山茱萸多糖的提取及清除自由基作用
川产山茱萸苷类及多糖成分的研究的开题报告
川产山茱萸苷类及多糖成分的研究的开题报告一、研究背景和意义山茱萸（Cornus officinalis Sieb.et Zucc.）是我国传统中药之一，历经数千年的临床实践证明，具有一定的药用作用。
川产山茱萸主要分布于四川、重庆等地区，其性味为酸涩、微寒，归肝、肾、脾经。
现代研究发现山茱萸中主要含有苷类和多糖等成分，具有降血脂、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等药理作用，因此备受关注。
众所周知，山茱萸的苷类成分是其药用价值的主要来源之一。
已有研究表明，山茱萸中可能含有酚酸类、黄酮类、萜烯类等苷类成分，其具体成分和含量尚未得到充分的研究。
此外，山茱萸中多糖类成分也是研究的热点之一。
研究表明，山茱萸中的多糖类成分具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等生物活性，具有广泛的应用前景。
因此，本研究拟对川产山茱萸中的苷类和多糖成分进行分离和纯化，探究其化学成分和药理作用，为进一步探究其使用价值提供科学依据。
二、研究内容1. 川产山茱萸中的苷类成分分离和鉴定：采用不同的化学方法（如硅胶柱层析、逆相液相色谱等）进行分离和纯化，利用质谱仪、化学计量仪等仪器对其化学结构进行鉴定。
2. 川产山茱萸中的多糖类成分分离和鉴定：采用多种不同的萃取方法（如超声波法、微波法、辅助酶解法等）进行分离和纯化，利用高效液相色谱仪、紫外分光光度计等仪器对其化学结构进行鉴定。
3. 川产山茱萸中苷类和多糖成分的生物活性评价：使用不同的体外和体内实验方法进行生物活性评价，如体外抗氧化实验、细胞免疫调节实验、细胞毒性实验等。
三、研究方法1. 川产山茱萸样品的采集和贮存：收集四川、重庆等地的山茱萸样品，进行干燥和粉碎，保存于干燥密闭容器中。
2. 川产山茱萸中苷类和多糖成分的提取和纯化：根据已有方法，采用酸碱法、醇提法等不同的提取方法，利用硅胶柱层析、逆相液相色谱等不同的分离方法进行纯化和分离。
3. 化学成分的鉴定：利用高效液相色谱、质谱仪等分析仪器进行分析，确定其化学成分的分子量、分子结构等信息。
山药多糖的作用及其提取方法 李昂
山药多糖的作用及其提取方法李昂.烟台大学生命科学学院，山东烟台264005摘要：本文综述了山药多糖各种生物活性作用，并对近几年山药多糖的提取方法作了综述，指出了不同提取方法最佳提取工艺条件关键词：山药多糖；作用；提取；最优条件The Effect of Yam Polysaccharide and Method of itsExtractionLi Ang（B iological Engineering，College of Life Science,Yantai University，Yantai 264005）Abstract: This paper was reviewed the biological activity of polysaccharides, and the extraction method in recent years, Chinese yam polysaccharide were summarized, pointed out the optimum extraction conditions of different extraction methodsKey words: yam polysaccharide; function; extraction; optimal condition前言山药是薯蓣科多年生宿根植物山药(Dioscores opposite Thunb．)的块根，主产于河南、广东、广西等省，以河南焦作市(古怀庆府)所产最佳，又称“怀山药”。
《本草纲目》记载其能“益肾气，健脾胃，止泻痢，化痰涎，润皮毛”。
现代医学研究表明，山药具有增强免疫、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降血糖等多种生物活性，其主要功效成分是山药多糖[1]。
因此山药多糖成为近年来近年来的研究热点。
山药多糖的组成和结构比较复杂，不同的研究者提取分离出了不同的山药多糖，其中有均多糖，有杂多糖，也有糖蛋白，相对分子质量从数干到数百万不等，其多糖含量和糖基组成也各不相同。
山茱萸纳米水提液
近年来的研究发现,肺炎衣原体、幽门螺杆菌、巨细胞病毒等病原体通过激活炎症反应及损伤内皮而促进冠心病的发生发展〔5〕,提示AS 与感染性疾病的发病机制可能密切相关。
