菠菜色素的提取及分离
菠菜色素的提取和分离实验报告
菠菜色素的提取和分离实验报告
一、实验目的：
本次实验的主要目的是学习和掌握菠菜色素的提取和分离技术，了解菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。
二、实验方法：
1、制备样品：将新鲜的菠菜叶片洗净晾干，切碎成小块备用；
2、提取菠菜色素：将切碎的菠菜叶片加入适量无水乙醇，研
磨成泥状物，过滤后取得浸提液；
3、进一步提取：将浸提液过滤并再次提取，过滤得到过滤液；
4、分离：将过滤液使用氯仿进行分离，水相和氯仿相层的色
素分离；
5、测定：将得到的色素溶于适量乙醇，测定菠菜色素的吸光度。
三、实验结果：
经过提取和分离，得到了深绿色的液体，与纯菠菜色素溶液比
较后发现两者颜色相似。
测定得到吸光度为0.54。
四、实验分析：
本次实验成功提取和分离了菠菜色素，并得到了较为准确的测定值。
在实验中，氯仿和无水乙醇是常用的有机溶剂，主要是因为在这些溶剂中菠菜色素的溶解度较高。
但是，在实验操作过程中需要注意保持实验环境的卫生和安全，氯仿是一种易挥发的有机物，需要注意防火和防烟。
五、实验结论：
通过本次实验，我们成功地提取和分离了菠菜色素，并且得到了较为准确的测定值。
同时，我们也了解了菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。
本次实验的成功对于今后相关实验研究以及实际应用具有一定的指导意义。
菠菜色素的提取和分离实验报告
菠菜色素的提取和分离实验报告菠菜色素的提取和分离实验报告引言：菠菜是一种常见的绿叶蔬菜，富含多种营养物质，其中包括一种被称为菠菜色素的成分。
菠菜色素是一类天然的色素，具有良好的生物活性和抗氧化性质。
本实验旨在通过提取和分离的方法，研究菠菜色素的性质和应用。
实验材料和方法：材料：新鲜菠菜叶片、无水乙醇、丙酮、石油醚、二氯甲烷、硅胶G柱、色谱柱、色谱试纸等。
方法：1. 取适量新鲜菠菜叶片，洗净并切碎成细末状。
2. 将菠菜末置于研钵中，加入适量无水乙醇，浸泡30分钟，搅拌均匀。
3. 将菠菜浸提液过滤，收集滤液。
4. 取少量滤液，加入石油醚，振荡混合，使菠菜色素溶于石油醚中。
5. 将石油醚层收集，加入少量无水乙醇，使溶液变为淡绿色。
6. 将淡绿色溶液倒入色谱柱中，以无水乙醇为洗脱剂，收集洗脱液。
7. 将洗脱液浓缩，得到菠菜色素。
实验结果和讨论：通过以上实验步骤，我们成功地从菠菜中提取和分离出了菠菜色素。
在实验过程中，我们使用了无水乙醇作为提取剂，因为乙醇能够有效溶解菠菜中的色素成分。
同时，我们使用石油醚作为分离剂，因为石油醚能够与菠菜色素发生亲和作用，使其溶于石油醚中。
在分离过程中，我们使用了色谱柱和色谱试纸进行分离和检测。
色谱柱是一种常见的分离工具，通过其内部填充的固定相材料，能够将混合物中的成分按照其亲和性和分子大小进行分离。
我们选择了硅胶G柱作为固定相材料，因为硅胶G柱对菠菜色素具有较好的亲和性。
通过使用无水乙醇作为洗脱剂，我们成功地将菠菜色素从硅胶G柱中洗脱出来。
在实验中，我们观察到菠菜色素呈现淡绿色。
这是因为菠菜色素主要由叶绿素和类胡萝卜素等成分组成，这些成分赋予了菠菜独特的颜色。
叶绿素是一种绿色的色素，具有光合作用的功能。
类胡萝卜素则是一类黄、橙、红等颜色的色素，具有抗氧化和免疫调节等作用。
菠菜色素不仅在食品工业中有广泛应用，还在医药和化妆品等领域发挥着重要作用。
菠菜色素富含抗氧化物质，能够有效清除自由基，延缓衰老和预防疾病。
菠菜中色素的提取
菠菜中色素的提取及分离赵涛食品科学一实验目的1 通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法2 了解薄层色谱的基本原理，掌握薄层色谱的基本操作3 了解柱层析的基本原理，掌握柱层析的基本操作二实验原理菠菜的叶片中含有叶绿素（包括叶绿素a和叶绿素b）、叶黄素及胡萝卜素等天然色素。
叶绿素是绿色植物的主要色素，分子由脱镁叶绿素母环、叶绿酸、叶绿醇、甲醇、二价镁离子等部分构成。
高等植物中有两种叶绿素即叶绿素a和叶绿素b 共存，它们的含量约3：1，叶绿素a为一蓝黑色固体粉末，在乙醇溶液中为蓝绿色，并有深红色荧光，而叶绿素b为暗绿色固体粉末，其乙醇溶液为黄绿色，并有红色荧光。
叶绿素不溶于水，易溶于有机溶剂，常可用极性有机溶剂（例如丙酮、乙醇、乙酸乙酯等）从植物匀浆中提取它。
叶绿素存在于植物细胞的叶绿体中，与类胡萝卜素、类脂物质及脂蛋白复合在一起，分布在叶绿体内的蝶形体的片层膜上。
叶绿素a和叶绿素b及衍生物在600~700mm（红光）和400~500mm （蓝光）有尖锐的吸收峰，可借助这一特性来鉴定它们。
游离叶绿素很不稳定，对光和热都较敏感。
胡萝卜素是一种橙色的天然色素，属于四萜，为一长链共轭多烯，有α、β、γ三种异构体，，其中β异构体最多。
