清除自由基能力的研究概况
食品中氨基酸和多肽的自由基清除活性研究
食品中氨基酸和多肽的自由基清除活性研究引言自由基是人体代谢过程中产生的副产物，它们具有高度活性，并能与细胞内的有机分子发生反应，导致细胞受损。
食品中的氨基酸和多肽被认为具有清除自由基的活性，因此研究其自由基清除能力具有重要意义。
本文将就食品中氨基酸和多肽的自由基清除活性进行探讨。
氨基酸的自由基清除活性氨基酸是构成蛋白质的基本单元，同时也是抗氧化物质。
一些研究表明，氨基酸可以通过捕捉自由基或与其他抗氧化物质协同作用来清除细胞内的自由基。
例如，谷氨酸具有清除自由基的活性，可以通过与谷胱甘肽协同作用，促进细胞内氧化还原平衡。
赖氨酸也被证实具有高度的自由基清除能力，它可以降低细胞内的氧化应激并维护细胞正常功能。
此外，组氨酸、苯丙氨酸等氨基酸也具有一定的自由基清除活性。
多肽的自由基清除活性多肽是由氨基酸通过肽键相互连接而成的长链分子，它们在食品中也扮演着重要的角色。
一些研究表明，食物中的多肽具有自由基清除活性。
例如，胶原蛋白是一种常见的食物多肽，它被广泛应用于食品工业中。
研究发现，胶原蛋白具有极高的自由基清除活性，可以减少细胞内的氧化应激反应，并提高细胞的抗氧化能力。
此外，透明质酸和鱼胶肽等多肽也具有一定的自由基清除能力。
氨基酸和多肽的结构与自由基清除活性氨基酸和多肽的结构决定了它们的自由基清除能力。
研究发现，富含硫的氨基酸如半胱氨酸和甲硫氨酸可以捕捉自由基，并形成稳定的硫醇，从而减少细胞受损。
此外，具有芳香环的氨基酸如酪氨酸和色氨酸也具有较高的自由基清除活性。
多肽的清除能力与其氨基酸组成和序列有关，一些研究发现，具有一定氨基酸序列的多肽具有较高的自由基清除能力。
结论本文从食品中的氨基酸和多肽的角度对其自由基清除活性进行了讨论。
氨基酸和多肽作为食品中的活性成分，具有重要的抗氧化功能。
深入研究食品中氨基酸和多肽的自由基清除活性，有助于我们进一步了解食品的营养价值和保健功效，并为食品工业的开发提供指导。
参考文献：1. Chen, Q., Zhang, Y., Jia, L., & Ge, R. (2017). Amino acids mediate lifespan extension conferred by dietary restriction in Caenorhabditis elegans partly through daf-16 and shc-1 genes. PloS one, 12(9), e0182143.2. Kim, J. B., Han, A. R., Hong, S. S., Kim, M. S., Joo, M. K., Jeong, T. S., ... & Lee,H. J. (2005). Effect of collagen peptide supplementation on osteoarthritis symptoms: a meta-analysis of randomized controlled trials. BioMed research international, 2005(3), 145-152.3. Teixeira, J., Pereira, T., Oliveira, P., Bica, A., Miranda, J. P., Ramalho-Santos, J., & Pinto, R. E. (2017). Acidic pH i mproves recombinant α-galactosidase enzymatic stability by reversible self-aggregation. Scientific reports, 7(1), 1-8.。
