大庆油田油藏采出水的细菌群落结构_艾明强

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不同基质配比下黄瓜根际细菌群落结构及多样性分析

不同基质配比下黄瓜根际细菌群落结构及多样性分析

热带作物学报2024, 45(3): 641 652Chinese Journal of Tropical Crops不同基质配比下黄瓜根际细菌群落结构及多样性分析陈宏昊,唐小付*,聂圣贤,林佳佳,魏西,刘婷,任昊奎广西大学农学院,广西南宁 530004摘要:分析菇渣、锯末不同比例配比下黄瓜植株根际细菌群落结构特征发现,菇渣和锯末复配基质可替代常规商品基质泥炭(CK)栽培黄瓜,为新型基质栽培模式的应用提供依据。

与CK相比,用菇渣、锯末按照3种不同比例复配组成的基质栽培黄瓜,其产量、根际细菌多样性和丰富度指数间均显著提高,同时还影响根际细菌的代谢功能,其中菇渣与锯末比例为1∶1时(T2)表现最佳。

在门分类水平上,菇渣、锯末复配基质栽培条件下黄瓜植株根际中变形菌门(Proteobacteria)细菌丰度占比均低于CK,但拟杆菌门(Bacteroidota)细菌丰度占比均高于CK,且拟杆菌门(Bacteroidota)是菇渣、锯末复配基质栽培共有的优势细菌门类。

在属分类水平上,unclassified_c__Gammaproteo-bacteria、利姆诺杆菌属(Limnobacter)和朱氏杆菌属(Chujaibacter)是CK条件下黄瓜植株根系特有的优势细菌属;慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、短波单胞菌属(Brevundimonas)、Dokdonella属是菇渣与锯末比例为1∶3(T1)处理下特有的优势细菌属;菇渣与锯末比例分别为1∶1(T2)和3∶1(T3)条件下黄瓜植株根际未发现特有的优势细菌属。

通过物种Venn分析,在种分类水平上,菇渣与锯末复配比例在1∶3(T1)、1∶1(T2)和3∶1(T3)处理下均增加了黄瓜植株根际细菌种分类水平数量,提升了根际细菌丰富度和多样性。

关键词:黄瓜;高通量测序;细菌群落结构;功能预测中图分类号:S642.2 文献标识码:AAnalysis of Cucumber Rhizosphere Bacterial Community Structure and Diversity under Different Matrix RatiosCHEN Honghao, TANG Xiaofu*, NIE Shengxian, LIN Jiajia, WEI Xi, LIU Ting, REN HaokuiCollege of Agronomy, Guangxi University, Nanning, Guangxi 530004, ChinaAbstract: The structural characteristics of the rhizosphere bacterial communities of cucumber plants under different proportions of mushroom residue and sawdust were analyzed, and it was found that mushroom residue and sawdust compound substrate could replace conventional commercial matrix peat (CK) cultivation cucumber, which providing a basis for the application of a new substrate cultivation mode. Compared with CK, cucumber cultivated with substrate composed of mushroom residue and sawdust in three different proportions significantly increased its yield, rhizosphere bacterial diversity and richness index, and also affected the metabolic function of rhizosphere bacteria, among which the ratio of mushroom residue to sawdust was 1∶1 (T2). At the classification level, the proportion of bacterial abundance in Proteobacteria of cucumber plants under the cultivation of mushroom residue and sawdust compound substrate was lower than that of CK, but the proportion of bacterial abundance of Bacteroidota was higher than that of CK, and Bac-teroidota was the dominant bacterial phylum shared by mushroom residue and sawdust compound substrate cultivation. At the taxonomic level, unclassified_c__Gammaproteobacteria, Limnobacter and Chujaibacter were the dominant bac-terial genera unique to the root system of cucumber plants under CK conditions. Bradyrhizobium, Brevundimonas, and Dokdonella were the dominant bacterial genera with a 1∶3 (T1) ratio of mushroom residue to sawdust. Under the con ditions of 1∶1 (T2) and 3∶1 (T3) ratios of mushroom residue to sawdust, respectively, no dominant bacterial genus收稿日期 2022-11-03;修回日期 2023-01-05基金项目 广西重点研发计划项目(桂科AB1850031,桂科AB19245016,桂科AB23026097)。

tas图版法在火成岩岩性识别中的应用

tas图版法在火成岩岩性识别中的应用

第29卷 第6期2019年11月  

黑 龙 江 科 技 大 学 学 报

JournalofHeilongjiangUniversityofScience&Technology 

 Vol.29No.6

Nov.2019

TAS图版法在火成岩岩性识别中的应用

张庆国1ꎬ 吕星辉1ꎬ 王海娇2(1.东北石油大学地球科学学院ꎬ黑龙江大庆163318ꎻ2.大庆油田采油六厂配制四队ꎬ黑龙江大庆163318)