在植物组织中，它们可能以固态微粒或者以与蛋白质、脂质、或者糖类复合的形式存在，特别是在有色体中存在。
其为典型的脂溶性色素，易溶于石油醚，、乙醚而难溶于乙醇。
如遇氧化条件，易受氧化和光化学氧化形成加氧产物或者进一步分解为更小的分子，在受强热时可分解为多种挥发性小分子化合物。
叶黄素是一种黄色色素，与叶绿素同存在与植物体内，是胡萝卜素的羟基衍生物，较易溶于乙醇，在石油醚中溶解度较小。
色素所呈现的颜色和在叶绿体中的含量见下表：高等植物体内叶绿体色素的种类、颜色及含量比例项目叶绿素类胡萝卜素叶绿素a 叶绿素b β-胡萝卜素叶黄素颜色蓝绿色黄绿色橙黄色黄叶绿体内各色素的含量56 19 17 8色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同，或和其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组份分开。
实验十二-菠菜色素的提取和分析
实验十二-菠菜色素的提取和分析实验十二-菠菜色素的提取和分析菠菜色素的提取和分离一、实验目的1、通过绿色植物色素的提取，学习天然物质的提取方法；2、通过薄层色谱分析，掌握有机物色谱分析的原理和方法。
二、实验原理 1 菠菜色素的提取绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C 55H 72O 5N 4Mg)和叶绿素b(C 55H 70O 6N 4Mg)，其差别仅是叶绿素a 中一个甲基被甲酰基所取代从而形成了叶绿素b 。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素（C 40H 56）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即-胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡萝卜素，其中β-胡萝卜素含量最多，也最重要。
在生物体内，β-胡萝卜素受酶催化氧化形成维生素A 。
目前β-胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素A 使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（C 40H 56O 2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
N N NNH 3CCHCH 2RCH 2CH 3CH 3H 3COCO 2CH 3CH 2CH 2OO3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg叶绿素a （R = CH ）H 3C CH 3RCH 3H 3CRH 3CCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素（R = H ）叶黄素（R = OH ）H 3CCH 3CH 3CH 2OHCH 3CH 3维生素A2 薄层色谱原理常用TLC 表示，又称薄层层析，属于固液吸附色谱。
样品在薄层板上的吸附剂（固定相）和溶剂（移动相）之间进行分离。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一：菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素，它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。
菠菜是叶绿素含量较高的植物之一，因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素，探索最有效的提取方式。
2.材料与方法2.1 材料：- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法：- 方法一：无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的无水乙醚，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于乙醚中，然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法二：丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的丙酮，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于丙酮中，然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法三：乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的乙醇，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于乙醇中，然后离心10分钟收集上层液体。