T RE M 21属免疫球蛋白超家族成员,能显著放大由脂多糖(LPS )等细菌产物引发的急性炎症反应,在感染性休克发生中具有重要作用,因而引起越来越多研究者的关注。
研究表明,TRE M 21不仅与细菌感染相关的急性炎症有关,在一些病毒感染性炎症、非特异性慢性炎症、缺血2再灌注损伤、烧伤、甚至肿瘤的复发及预后判断方面都有重要作用〔6,7〕。
U937本质上是人单核细胞,经佛波酯、ox 2LDL 刺激后可以分化为巨噬细胞样细胞,进而转化为巨噬细胞源性泡沫细胞。
U937的这一特性使其成为体外研究泡沫细胞形成机制的重要工具。
本研究用RT 2PCR 法及W estern 印迹法对U937向泡沫细胞转化过程中TRE M 21mRNA 及蛋白表达情况进行检测,结果发现单核细胞在向泡沫细胞转化过程中表达量不断增加,提示TRE M 21参与泡沫细胞的形成,可能与AS 斑块的发生发展密切相关。
因此TRE M 21可能成为AS 治疗的一个新的靶点或监测AS 进展的一项新指标。
4 参考文献1 Yue HH,Leng N,W u Z B,et al 1Exp ressi on of CD147on phorbol 2122my 2ristate 2132acetate (P MA )2treated U937cells differentiating int o foam cells 〔J 〕1A rch B i oche m B i ophys,2009;485(1):302412 Galkina E,Ley K 1I m mune and infla mmat ory mechanis m s of ather oscler o 2sis 〔J 〕1Annu Rev I m munol,2009;27(1):16529713 毛节明,王 广1动脉粥样硬化与炎症〔J 〕1中国循环杂志,2006;21(6):4052614 朱建华1动脉粥样硬化炎症机制新视点〔J 〕1同济大学学报(医学版),2009;30(2):62915 朱建健,王 宪1慢性炎症、自身免疫和动脉粥样硬化〔J 〕1生理科学进展,2002;33(4):32723116 Spapen HD,Hachi m i 2I drissi S,Corne L,et al 1D iagnostic markers of sep 2sis in the e mergency depart m ent 〔J 〕1Acta Clin Belg,2006;61(3):13824217 Klesney 2Tait J,Turnbull I R,Col onna M 1The T RE M recep t or fam ily andsignal integrati on 〔J 〕1Nat I m munol,2006;7(12):12662731〔2009211216收稿 2010201220修回〕(编辑 曲 莉)山茱萸纳米水提液对衰老小鼠脑组织p66shc表达的影响王明富 欧 芹 朱贵明 王 昭 冷莉莉 (佳木斯大学基础医学院,黑龙江 佳木斯 154007) 〔摘 要〕 目的 探讨山茱萸制剂对自然衰老小鼠脑组织的磷酸化酪氨酸信号适配蛋白(66kil odalt on is ofor m of shcgene p r oducts,p66shc )表达的影响。
山药多糖的体外抗氧化活性
122 2021, Vol.42, No.19 食品科学
※基础研究
山药多糖的体外抗氧化活性陈丽叶1，常希光2，冯晓光2，杨肖飞2，刘慧君1，范俊峰3，陈湘宁1,*（1.北京农学院食品科学与工程学院，北京 102206；2.北京裕农优质农产品种植有限公司，北京 101400；3.北京林业大学生物科学与技术学院，北京 100083）
摘 要：为探究山药多糖能否抑制低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）氧化，本实验提取了山药
（Dioscorea opposita）多糖并除杂，分析了多糖的成分及体外抗氧化活性，对多糖能否抑制LDL氧化进行了初步探讨。结果表明，山药多糖的总糖质量分数为（65.79±1.03）%，蛋白质量分数为（5.89±0.43）%，灰分质量分数为（5.51±0.14）%，糖醛酸质量分数为（10.81±1.14）%；4 个主要多糖组分的分子质量分别为933 742、 148 878、39 233、17 318 Da；对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、超氧化物自由基和羟自由基清除率的半抑制质量浓度分别为1.06、1.06 mg/mL和0.98 mg/mL；可有效减缓共轭二烯的形成，1.0 μg/mL山药多糖对硫代巴比妥酸反应