摘 要:针对火成岩岩性复杂ꎬ常规的岩性识别模型难以建立的问题ꎬ利用基于酸碱度分类的TAS图版法识别其储层岩性ꎮ在L井区营城组储层岩性特征分析的基础上ꎬ依据获取的ECS测井

数据ꎬ应用TAS图版识别研究区火成岩岩性ꎮ结果表明ꎬ研究区以酸性流纹岩、中酸性英安岩、安山岩和粒径较小的熔结凝灰岩为主ꎬ并有少量的火山角砾岩和基性玄武岩发育ꎬ且酸性流纹岩为该区成藏最有利岩性ꎮ该研究证实TAS图版法识别火成岩岩性可靠性高ꎮ关键词:火成岩ꎻ岩性识别ꎻTAS图版ꎻECS测井ꎻ测井评价doi:10.3969/j.issn.2095-7262.2019.06.008

中图分类号:P618.13

文章编号:2095-7262(2019)06-0678-04文献标志码:A

ApplicationofTASmapinlithologyidentificationofigneousreservoirs

ZhangQingguo1ꎬ LüXinghui1ꎬ WangHaijiao2(1.SchoolofEarthSciencesꎬNortheastPetroleumUniversityꎬDaqing163318ꎬChinaꎻ2.No.6OilProductionPlantPreparationTeam4ꎬDaqingOilFieldꎬDaqing163318ꎬChina)

Abstract:Thispaperismotivatedbythecomplexityofigneousrockswhichmakesdifficultthede ̄velopmentofconventionallithologyidentificationmodelsꎬandhighlightstheapplicationofTASmapmethodbasedonchemicalcomposition(pH)classificationtoidentifythelithologyofigneousrocks.Thestudyisfocusedonidentifyingthelithologyofigneousrocksinthestudyareabyanalyzingreservoirlithol ̄ogycharacteristicsofYingchengFormationinwellareaLandusingtheobtainedECSloggingdataandTASmap.Theresearchconcludesthatthestudyareaisdominatedbyacidrhyoliteꎬmiddleacidquartzꎬandesiteandfusiontuffwithsmallsizeandisaccompaniedbyasmallamountofdevelopedvolcanicbrec ̄ciaandbasicbasalt.Acidrhyoliteisthemostfavorablelithologyforaccumulationinthisare.ThisstudyprovesthatTASmapisreliableinidentifyingthelithologyofigneousrocks.Keywords:igneousrocksꎻlithologyidentificationꎻTASmapꎻECSloggingꎻwellloggingevaluation

大连湾石油污染沉积物中细菌群落结构分析

大连湾石油污染沉积物中细菌群落结构分析

大连湾石油污染沉积物中细菌群落结构分析高小玉;明红霞;陈佳莹;李江宇;韩俊丽;林凤翱;樊景凤【期刊名称】《海洋学报(中文版)》【年(卷),期】2014(000)006【摘要】大连新港“7.16”输油管道爆炸溢油事故发生后,为探究石油污染与细菌群落结构变化之间的关系及在石油生物降解过程中起重要作用的细菌菌群,本研究对大连湾表层沉积物中石油烃含量和细菌宏基因组16 S rDNA V3区进行分析。

结果表明:溢油初期2010年8月DLW01站位表层沉积物石油烃含量高达1492 mg/kg,符合第三类沉积物质量标准,随着时间推移,2011年4月、2011年7月、2011年12月航次各站位沉积物中石油烃含量基本呈下降趋势,且均符合第一类沉积物质量标准;16S rDNA PCR-DGGE方法分析表明,石油烃含量高的区域优势细菌种类少,反之则较丰富;海洋环境中同一地点的细菌群落能保持一定稳定性;大连湾石油污染沉积物中变形菌门γ-变形菌纲和拟杆菌门一直保持较高的优势度,是在石油生物降解过程中起重要作用的细菌菌群,而厚壁菌门只在石油烃含量低的区域出现;此外,出现的对污染物敏感的嗜冷杆菌可作为石油污染指示生物进行深入研究。