3.结果在三种提取方法中，通过观察可以发现，方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色，而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。
利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度，发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高，而方法三的吸光度较低。
4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂，乙醚能有效溶解叶绿素，并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。
方法二使用丙酮作为提取溶剂，丙酮也能有效溶解叶绿素，并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。
方法三使用乙醇作为提取溶剂，乙醇对叶绿素的溶解能力较差，导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。
5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较，我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素，并且吸光度较高。
因此，在菠菜中提取叶绿素的实验中，建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。
实验报告二：叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一，它在光合作用中起着关键作用。
本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。
菠菜叶中色素的提取实验报告
菠菜叶中色素的提取实验报告一、实验目的1、了解菠菜叶中所含色素的种类和化学性质。
2、掌握从菠菜叶中提取和分离色素的实验方法。
3、学习使用分光光度计测定色素溶液的吸光度。
二、实验原理菠菜叶中含有多种色素，如叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素等。
这些色素在有机溶剂中的溶解度不同，因此可以通过萃取的方法将它们分离出来。
叶绿素 a 和叶绿素 b 为吡咯衍生物，可溶于有机溶剂，如乙醇、丙酮等。
叶绿素 a 为蓝绿色，叶绿素 b 为黄绿色。
叶黄素和胡萝卜素属于类胡萝卜素，叶黄素为黄色，胡萝卜素为橙黄色，它们也能溶于有机溶剂。
根据不同色素在层析液中的溶解度不同，在层析过程中，溶解度大的色素随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度小的色素扩散得慢，从而将不同的色素分离开来。
三、实验材料与仪器1、材料：新鲜菠菜叶2、仪器：研钵、漏斗、玻璃棒、分液漏斗、容量瓶、分光光度计、滤纸、脱脂棉等。
3、试剂：无水乙醇、石油醚、丙酮、层析液（石油醚：丙酮＝9:1）四、实验步骤1、提取色素称取 5g 新鲜菠菜叶，剪碎后放入研钵中，加入 5mL 无水乙醇、少许碳酸钙和石英砂，充分研磨成匀浆。
将研磨好的匀浆用漏斗过滤到分液漏斗中，用 5mL 无水乙醇冲洗研钵和漏斗，将滤液合并到分液漏斗中。
轻轻振摇分液漏斗，静置分层，放出下层的水相，保留有机相。
2、制备色素溶液将有机相转移到容量瓶中，用无水乙醇定容至 25mL，得到色素提取液。
3、色素的分离取一块干燥的滤纸，剪成 15cm×3cm 的长条，在一端剪去两角，在距离剪角一端 1cm 处用铅笔轻轻画一条横线。
用毛细吸管吸取少量色素提取液，在铅笔线处点样，每次点样后吹干，重复多次，使点样处形成一条细而直的色素线。
将点样好的滤纸放入装有层析液的层析缸中，层析液液面不能超过滤纸的铅笔线。
盖上盖子，进行层析。
当层析液前沿接近滤纸的上端边缘时，取出滤纸，用铅笔标记出色素带的位置。
4、色素的鉴定用分光光度计分别测定叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素溶液在不同波长下的吸光度，绘制吸光度波长曲线，确定最大吸收波长。
色素提取和分离实验报告
