培养基及其制备方法
培养基制备
培养基制备一、概述培养基是生物实验中必不可缺的基础设施，它为微生物、细胞等生物种群的繁殖和生长提供了必要的营养物质。
本文将介绍常用的培养基配方和制备方法，以及如何根据中国国情进行优化。
二、常用培养基1.大肠杆菌培养基（LB）配方：10克蛋白胨、5克酵母提取物、10克氯化钠、加水至1L。
特点：优点是制备方便、易于培养，多数菌株生长良好。
缺点是含有大量营养物质，若用于长期贮存菌株，容易导致突变风险增加。
2.液体麦康凯发酵培养基（BHI）配方：将500克肉汤蛋白胨培养基、10克氯化钠、2克二氢磷酸氢二钠、2克葡萄糖溶解在1L蒸馏水中。
特点：适合多种微生物的生长，包括厌氧微生物。
BHI较LB富含营养物质，可提供较好的生长环境，适合繁殖菌株。
3.青霉素酸糖盐地衣芽孢杆菌培养基（PDA）配方：20克琼脂、4克葡萄糖、0.75克潮霉素、0.125克青霉素钾盐、0.05克维生素B1、加水至1L。
特点：适用于分离和培养种类繁多的真菌、放线菌等微生物，能有效地防止杂菌的污染。
三、优化培养基由于中国的气候、温度等环境条件与西方国家有所不同，因此需要进行针对性的优化，以满足不同微生物的生长需求。
1.调整pH值许多微生物生存和生长所需的pH值范围在7.0-7.5之间。
但是，我们在制备培养基时应从当地水质的酸碱性入手，适当调整pH值，以便营养物质的有效吸收。
2.添加一些特殊成分在中国有些地区，水质有问题，例如含有高浓度的重金属和有机物污染，这些都会影响微生物的生长和繁殖。
因此，在制备培养基时，要添加些许抗菌剂和抗氧化剂，保证培养环境的纯净度和稳定性。
3.注意制备温度对于不同的菌株，其适宜的生长温度也有所不同。
在制备培养基时，应根据菌株的特点，以及所处的生态环境，调整制备温度，将传统的37度下的浸渍式消毒改为高温滤器灭菌法，避免纳米材料产生自拍。
四、结论在国内微生物学、生物医学和生物工程研究领域中，培养基是至关重要的实验基础设施。
培养基制备的方法
培养基制备的方法培养基是微生物学研究和实验室中微生物的生长和繁殖的基础。
培养基的制备主要分为固态培养基和液态培养基两种形式。
下面我将详细介绍培养基的制备方法。
1. 固态培养基制备方法：a. 准备所需材料：琼脂、食物源（如肉汤、蛋白胨等）、矿物质、维生素、葡萄糖等。
b. 称取适量矿物质、维生素和葡萄糖，并添加到蒸馏水中，溶解成浓缩液。
c. 称取适量肉汤或蛋白胨等食物源材料，并加入蒸馏水中，并在加热搅拌的条件下溶解。
d. 将步骤b和c中的溶液混合，并加热搅拌，使其完全溶解，并达到所需浓度。
e. 将溶液倒入试管或培养皿中，使用自动灌装机进行灌装。
f. 放入高压灭菌锅中，在121高压下灭菌15-20分钟。
取出后冷却至室温。
g. 检查培养基是否凝固，如凝固则放入冰箱中保存。
2. 液态培养基制备方法：a. 准备所需材料：氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、葡萄糖等。
b. 称取适量氯化钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，并加入蒸馏水中，溶解成浓缩液。
c. 称取适量葡萄糖，并加入蒸馏水中，并在加热搅拌的条件下溶解。
d. 将步骤b和c中的溶液混合，并加热搅拌，使其完全溶解，并达到所需浓度。
e. 将溶液倒入试管或培养瓶中，并使用自动灌装机进行灌装。
f. 倒入适量培养基后，使用高压灭菌锅进行灭菌。
高压灭菌条件一般为121高压15-20分钟。
g. 取出后冷却至室温，检查液态培养基是否出现浑浊或沉淀物，若有则需要重新制备。
在制备培养基过程中，需要注意以下几个方面：1. 材料选择：根据实验需要，选择适合微生物生长的食物源、矿物质、维生素等材料。
2. 材料溶解：将所需材料称取放入试管或容器中，并加入适量的蒸馏水中进行溶解，加热搅拌加快溶解速度。
3. 浓度调整：根据实验需要和微生物的生长条件，调整培养基材料的浓度，以满足微生物生长的要求。
4. 灭菌处理：使用高压灭菌锅进行灭菌处理，达到高温高压杀灭细菌、真菌和病毒的目的。
灭菌是为了减少外界微生物对培养基的污染，保证实验的准确性和可靠性。
培养基制备实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的基本成分和配制方法。
2. 熟悉培养基的灭菌操作流程。
3. 了解培养基在微生物培养中的应用。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，通常由碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等组成。
