溶出度的方法学验证
溶出度检测方法建立及验证标准操作规程
溶出度检测方法建立及验证标准操作规程溶出度（释放度）检测是药物质量控制中的重要测试之一，用于评估药物的溶出性能。
溶出度测试可以确定药物在固体药物制剂中的药物溶出速率，从而判断药物的口服吸收和生物利用度。
本文将介绍溶出度检测方法的建立及验证标准操作规程。
1.仪器和试剂准备（1）溶出度仪器：常用的溶出度仪包括旋转篮法、磁力驱动法和流动池法等。
根据需求选择适合的仪器。
（2）溶出介质：根据药物特性选择适当的溶出介质，如水、缓冲液、模拟胃肠液等。
（3）试剂：如酸或硷，用于调整溶出介质的pH值。
2.样品制备（1）固体制剂：称取一定重量的固体制剂，放入溶出度仪的样品容器中，加入适量的溶出介质，封闭样品容器。
（2）液体制剂：取一定量的液体制剂，放入溶出度仪的样品容器中，封闭样品容器。
3.溶出度测试条件设定（1）旋转篮法和磁力驱动法：设定速度、旋转篮或磁力驱动子的数量等。
（2）流动池法：设定流速、温度和流动池的体积等。
4.溶出度测试操作（1）样品容器准备：根据所选的溶出度仪器选择适当的样品容器。
（2）样品装载：将样品容器放入溶出度仪器中，根据仪器要求加入预定体积的溶出介质。
（3）测试条件设定：根据所选的溶出度仪器设定相应的测试条件，如速度、温度等。
（4）样品测试：启动溶出度仪器，按照设定条件进行样品测试。
（5）结果记录：根据溶出度仪器的要求，记录样品测试结果。
5.数据处理和结果分析（1）计算溶出度：根据样品测试结果，计算出药物的溶出度或释放度。
（2）结果分析：对溶出度结果进行统计学分析，如平均值、标准偏差等。
二、方法建立1.选择合适的仪器和试剂，根据药物特性和要求选择合适的溶出度仪器和溶出介质。
2.设定溶出度测试条件，包括旋转篮法、磁力驱动法或流动池法的相关参数。
3.开展溶出度测试，根据所选的溶出度仪器和条件进行样品测试。
4.收集测试数据，根据测试结果计算药物的溶出度或释放度。
5.对测试结果进行分析和评估，根据统计学方法验证方法的准确性和可靠性。
溶出度
溶出度总结一、溶出度方法的确立1、溶出方法的选择（1）篮法(B)/浆法(P)，不提首选浆法或蓝法非崩解型药物（B）崩解型药物制剂中含有难以溶解、扩散的成分（P）主药或辅料为一定胶性物质（P）悬浮的制剂（B）,如辅料易堵塞网孔(P,使用沉降篮)（2）小杯法:≥500ml浓度过低,较灵敏的方法仍难以进行定量测定(不能使用沉降篮，测定不能再稀释测定)。
2、溶出介质的选择（1）水:不提以水为主（pH 值无法控制，在试验过程中易发生改变，适合非pH 依赖释药）（2）人工胃液（0.01～0.1mol/L盐酸溶液, 必要时可加胃蛋白酶）（3）人工肠液（必要时可加胰蛋白酶）（4）其他缓冲液（pH值一般不超过7.6）三羟甲基氨基甲烷(Tris):缓冲范围pH7.0～9.5，低离子强度(二氟尼柳胶囊)（5）其他: 低浓度表面活性剂; 醇溶液（一般＜5％）人体生理pH值在胃内为1～3.5,小肠内约为7,结肠内约为7.5（6）表面活性剂----尽量避免使用，种类和浓度需通过多个试验来验证。
•FDA 溶出度指导原则：对于难溶性药物不提倡使用有机溶剂，推荐SDS，但必须证明表面活性剂的选择和用量的合理性。
即应考察表面活性剂对药物的增溶量，以确定最少且最佳的使用浓度。
采用阳离子表面活性剂/非离子表面活性剂。
十二烷基硫酸钠(Sodium laurylsulfate SLS或SDS) —纯度；pH≦2.5聚山梨酯(吐温)20-80 (Tween20-80 ) —茴三硫片/吉非替尼片/盐酸雷洛昔芬片等溴化十六烷基三甲胺—粘度大月桂基二甲基氧化铵—替代SDS 用于胶囊剂（可以与酶配伍）3、溶出介质体积的选择使药物符合漏槽条件小规格品种一般不提倡将2粒/片投入1个溶出杯中来满足测定的灵敏度需要。
常用：大杯法：500 ～1000ml ，900ml为最普遍小杯法：100～250ml。
漏槽条件：即所用介质的体积应达到被测物质在37℃时在此介质中达到饱和溶液浓度的体积的3～10倍。
美国药典溶出度试验方法的建立与验证指导原则的解读-yh20170630.pptx