色素提取和分离实验报告色素提取和分离实验报告引言：色素是一类广泛存在于自然界中的有机化合物，具有丰富的颜色和多样的功能。
色素提取和分离是一项重要的实验技术，可以帮助我们深入了解色素的性质和应用。
本实验旨在通过提取和分离植物中的色素，探究其在不同溶剂中的溶解性和分离效果。
实验材料和方法：材料：鲜菠菜叶片、无水乙醇、丙酮、二氯甲烷、石油醚、氯化钠溶液、滤纸、试管等。
方法：1. 将鲜菠菜叶片切碎，放入试管中。
2. 加入适量的无水乙醇，用玻璃棒搅拌均匀。
3. 将悬浊液过滤，收集滤液。
4. 将滤液分成几份，分别加入丙酮、二氯甲烷和石油醚中，摇匀。
5. 观察不同溶剂中的色素溶解情况和分离效果。
结果和讨论：通过实验观察和记录，我们得到了以下结果和结论：1. 无水乙醇提取：将鲜菠菜叶片与无水乙醇混合后，溶液呈现出深绿色。
这是因为无水乙醇可以有效提取鲜菠菜叶片中的叶绿素，叶绿素是一种绿色的植物色素。
2. 不同溶剂中的色素溶解情况：在实验中，我们用丙酮、二氯甲烷和石油醚分别与提取得到的无水乙醇溶液混合，并观察其溶解情况。
结果显示，丙酮溶液呈现出深绿色，二氯甲烷溶液呈现出橙黄色，而石油醚溶液呈现出淡黄色。
这说明不同溶剂对色素的溶解性有所差异。
3. 色素的分离效果：在实验中，我们通过观察不同溶剂中的色素溶液，发现色素在不同溶剂中有不同的分离效果。
丙酮溶液中的色素分离效果最好，可以清晰地观察到绿色和黄色两个色带。
而二氯甲烷溶液中的色素分离效果较差，只能看到一个橙黄色的色带。
石油醚溶液中的色素分离效果最差，只能观察到一个淡黄色的色带。
这说明不同溶剂对色素的分离效果也有所差异。
结论：通过本实验，我们得出了以下结论：1. 无水乙醇可以有效提取鲜菠菜叶片中的叶绿素。
2. 不同溶剂对色素的溶解性有所差异，丙酮溶液中的色素溶解性最好。
3. 不同溶剂对色素的分离效果也有所差异，丙酮溶液中的色素分离效果最好。
实验的局限性和改进方向：本实验中我们只使用了鲜菠菜叶片作为色素的来源，未涉及其他植物材料。
从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇从菠菜中提取叶绿素实验报告 (1)1.1 仪器与试剂仪器：研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂：石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目～160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶，加入20 mL3：2(体积比)石油醚—乙醇混合液，适当研磨(不要研成糊状，否则会给分离造成困难)，用倾析法将提取液转移到分液漏斗中，每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。
洗涤时要轻轻旋荡，以防乳化。
弃去水乙醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥，干燥后滤入小圆底烧瓶，在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。
1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片，硅胶G经0.5％羧甲基纤维素钠调制后制板，在室温下晾干后在110°C活化1h。
选取效果最好的一块进行点样。
展开剂：（1）石油醚—丙酮=8:2（体积比）（2）石油醚—乙酸乙酯=6:4（体积比）取活化后的层析板，点样，放入预先选定展开剂的广口瓶。
瓶的内壁贴一张高5cm，绕周长4/5的滤纸，下部浸入展开剂中，盖上瓶盖。
待展开剂上升至规定高度时，取出层析板，晾干，做出标记。
分别用两种展开剂展开，比较不同展开剂的展开效果。
观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。
注意更换展开剂时，需干燥层析瓶，不允许前一种展开剂带入后一系统。
1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后，挤压除去气泡，放在层析柱底部。
在层析柱中加15cm石油醚。
加入中性氧化铝8克，打开柱下活塞，保持石油醚高度不变，氧化铝在柱子中堆积。
装完后，打开下端活塞，放出溶剂，直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止（不能使氧化铝表面露出液面）。
将浓缩液用滴管加到柱顶部，打开下端活塞，让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞，加数滴石油醚，打开活塞，使液面下降，几次反复，使色素全部进入柱体。