物的抑制率为CuSO4组的16.28%（P＞0.05）；但对LDL糖化的抑制作用不大。本研究可为了解山药多糖对LDL氧化
的抑制作用提供参考。关键词：山药多糖；抗氧化；低密度脂蛋白；糖化
In Vitro Antioxidant Activity of Chinese Yam Polysaccharides
CHEN Liye1, CHANG Xiguang2, FENG Xiaoguang2, YANG Xiaofei2, LIU Huijun1, FAN Junfeng3, CHEN Xiangning1,*(1. College of Food Science and Engineering, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China; 2. Beijing Unong High-Quality Farm Products Planting Limited Company, Beijing 101400, China; 3. College of Biological Sciences and Technology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China)
山茱萸果核不同提取物体外抗氧化活性-南美娟
64第21卷 第3期 2019 年 3 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 21 No. 3 Mar .，2019摘 要：目的：对山茱萸果核不同提取物的体外抗氧化作用进行评价。
方法：通过测定山茱萸果核石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇和水提取物清除羟自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O 2-·）及1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）的能力，评价其抗氧化活性。
结果：山茱萸果核石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇、水提取物和VC 体外清除羟自由基的IC 50值分别为3.860、4.578、2.900、2.222、0.46 mg；清除超氧阴离子自由基的IC 50值分别为4.345、4.329、4.278、4.258、0.36 mg；果核乙酸乙酯、无水乙醇、水提取物和VC 清除DPPH 自由基的IC 50值分别为0.130、0.137、0.026、0.029 mg。
结论：山茱萸果核的水提取物具有良好的抗氧化活性，具有潜在的开发应用价值。
关键词：山茱萸果核；提取物；抗氧化；开发应用中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2019) 03- 0064- 04基金项目：陕西省教育厅重点科研计划项目（18JS028）作者简介：南美娟（1993-），女，陕西咸阳人，硕士研究生，研究方向：中草药药效物质基础研究。
通讯作者：邓翀（1978-），男，陕西咸阳人，教授，博士，研究方向：中草药药效物质基础及中药炮制化学研究。
Antioxidant Activity of Different Extracts of Fructus Corni Fruit Core in VitroNAN Meijuan，DENG Chong，ZHANG Huawei，BAI Wei（Shaanxi University of Chinese Medicine，Xianyang 712046，Shaanxi，China）Abstract：Objective ：To evaluate the antioxidant activity of different extracts of Fructus Corni fruit core. Methods ：The antioxidant activity of different extracts of Fructus Corni fruit core petroleum ether，ethyl acetate，absolute ethanol and