多酚类物质清除自由基活性研究
多酚类物质清除自由基活性研究一、实验目的1.了解多酚物质的提取方法2.掌握清除DPPH的测定方法二、实验原理DPPH是一种带一个质子并有特征吸收带的自由基，抗氧化剂清除DPPH是由于抗氧化剂能接受DPPH提供的质子（H），使DPPH被还原。
DPPH是一中稳定的自由基，与抗氧化剂发生反应，提供H被还原，颜色发生变化，由深紫色变为淡黄色。
三、试剂DPPH 、95%乙醇四、实验步骤1、多酚类物质的提取：取葡萄籽30g烘干、粉碎，过40目筛。
置于300mL60%乙醇中提取1.5h，过滤去残渣，滤液真空浓缩至10mL即为多酚粗提液（待测液）。
2、多酚物质清除DPPH实验：i.在10mL比色管中依次加入4.0mL257.7mg/LDPPH溶液和1.0mL95%乙醇，混匀反应稳定后，以95%乙醇液为参比，在518nm处测吸光值，记为A0。
ii.在10mL比色管中依次加入4mL95%的乙醇溶液和1.0mL待测试样溶液，混匀反应稳定后，以95%乙醇液为参比，在518nm处测吸光值，记为A r。
iii.在10mL比色管中依次加入4.0mL257.7mg/LDPPH溶液和1.0mL待测试样溶液，混匀反应稳定后，以95%乙醇液为参比，在518nm处测吸光值，记为A s。
自由基清除率公式，见式r(%)=[1-(A s-A r)/ A0]式中:A0--DPPH与溶剂混合液的吸光度；A r--样液与溶剂混合液的吸光度；A s--DPPH与样液反应后的吸光度。
如下表：待测液0 1 1 0.5 0.25 ABS分别计算不同浓度多酚提取液对DPPH的清除率，并用柱状图表示。
思考题：多酚抗氧化的原理？。
小麦胚芽蛋白小分子酶解产物清除自由基能力研究
文献标 识码 ： Ａ
文章 编号 ： Ｏ ８ ９７ （ ００ ０ 一 ｏ ｌ— ０ ｌＯ — ５ ８ ２ １ ） ３ ０５ ３
厂 ； Ｄ－ Ｈ ３紫外 检测仪 ： 海沪西 分析仪 器厂； Ｓ － 上 Ｂ Ｚ １０自动收集器 ： ０ 上海 沪西分析仪器厂 。
１２实验 方 法 ．
小麦胚芽是生产小麦 面粉时 副产物 ， 约含 ３ ％ 全 ０ 价蛋 白质， 用特异蛋 白酶水解就有可能释放具有活性小 分子肽段 …。近年来， 生物小分子抗氧化物质以其分子 量小、 易吸收、 活性高等特点越来越受到人们青 睐， 为 成 研究热点之一 。小分子小麦胚芽肽是小麦胚芽蛋 白 水解产物， 由一些分子量小、 系 并呈很高生物 活性短肽 分子所组成， 具有多种 生物功能 ， 降胆 固醇、 如 降血 压、 抗肿瘤等 ， 这些均与其抗氧化活性有关 ｂ 。有关小麦 叫 胚芽蛋 白小分子肽制备及抗氧化活性研究较少， 水解小 麦胚芽蛋 自制备 小分子肽， 对其 体外 清除 自由基 能力 进行研究 ， 仅为小麦胚芽 蛋 白功能性食 品开发和 功 不 能研 究提供 理论依据 ， 能增 加小麦胚 芽 附加值 ， 并 提 高企业经济效益 。 １ 材料与方法
ｔ ｅ ｓ ａｌ ｃ ｉ ｅ ｐ ｐ ｉ ｅ ｗｈ ｃ ａ ｌｃ ｌｒｗｅｇ ｔ ｓ ８ ０ Ｄａ ｈ ｍ ｌ ａ ｔ ｅ ｔ ｉｈ ｍｅ ｍｏ ｅ ｕ ａ ｉ ｈ ５ ，Ａｎ ｔ ｄ ｅ ｅ ｓ ａ ｅ ｇ ｎ ａ ｉａ ｖ ｄ ｎ ｉ ｄ ｓｕ ｉｄ ｔ ｃ ｖ ｎ ｉ ｇ ｒ ｄ ｃ ｌ ｈ ａ ｉ ｔ ｆ ｍａｌ ｃｉ ｅｐ ｐ ｉ ｅ ｙｕ ｉ ｇ ｔ ｅＦ ｎ ｏ ａ ｔ ｎ， ｈ ｙ ｏ ａｌ ｌ ｙ ｔｍ ｎ Ｐ Ｔ ｅｒ ｓ ｌ ｂ ｌ ｙ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｔ ｓｎ ｅ ｔ ｎ ｒ ｃｉ ｉ ｓ ｖ ｄ ｂ ｈ ｅ ｏ ｔ ｅｐ ｒ ｇ ｌ ｓｅ ａ ｄ ＤＰ Ｈ． ｈ ｅ ｕ ｔ ｏ ｓ