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菠菜色素的提取和色素分离姓名：学号：指导教师：成绩：摘要：利用石油醚，甲醇为萃取剂萃取叶片中的叶绿素，在薄层层析中时别离在两种不同的展开剂中展开比较展开剂的极性，在柱层析当选用适当的洗脱剂进行层析，当第一个有色成份即将滴出时，取一锥形瓶搜集的橙黄色溶液即胡萝卜素.关键词：菠菜色素、萃取、薄层色谱分析法、柱色谱正文：1.前言菠菜叶中含有叶绿素、胡萝卜素、和叶黄素等多种天然色素. 叶绿素是植物进行光合作用所必需的催化剂, 也是食用的绿色色素, 可用于糕点、饮料水等中, 添加于胶姆糖中还可排除口臭. 胡萝卜素的三种异构体中B-异构体具有维生素A 的生理活性, 可代替维生素A 利用, 也可作为食物工业中的色素利用, 最新研究报导, B-胡萝卜素还有防癌功能. 叶黄素是胡萝卜素的羟基衍生物, 在光合作用中能起搜集光能的作用. 由此可见, 叶绿素等天然色素有普遍的用途, 关于色素的提取与分离就显得很重要了。
叶绿体色素提取与分离实验比较复杂, 但又超级重要。
实验用层析法来进行, 依照叶绿体色素各成份在层析液中分派系数的不同, 将不同的叶绿素一一分开, 但在实验中, 常因实验材料中色素含量低提取制备较难, 层析分离后色带清楚度差, 乃至色带种类不全等诸多因素, 最后阻碍了实验结果。
其中叶绿体色素的提取制备、过滤与点样、分离与层析是取得良好的实验结果的关键问题,绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。
2.实验部份通过绿色植物菠菜色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方式；通过柱色谱和薄层色谱分离操作，加深了解微量有机物色谱分离的原理。
2.2实验原理色谱法是分离色谱法是分离色谱法是分离色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方式。
其分离原理是利用混合物中各个其分离原理是利用混合物中各个成份的物理化学性质的不同，被选择某一个条件使各个成份流过支持剂或吸附剂时，各成份可由于其物理性质的不同而取得分离。
与经典的分离提纯手腕不同，色谱法具有微量、快速、简便和高效等优势。
按其操作不同，色谱可分为薄层色谱、柱色谱、纸色谱、气相色谱和高压液相色谱等。
1. 柱色谱原理液体样品从柱顶加入，流经吸附柱时，即被吸附在柱中固定相（吸附剂）的上端，然后从柱顶加入流动相（洗脱剂）淋洗，由于固定相对各组分吸附能力不同，以不同速度沿柱下移，吸附能力弱的组分随洗脱剂第一流出，吸附能力强的组分后流出，分段接收，以此达到分离、提纯的目的。
2. 薄层色谱原理由于混合物中的各个组分对吸附剂（固定相）的吸附能力不同，当展开剂（流动相）流经吸附剂时，发生无数次吸附和解吸进程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前移动，吸附力强的组分滞留在后，由于各组分具有不同的移动速度，最终得以在固定相薄层上分离。
其应用要紧有：跟踪反映进程；鉴定少量有机混合物的组成；分离；寻觅柱色谱的最正确分离条件等。
绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)，其不同仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a的含量一般是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素（C40H56）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即a-,β-和γ-胡萝卜素，其中β-异构体含量最多，也最重要。
在生物体内，β-体受酶催化氧化即形成维生素A。
目前β-胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素A利用，也可作为食物工业中的色素。
叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量一般是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相较，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
提取制备中加入适量CaCO3( 碳酸钙)在植物叶片的液泡中含有机酸, 研磨提取叶绿体色素时, 加入适量的CaCO3 粉末, 能够避免叶绿体色素被破坏, 从而维持叶片的生理活性。
咱们从对如实验中发觉, CaCO3 对提取液阻碍较大, 不加Ca-CO3 的提取液放置一段时刻以后容易变黄, 而加Ca-CO3 的提取液那么无明显转变, 这说明不加CaCO3 的提取液容易受到外界破坏。