water extract were evaluated by antioxidant tests，including hydroxyl radical，superoxide anion radical and DPPH radical scavenging ability. Results ：The IC 50 value of hydroxyl radical scavenging by petroleum ether，ethyl acetate，absolute ethanol，water extract and VC were 3.860，4.578，2.900，2.222 and 0.463 mg；and the IC 50 value of scavenging superoxide anion radical were 4.345，4.329，4.278，4.288 and 0.368 mg；The IC 50 value of DPPH radical scavenging by ethyl acetate，absolute ethanol，water extract and VC were 0.130，0.137，0.026 and 0.029 mg. Conclusion ：The water extract of Fructus Corni fruit core has good antioxidant activity，with potential development and application value.Keywords：Fructus Corni fruit core；extract；antioxidant；development and application山茱萸果核系山茱萸科山茱萸属植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果核。
山茱萸的炮制及药理研究进展
山茱萸的炮制及药理研究进展
姬涛
【期刊名称】《光明中医》
【年(卷),期】2022(37)21
【摘要】山茱萸是当前临床中常见的中药材,本身有着补益肝肾和收涩固脱的效果。
从古至今山茱萸的炮制方法很多,例如炒法、蒸法、酒制法和盐制法等。
山茱萸的
药理作用也有很多,最显著的就是在免疫系统方面、抗心律失常方面、降血糖方面、抗炎抑菌和抗氧化等方面所起到的积极效果。
因此,此文对山茱萸进行全面研究,围
绕着山茱萸的研究进展和它的药理作用展开分析,帮助人们对山茱萸有更全面的了解。
【总页数】3页(P4018-4018)
【作者】姬涛
【作者单位】河南中医药大学第一附属医院药学部
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.山茱萸的炮制工艺与质量评价研究进展
2.山茱萸的炮制历史沿革及现代研究进展
3.山茱萸化学成分和药理作用的研究进展
4.山茱萸多糖的提取分离及药理活性研究进展
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
山茱萸多糖的提取及含量测定
山茱萸多糖的提取及含量测定【关键词】山茱萸；，，山茱萸多糖；，，均匀设计；，，提取摘要：目的从山茱萸中提取多糖，并建立山茱萸多糖含量的测定方法。
方法采用均匀设计优化山茱萸多糖的提取条件，用热水浸提、乙醇沉淀、DE-52柱层析的方法提取纯化山茱萸多糖，用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量。
结果山茱萸中多糖的含量为16.04%，平均回收率为99.01%，RSD=1.13%（n=3）。
结论首次运用均匀设计优化山茱萸多糖的提取条件，提取得率高，苯酚-硫酸比色法测定山茱萸多糖含量稳定性、回收率较好。
关键词：山茱萸；山茱萸多糖；均匀设计；提取xtraction and Determination of the Content of Polysaccharide from Fructus CorniAbstract：ObjectiveTo extract polysaccharide and establish the method for determination of the content of polysaccharides from Fructus Corni. MethodsUniform design test was used to extract polysaccharides from Fructus