝隙连接(Gap Junction，GJ)介导，GJ是细胞间信息通讯的主要通道。缝隙连接蛋白是GJ基本构成部分，而缝隙连接蛋白43(connexin43，Cx43)是人类最重要的缝隙连接蛋白。本实验运用免疫组化方法观察Cx43和ICC特异性标志物c一kit在HD结肠壁的表达情况，并应用电镜技术观察HD结肠壁的ICC和缝隙连接的超微结构，以探讨二者与HD发病的关系。材料和方法1.应用免疫组化方法观察30例HD手术切除标本(分别取狭窄段和扩张段全层组织)和巧例正常结肠组织中c一kit和Cx43的表达;2.应用电镜技术观察5例新鲜HD手术切除标本(包括狭窄段和扩张段全层组织)中ICC和GJ的超微结构;3.统计学处理:所得到的计量资料分析采用单因素方差分析，最小显著差法(L sD);定性资料采用了检验;有统计学意义者进行了分割。显著水准取。一0.口，，才分割时调整检验水准为。一0.05/3一0.16“。
少郑州大学2009届硕士研究生毕业论文中文摘要
结果1.。一kit在HD狭窄段中的表达明显少于正常对照组和HD扩张段(尸<0.01)，在正常结肠和HD扩张段中表达比较差别无统计学意义(尸=0.535>0.05);2.Cx43在HD狭窄段中的表达较正常对照组和HD扩张段明显减少(P<0.01)，而在正常对照肠壁和HD扩张段中表达之间的差别无统计学意义(P=0.458>0 .05);3.扩张段平滑肌及ICC之间可见到缝隙连接，神经节完整，ICC围绕神经节分布。HD狭窄段可见孤立的ICC，其形态及内部结构未见明显变化。结论1.与神经节细胞缺如一样，先天性巨结肠病变肠管缺少Cajal间质细胞是HD的病理改变之一;2.先天性巨结肠病变肠管不仅Cajal间质细胞减少，而且存在缝隙连接蛋白connexin43表达和分布减少;3.ICC和connexin43数目和分布异常可能HD发病的原因之一。关键词:先天性巨结肠;Cajal间质细胞;缝隙连接蛋白43;透射电镜郑州大学2009届硕士研究生毕业论文英文摘要
Thestudyoflocalizationofconnexin43andinterstitial cellsofCajalincoloninHirsehsPrung’5 disease
PostgraduateHe Zhili
护几torThe DePartmentChen Qi
of surgeryofPediatriesTheThirdAffiliatedHosPitalofzheng劝ou universityZhengzhou Henan，450052
AbstraCtBaekgroundand objectiveHirsehsP姗g，5diseas(HD)15theeommonlyeneountereddiseasein PediatlseSurgery.ThemaineliniealsymPtoms15abdominaldistension，constiPationand 50on.HD15aeongenitalmalformationofembryoniehindguteharaeterisedby theabsenseofParasymPathetieintrisicganglioneellsinthesubmueosaland myenterie
Plexuses.ThePathoPhysiologyofHirschsPrung，5disease15notfully understood.Inreeentlystudies，HD15assoeiatedwithabseneeoraltereddistributionofthe interstitialeellsofCajal(ICC)andthedysfunetionofintercellular eommunieation.InterstitialeellsofCajalareeonsideredasPacemakereellsbetweengastrointestinal smoothmuseles:theyeangeneratesPontaneousslowwavesofthesmoothmuselelayers andmediateneurotransmission.IthasbeenrePortedthatthetransmembrane ProteintyrosinekinasereeePtore一kit15essentialforthedeveloPmentandfunetionof theICC.TheeellularnetworkofICC15eonneetedbyGapjunetionstoeaehotherand tothesmoothmusclecells.ThebasicuniteonformingtheGapjunetionchannels isaProteincalled“eonnexin，，.Connexin4315regardedasthemajorGaPjunetion Proteininmammalianvertebrates.Inthisstudyweusetheteelmologyof immunohistoe-
chemistytoinvestigatetheloealizationofgaPjuctionProtein43(Cx43)ande一kit inHirsehsPnmg，5disease(HD)eolon.Andweinvestigateultrastrueturalorganization of
111，权2郑州大学2009届硕士研究生毕业论文英文摘要ICCandGaPjunctionsinTransmissioneleetron mieroseoPy.Materialsand methods1.Weinvestigatethethedistributionofe一kit一PositiveICCsand immunohistochemieloealizationofGaPjunetionProteinConnexin43inthenormal(15)and HD(30)bowelusingwhole一mount PreParation:2.UsingtheteelmologyoftransmissioneleetronmicroseoPyinvestigate the
ultrastruetUralorganizationofICCandGapjunetions intheHDbowel:3.StatistiealanalysiswasearriedoutbyusingAVOVA，LSDin measure幻nentdata.Inqualitationdatathestatistiealanalysiswase而edoutby using扩一test.a一0.05waseonsideredas signifieanee.Results1.TheexPressionofe一kitProteininthesegmentsofdisteni15the same(介0.535>0.05)tothatinthesegmentsofnormaltissuesandhighersignifieantlythanthose intheseglnentsof stenosis(P<0.01):2.TheexPressionofCx43Proteininthesegmentsofdistent15the same(P二0.458>0.05)tothatinthesegmentsofnormaltissuesandhighersignificantlythanthose inthesegmentsof stenosis(P<0.01):3.UndereleetromieroseoPieexamination，gaPjunetionwasabseniorlessin theaganglioniePartofHD，butiteouldbeobservedinganglioniePart ofHD.Conelusion1.Withtheabsenceofganglioneells，likeHirsehsPrung，5diseaselaekof Cajalintestinalstromaleells15oneofthePathologicalehangesin HD;2.ResultsofourstudyshowthattheabnormaldistributionofICCandGap JunctionProteineonnexin43in HD;3.ThelackofICCandeonnexin43maybeonereasonofineidenee ofHD.K即words:HirsehsPrung，disease;Interstitialeells ofCajal:eonnexin43:Transmissioneleetron mieroseoPy