在加CaCO3 时, 用量应把握在每克绿叶用0. 2~ 0. 4 克CaCO 3 粉末为宜。
试剂与仪器试剂：95％乙醇, 丙酮,硅胶G ，中性氧化铝，甲醇，石油醚（60-90℃），丙酮，乙酸乙酯。
仪器：电子天平、研钵、布氏漏斗 、圆底烧瓶、 电炉、 滴管、显微载玻片、N N NNH 3CCHCH 2RCH 2CH 3CH 3H 3COCO 2CH 3CH 2CH 2OOCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg H 3CCH 3RCH 3H 3CH 3CCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素（R = H ） 叶黄素（R = OH ）叶绿素a （R = CH 3） 叶绿素b （R = CHO ）广口瓶、滤纸、少量脱脂棉、层析柱材料：新鲜菠菜叶片2.4 实验装置2.5实验方式与步骤实验流程图：实验方式：Ⅰ薄层层析法Ⅱ柱层析实验步骤：<1>菠菜色素的提取（提取液可为石油醚-甲醇、丙酮、CCl4、无水乙醇）取20g 新鲜菠菜叶于研钵中拌匀研磨5 分钟，残渣用20mL 的石油醚-乙醇（2:1）混合液进行提取，共提取两次。
把浸取液归并过滤，滤液转移到分液漏斗中，加入等体积的水洗涤后弃去基层的水-乙醇层、石油醚层再用等体积的水洗涤两次，以除去乙醇和其它水溶性物质。
石油醚层用无水Na2SO4进行干燥、浓缩为2 mL。
取一半做柱层析分离，其余留作薄层层析分析。
抽滤装置Ⅰ柱色谱分离（经常使用的吸附剂：氧化铝，硅胶，氧化镁，碳酸钙，活性炭等）（1）色谱柱的装填将10g中性氧化铝与10mml石油醚将拌成糊状，冰凝将其慢慢加入预先加了必然石油醚的色谱柱中，同时打开活塞，让石油醚流入锥形瓶中（以稳固速度装柱，不时敲打色谱柱，是色谱柱装的均匀）。
在装好的柱子上放厚的石英砂或一张滤纸，并非时用石油醚洗脱，以使色谱柱流实。
然后放掉多余的石油醚，直至液面方才达到石英砂或滤纸的顶部，关闭活塞。
（2）洗脱将取得的色素滤液用滴管警惕夹到色谱柱顶，加完后，打开活塞，让液面下降到柱面以上1mm左右，关闭活塞，加数滴石油醚，打开活塞，使液面下降，经几回反复，使色素全数进入柱体。
待色素全数进入柱体后，在柱顶警惕加约高度洗脱剂石油醚-丙酮溶液9:1（体积比）。
打开活塞，让洗脱剂逐滴放出，层析即开始进行，用锥形瓶搜集。
（3）分离当第一个有色成份即将滴出时，取另一锥形瓶搜集，得橙黄色溶液，它确实是胡萝卜素。
用石油醚-丙酮7:3（体积比）作洗脱剂，分出第二个黄色带，它是叶黄素。
再用丁醇-乙醇-水3:1:1（体积比）洗脱叶绿素a（蓝绿色）和叶绿素b（黄绿色）。
（溶剂的洗脱能力按递增顺序排列如下：己烷（石油醚）、四氯化碳、甲苯、苯、二氯甲烷、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、丙醇、乙醇、甲醇、水。
）表1 不同洗脱剂对叶黄素的洗脱成效比较Ⅱ薄层色谱的操作方式（1）点样将样品用低沸点的溶剂配成1-5％的溶液，用内径小于1 mm的毛细管点样。
点样前，先用铅笔在薄层板上距一端1 cm处轻轻划一横线作为起始线，然后用毛细管吸取样品，在起始线上警惕点样，斑点直径不超过2 mm；若是需要重复点样，那么待前次点样的溶剂挥发后，方可重复点样，以避免样点过大，造成拖尾、扩散等现象，阻碍分离成效。
假设在同一板上点两个样，样点之间距离在1-1.5 cm为宜。
待样点干燥后，方可进行展开。
（2）展开和展开剂薄层展开要在密闭的器皿中进行，加入展开剂高度为0.5 cm。
把带有样点的板（样点一端向下）放在展开器中，并与器皿成必然的角度。
盖上盖子，当展开剂上升到离板的顶部约1 cm处时掏出，并当即标出展开剂的前沿位置，待展开剂干燥后，观看斑点的位置。
（3）显色假设化合物不带色，可用碘薰或喷显色剂后观看，假设化合物有荧光，可在紫外灯下观看斑点的位置。
（1）薄层层析时，薄层板的制备要厚薄均匀，表面平整光洁。
（2）点样与展开应按要求进行，点样不能戳破薄层板面。
展开时，不要让展开剂前沿上升至底线。
不然，无法确信展开剂上升高度。
即无法求得RF 值和准确判定粗产物中各组分在薄层板上的相对位置。
物理常量参考文献：[1] 李好样、冯轶雪题目：菠菜色素的提取与分离杂志：太原师范学院学报（自然科学版）2004年9月第三卷第3版（64～66页）[2] 作者；欧阳菲题目：关于5叶绿体色素提取与分离的难点分析及其改良方式杂志：伊利教育学院学报 2001年6月第14卷第2期（39～95页）[3] 罗一鸣、唐瑞仁《有机化学实验指导》（中南大学出版社）195～197页[4] 王兴涌、尹文萱、高宏峰《有机化学实验》（科学出版社）183～185页[5] 王福来《有机化学实验》（武汉大学出版社）111～113页。