Corni. Polysaccharide was purified by water extraction ，ethanol sedimentation， DE-52 chromatography. The content of polysaccharide was determined by phenol-vitriolic colorimetry. ResultsThe content of polysaccharide in the Fructus Corni was 16.04%，the average recovery was 99.01%，and RSD was 1.13%（n=3）.ConclusionIt is the first time that uniform design is used to optimize extraction conditions of polysaccharide. The extraction rate of polysaccharide is high. Phenol-vitriolic colorimetry was a stable and reproduciable method to determine content of polysaccharide in Fructus Corni.Key words：Fructus Corni; Polysaccharide; Uniform design; Extraction山茱萸［1］(Fructus Corni)为山茱萸科植物山茱萸Cornus Officinalis Sieb.et Zucc.的干燥果肉，又名山萸肉、药枣、肉枣等，临床上以除去种子的成熟果实入药，其味酸、涩、微温，归肝肾经，有补益肝肾、涩精固脱的功效，是我国传统的中药材。
微波辅助提取山茱萸多糖的工艺研究
微波辅助提取山茱萸多糖的工艺研究摘要:采用单因素试验和正交试验,进行了微波辅助提取山茱萸多糖的研究,得到了微波辅助提取山茱萸多糖的最佳工艺条件是料液比为1∶25(m/V,g∶mL),微波功率为560 W,微波处理时间为10 min,浸提时间为70 min｡在此工艺条件下,多糖平均提取率为10.53%｡与热水浸提法进行比较,微波辅助提取能缩短提取时间,提高山茱萸多糖提取率｡关键词:山茱萸多糖;微波;提取Study on Microwave-assisted Extraction of Polysaccharides from Corni Fructus Abstract: Microwave-assisted exaction(MAE)of Corni Fructus polysaccharides was studied by single factor design and orthogonal test. The results show that the optimum conditions of extraction were microwave treatment for 10min at power of 560W after being extracted for 70min, with the ratio of material to water at 1∶25(g∶mL). Under these conditions, the yield of polysaccharides was 10.53%. MAE could shorten the exaction time and improve yield of Corni Fructus polysaccharides compared with direct hot water extraction.Key words: Corni Fructus polysaccharides; microwave; extraction山茱萸(Corni Fructus)为山茱萸科植物山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc)的干燥果肉｡本品酸､涩,微温,归肝､肾经,具有补肝益肾,涩精固脱之功效｡药理研究证明,山茱萸多糖可明显提高正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数,促进其溶血素､溶血空斑形成和淋巴细胞的转化;可显著升高D-半乳糖致衰老模型小鼠血中SOD､CAT及GSH降低的活性,降低血､肝匀浆､脑匀浆中LPO升高的水平;可提高环磷酰胺致免疫功能低下动物的腹腔巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数,具有明显的增强免疫及抗衰老作用[1-4]｡