%In order to explore the connection between petroleum pollution and bacterial community structure change, the important dominant bacteria communities in the process of oil biodegradation,after the“7.1 6”pipeline explo-sion and oil spill accident happened in Dalian Xingang,the content of petroleum hydrocarbon and bacterial metage-nome were studied in Dalian Bay.Results showed that the petroleum hydrocarbon content in the surface sediment of DLW01 in August 2010was 1 492 mg/kg ,according with the third standard of marine sediment quality.As time went on,the content of petroleum the presented basic downward thrend,and all conformed to the first stand-ard of marine sediment quality in April 2011,July 2011,December 2011.16S rDNA targeted PCR-DGGE results suggested that the dominant bacteria communities were monotonous in high petroleum hydrocarbonsareas,while conversely rich in low oil pollution.Bacterial community in the same place could maintain stability.Phylum Gam-maproteobacteria and Bacteroidetes were higher in the oil polluted sediment of Dalian Bay,which played an impor-tant role in the process of oil biodegradation.Phylum Firmicutes only detected in the area of low oil pollution.The sensitive pollution indicator Psychrobacter sp.could be used as biological indicator for further research.【总页数】9页(P58-66)【作者】高小玉;明红霞;陈佳莹;李江宇;韩俊丽;林凤翱;樊景凤【作者单位】国家海洋局国家海洋环境监测中心,辽宁大连 116023; 国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室,辽宁大连116023; 大连海洋大学水产与生命学院,辽宁大连 116023;国家海洋局国家海洋环境监测中心,辽宁大连 116023; 国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室,辽宁大连116023;国家海洋局国家海洋环境监测中心,辽宁大连 116023; 国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室,辽宁大连116023; 大连海洋大学水产与生命学院,辽宁大连 116023;国家海洋局国家海洋环境监测中心,辽宁大连 116023; 国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室,辽宁大连116023; 大连海洋大学水产与生命学院,辽宁大连 116023;国家海洋局国家海洋环境监测中心,辽宁大连 116023; 国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室,辽宁大连116023; 大连海洋大学水产与生命学院,辽宁大连116023;国家海洋局国家海洋环境监测中心,辽宁大连 116023; 国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室,辽宁大连116023;国家海洋局国家海洋环境监测中心,辽宁大连 116023; 国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室,辽宁大连116023【正文语种】中文【中图分类】Q938.1【相关文献】1.陕北石油污染区土壤细菌群落结构解析 [J], 陈锐;赵玲侠;孙晓宇;瞿佳;路鹏鹏;沈卫荣2.石油污染土壤中细菌群落结构特征 [J], 万春黎;杨雪;杜茂安;于春光;李观元3.溢油污染物在海底沉积物中的识别与垂向迁移——大连湾海底沉积物研究 [J],于晓果;杨海丽;刘星;雷吉江;林忠胜;姚子伟;章伟艳;姚旭莹;金肖兵4.大连湾近岸沉积物中油类污染的研究 [J], 王静芳;韩庚辰5.舟山海洋沉积物及沿海沉积物流动相石油污染的电阻率特性及其影响因素研究[J], 伊国杰;潘玉英;陈琳;施羽昕;童森炜;童奕涵因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

高矿化度条件下石油烃降解菌种的筛选与评价

高矿化度条件下石油烃降解菌种的筛选与评价

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酵母 膏/ g

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O 1 .0 0 5 0 .0 0
05 0 .0
0 0
05 0 .0
绵羊 红细 胞/ 0 g
Na /g CI 02 0 .0
C S Jg uO
O0 1 . 0
O0 1 . 0
培养 基 培养 基 培 养基 培养基
O20 . 0 200 . 0 0 0 . 0 2 500 .0 0 0 0 0
N ,O H, Jg N
1 0 .0 0
010 . 0
010 . 0




牛 肉膏/ g
蛋 白胨/ g
O30 . 0
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
取1 L 含油污水水样 ,接人20 L m 5 富集培养基 ,3 c摇床振荡培养4 。取0 L富集液涂布到筛选 m 0I C 8 h .m 2 培养基平板 ,3 ℃恒温培养4 。挑取生长较好 、菌落较大的菌株分别在细菌 、真菌和放线菌分离培养基 7 8 h 平板上分离 、 纯化 ,纯化后的菌种在原油培养基平板上驯化3 4次 , ~ 获得石油降解菌种。观察菌株的生长 情况 、菌落特征和菌体形进行初次筛选。
达 2. 8 %、5 . 5 1 %。偏酸或偏碱环境 均不利于菌体生长 ,培养温度对 2株菌体生 长和石油 降解 率影 响较大 ,晟佳 温 5 度是 3 ℃。在 高矿化度条件下 ,菌株对原汕仍有降解作用 ,降黏率为 4 %以上 。原油组分分析结果表 明,菌种在 5 0 以原油为碳源培养后 ,使原 油组 分中沥青质 、非烃及芳烃类含量均发生变化 。 关键词 :石油降解 ;菌种筛选 ;矿化度 ;降黏率