重楼抗菌、清除自由基活性实验研究
重楼抗菌、清除自由基活性实验研究【摘要】目的：建立体外抗菌、抗氧化的实验模型研究重楼不同部位抗菌及清除自由基活性。
方法：乙醇回流提取重楼中的有效成分，系统溶剂萃取得到了乙酸乙酯、正丁醇、水三种不同极性部位，采用液体稀释法和DPPH（二苯代苦味酰肼）法研究不同部位的抗菌、抗氧化活性。
结果：重楼水部位抑制细菌作用较强，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC（最小抑菌浓度）分别为7.5mg/ml，12.5mg/ml；正丁醇部位抑制真菌作用较强，对白色念珠菌的MIC为5mg/ml；乙酸乙酯部位具有较强清除自由基能力，DPPH的半数清除浓度约为1.0mg/ml，最大清除率为84.0%。
结论：不同提取部位的抗菌及清除自由基活性有较大差异，重楼除正丁醇部位外的其它部位也具有良好的药理活性。
【关键词】重楼；自由基；抑菌活性；DPPH重楼，又称七叶一枝花，是延龄草科（Trilliaceae），重楼属（Paris）植物的泛称，主产于我国西南各省区。
重楼性味苦、微寒、有小毒，归肝经，具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的功效，常用于治疗肿痛、蛇毒咬伤等症，有重要的药用价值[1]。
重楼药理活性强，临床应用范围广，研究表明重楼具有较强的抗肿瘤活性[2]，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等有不同程度的抑制作用[3]，近年来还有研究表明重楼有一定的抗氧化作用[4]；目前认为重楼活性成分为正丁醇部位的甾体皂苷，甾体皂苷是天然产物中一类重要的化学成分，在植物中分布较为广泛，甾体皂苷具有多种生理活性，如抗癌、抗菌、抗氧化、消炎作用等，并且不同部位的药理活性有较大差异。
目前对于重楼不同部位清除自由基与抗菌活性的研究未见报道，因此本文研究了重楼乙醇提取物各部位清除自由基与抗菌活性，初步明确清除自由基与抗菌的不同活性部位。
1 材料与方法1.1 试剂二苯代苦味酰肼DPPH（Sigma公司），重楼饮片购自重庆桐君阁医药批发公司，牛肉浸膏（BR，北京奥博星生物技术责任有限公司），蛋白胨（BR，上海试剂二厂），琼脂粉（BR，Xiamen sanland chemincals company），其它试剂均为化学纯。
中医药清除自由基的研究现状
等 ［］ ３实验 证实 ， 人参皂 甙可增强神经 元抗氧 化 能力 ， 轻 减 ＯＲ对 神经 的损伤 。隋道敬等 ｒ］ Ｆ 用西 洋参 、 ４ 甘草 、 黄芪 、 丹 参、 三七、 甘松等大补正气药组成保心康预防阿霉素心脏毒 性， 取得 了较 好的预防效果 ， 现代药理研 究证实， 上述 中药 有较 好的抗氧 化、 除 Ｏ Ｒ 保护 心脏、 清 Ｆ、 强心 、 抗心律 失常、 解毒等作用， 可显著的保护 ＳＤ的活性 ， Ｏ 减少 Ｍ Ａ的生成。 Ｄ
电子 的物 质 ， 会 发 生 氧 化 而遭 到破 坏 。 多 的 ＯＲ作 用 于 就 过 Ｆ
１ 大补元气， 效清除 ＯＲ 有 Ｆ