多糖的提取方法有多种,包括水浸醇沉法､稀酸法､稀碱法､超声辅助法､微波辅助法和酶法,山茱萸多糖的提取目前主要是水浸醇沉法[5-7],未见用微波辅助提取的报道｡利用微波加热提取多糖,能较大程度地提高多糖提取率[8],本文对微波辅助提取山茱萸多糖提取工艺进行了研究,以期获得山茱萸多糖的最佳提取条件,为其产业化生产提供有效的方法和技术参数｡1材料､试剂与仪器山茱萸采自河南省栾川县,经鉴定为山茱萸科植物山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc)的干燥果肉｡试验所用试剂均为分析纯｡试验所用仪器有752N紫外分光光度计､台式离心机､电子恒温不锈钢水浴锅､电子天平､KQ3200B型超声波清洗器､美的微波炉｡2方法与结果2.1标准曲线的绘制采用苯酚-硫酸法[7]｡精密称取105℃干燥至恒重的D(+)-葡萄糖10.11 mg,去离子水溶解,并转移至100.0 mL容量瓶中,加去离子水至刻度,摇匀｡精密吸取0.0､0.6､1.0､1.4､1.8､2.2､2.6 mL于10.0 mL容量瓶中,平行3份｡分别加入5%苯酚1.0 mL,摇匀后迅速加入浓硫酸5.0 mL,密塞,摇匀,放置5 min,沸水浴中加热15 min,取出置冷水浴中冷却,定容,在485 nm处测定吸光值｡以横坐标为吸光值,纵坐标为葡萄糖浓度,得回归方程C=0.029 2A+0.102 7,r=0.999 6｡2.2山茱萸预处理将已干燥的山茱萸粉碎,过60目药典筛｡取一定量的山茱萸粉末,用8倍体积的95%乙醇回流8 h脱脂,冷却,过滤,滤渣晾干即为多糖提取的原材料｡2.3单因素试验微波辅助提取工艺的优化主要包括微波功率､微波处理时间､料液比和浸泡时间的选择｡针对这几个因素,分别在保持其他因素相同的条件下进行单因素试验,考察各因素对提取率的影响,选择最佳的提取工艺条件｡2.3.1微波功率对山茱萸多糖提取的影响精密称取预处理的山茱萸粉末5.000 0 g,平行5份,置于三角锥形瓶内,以去离子水作为提取溶剂,料液比1∶20,浸泡30 min,选择不同微波功率80､240､400､560､800 W处理8 min,离心分离得到上清液,稀释定容,按2.1的方法测定吸光值｡结果见图1,从图1看出,吸光值随微波功率的增大而呈先升后降的趋势,560 W左右为较好的提取条件,以此条件进行以后的正交试验｡2.3.2微波处理时间对山茱萸多糖提取的影响精密称取预处理的山茱萸粉末5.000 0 g,平行6份,置于三角锥形瓶内,以去离子水作为提取溶剂,料液比1∶20,浸泡30 min,微波功率560 W,分别处理2､4､6､8､10､12 min,处理完毕后,离心分离得到上清液,稀释定容,按2.1的方法测定吸光值｡结果见图2,由图2可以看出吸光值随微波处理时间的延长而增加,但10 min之后增加不大,所以选取6､8､10 min 进行正交试验｡2.3.3料液比对山茱萸多糖提取的影响精密称取预处理的山茱萸粉末5.000 0 g,平行5份,置于三角锥形瓶内,以去离子水作为提取溶剂,选择料液比分别为1∶5､1∶10､1∶15､1∶20､1∶25,浸泡30 min,微波功率560 W,处理8 min,提取完毕后,离心分离得到上清液,稀释定容,按2.1的方法测定吸光值｡结果见图3,从图3看出,吸光值随提取溶剂比例的提高而呈上升趋势,但增加到料液比为1∶15后就趋于平稳,1∶15､1∶20､1∶25为较好的提取条件,以此条件进行以后的正交试验｡2.3.4浸泡时间对山茱萸多糖提取的影响精密称取预处理的山茱萸粉末5.000 0 g,平行5份,置于三角锥形瓶内,以去离子水作为提取溶剂,料液比1∶20,选取不同的浸泡时间10､30､50､70､90 min,微波功率400 W,处理时间6 min,提取完毕后,离心分离得到上清液,稀释定容,按2.1的方法测定吸光值｡结果见图4,从图4看出,吸光值随浸泡时间的增大而呈上升趋势,但增加到一定程度就趋于平稳,超过70 min后提取率变化不大,因此,浸泡时间宜选择为70 min左右,以此条件进行以后的正交试验｡2.4微波辅助提取工艺条件的正交试验根据单因素试验结果,用正交试验对影响提取的因素进行优化,选择料液比(1∶15､1∶20､1∶25)､浸泡时间(50､70､90 min),微波功率(400､560､800 W)､微波处理时间(6､8､10 min),设计四因素三水平L9(34)正交试验,试验方案见表1,结果见表2｡