原生地衣形芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在微生物提高采收率中的作用

原生地衣形芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在微生物提高采收率中的作用

原生地衣形芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在微生物提高采收率中的
作用
刘雄志;张岩
【期刊名称】《石油石化节能》
【年(卷),期】2009(025)007
【摘要】微生物产生的脂肽被分离出来,用于微生物提高采收率研究.约60 g的活性细菌从被原油污染的土壤中分离出来,该土壤取自伊朗Tehran地区的Tehran炼油厂中原油储油罐附近.然而,大多数室内实验已经生产出了脂肽,这种脂肽是由一种纯微生物培养方法产生的.溶血测试表明,这些分离液中存在两种可产生表面活性剂的物质.菌株设计为C2和E1.通过生态学、生物化学及分子生物学测定(16 SrRNA),菌株被确定为地衣形芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌.乳化活性和表面张力测试表明,这种分离液可产生大量表面活性剂.C2和E1的主要产物为脂肽,它可将界面张力从65 mN/m降到30 mN/m.C2、E1分别使原油乳化92%、90%.这是第一次报道原生地衣形芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌具有产生表面活性剂的能力,而这两种菌均源自伊朗炼油厂被油污染的土壤中.
【总页数】4页(P16-18,25)
【作者】刘雄志;张岩
【作者单位】中国石油大学(北京)提高采收率中心;中国石油大学(北京)提高采收率中心
【正文语种】中文
【中图分类】TE3
【相关文献】
1.地衣芽孢杆菌对有害微生物的拮抗作用
2.枯草芽孢杆菌对畜禽常见致病微生物体外拮抗作用的研究
3.噻虫嗪对胶冻样类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的拮抗作用
4.盐胁迫下枯草芽孢杆菌NCD-2对番茄促生作用及对土壤微生物群落结构的影响
5.地衣芽孢杆菌C_(1213)碱性蛋白酶基因在枯草芽孢杆菌中的克隆及表达
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微生物修复大庆采油区湿地石油污染实验研究

微生物修复大庆采油区湿地石油污染实验研究

58工业安全与环保I ndust r i al Saf et y a nd Envi r onm e nt alPr o t ect i on2013年第39卷第2期Febr uary 2013微生物修复大庆采油区湿地石油污染实验研究*徐璐1王继富1刘兴土2文波龙2宿伟萍1(1。

黑龙江省普通高等学校地理环境遥感监测重点实验室,哈尔滨师范大学地理科学学院哈尔滨150025;2.中国科学院湿地生态与环境重点实验室/中国科学院东北地理与农业生态研究所长春130012)摘要通过在大庆湿地采油区野外实验点对JI 酾Ⅻ叫、Ⅱgcr pof i z 两种俄罗斯石油降解微生物制剂本土测试,验证其石油污染湿地修复的效果。