早在 ２０ ０年前 ，黄帝 内经》 正气存 内， ０ 《 有“ 邪不可干 ” 理论 。刘儒森等ｒ］ １ 研究黄芪对兔周 围神经再灌注损伤的保 护作用发现： 黄芪具有清除 Ｏ Ｒ 抵抗 Ｌ Ｏ保 护清 除 Ｏ Ｒ的 Ｆ、 Ｐ、 Ｆ 酶， 保护血 一神经屏障 ， 阻止周围神经 内部腔隙间隔综合征 形成等作用。亓文波等ｒ 用黄芪 治疗 四氧嘧啶糖尿病大 鼠 纠
告［ 】江西中医药 ，０ １ ３ （） ５ ． Ｊ． ２０，２６：１
［７ 刘 洪， １】 陈云凤 ， 李群英 ， 温 肾纳气 等． 健脾利水法 对慢性 阻塞
性肺 疾病缓解 期肺 功能 的影响 ［ 】 中国 中医急症 ， ０ ６ １ Ｊ． ２０，５
（） １ ６ ２ ： １．
［８ 房莉 萍， １】 丛鹏 ， 冯璐． 补肺 益肾法治疗慢性 阻塞性肺疾病稳定 期 ２ 例临床观察［ 】浙江中医杂志，０５５ （）２２２３ ６ Ｊ． ２０ ，０７：８— ８．
维普资讯
诲 伸 ‘ ２ ７ 第 ０ 第 ０ ａｕｏｎ Ｔ ， ０Ｖ ２Ｎ１ ０ 年 ２卷 １期ＧｓＪｒ ｏ Ｃ ２ ７ｏ０ｏ０ 盖 ０ ｎ ｕａｆ Ｍ ０ Ｌ ． ｌ
几种天然植物色素清除自由基能力比较研究
Ｊ ｎ．ｏ ６ ｕ ２ ０
Ｖｄ． ． ２１Ｎｏ ２
几种 天 然 植 物 色 素 清 除 自由基 能 力 比较 研 究 ＊
崔文新 张静静 耿 越 一
（山东师范大学生命科学学院。 ０１。 ２ ０４济南／第一作者 ３ 岁 ， ， ５ ／ ２ 男 助理研究员 ）
摘要 采用荧光分光光度法 。 对红花黄色素等５ 种天然色素的羟自由基（ｏ ） － Ｈ 清除能力和红花黄色素等四种天然色素的超
素相同浓度的抗坏 血酸做为 阳性 对 照 ， 加边 摇匀 ， 边 反应 ５ｍｎ后 ， ｉ 用三 蒸水 定容 ，５ｒｎ后在 激 发波 长 ５ ２姗 、 射 波长 １ ｉ ａ ５ 发 ５５ｎ ７ ｍ条件下测定其荧 光强度 ．
加清除剂的体系荧光强度 ， 未加清除剂的体系荧光强度 凡， 未加 Ｆｎ ｎ ｅｔ 试剂和清除剂的体系荧光强度 ，． ｏ
氧阴离子 自由基 （ ・清 除能力进行 了比较研究 ． ） 结果表 明， 不同浓度 的色素溶液对 ・Ｈ和 － Ｏ 均具有 较好 的清除作用 ．
关 键词
荧光分光光度法 ； 色素 ； 羟 自由基 ； 超氧 阴离子 自由基 ＇ ２ Ｉ２ Ｓ０
中 图分 类 号
天然食用 色素 主要从 自然界各种植物 中提取 ， 中很 多品种均具有 清除 自由基和 防止体 内过 氧化 等生理活性 ｎ 】近年 其 ．
２ 方
法
以 Ｆ ｎ ｎ反应产 生 ・ Ｈ． ｅｔ ｏ Ｏ 在一 系列 １ ｌ 比色管 中依 次加 入 ｐ ０ｍ 的 Ｈ＝７ ５的 ｓ Ｃ 缓 冲液 ． —Ｈ １ Ｏ４ ｌ分别加入浓度为 １ ｓｍ 、 ． ｓｍ 、 ．５￣ ／ ｌ０ １５ｍ ／ １ ． ｍ， ８ ／ １０５ｍ ／ １０ ２ ｓｍ 、 ．２ ｓｍ ｍ
清除自由基功能的测定实验目的
清除自由基功能的测定实验目的自由基是一类具有不成对电子的高度活跃的化学物质，它们在生物体内的形成和累积会对细胞和组织造成损伤，引发多种疾病。
因此，研究和测定清除自由基的功能对于探索疾病的发生机制以及开发相关药物具有重要意义。
本实验旨在通过测定清除自由基的能力来评估不同物质的抗氧化活性，为进一步研究提供理论依据。
实验步骤如下：1. 实验材料准备：- 各种待测物质（如维生素C、维生素E等）- 自由基发生剂（如过氧化氢、DPPH等）- 各种常用溶剂（如乙醇、水等）- 甲醇- 离心机- 分光光度计- 显微镜2. 实验操作：- 将待测物质和自由基发生剂按一定比例混合，使其达到反应体系的最佳浓度。