根据微生物的营养需求和实验目的，可以配制不同类型的培养基。
灭菌是保证培养基无菌的关键步骤，常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌和过滤灭菌等。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 酵母提取物- 胰蛋白胨- 琼脂- NaCl- K2HPO4- MgSO4·7H2O- 水- 水平式电热灭菌锅- 高压蒸汽灭菌锅- 烧杯- 玻璃棒- 试管- 移液器- 灭菌指示剂- 灭菌棉塞2. 仪器：- 电子天平- 灭菌器- 玻璃器皿四、实验步骤1. 培养基的配制：- 称取酵母提取物10g、胰蛋白胨20g、琼脂15g、NaCl 5g、K2HPO4 1g、MgSO4·7H2O 0.5g，加入适量水溶解。
- 将溶液转移至烧杯中，用玻璃棒搅拌至完全溶解。
- 将溶液转移至锥形瓶中，用移液器定容至1000mL。
- 将锥形瓶置于电热灭菌锅中，进行121℃、20min的高压蒸汽灭菌。
2. 灭菌指示剂的加入：- 在灭菌后的培养基中，加入灭菌指示剂，观察指示剂的变化，确认培养基是否灭菌彻底。
3. 培养基的倒平板：- 将灭菌后的培养基冷却至50℃左右，倒入平板中，待凝固后，用无菌镊子取出平板，标记并放置于培养箱中。
五、实验结果与分析1. 培养基灭菌效果：- 通过观察灭菌指示剂的变化，确认培养基灭菌彻底。
2. 培养基平板制备：- 倒平板过程中，注意无菌操作，防止污染。
六、实验讨论1. 培养基的配制过程中，应注意称量准确，避免误差。
2. 灭菌过程中，应控制好温度和时间，确保培养基灭菌彻底。
3. 倒平板过程中，应注意无菌操作，防止污染。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了培养基的基本成分和配制方法，熟悉了培养基的灭菌操作流程，了解了培养基在微生物培养中的应用。
培养基制备方法
培养基制备方法
引言
本文档旨在介绍培养基制备的一种简单而有效的方法。
培养基是用于细菌、真菌或细胞培养的基础营养液，对于科研实验以及生物制药等领域起着至关重要的作用。
材料与设备
以下是本方法制备培养基所需的主要材料和设备：
- 蔗糖：用作能源供应
- 酵母提取物：提供必要的氮源
- 高锰酸钾：用于抑制细菌污染
- 磷酸二氢钾：提供磷源
- 硫酸镁：提供镁离子
- 氯化钙：提供钙离子
- 水
- 烧杯和容量瓶：用于容量的测量和混合
制备方法
按照以下步骤制备培养基：
1. 首先，将适量的水加入烧杯中。
2. 将蔗糖、酵母提取物、高锰酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁和氯
化钙按照给定比例加入烧杯中。
3. 充分搅拌混合，确保所有成分均匀分散。
4. 用过滤器或无菌操作，将培养基转移至无菌容量瓶中。
5. 根据需要，调整pH 值，使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
6. 用无菌蒸馏水将容量瓶中的培养基补满至标定线。
7. 密封，通过高压灭菌器（autoclave）高压灭菌，确保培养基
无细菌污染。
8. 灭菌后，将培养基冷却至室温后即可使用。
结论
通过上述简单的步骤，我们可以制备出一种基础的培养基，适
用于细菌、真菌或细胞的培养。
当然，根据不同的应用和研究需求，
可以调整配方和浓度以满足特定要求。
培养基的制备对于科研实验和生物制药至关重要，因此我们建议严格按照无菌操作以及实验室安全规范来执行制备过程。
培养基及配制
A 无机大量母液(扩大10倍配1L )
成分
硝酸钾 硝酸铵 硫酸镁 磷酸二氢钾 氯化钙
称量工具
托盘天平 百分电子天平
注意：无机大量母液中的各种物质在混合过程中 有些离子易产生沉淀，应使每种物质先充分溶解 ，再进行混合，而且钙盐最后缓慢加入进去。
B 无机微量母液（扩大100倍配1000ml）
成分
硼酸，硫酸铜， 硫酸锰，硫酸锌， 氯化钴，钼酸钠， 碘化钾
大规模生产时可用自来水。
但研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不 良效果。
药品： 应选取等级较高的化学纯（CP）或分析纯(AR)； 药品的称量一定要准确、正确，防止药勺之间的交叉
污染。
2 培养基母液的配制和保存
2.1 母液（贮备液，stock solution)配制的目的
1）方便配置其他培养基； 2）保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取 3）便于低温保藏。
称量工具
万分电子天平
C 铁盐（扩大100倍1000ml）
铁盐