美国药典溶出度试验⽅法的建⽴与验证指导原则的解读-yh20170630.pptx美国药典溶出度试验⽅法的建⽴与验证指导原则的解读2017.6.30涵盖内容总体评价溶出介质溶出仪器实验设计测定⽅法与验证总体评价总体评价-限度限度范围应考虑的问题1、多批次的考量2、具有代表性3、具有针对性（针对重点药品）4、考虑样品的稳定性总体评价-区分⼒区分可能影响体内活性的改变处⽅组成、API的晶型关键辅料的品规⽣产⼯艺关键⼯艺参数等等总体评价-稳定性稳定性（重点是影响因素）总体评价-变异范围变异区间的考量总体评价-变异范围药物本⾝的原因举例总体评价-变异范围试验设计的原因举例溶出介质溶出介质选择的基本原则应考察API及制剂的理化性质和介质对API的影响：溶解性稳定性尽可能模拟药物在体内释药过程的环境溶出介质漏槽条件（SINKCONDITION）在静态循环溶出装置中随着溶出的进⾏杂质中药物浓度↑浓度梯度（Cs-C）↓扩散动⼒↓溶出速度↓☆漏槽条件：溶出介质量应超过药物全溶时所需量，⾄少3倍以上。
☆如果溶出介质的区分⼒⾜够，且经过验证，不满⾜漏槽条件也是允许的。
溶出介质释药介质的基本种类1、⽔（适合⾮pH依赖释药）2、pH1.2-6.8的溶液（速释制剂）3、pH1.2-7.5的溶液（缓释制剂）4、⼈⼯胃液2h+⼈⼯肠液5、⽔+表⾯活性剂（SDS或SLS、胆酸盐等）6、缓冲盐⽔+表⾯活性剂（SDS或SLS、胆酸盐等）7、有机溶媒（不推荐）8、其他如：结肠、⼝腔、眼内释药等特殊介质溶出介质关于表⾯活性剂和有机溶剂有机溶剂：在进⾏⼯艺摸索溶出⽐对时可以使⽤，在拟定质量标准时不建议使⽤。
表⾯活性剂：1）必要时可添加。
2）所使⽤浓度应在多⽔平进⾏考核。
3）应通过考核耐⽤性，确定是否规定表⾯活性剂的纯度。
所⽤缓冲盐与酸的浓度如影响溶出效果时，也应予以考察。
溶出介质其他因素溶出介质体积溶出介质脱⽓处理溶出介质酶允许添加酶的原因：因明胶表⾯会产⽣交联，影响溶出度测定结果，但在体内由于酶的作⽤，不会影响药物的体内释放。
泮托拉唑钠肠溶片溶出度测定方法学验证
【文 献标 识码 １Ａ
［文章编 号】１００７—１８６５（２０１８）０３ ００１０ ０２
Ｍ ｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａｌ Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｐａｎｔｏｐｒａｚｏｌｅ Ｓｏｄｉｕｍ Ｅｎｔｅｒｉｃ Ｔａｂｌｅｔｓ
Ｚｈａｏ Ｊｉａｌａｎ，Ｗ ａｎｇ Ｙｕｅｍｉｎ，Ｑｉｎ Ｌｉｎｇｈａｏ （Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍ ａｃｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｈｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５ １ ０００６，Ｃｈｉｎａ）
ｄｒｕ ｇ． Ｋｅｙｗ ｏｒｄｓ：Ｐａｎｔｏｐｒａｚｏｌｅ ｓｏｄｉｕｍ ｅｎｔｅｒｉｃ ｔａｂｌｅｔｓ： Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ： Ｍ ｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａ１ ｓｔｕｄｙ
泮 托 拉唑 钠化 学 名为 ５一二 氟 甲氧基一２一｛ｆ３，４一二 甲氧 基．２．（吡 啶 基 ）甲基 １亚磺 酰基 ｝。ｌＨ 苯并 咪唑钠 盐 ，是 继奥 美拉 唑和 兰索 拉 唑
球第 三 个质 子泵 抑制 剂 。此 类 药物通 过 作用 于 一Ｋ 一ＡＴＰ 酶 抑 制 胃酸 的分 泌 ，用 于 卜 指 肠和 胃溃 疡及 反 流性 食管 炎等 疾病 的治疗 。木文 对泮 托拉 唑 钠肠 溶片 溶 出度 测定 方法 从专 属性 、线
性 及 范 嘲、精 密 度 、溶液 稳定 性 、回收 率 等方 面进 行验ｔ：０ｂｉｅｃｔｉｖｅ Ｔｂ ｍｃｔｈ０ｄｏＩｏ ｃａｌＩｖ ｖａｌｉｄａｔｅ ａ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｐａｎｔｏｐｒａｚｏｌｅ ｓｏｄｉｕｍ ｅｎｔｅｒ ｉｃ ｔａｂｌｅｔｓ Ｔｈｅ ｓｅｌｆ－ｍａｄｅ ｐａｎｔｏｐｒａｚｏｌｅ ｓｏｄｉｕｍ ｅｎｔｅｒｉｃ ｔａｂｌｅｔｓ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｌｉｓｔｅｄ ｄｒｕ； ￣．