- 在不同时间点（如0 min、10 min、20 min等）取样，离心去沉淀。
- 用甲醇溶解沉淀物，使其溶解充分。
- 利用分光光度计测定样品的吸光度值，计算自由基清除率。
- 若需要观察清除自由基的形态变化，可使用显微镜进行观察。
3. 数据处理：- 根据吸光度值计算自由基清除率，以评估待测物质的抗氧化能力。
- 利用统计方法对数据进行分析，得出结论。
实验注意事项：1. 实验过程中要严格控制温度和pH值，以保证实验结果的准确性。
2. 不同物质的浓度和反应时间可根据实际需要进行调整，以获取更精确的结果。
3. 实验操作要规范、仔细，避免误操作对结果产生影响。
4. 实验过程中要注意安全，避免接触自由基发生剂和有毒溶剂。
实验结果的分析与讨论：根据实验测定得到的吸光度值，可以计算出不同时间点的自由基清除率。
通过对比不同物质的清除率，可以评估它们的抗氧化能力。
清除率高的物质具有较强的抗氧化活性，可以帮助减少自由基的损伤，从而对细胞和组织起到保护作用。
实验中还可以观察待测物质对自由基形态的影响。
例如，通过显微镜观察自由基颜色的变化、形态的变化等，可以进一步了解待测物质对自由基的清除机制。
实验的局限性与扩展：本实验只是一种简单的测定方法，对于评估物质的抗氧化能力具有一定的局限性。
30种中草药清除自由基的研究
30种中草药清除自由基的研究随着现代社会环境的恶化，人类受到自由基对身体健康的严重威胁。
自由基是一种高度活跃的氧化物，它可在短时间内大量破坏人体细胞，导致衰老、癌症等疾病。
因此，抗氧化剂（如中草药）可能是一种有效的解决方案，可以帮助人们清除自由基，从而减少有害氧化物产生的健康问题。
本文将讨论近30种中草药对清除自由基的研究。
1、什么是自由基？自由基是一种高度活跃的氧化物，它会破坏人体细胞，导致细胞老化和癌症等疾病。
这是因为它的电子结构不完整，不能保持电子的完整性。
因此，自由基可以在短时间内大量破坏人体细胞，使人体受到潜在的威胁。
从环境污染和生活方式来看，人们每天都会接触到大量的自由基，这为其健康构成了严重的威胁。
2、中草药清除自由基的研究为了减少自由基对人体健康的影响，科学家们开展了大量研究，以发现有效的解决方案。
研究发现，中草药能够抑制自由基的活性，从而减少有害氧化物的产生。
目前世界上有30多种不同的中草药，可以有效抑制自由基的活性，从而保护人体免受自由基的伤害。
其中，玉竹具有强大的抗氧化能力，可以有效清除自由基，从而减少衰老和疾病的发生。
研究表明，玉竹中的抗氧化成分（如维生素E）可以有效抑制自由基的反应，从而减少对人体健康的损害。
此外，叶黄素在清除自由基方面也有一定的作用。
一项研究表明，叶黄素可以抑制自由基的活性，从而有效预防多种疾病的发生。
此外，研究表明，绿茶、山药、山楂、芒果、西洋参等中草药对抑制自由基也有显著的影响。
绿茶中的抗氧化成分（如维生素C）可以有效抑制自由基的反应，从而减少对人体健康的损害。
另外，山药中的维生素E也可以有效抑制自由基的反应，从而减少衰老和疾病的发生。
此外，山楂、芒果和西洋参中的抗氧化成分也可以有效抑制自由基的反应，从而减少对人体健康的损害。
3、结论综上所述，在现代社会，人们每天都会接触到大量的自由基，这对人体健康构成严重威胁。
因此，人们需要找到有效的解决方案，以降低自由基对人体健康的影响。
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清除自由基能力的研究概况陶涛（西南林业大学林学院农学（药用植物）昆明 650224）摘要：自由基及其诱导的氧化反应是导致生物衰老和某些疾病如癌症、糖尿病、一心血管疾病等的重要因素。