硫酸亚铁， Na2-EDTA
注意：铁盐选用硫酸亚铁而不用硫酸铁，是因为它 溶解后易产生红色的氢氧化铁沉淀。
在装有800ml 蒸馏水的烧杯中加入2粒氢氧化钠。溶解后加入3.73g EDTA-Na2 ，加热使其全部溶解，然后边搅拌边慢慢加入2.78g FeSO4.7H2O直至全部溶解， 冷却后定容至1000ml，置于冰箱中备用。
。 较生长素和细胞分裂素少用，可溶于水。
ABA →因物种不同，能促进或抑制愈伤组织生长；
5 琼脂/培养体支持材料
5.1.琼脂 (1)用量 6－10g/L (2)种类 琼脂粉 琼脂条 (3)作用 固化作用 注意：琼脂使用有优缺点；新买应试凝固力。
细菌培养基的制备、灭菌及接种、培养技术ppt课件
目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从 而获得若干种细菌纯培养技能。 掌握几种接种技术。
21
实验材料
无菌培养皿(直径90mm)10套、无菌移液管1mL2
支、10mL1支。
营养琼脂培养基1瓶，活性污泥或土壤或湖水1瓶， 无菌稀释水90mL1瓶、9mL5管。 其它：接种环、酒精灯、恒温箱。
22
c. 第三次蒸煮之后基本无菌，但为了确保无菌仍要放 在37℃恒温条件下培养24h，确定无菌才能使用。
18
实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法： 不能用加热灭菌的 液体物质（如维生 素、血清），一般 可用细菌过滤器进 行除菌。
19
第二部分 细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求 实验材料 实验程序
9
实 验 程 序2
（培养基的配制方法和步骤） 3. 调pH值：用10％ NaOH调pH至7.6，用精 密pH试纸对照。 4. 分装：将培养基分装于5支试管，其余全部 倒入250mL锥形瓶中，分别塞上棉塞。注意 不要污染棉塞和瓶口。 5. 包扎成捆，挂上标签，注明何种培养基。 6. 灭菌备用：培养基灭菌后必须在37℃下恒 温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
实验二
细菌培养基的配制、灭 菌及接种、培养技术
1
第一部分 细菌培养基的制备、灭菌
目的要求 实验材料 实验程序
2
目的要求
熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备。 掌握培养基和无菌水的制备方法。 掌握高压蒸气灭菌技术。
3
实验材料
药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。
高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。 其它：培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻 璃珠等。
实验室常用培养基配方及制备方法
实验室常用培养基配方及制备方法实验室中常用的培养基有很多种，不同的培养基适用于不同类型的微生物，如细菌、真菌或细胞系等。
下面将介绍几种常用培养基的配方及制备方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）LB培养基常用于大肠杆菌等细菌的培养。
其配方如下：- Tryptone：10g/L- Yeast extract：5g/L-NaCl：10g/L将上述成分完全溶解于适量蒸馏水中，调节pH至7.0。
用自动过滤器过滤液体得到无菌的LB培养基。
分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。
2. Sabouraud葡萄汁蘑菇培养基Sabouraud培养基常用于真菌的培养。
其配方如下：- Peptone：10g/L- Dextrose：40g/L将上述成分完全溶解于适量蒸馏水中，调节pH至5.6、用自动过滤器过滤液体得到无菌的Sabouraud培养基。
分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。
3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle Medium）DMEM培养基常用于细胞系的培养。
其配方如下：-DMEM粉：每升DMEM培养基50g-细胞因子或血清等:根据实验要求添加将DMEM粉溶解于适量蒸馏水中，并根据实验要求添加适量的细胞因子或血清。
调节pH至7.2-7.4、用自动过滤器过滤液体得到无菌的DMEM 培养基。