Ｍ ｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ Ｔｈｅ ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｐａｎｔｏｐｒａｚｏｌｅ ｓｏｄｉｕｍ ｅｎｔｅｒ ｉｃ ｔａｂｌｅｔｓ ｗ ａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｗ ｉｔｈ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍ ｅｔｒｙ．Ｗ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ｖａｌｉｄａｔｅｄ ｔｈｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｍ ｅｔｈｏｄ Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｍ ｅｄｉａ．ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ ａｎｄ ｍ ｅｍ ｂｒａｎｅ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｄｉｄ ｎｏｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆｐａｎｔｏｐｒａｚｏｌｅ ｓｏｄｉｕｍ ｉｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｂｖ ＵＶ Ｉｔ ｓｈｏｗ ｅｄ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｉｎ ｄｒｕｇ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｆ ｒｏｍ ｌ ｇ／ｍ Ｌ ｔＯ ２５ Ｉ．ｔｇ／ｍ Ｌ Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ９５％ ｔｏ １０２％ ．Ｔｈｅ ＲＳＤ ｏｆｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｗｅｒｅ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ２ ％ ａｎｄ ｔｈｅ ｓａｍ ｐｌｅ ｗａｓ ｓｔａｂｌｅ ｉｎ ４ ｈｏｕｒｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｔｈｅ ＵＶ ｍ ｅｔｈｏｄ ｉＳ ｒｅｌｉａｂｌｅ ．Ｔｈｅ ｄｒｕｇ ｒｅｌｅａｓｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｓｅｌｆ－ｍ ａｄｅ ｐａｎ ｔｏｐｒａｚｏｌｅ ｓｏｄｉｕｍ ｅｎｔｅｒｉｃ ｔａｂｌｅｔｓ ｉＳ ｓｉｍ ｉｌａｒ ｔｏ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｌｉｓｔｅｄ
溶出度
溶出度总结一、溶出度方法得确立1、溶出方法得选择（1）篮法(B)/浆法(P)，不提首选浆法或蓝法非崩解型药物（B）崩解型药物制剂中含有难以溶解、扩散得成分（P）主药或辅料为一定胶性物质（P）悬浮得制剂（B）,如辅料易堵塞网孔(P,使用沉降篮)（2）小杯法:≥500ml浓度过低,较灵敏得方法仍难以进行定量测定(不能使用沉降篮，测定不能再稀释测定)。
2、溶出介质得选择（1）水:不提以水为主（pH 值无法控制，在试验过程中易发生改变，适合非pH 依赖释药）（2）人工胃液（0、01～0、1mol/L盐酸溶液, 必要时可加胃蛋白酶）（3）人工肠液（必要时可加胰蛋白酶）（4）其她缓冲液（pH值一般不超过7、6）三羟甲基氨基甲烷(Tris):缓冲范围pH7、0～9、5，低离子强度(二氟尼柳胶囊)（5）其她: 低浓度表面活性剂; 醇溶液（一般＜5％）人体生理pH值在胃内为1～3、5,小肠内约为7,结肠内约为7、5（6）表面活性剂----尽量避免使用，种类与浓度需通过多个试验来验证。
•FDA 溶出度指导原则：对于难溶性药物不提倡使用有机溶剂，推荐SDS，但必须证明表面活性剂得选择与用量得合理性。