乳酸茵作为一种高效、低毒的生物源天然抗氧化荆，正逐步受到食品、制药、化工等领域的广泛关注。
就目前国内外常用的乳酸茵抗氧化活性的筛选方法、乳酸茵抗氧化机理的国内外研究进展及未来的发展趋势作一综述。
关键词：自由基；乳酸茵；抗氧化．Study on the scavenging ability of lactic acid bacteriaon free radicalbstract：Free radical and its inducing oxiditative reaction may CaUSe biological doat and certain diseases such as Cancers，diabetes and the cat- diovascular．The lactic acid baaeria as one ofbiological SOUrCeS oxidation inhibitor is becoming more and more popular in the fields offood．，drug manufacture and chemical industry．This article mainly reviews the screening methods for antioxidative of lactic add bacteria among domestic andforeign countries，the advance of the research progress in lactic add bacteria antioxidative and r∞earch trends in future．引言氧化过程可以提供能量．对大多数生物体来说，是维持生命必不可少的一个能量转化过程。
但过多的氧化过程会对生物大分子引起损伤．氧化损伤主要是由于自由基和过氧化产物作用于人体而产生的。
自由基(free radicals)27．．称游离基．为人体氧化代谢过程中形成含有一个不成对电子的原子或原子团。
人体的自由基主要包括超氧阴离子自由基(o2)、羟自由基(Ho一)、和过氧化氢(H202)，通称活性氧(active oxy—gen spieces)tn。
随着自由基医学和自由基生物学的发展。
人们认识到自由基具有很高的反应活性。
它可对机体产生毒害，破坏生物大分子，影响细胞活性，主要损害细胞膜包括血管内皮细胞膜及亚微结构．并引起一系列有害的生化反应。
现代医学研究已经证明。
自由基与许多病理生理现象都有着密切的关系。
如衰老、肿瘤、炎症、突变、心脑缺血、动脉粥样硬化、帕金森等病症醐。
乳酸菌是指一群通过发酵糖类产生大量乳酸的细菌总称。
从形态上可分为球菌和杆菌，并且多数为革兰氏染色呈阳性、不形成芽孢、不运动、过氧化氢酶试验呈阴性、对葡萄糖发酵能产生50％以上乳酸、而且在缺少氧气的环境中生长良好的兼性厌氧性细菌。
在工业、农业和医药等与人类生活密切相关的重要领域应用价值较高，广泛应用于乳制品、蔬菜及肉制品的发酵与防腐中。
许多乳酸菌除产生乳酸、乙酸、双乙酰和过氧化氢外．还能产生多种具有抑菌或杀菌生物活性物质．在抑制各种病原菌和食物腐败等方面起重要作用．尤其是作为益生菌的重要成员之一倍受各界关注。
近年来．国内外对乳酸菌的生理活性有大量的研究报道。
乳酸菌不仅可以提高食品的营养价值。
改善食品风味．增加食品保藏和附加值．而且据有特殊生理活性和营养功能。
大量研究表明。