直观分析表2可看出,微波辅助提取不同因素水平对多糖提取率有明显的影响｡从极差R值可知,四因素对多糖提取率影响的主次顺序为C>D>B>A,即料液比为主要影响因素,浸泡时间次之,微波功率影响最小｡根据单因素及正交试验结果,各因素最佳为C3､D3､B3､A2,考虑到浸泡70 min和90 min效果差别不大,为了节约时间,最佳提取工艺确定为C3D2B3A2,即料液比1∶25､浸泡时间70 min､微波处理时间10 min､微波功率560 W,在此条件下,山茱萸多糖平均提取率为10.53%｡2.5验证试验按正交试验优选工艺C3D2B3A2,重复提取3次,得平均提取率10.53%,表明试验所确定的最佳工艺为较优工艺｡2.6微波辅助提取法与热水浸提法的比较使用同一批原料,在各自最佳试验条件下分别进行3次试验,对比微波辅助提取与热水浸提对山茱萸多糖含量测定的影响,结果见表3,从表3可以看出,微波辅助提取和热水浸提相比,明显地提高了多糖的提取率,并且缩短了提取时间｡3结论本试验对微波辅助提取水浸法提取山茱萸水溶性多糖工艺进行了优化,并对山茱萸多糖含量进行了测定｡采用微波辅助提取法最佳提取工艺为:料液比1∶25､浸泡时间70 min,微波功率560 W､微波处理时间10 min｡其中,料液比和浸泡时间对多糖提取率有较为明显的影响,在此条件下,山茱萸多糖平均提取率为10.53%,与热水浸提法比较,山茱萸水溶性多糖平均提取率增加了35.7%｡此外,微波辅助提取技术的最大优点是提取率高､提取时间短,同时它还具有成本低､投资少的优点,其在工业化提取植物有效成分方面具有广阔的应用前景,本试验为山茱萸多糖的提取最优工艺提供了依据｡参考文献:[1] 李平,王艳辉,马润宇. 水提山茱萸多糖的理化性质及抗氧化活性研究[J]. 食品科学,2003,24(7):133-137.[2] 李平,王艳辉,马润宇. 山茱萸多糖PFCAm的理化性质及生物活性研究[J]. 中国药学杂志,2003,38(8):583-586.[3] 苗明三,方晓燕,杨云山.山茱萸多糖对小鼠免疫功能的影响[J]. 河南中医,2002,22(2):12-13.[4] 欧芹,葛堂栋,王迪迪,等.山茱萸多糖抗HDF衰老与cyclinD1表达的关系[J].黑龙江医药科学,2008,31(1):1-3.[5] 张良,张彩莹,李云,等. 山茱萸多糖提取条件的优化[J]. 安徽农业科学,2006,34(22):5893-5894.[6] 李平,王艳辉,马润宇. 山茱萸多糖提取过程研究[J]. 北京化工大学学报,2003,30(1):13-16.[7] 陈随清,王利丽,杨晋,等. 不同栽培品种山茱萸药材中多糖的含量测定[J]. 河南科学,2005,23(4):513-516.[8] 池爱平,陈锦屏. 微波辅助提取绞股蓝多糖的工艺研究[J]. 食品科学,2007,28(7):181-184.。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
史 娟． 山茱萸多糖的提取及清除自由基作用［J］． 江苏农9 —
山茱萸多糖的提取及清除自由基作用
史娟
（ 陕西理工学院化学与环境科学学院，陕西汉中 723001）
摘要： 采用水体醇沉法提取山茱萸多糖，研究山茱萸粗多糖和去蛋白多糖对二苯代苦味酰肼基自由基（ DPPH·） 的清除作用。通过单因素及正交试验确定山茱萸中多糖的最佳提取条件为： 浸提 1 次，提取时间 90 min，乙醇浓度 75% ，料液比 1 g ∶ 18 mL。清除自由基试验结果表明，山茱萸多糖对 DPPH·的清除活性弱于对照品维生素 C，粗多糖 清除自由基活性高于去蛋白多糖。
收稿日期： 2012 － 04 － 26 基金项目： 陕西省社会发展科技攻关项目（ 编号： 2009K11 － 03 ） ； 四
川省广元市科技支撑项目（ 编号： 41431） 。 作者简介： 史 娟（ 1978—） ，女，陕西子长人，硕士，讲师，主要从事天
然产物化学研究。E － mail： hzhshijuan@ 126． com。
关键词： 山茱萸； 多糖； 提取； 抗氧化性 中图分类号： TS202． 3 文献标志码： A 文章编号： 1002 － 1302（ 2012） 12 － 0289 － 03