即应考察表面活性剂对药物得增溶量，以确定最少且最佳得使用浓度。
采用阳离子表面活性剂/非离子表面活性剂。
十二烷基硫酸钠(Sodium laurylsulfate SLS或SDS) —纯度；pH≮2、5聚山梨酯(吐温)20-80 (Tween20-80 ) —茴三硫片/吉非替尼片/盐酸雷洛昔芬片等溴化十六烷基三甲胺—粘度大月桂基二甲基氧化铵—替代SDS 用于胶囊剂（可以与酶配伍）3、溶出介质体积得选择使药物符合漏槽条件小规格品种一般不提倡将2粒/片投入1个溶出杯中来满足测定得灵敏度需要。
常用：大杯法：500 ～1000ml ，900ml为最普遍小杯法：100～250ml。
漏槽条件：即所用介质得体积应达到被测物质在37℃时在此介质中达到饱与溶液浓度得体积得3～10倍。
溶出度方法学验证-4
Reciprocating cylinder Flow cell
1
Reciprocating cylinder
Pharmacopial status
• Apparatus 3 of the USP and there are several official monographs which use this appratus • The Apparatus is included as Apparatus 4 in the Ph. Eu. (Accepted in Eu applications)
most probably will be removed from the USP !!!
17
• Advantages
– standard equipment (paddle) can be used, only add a stainless steel disk assembly
• Disadvantages
– disk assembly restricts patch size
16
Apparatus 6 – Rotating cylinder Apparatus 7 – Reciprocating holder
In Canada any of the pharmacopoeial texts set out in this annex can be considered interchangeable. The dissolution tests for delayed-release/enteric coated products as published in the USP and in the Ph. Eur. can be considered interchangeable. 2
溶出度方法学研究
and f2 Limit
平均偏差（Average difference） 2% 5% 10% 15% 20%
F2 临界值（f2 Limit）
83 65 50 41 36
f2 因子的应用条件及注意事项： 1.在进行参比与受试制剂的溶出曲线比较的过程中，时间点间隔 无需相等，但两者所取各时间点必须一致，一般除 0 时外，选择 3 点以上，即 n≥3。 2.f2 计算公式只适用于受试与参比制剂的平均累积释放度差值 <100 时的溶出曲线比较（如果二者的差值>100，就会得到一个负 值），普通口服制剂要保证药物溶出 90%以上，缓释制剂、肠溶 制剂药物释放需达到 80%以上，或达到释放平台。 3.受试与参比制剂释放曲线上各时间点的平均累积释放度差异， 在平台区达到最小（如果外推到释放 100％，差值将为 0），在该
水：纯化水（质量标准见中国药典 2010 年版二部）
1.4 注释
溶出曲线一般要考察至少 3 种介质，对于仿制药，在标准介质中的
溶出曲线必做，如果标准介质与上述常用介质不一致，与标准介质最接
近的介质不再做。
溶出介质第一次配制时，要测定 pH 值，与标准值的差值应不超过
0.1。溶出介质使用前要加热或超声脱气。
超声使充分溶解后定量稀释至标准规定浓度，摇匀，滤过，取续滤液进
样。
对照品溶液：取对照品适量，按标准方法配制。
判断标准：空白溶液在主成分的位置不出峰；供试品溶液色谱峰的
理论板数、拖尾因子要符合要求；对照品溶液和供试品溶液的峰面积相
差不超过 10% 。
4.2 系统精密度
取专属性项下的对照品溶液，连续进样 6 次。结果见下表。