采用单因子污染指数与综合污染指数表征方法,评价不同实验方案处理后大庆采油区湿地水体的污染程度变化,比较不同实验方式的效果,确定理想的湿地水体石油污染降解方式。

结果表明,以两种生物制剂等量混合达到湿地水体石油污染降解效果最佳。

并以实验地为例,讨论了大庆油田湿地石油污染以微生物修复为主的修复方案必须注意的一些问题。

关键词湿地石油污染微生物修复T he Exper i m ent al R es ea r chonM i cr obi al R em edi at i onof O i l Pol l u t edW et l andi n D aqi ng O i l ——pr oduci ng Regi on xU LulW A N G J tf ulLIU )(i ngt u2W E N B ol on92SU W el r,lns ,l(1.鳓l abor at or y of R em ot eS e ns i ngM oni t ori ng ofG e ogra phi c Envi r onm ent ,C ol l e geofnat o .d 讹g erol l ince ,H ar bi n N or m alV ni ,臃i t yH ar bi n 150025)A l 矧r aetT w o ki nds of R u s s i a n m i cr obi a l agent s ,J-l e f m onand 皿唧沥,aret est ed l ocal l y a nd t hei r ef f ect so nr em ed i a —f i o n of oil pol l u t ed w e t l and i n oi l -pr o duci ng r esi on ar e t est i f ied by est abl i shi ng expe r i m ent a l s i tes a nd f i el d si t es .Si ngl e fa c —t orpol l ut i on i nde x a nd c om pr e he nsi ve pol l u t i on i nde x r epr esent at i on met hod i s used t oev al uat e t he var i et i es of t he pol l ut edde gr e e of w e t l and w ar ter i n D aqi ngo 丑一producing 咖aft erdi spose d w i t h di f f er ent expe r i m ent a l pl ans .A f t e rc0咧sons0f ‰ef fect sof di f f er ent expe r i m ent a lm et hods ,t hei deal de gr ad at i o n m et hods ar ede t e rm i ne d .I t i sacc 一删t hatt he half —a nd —ha l f m i xt ur e of t he se t w o ki nds of m i cr obi a l age nt s can ac hi eve t he best ef f ect .A t l astSO m eprobl e m s i n mi c r obi al re m e di at i on aI edi scussed .K eyW or dsw e t l andoil pol l u t i onm i er obi a l r e m edi a t i on0引言湿地作为一种生态系统,具有多种独特的功能【1-2|。

油田采出水中聚丙烯酰胺的生物降解


2%、菌株活化 3次 、培养基初始 pH值 7.5,此条件下聚丙烯酰胺 降解率 可达 38.4%;优 化条件下 ,添加金 属离
子对 聚丙烯酰胺降解具有一定影 响 ,单 独添加 Zn“、Mn“、Fe 离 子对聚丙烯 酰胺 降解均具 有一定 的促进 作用 ,
单独 添加 cu 离 子对聚丙烯酰胺降解具有一 定的抑制作用 ;同时添加 Zn 、Mn 、Fe 离子 显示 出一定 的协 同作
HPAM degradation by Strain H3 were 2% inoculation amount, 3一time activation and pH 7.5 initial value. the HPAM can be degraded by 38.4% ; under these conditions,there exits a certain influences for the added metal i— ons on the HPAM degradation, in the individual additions of"Zn , M n and Fe ions have a certain promoting effects on the HPAM degradation,while in the individual addition of Cu ion has a certain inhibition effects on the degradation;adding Zn ,Mn and Fe ions at the same time,a certain accordant efects are shown,the degrada— tion is obviously higher than those of the individual additions i. e.is up to 63.86% .

油田注水水质检测与分析

第一篇:水质检测第一章:碎屑岩油藏注水水质推荐指标第一节:注水水质的基本要求在油田注水中水质必须符合以下几方面的要求1、水质稳定,与油层水相混不产生沉淀。

2、水注入油层后不使粘土矿物产生水化膨胀或悬浊。

3、水中不得携带大量悬浮物,以防堵塞注水井渗滤端面及渗流孔道。

4、对注水设施腐蚀性小。

5、当采用二种水源进行混合注水时,应首先进行室内实验,证实二种水的配伍性好,对油层无伤害才可注入。

6、评价注水水源,确定注水水质应按第二篇,第二章的要求进行。

第二节:推荐水质主要控制指标推荐水质主要控制指标见下表注:1、1≤n≤10。

2、清水水质指标中去掉含油量。

第三节:注水水质辅助性指标注水水质辅助性指标,包括溶解氧、硫化氢、侵蚀性二氧化碳、铁、PH值等。

规定注水水质辅助性指标主要是由于以下几方面的原因。

1、水质的主要控制指标已达到注水要求,注水又较顺利,可以不考虑辅助性指标,如果达不到要求,为查其原因可进一步检测辅助性指标。

2、采出水中溶解氧浓度最好是小于0.05mg/L,不能超过0.10mg/L。

清水中的溶解氧要小于0.50 mg/L。

3、侵蚀性二氧化碳含量等于CaCO3达到溶解平衡所需的量时此水稳定;大于溶解平衡所需的量时此水可溶解碳酸钙并对注水设施有腐蚀作用;小于溶解平衡所需的量时有碳酸盐沉淀出现。

