蛙心灌流实验报告

实验二离体蛙心灌流实验

专业：学号：姓名：

一、实验目的

1.学习离体器官（蛙心）灌流的方法。

2.观察理化因素对蛙心活动的影响。

二、实验原理

蛙心的灌流:蛙心无营养性血管，离体之后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间，心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。

心肌：

受体受体激动剂效应

β

1

肾上腺素

去甲肾上腺素心率增快、房室传导加速、心肌收缩力加强。

M 乙酰胆碱心率减慢、房室传导

减慢、心肌收缩力减

弱。

1.

含有NaCl、CaCl

2、KCl、NaH

2

PO

4

、 Na

2

HPO

4

和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。

2.0.65%NaCl灌流：

3.2%CaCl

2

灌流：

4.1%KCl灌流：

5.1:10000 E 灌流

6.1:10000 Ach灌流

7.心得安

β

1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β

1

受体结合，使E不能发挥作用。

8.阿托品

M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。

三、 实验器材

离体蛙心 任氏液、l ％KCl 溶液、2％CaC12溶液、0.65%NaCl 溶液、1:10000 肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、心得安、阿托品

四、 实验步骤

五、 结果与分析

心率：34次/min 最大收缩力：2.5g 最小收缩力：1.1g

图1 正常脉搏曲线

心率：35次/min 最大收缩力：1.6g 最小收缩力：1.1g

图2 0.65%NaCl 灌流脉搏曲线

任氏剂 0.65%NaCl

任氏液清洗

2%CaCl 2

任氏液清洗

1%KCl

任氏液 2.药物试剂

E 任氏液清洗 心得安+E 任氏液清洗 Ach

任氏液清洗 阿托品+Ach

任氏液

1.离子试剂

分析：细胞外液中Ca2+浓度降低，2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。

心率：38次/min

最大收缩力：3.5g

最小收缩力：1.1g

灌流脉搏曲线

图3 2%CaCl

2

分析：心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关。心肌肌浆网不发达，储钙能力差，易受细胞外钙离子浓度高低影响。细胞外液中Na+与Ca2+有竞争性抑制，细胞外液Ca2+浓度升高，细胞兴奋时内流Ca2+增加，心肌收缩力增强。慢反应细胞4期去极速度加快，心率增快。

心率：21次/min

最大收缩力：3.4g

最小收缩力：1.1g 图4 1%KCl灌流脉搏曲线

分析： K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制，细胞外液中K+浓度升高，K+抑制细胞膜对Ca2+转运，因此进入细胞内Ca2+降低，心肌的兴奋—收缩耦联作用减小，心肌收缩力减弱。

心率：35次/min

最大收缩力：3.5g

最小收缩力：0.9g 图5 肾上腺素灌流脉搏曲线

分析：肾上腺素与心肌细胞膜上的β

受体结合，心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透

1

性增强，肌浆中Ca2+浓度升高，心肌收缩力增强。而且肾上腺素使肌钙蛋白与钙离子亲和力下降，肌钙蛋白对钙离子的释放增强，肌浆网膜摄取钙离子的速度加快，钠-钙离子的交换增加，复极期向细胞外排出钙离子增多，心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显加强。

心率：34次/min

最大收缩力：2.5g

最小收缩力：1.1g 图6 心得安+E灌流脉搏曲线

分析：心得安是β1受体阻断剂，能够抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用，因此心率及心肌收缩力保持不变。

心率：33次/min

最大收缩力：2.5g

最小收缩力:1.1g 图7 乙酰胆碱灌流脉搏曲线

分析：乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，心肌细胞膜K+通道的通透性增强，促进K+外流，动作电位期间Ca2+内流减少，心肌收缩力降低。同时乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道，导致Ca2+内流减少，心肌收缩力降低。

心率：34次/min

最大收缩力：2.5g

最小收缩力：1.1g 图8 阿托品+Ach灌流脉搏曲线