分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。
4.M9液体培养基M9液体培养基是一种常用于细菌的最小培养基，适用于检验细菌的营养需求。
其配方如下：-Na2HPO4：6g/L-KH2PO4:3g/L-NaCl:0.5g/L-NH4Cl:1g/L-MgSO4·7H2O:0.1g/L-CaCl2:0.01g/L将上述成分完全溶解于适量蒸馏水中，调节pH至7.0-7.4、用自动过滤器过滤液体得到无菌的M9液体培养基。
分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。
培养基的制作方法
培养基的制作方法培养基是微生物学研究中常用的实验材料，用于培养和繁殖微生物。
正确的制备培养基对于保证实验结果的准确性和可重复性至关重要。
本文将介绍培养基的制作方法，以帮助读者掌握正确的制备技巧。
一、准备工作1. 清洗和消毒培养器具：包括量筒、容量瓶、烧杯、培养皿等。
使用去离子水或含0.1%次氯酸钠的消毒液进行清洗和消毒。
2. 准备所需试剂和培养基成分：包括碳源、氮源、无机盐、维生素、生长因子等。
根据实验需要选择合适的配方。
二、制备培养基步骤1. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。
精确称量或计量试剂，避免误差。
2. 将所需试剂分别溶解于适量的去离子水中，搅拌均匀。
注意溶解过程中的温度和pH值控制。
3. 将溶解好的试剂倒入容量瓶中，加入适量的去离子水，使总体积达到容量瓶标记线。
再次搅拌均匀。
4. 用适当的容器（如烧杯）接收制备好的培养基。
注意避免污染，避免气泡的产生。
5. 进行高温高压灭菌，通常为121摄氏度，压力为15磅，时间为20分钟。
确保培养基的无菌性。
6. 灭菌后，将培养基倒入培养器具（如培养皿、试管等），根据实验需要分装适量的培养基。
7. 将培养器具密封，避免外界污染。
存放于冰箱或低温冷藏室中，避光保存。
三、常见培养基的制备方法1. 营养琼脂培养基制备方法：a. 按照配方计算所需琼脂的质量。
b. 将琼脂溶解于适量的去离子水中，加热至完全溶解。
c. 加入所需营养成分，如葡萄糖、胰蛋白酶胨等。
搅拌均匀。
d. 倒入容器中，高温高压灭菌后分装。
2. 非琼脂培养基制备方法：a. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。
b. 将所需试剂溶解于适量的去离子水中，搅拌均匀。
c. 调整pH值至所需的范围，使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
d. 倒入容器中，高温高压灭菌后分装。
四、培养基制备中的注意事项1. 注意实验室的洁净环境，避免外界污染。
2. 注意试剂的质量和纯度，避免影响培养基的质量。
3. 注意培养基的pH值控制，不同微生物对pH值有不同的要求。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
培养基及其制备方法1、营养肉汤培养基胨10g肉浸液1000ml氯化钠5g取胨与氯化钠，加入肉浸液内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，调节pH 值使灭菌后为7.2±0.2，分装，115℃灭菌30分钟。
2、营养琼脂培养基照上述营养肉汤培养基的处方及制法，加入15～20g琼脂，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，分装，115℃灭菌30分钟。
3、虎红琼脂培养基胨5g虎红（四氯四碘荧光素）0.0133g葡萄糖10g （或0.133％虎红溶液10ml）磷酸二氢钾(KH2PO4) 1g琼脂15～20g硫酸镁(MgSO4.7H2O) 0.5g水1000ml除葡萄糖、虎红外，取上述成分，混合，加热溶化后，滤过，加入葡萄糖、虎红，分装，115℃灭菌30分钟。
4 、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨10g琼脂15～20g酵母浸出粉5g水1000ml葡萄糖20g除葡萄糖外，取上述成分，混合，加热融化后，滤过，加入葡萄糖，分装，115℃灭菌15分钟。
5 、胆盐乳糖培养基(BL)胨20g牛胆盐 1.3g乳糖5g （或去氧胆酸钠0.25g）氯化钠5g水100ml磷酸氢二钾(K2HPO4) 4.0g磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.3g除乳糖、牛胆盐外，取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2,煮沸，滤清，加入乳糖、牛胆盐，分装，115℃灭菌30分钟。