山茱萸（ Fructus Corni） 是我国的传统中药材［1］。多糖为 山茱萸的主要活性成分之一［2］，它与免疫功能调节、细胞与 细胞的识别、细胞间物质的运输、癌症诊断与治疗等有着密切 关系，具有能 量 储 存、结 构 支 持、防 御 功 能 和 抗 原 等 功 能［3］ 。 山茱萸多糖是山茱萸生物学活性物质的重要成分，具有抗氧 化性和清除自由基［4］、免疫兴奋［5 － 6］、抑菌等作用［7］。目前山 茱萸多糖的提取工艺已逐步成熟［8 － 。 10］ 本试验以陕西省汉 中市佛坪县产山茱萸为原料，研究溶剂浓度、提取次数、时间、 料液比等因素对多糖提取的影响，并对所提取山茱萸多糖抗 氧化性能进行评价，旨在为山茱萸多糖的药用功能研究及开
以葡萄糖做标准品，吸取一定体积粗多糖提取液，按标准 曲线的制作方法在 490 nm 处测定吸光度，采用苯酚 － 硫酸法 测 定 山 茱 萸 中 多 糖 含 量，根 据 标 准 曲 线 回 归 方 程 进 行 相 关 计算。 1． 4 山茱萸多糖提取条件的单因素试验 1． 4． 1 不同料液比对山茱萸多糖提取率的影响 称取山茱 萸粉末 5 g，在提取时间为 60 min，乙醇浓度为 75% 条件下， 设定料液比 （ g ∶ mL） 分 别 为 1 ∶ 12、1 ∶ 14、1 ∶ 16、1 ∶ 18、 1 ∶ 20 各提取 4 次，测定 D490 nm ，并计算多糖提取率。 1． 4． 2 不同提取次数对山茱萸多糖提取率的影响 称取山 茱萸粉末 5 g，在提取时间为 60 min、乙醇浓度为 75% 、料液 比为 1 g ∶ 18 mL 的条件下，设定提取次数分别为 1 ～ 5，测定 D490 nm ，并计算多糖提取率。 1． 3． 2． 3 不同提取时间对山茱萸多糖提取率的影响 称取 山茱萸粉末 5 g，在乙醇浓度为 75% 、料液比 1 g ∶ 18 mL、提取 4 次的条件下，设定提取时间分别为 30、60、90、120、150 min， 测定 D490 nm ，并计算多糖提取率。 1． 4． 4 不同乙醇浓度对山茱萸多糖提取率的影响 称取山 茱萸粉末 5 g，在提取时间为 60 min、料液比 1 g ∶ 18 mL、提取 次数 为 4 次 的 条 件 下，设 定 乙 醇 浓 度 分 别 为 60% 、65% 、 70% 、75% 、80% ，测定 D490 nm ，并计算多糖提取率。 1． 5 山茱萸多糖提取条件的正交试验
— 290 —
江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 12 期
120 min，多次重复，合并提取液，减压浓缩，所得滤液减压浓 缩后，加无水乙醇至醇浓度达 70% ，静置 24 h，4 000 r / min 15 min 沉淀物离心，依次用无水乙醇、丙酮、乙醚反复洗涤沉 淀后，40 ℃ 真空干燥得粗多糖。 1． 2． 2 去蛋白多糖的制备 称取山茱萸粗多糖 2． 0 g，用适 量蒸馏水溶解，多次 Sevag 法脱蛋白。脱蛋白后的多糖醇沉， 搅拌后静置 24 h，抽滤，洗涤，干燥得去蛋白山茱萸多糖。 1． 3 山茱萸中多糖含量的测定方法
发利用提供技术支持。
1 材料与方法
1． 1 材料、仪器与试剂 1． 1． 1 材料 山茱萸干燥果实采自陕西省汉中市佛坪县。 1． 1． 2 仪器 722E 型可见分光光度计（ 上海光谱仪器有限 公司） ，101 型电热鼓风干燥箱 （ 北京科 伟 永 兴 仪 器 有 限 公 司） ，L204 － IC 电子分析天平（ 梅特勒 － 托利多仪器上海有限 公司） ，HH 系列恒温水浴锅（ 河北省黄骅市渤海电器厂） ，台 式离心机（ 太仓市医疗器械厂） 。 1． 1． 3 试剂 葡萄糖标准品（ 色谱纯） ，无水乙醇、95% 乙 醇、三氯甲烷、正丁醇、苯酚、丙酮、浓硫酸等分析纯。 1． 2 方法 1． 2． 1 粗多糖的提取 将山茱萸果实烘干、粉碎、过筛。准 确称取 30． 0 g，加 95% 乙醇回流 2 h，以除去单糖、低聚糖及 醇溶性质，趁热抽滤，滤渣烘干后加入 6 倍体积蒸馏水，煮沸
精确称取 105 ℃ 烘干至恒重的葡萄糖 25 mg，蒸馏水溶 解后定容至 100 mL 作为标准溶液。分别吸取标准液 0、0． 2、 0． 4、0． 6、0． 8、1． 0、1． 2、1． 4、1． 6、1． 8、2. 0 mL 置于 10 mL 比 色管中，蒸 馏 水 补 至 2． 0 mL，分 别 加 入 5% 重 蒸 苯 酚 溶 液 1． 0 mL，浓硫酸溶液 5． 0 mL，振荡均匀后于室温放置 10 min， 在 490 nm 处测定吸光度。以葡萄糖浓度 C（ μg / mL） 为横坐 标，吸光度（ D） 为纵坐标绘制标准曲线，并求得回归方程为： D = 0． 092 5C + 0． 174 3，r2 = 0． 998 3。