4、系统中硫化物增加是细菌作用的结果。

硫化物过高的水也可导致水中悬浮物增加。

清水中不应含硫化物,油层采出水中硫化物浓度应小于2.0mg/L。

5、水的PH值应控制到7±0.5为宜。

6、水中含亚铁时,由于铁细菌作用可将二价铁转化为三价铁而生成氢氧化铁沉淀。

当水中含硫化物(S2-)时,可生成FeS沉淀,使水中悬浮物增加。

第四节:标准分级及使用说明1、从油层的地质条件出发,将水质指标按渗透率小于0.1、0.1~0.6、大于0.6um2分为三类。

由于目前水处理站的工艺条件和技术水平有差异,对标准的实施有困难,所以又将每类标准分3级要求。

生物采油解堵剂中产蛋白酶菌株的筛选及培养条件优化


作者简介 : 左佳敏( 9 3 , , 1 8 一) 女 硕士研究生 , 主要从 事天然 产物 资源化学方面 的研究

9 ・ 6
第 2 期
左佳 敏 等 : 物 采 油解 堵 剂 中 产 蛋 白 酶 菌株 的 筛选 及 培养 条 件 优 化 生
1 1 2 培养 基 ._
无 机 营养 液 ( / ) Na 1 . ; g L : C 0 NH4 1 . ; S . 2 K2 O ・H2 . ; NO . ; 3 C 1 Mg O4 0 ; HP 4 3 O 0 2 Na 30 2 KH2 O 0 0 P 4
1 材 料 与方 法
1 1 材 料 .
1 1 1 菌株 . .
从 大 庆油 田原 油样 品 中筛选 得到 菌种 , 经部 分生 理 生化实 验及 1 Sr 6 DNA鉴 定 为铜绿 假单 胞菌 .
收 稿 日期 :0 2—0 21 2—2 ; 8 编辑 : 志平 任 基 金 项 目 : 宁 省 工 业 攻 关 计划 项 目(0 92 0 3 辽 20 2 30 )
酪素 培养 基[ ( / : g L) KH2 O4 . 6 Mg O . ; n 1 0 0 4 N C . 6 NaHP 4 7 O 1 O ; P 3 ; S 40 5 Z C 2 . 1 ; a 1 1 ; 2 O ・ H2 . 7 0 0 C C 2 . 0 ; e O . 2 干酪 素 4 琼 脂 2 . ; 离子 水 10 0mL p 6 5 . . a 100 2 F S 4 0 ; 0 ; 0 0去 0 ; H . ~7 0 以上 培养 基使 用前 在 1 1℃ 、 . a 2 0 1MP 条件 下 灭菌 3 i. 0r n a