6 、曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)营养琼脂培养基100ml2％曙红溶液2ml20％乳糖溶液5ml0.5％亚甲蓝溶液 1.3～1.6ml取营养琼脂培养基，加热融化后，冷至60℃,按无菌操作加入灭菌的其它三种溶液,摇匀，倾注平皿。
7 、麦康凯琼脂培养基(MaCC)胨20g1％中性红溶液 2.5ml乳糖10g琼脂15～20g牛胆盐5g水1000ml氯化钠5g除乳糖、1％中性红溶液、牛胆盐及琼脂外、取上述成分,混合，加热使溶解，调节pH 值使灭菌后为7.2±0.2，加入琼脂，加热融化后，再加入其余各成分，摇匀，分装，115℃灭菌30分钟，冷至约60℃，倾注平皿。
8 、三糖铁琼脂培养基(TSI)胨20g 硫酸亚铁0.2g牛肉浸出粉5g 硫代硫酸钠0.2g乳糖10g 0.2％酚红溶液12.5ml蔗糖10g 琼脂12～15g葡萄糖1g 水1000ml氯化钠5g除三糖、0.2％酚红溶液、琼脂外，取上述成分，混合，加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，加入琼脂，加热融化后，滤过，再加入其余成分，摇匀，分装,115℃灭菌30分钟，制成高底层(2～3cm)短斜面。
9 、四硫磺酸钠亮绿增菌液(TTB)胨5g 硫代硫酸钠30g牛胆盐1g 水1000ml碳酸钙10g取上述成分，混合，微温使溶解，121℃灭菌20分钟。
临用前，取上述培养基，每10ml 中加入碘溶液(取碘6g与碘化钾5g，溶于20ml水中)0.2ml和0.1％亮绿溶液0.1ml ，混匀。
10 、沙门氏、志贺氏菌属琼脂培养基(SS)胨5g 硫代硫酸钠8.5g牛肉浸出粉5g1％中性红溶液 2.5ml乳糖10g0.1％亮绿溶液0.33ml牛胆盐8.5g琼脂20g枸橼酚钠8.5g 水1000ml枸橼酸铁铵1g除糖、指示剂、琼脂外，取上述成分混合，加热使溶解，调节pH值使灭菌后为7.2 ±0.1，滤过，加入琼脂，加热融化后，121℃灭菌20分钟，再加入其余成分，摇匀，冷至约60℃，倾注平皿。
11、十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基胨10g 牛肉浸出粉3g氯化钠5g 琼脂15～20g十六烷三甲基溴化铵0.3g 水1000ml除琼脂外，取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.5±0.1，加入琼脂，加热熔化后，分装，121℃灭菌20分钟，冷至约60℃，倾注平皿。
12、亚碲酸盐肉汤培养基临用前，取灭菌的营养肉汤培养基，每100ml中加入新配制的1％亚碲酸钠（钾）溶液0.2ml，混匀，即得。
13、卵黄高盐琼脂培养基胨6g 10％氯化钠卵黄液100ml牛肉浸出粉1.8g 琼脂23g氯化钠30g 水650ml除10％氯化钠卵黄液外，取上述成分混合，微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.6±0.1。
121℃灭菌20分钟，待冷至约60℃，以无菌操作加入10％氯化钠卵黄液,充分摇匀,倾注平皿。
10％氯化钠卵黄液的制备取新鲜鸡蛋一个，以无菌操作取出卵黄，放入10％灭菌氯化钠溶液100ml中，充分振摇，即得。
14、甘露醇高盐琼脂培养基胨10g 1％酚红溶液 2.5ml牛肉浸出粉1g 琼脂15～20g甘露醇10g 水1000ml氯化钠75g除甘露醇、1％酚红溶液及琼脂外,取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.4±0.2，加入琼脂，加热融化后，滤过，分装，115℃灭菌30分钟，冷至约60℃,倾注平皿。
15、蛋白胨水培养基胰蛋白胨10g 水1000ml氯化钠5g取上述成分混合，加热融化，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，分装于小试管中,121℃灭菌20分钟。
16、磷酸盐葡萄糖胨水培养基胨7g 葡萄糖5g磷酸氢二钾(K2HPO4) 3.8g 水1000ml取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，分装于小试管中，121℃灭菌15分钟。
17、枸橼酸盐培养基氯化钠5g 枸橼酸钠（无水）2g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g 溴麝香草酚蓝指示液20ml磷酸氢二钾(K2HPO4) 0.8g 琼脂15～20g磷酸二氢铵(NH4H2PO4) 1g 水1000ml除溴麝香草酚蓝和琼脂外，取上述成分，混微温使溶解,调节pH值使灭菌后为6.9±0.1，加入琼脂，加热融化，加入指示剂混匀。