在制剂的开发研究中，通过对比不同处方之间的溶出曲线，可以 较准确地反映药物处方、工艺、生产场地及规模等因素变化对药物体 外释放行为的影响。近年来，国外针对溶出曲线的相似性评价方法报 道很多，其中 f2 因子方法因为计算简单、判定结果可靠，作为评价 体外溶出曲线相似性的方法，已经被美国 FDA 的 CDER 和欧盟 EMEA 收 载并推荐使用。
甲硝唑口含片的溶出度测定
甲硝唑口含片的溶出度测定目的：建立甲硝唑口含片溶出度的测定方法。
方法：采用转篮法，以稀盐酸（9→1000）为溶出介质，转速为100r/min，45min时取样，以紫外分光光度法测定甲硝唑口含片的含量。
结果：甲硝唑可以采用紫外分光光度法测定甲硝唑口含片溶出度；3批中试样品在45min时的累计溶出度均符合Ch.P（2015）的规定，其数值分别为（99.4±0.22）%（RSD为0.21%，n=6）、（99.0±0.32）% （RSD 为0.27%，n=6）、（98.4±0.18）% （RSD为0.34%，n=6）。
结论：该甲硝唑口含片测定方法科学合理、简便易行、结果准确。
标签：甲硝唑口含片溶出度测定转篮法紫外分光光度法溶出度实验是评价口服固体制剂内在质量的一种必要手段，对保证药物能从制剂中顺利溶出而发挥疗效起到十分重要的作用，也是新药评审的重要依据[1]。
甲硝唑是临床常用的、疗效肯定的抗厌氧菌药物，而且价格较便宜，有利于减轻患者的经济负担，不但用于治疗厌氧菌感染，而且是抗多种寄生虫、原虫等的重要药物，目前尚未见有甲硝唑口含片上市，为了方便口腔厌氧菌感染的患者用药和疾病的治疗，笔者采用矫味制剂技术，将甲硝唑原料制备成了甲硝唑口含片[2]。
笔者参考相关文献，采用紫外分光光度法，测定了甲硝唑口含片溶出度，并通过方法学验证了溶出度测定方法科学性。
一、材料1.仪器ZRC-6ST型智能溶出度测定仪（天津创兴电子设备制造有限公司）；ZPY1036型旋转式压片机（上海天祺制药机械有限公司）；Carry-100紫外可见分光光度计（美国瓦里安仪器有限公司）；DZF-6020真空干燥箱（上海基玮试验仪器设备有限公司）；TE214S型电子分析天平（德国赛多利斯）。
2.药品与试剂甲硝唑对照品（中国药品生物制品检定所，批号：090806，纯度：99.90%）；甲硝唑原料（宜昌长江药业有限公司，批号：20140162）；甲硝唑口含片（自制，批号：150601，150602，150603，规格：100mg/片）；十二烷基硫酸钠（SDS，湖南尔康制药有限公司）；其他试剂均为分析纯。
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溶出度的方法学验证
溶出度指的是单位时间内固体溶解于溶液中的量，通常以质量浓度（mg/mL）或体积浓度（mg/L）表示。
溶出度的方法学验证主要包括截短法、体外溶出试验、压片法和旋转桨法等。
截短法主要适用于缓释药物的溶出度测试。
该方法通过将靶药物的溶液倒入给定的表观容积的释放介质中，使用一定速度进行搅拌，并在不同时间点采样，测定每个时间点溶出物中药物的浓度。
然后根据浓度-时间数据绘制药物释放曲线，进而计算溶出度。
体外溶出试验也是一种常用的溶出度测试方法。
该方法通过使用自动溶出度仪来模拟体外环境，将药物制剂置于固定容器中的释放介质中，通过设定合适的搅拌速度和温度，在预定时间内采取适量的样品进行药物浓度测定。
测定结果可以用来评估制剂的溶出性能。
压片法是常用的用于固体制剂的溶出度测试方法。
该方法通过将固体制剂样品与某种溶液进行摩擦压片，使其成为固体块状，然后放入溶出介质中进行搅拌。
在一定时间内，采取适量的样品进行药物浓度测定，并根据测定结果计算溶出度。
压片法对块状制剂的溶出度测试非常适用，常用于固体制剂的质量控制。
旋转桨法用于悬浮型和非均质固体制剂的溶出度测试。
该方法使用旋转桨设备，将样品放入容器中，浸入溶出介质中并进行旋转搅拌。
在一定时间内，采取适量
的样品进行药物浓度测定，并计算溶出度。
旋转桨法是一种可以模拟胃肠道溶解环境的方法，可以评估药物在溶液中的溶出速度。
除了以上常用的方法，还有其他方法可以用于溶出度的验证，如自旋诱导溶出和微量过饱和溶出等方法。
这些方法根据所需的实验条件和目的的不同，选择合适的方法来进行溶出度测试。
总结起来，溶出度的方法学验证可以通过截短法、体外溶出试验、压片法、旋转桨法等多种方法来进行。
每种方法都有其适用的药物类型和测试条件。
选用合适的方法，可以准确评估药物的溶出性能，为制药工艺控制和质量评价提供依据。