油田生产过程中硫酸盐还原菌的危害及防治探讨

T e c h n o l o g y F O r u m
油田生产过程中硫酸盐还原菌的危害及防治探讨
刘 丽娇 ’ 陈 有
( 1 . 大 庆油 田技术培训 中心 ,黑龙江 大庆 1 6 3 2 5 5; 2 . 大庆油田有 限责任公司第六采油厂作 业大 队,黑龙江 大庆 1 6 3 1 1 4)
膜,杀死细菌。
【 摘
要】 硫 酸盐还原 茵是一种生存 于沼泽 、井矿、土壤、地
下石 油等氧 气稀缺环境 中的一种厌氧微生物。在缺氧环境 中,硫酸 盐还原 茵生物膜 内生成一种 氢,通过与金属表 面硫酸盐进行氧化还 原反 应 获取 能量 。本 文就 油 田 生产 过 程 中 ,硫 酸 盐 还 原 茵 对 油 田机 械 等造 成的危 害做 出讨论 ,并研 究探讨检测硫酸盐还原茵的手段以 及 防 治硫 酸 盐 还 原 茵 危 害 的 各 种 方 法 。
细菌代谢产物的检测能够估算出细菌含 量。具体 方法为 :先将 三碘 化亚 甲基蓝与维生素 c进行化学反应, 生成产物为氧化性亚 甲基蓝 。 硫酸盐还原菌的代谢产物为硫离子化合物。蓝色的氧 化性亚甲基蓝 溶液 与 硫 化 物 反 应 生 成 还 原 型 甲基 蓝 , 蓝 色 溶 液 变为 无 色 溶 液 ,根 据反应时间 以及溶剂使用量推算 出硫酸盐还原菌的活性以及含 量。 2 . 4荧光 原 位 杂 交 检测 技 术 荧光 原位杂交检测技术与其他检测技术不同,没有对硫 酸盐还 原菌进行培养皿培养 。荧光原位杂交检测技术涉及先进的遗传基因 领域 , 利ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ硫酸盐还原菌独特 的 r R N A特异性片段制成带有荧光标记 的基 因探针 ,通过荧光基因探针与硫酸盐还原 菌特异性基因片段的 杂交结合 ,在细菌上成功标记荧光物质 ,最后再显微镜下进行观测 计量 ,得 出硫 酸 盐 还 原 菌 总 量 。 , 荧光原位 杂交技术是利用硫酸盐还原菌特有的 r R N A进行细菌 标记 的新兴基 因技术,检测效率高、准确度 强,但是检测成本过高 , 检测仪器 、试剂价格较高,并且 需要配备技术性检测人员。 3防治硫酸盐还原 菌的方 法 近 年 来 , 硫酸 盐还 原 菌 的 防治 方 面 取 得 越 来 越 多 的成 果 ,概 括 起来 ,消灭硫 酸盐还 原菌 的方法主要划分为三大类别 ,分别是物理 方法 、化 学 方 法 以及 生 物 方 法 。 3 . 1 物 理 方法 ( i )将原油注水后 ,通过紫外线、x射线 、 B射线等高 能量 、 高频率的电离辐射 ,破坏硫酸盐还原菌 的基 因链 ,阻止细菌体 内的 代谢活动 ,进而灭杀细菌 。 . ( 2 )利用高强度的超声波 ,集中能量震碎硫酸盐还 原菌 的细胞
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[ 5 - 6] [ 7 - 8] [ 9] 、 产甲烷菌 锰和铁还原菌 和产乙酸菌 等. 然而, 由于大多数微生物难以培养, 因此对油藏生态
采出液 pH 约为 8. 0 , 苏林分类水 度 40 ℃ ~ 45 ℃ , 型 为 碳 酸 氢 钠 型. 聚 驱 采 出 液 总 矿 化 度 平 均 为
-1 5367. 5 mg · L - 1 , 硫酸根含量 27. 0 mg · L , 原油 -3 密度 859. 7 kg · m , 黏 度 19. 6 mPa · s, 凝固点 31. 0 ℃ , 含水 95. 2% ; 注入的聚合物为阴离子型部 分水解聚 丙 烯 酰 胺, 采出液中聚合物平均浓度为
李娜娜
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( 1 中国科学院沈阳应用生态研究所 / 中国科学院陆地生态过程重点实验室,沈阳 110016 ; 大庆油田采油二厂,黑龙江大庆 163414 )来自中国科学院研究生院,北京
摘 要 采用 ARDRA ( 扩增性 rDNA 限制性酶切片段多态性分析 ) 技术对大庆油田聚驱、 水 驱和过渡带 3 种油藏采出水中的细菌群落的基因明: 随机挑取的 596 个阳性克隆可分为 85 个操作分类单元 ( OTUs) , 41 和 33 个. 通过对优势 O 进行序列比对, 发现油藏采出水中的优势菌群为不动杆菌属、 弓形杆菌属、 厚壁菌 门、 假单胞菌属和硫磺单胞菌属. 聚驱样品中细菌群落组成最简单, 优势菌群为不动杆菌属, 占库容的 85% , 假单胞菌属占 7% ; 水驱样品中的优势菌群也是不动杆菌属, 占库容的 62% , 假单胞菌属和硫磺单 50% , 不动杆菌属和厚壁菌门各占 19% 和 18% . 属, 关键词 A Bacterial community structure in production water from oil reservoirs in Daqing Oilfield. AI 2 2 Mingqiang1, , LI Hui1 , LIU Xiaobo3 , SHI Rongjiu1 , HAN Siqin1 , LI Nana1, , ZHANG Ying1 1 ( Key Laboratory of Terrestrial Ecological Processes,Institute of Applied Ecology,Chinese Academy of Sciences,Shenyang 110016 ,China; 2 Graduate University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 110049 ,China; 3 No. 2 Oil Production Plant of Daqing Oilfield Co. Ltd. ,Daqing 163414 ,Heilongjiang,China) . Chin. J. Appl. Ecol. , 2010 , 21 ( 4 ) : 1014 - 1020. Abstract: By the methods of molecular biology,this paper studied the bacterial community structure in the production waters from polymerflooded,waterflooded,and transition zone ’ s oil reservoirs in Daqing Oilfield of Northeast China. The total DNA was extracted from the three production waters ,and the 16S rDNA clone libraries of the waters were constructed. About 200 positive clones were randomly selected from each library,and analyzed with amplified ribosomal DNA restriction analysis ( ARDRA) . The selected 596 positive clones were clustered into 85 operational taxonomic units ( OTUs) ,with 28 OTUs in polymerflooded library,41 in waterflooded library,and 33 in transition zone ’ s library. Sequences analysis of the libraries showed that the dominant bacterial groups in the production waters were Acinetobacter,Arcobacter,Firmicutes,Pseudomonas,and Sulfurospirillum. Polymerflooded sample had the simplest bacterial composition,with the dominant ( 85% ) of Acinetobacter,and part ( 7% ) of Pseudomonas. Waterflooded sample was also dominated by Acinetobacter ( 62% ) , while Pseudomonas and Sulfurospirillum occupied 20% and 6% of the total,respectively. Different from the former two,the transition zone ’ s sample was dominated by Arcobacter ( 50% ) ,followed by Acinetobacter ( 19% ) and Firmicutes ( 18% ) . Key words: oil reservoir; bacterial community structure; 16S rDNA clone library; amplified ribosomal DNA restriction analysis. 油藏内通常是一种高温、 高压、 高盐、 厌氧和寡 营养的环境, 然而近十几年来大量研究表明, 这种极 端环境中存在着大量的多样的本源微生物类群以及 油分析 文章编号 1001 - 9332 ( 2010 ) 04 - 1014 - 07 中图分类号 Q938. 1 ; TE355 文献标识码
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在石油开采过程中由外界引入的微生物
. 其中有
些微生物可以降解石油烃, 产生一些有利于石油开 采的代谢产物, 例如表面活性物质、 生物气、 有机酸 — —微生物采 和生物聚合物等. 一种新的采油技术— MEOR ) , 油技术 ( microbial enhanced oil recovery, 就 是将菌种和营养物注入到油藏中, 或者只注入营养 物以激活油藏中的本源微生物, 提高原油的采出率. 但首先要明确油藏中存在哪些微生物类群 , 才能采 取有针对性的措施来激活这些微生物 . 因此, 了解油 藏中微生物的群落结构是开发微生物采油技术的前 提, 此项研究具有重要的理论意义和应用价值 . 人们利用传统的培养方法已经在油藏中发现了 [ 2 - 3] [ 4] 、 许多种微生物, 例如, 硫酸盐还原菌 发酵菌 、
486. 7 mg · L - 1 . 水 驱 采 出 液 总 矿 化 度 平 均 为 -1 5147. 8 mg · L - 1 , 硫酸根含量 37. 2 mg · L , 原油
-3 密度 865. 4 kg · m , 黏 度 21. 2 mPa · s, 凝固点 31. 7 ℃ , 含水 94. 5% . 过渡带油层也采用水驱开采 -1 方式, 采出液总矿化度平均为 7427. 7 mg · L , 硫 -1 -3 酸根含量 48. 5 mg·L , 原油密度 878. 0 kg · m , 黏度 14. 4 mPa·s, 凝固点 34. 0 ℃ , 含水 87. 7% .
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12 口采油井, 于井口取 4 L 采出液, 将每种样品分 别混合, 装入无菌桶内密封, 静置. 待油水分层后, 将 水相装入无菌瓶内密封, 迅速运回实验室置于 4 ℃ 冰箱内保藏待用. 每种样品分别取约 6 L 水样, 离心 (4 ℃ , 10000 × g, 15 min ) 收集菌体. 将收集到的菌 加 1500 μl DNA 提取缓 体转入 2 ml 无菌离心管中,
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样品采集及微生物群落基因组总 DNA 的提取 对于水驱、 聚驱和过渡带油藏, 分别随机选取
系统中的微生物多样性和群落结构仍然知之甚少 . 现代分子微生物生态学, 特别是基于 16S rDNA 的 分子生物学技术的发展, 突破了依赖培养方法的局 [ 10 ] 限性 . 国内外已有应用分子生态学方法研究油藏 Voordouw 等 用 微生物群落结构的报道. 例如, 反相基因组探针、 功能基因探针杂交和 16S rDNA 序列分析等技术研究了加拿大某油藏中硫酸盐还原 [ 13 ] 菌的群落结构; Orpha [ 14 ] 高温油藏中微生物的多样性; Grabowski 等 综合 利用分离培养和 16S rDNA 分析等多种方法研究了 加拿大某 低 温 低 盐 油 藏 中 的 微 生 物 群 落 结 构;生物多样性 . 以往仅采用传统培养方法调查大庆油田本源微 [ 16 ] 生物的群落组成 , 所获得的信息不全面. 近年来, 张 切片段多态性分析和优势 OTUs 测序, 研究了大庆 油田聚驱、 水驱和过渡带油藏采出水中细菌的多样 性和群落结构, 以期为今后在大庆油田实施微生物 采油提供参考. 1 1. 1 材料与方法 采样油藏特征
应 用 生 态 学 报 2010 年 4 月
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