分装于小试管中，121℃灭菌15分钟，置成斜面。
注：所用琼脂应不含游离糖，用前用水浸泡冲洗。
18、糖、醇发酵培养基基础液胨10g 0.5％酸性复红指示剂10ml糖、醇0.5％（或溴麝香草酚蓝指示液6ml ）氯化钠5g 水1000ml取胨和氯化钠加入水中，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.4,加入指示剂混匀,分装每瓶100ml，121℃灭菌15分钟。
配制葡萄糖发酵管时，于100ml基础液中加入0.5g葡萄糖,分装于含杜氏管(Durham)的小试管中。
121℃灭菌15分钟,配制其它糖醇发酵管时,将各种糖醇分别配成10％溶液,与基础液同时于121℃灭菌15分钟。
以无菌操作将5ml糖醇溶液加入100ml基础液内,分装于灭菌小试管中。
注：糖醇溶液亦可采用薄膜过滤法除菌。
19、5％乳糖发酵管胨0.2g 乳糖5g氯化钠0.3g 溴麝香草酚蓝指示液0.6ml磷酸氢二钠0.2g 水1000ml除乳糖和指示剂外，取上述成分，混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.4,加入乳糖及指示剂，混匀，分装于含杜氏管的灭菌小试管中，115℃灭菌15分钟。
20、尿素琼脂培养基胨1g 葡萄糖1g氯化钠5g 20％尿素溶液1000ml磷酸二氢钾(KH2PO4) 2g 琼脂20g0.2％酚红溶液6ml 水1000ml除尿素和琼脂外，取上述成分，混合，调节pH值使灭菌后为7.2±0.1，加入琼脂，加热溶化并分装于锥形瓶，121℃灭菌20分钟。
冷至50～55℃,加入经薄膜过滤除菌的尿素溶液，混匀。
尿素的最终浓度为2％，分装于灭菌试管中，置成斜面。
21、氰化钾培养基胨3g 磷酸氢二钠(Na2HPO4) 5.64g氯化钠5g 氰化钾试液磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.225g 水1000ml除氰化钾试液外，取上述成分，混合,调节pH值使灭菌后为7.5±0.1，121℃灭菌20分钟，冷却后，每100ml培养基中加入氰化钾试液1.5ml,分装于12×100mm灭菌试管内，每管4ml，立即用灭菌橡皮塞塞紧，置4℃保存。
同时，以不加氰化钾试液的培养基作为对照培养基，分装于灭菌试管中。
22、赖氨酸脱羧酶试验培养基胨5g 1.6％溴甲酚紫乙醇溶液1ml酵母浸出粉3g L-赖氨酸(DL-赖氨酸) 0.5(1g)/100ml葡萄糖1g 水1000ml除赖氨酸外，取上述成分，混合，加热溶解后分装，每瓶100ml。
加入L-赖氨酸0.5g（DL-赖氨酸1g）调节pH值使灭菌后为6.8,同时以不加赖氨酸培养基作为对照。
分装于灭菌的小试管内，每管1ml并滴加一层液体石蜡，121℃灭菌10分钟。
23、绿脓菌素(pyocyanin)测定用培养基（PDP琼脂）胨20g 甘油10ml氯化镁（无水）1.4g 琼脂18～20g硫酸钾（无水）10g 水1000ml取胨、氯化镁和硫酸钾加入水中，微温使深解。
调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，加入甘油及琼脂，加热溶解，121℃灭菌20分钟，置成斜面。
24、明胶培养基胨5g 明胶120g牛肉浸出粉3g 水1000ml取上述成分加入水中，浸泡约20分钟，随时搅拌，加热使溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，分装于小试管中，115℃灭菌20分钟。
25、硝酸盐胨水培养基胨10g 亚硝酸钠0.5g酵母浸出粉3g 水1000ml硝酸钾2g取胨及酵母浸出粉加入水中，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，加入硝酸钾和亚硝酸钠溶解，混匀。
分装于含杜氏管的小试管中，115℃灭菌20分钟。
26、胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)胨20g 枸橼酸钠1g牛肉浸出粉3g 枸橼酸铁铵1g乳糖10g 1％中性红溶液3ml蔗糖10g 琼脂18～20g去氧胆酸钠1g 水1000ml硫代硫酸钠 2.3g除糖、1％中性红溶液及琼脂外,取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.2±0.1，加入琼脂,加热融化后,再加入其余成分，摇匀，冷至约60℃，倾注平皿。