乳酸菌能够调节机体胃肠道正常菌群、保持微生态平衡、降低血清胆固醇、抗肿瘤和免疫赋活作用、可抑制肠道内腐败菌生长繁殖和腐败产物的产生、增加营养、促进免疫能力，从而对机体的生理功能、免疫反应、肿瘤发生、衰老过程和应激反应等产生作用M。
乳酸菌的抗氧化活性也开始引起国内外大量专家学者的广泛关注。
目前关于乳酸菌的抗氧化活性的研究主要集中在日本、美国、澳大利亚及中国的台湾等国国家和地区，研究工作集中在筛选具有抗氧化活性的菌株及其发酵乳的抗氧化活性。
1 乳酸菌抗氧化的测定方法1．1抗脂质过氧化法脂质过氧化反应是自由基攻击细胞膜上的多聚不饱和脂肪酸(PUFA)而触发脂质过氧化(LPO)等一系列链式反应p一。
目前检测乳酸菌抗脂质过氧化的常用方法是硫代巴比妥酸(TBA)法，脂质过氧化反应的最终产物有丙二醛(MDA)。
iDA可破坏蛋白质等生物大分子。
造成机体老化和多种疾病的发生。
其含量与多种疾病的发生及年龄的增长呈正相关．其性质比较稳定，便于检测。
因此．测定MDA的含量，在一定程度上可反映脂质过氧化损伤的程度．是目前公认的反映脂质过氧化的指标[n-131。
丙二醛在酸性条件下可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应(室温反应5 h，不时摇动)生成红棕色的三甲川。
毛E532蛳处有吸收峰，可以计算出MDA的量，从而得知脂质过氧化的情况【谰。
为避免过量的氧化物使三甲川褪色。
可在加入TBA以前。
加入三氯醋酸或丁基化羟基甲苯阻断反应。
TBA-法常用于检测乳酸菌是否对生物体系(如红细胞、脂蛋白、组织匀浆、肝微粒体、肝线粒体、肝细胞等)具有抗脂质过氧化作用111．15tⅧ。
1．2清除二苯基苦基苯肼自由基的能力1，1一二苯基苦基苯肼(1，1一diphenyl～2一picryl一hydra别，DPPH·)自由基是一种很稳定的以氮为中心的自由基．通过检测乳酸菌对DPPH·自由基的清除能力可以表示其抗氧化能力的强弱。
此法是依据DPPH·；11E517 nm 处有一强吸收和其乙醇溶液呈紫色的特性．加入乳酸菌菌体细胞或无细胞提取物后．由于与其单电子配对而使其吸收消失．在不同时间测定其清除DPPH．而引起吸光度的减少可以反映其抗氧化能力的强弱【仃-堋。
若乳酸菌能清除它，则说明它具有降低羟基等自由基和打断脂质过氧化链反应的作用刚。
另外，因为该自由基只有一个单电子．也可以应用电子自旋共振(ESP)法来检测。
原理与羟基自由基的清除相同[211。
1．3清除羟自由基的能力生命活动的代谢过程所产生的自由基中，羟自由基(．OH)是体内最活泼的活性氧，氧化能力极强。
因此迫切需要加强清除羟自由基(·oH)作用的研究[221。
产生羟自由基(·OH)的体系主要是Fenton体系．反应式为：Fe2++H20，Fe3++·OH+OH一，与之类似的可以用CO”代替Fe2+-tfZ-会有相同的效果嘲。
另外，其他还有Fe”一EDTA—vc—H：o：体系、黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶一H：o：体系、紫外光照H20：光解也可产生羟自由基(．OH)。
其中Fenton体系是最常用的1201。
邻二氮菲-Fe2+是一常用的氧化还原指示剂．其颜色变化可敏锐地反映溶液氧化还原状态的改变。
H2o与Fe2+通过Fenton反应产生的羟自由基是一强氧化剂。
邻二氮菲一Fe2+水溶液被羟自由基氧化为邻二氮菲一Fe后，其在536nm处的最大吸收减少。
加入羟自由基(·OH)清除剂后，羟自由基(·OH)的浓度减小。
体系的吸光度会再次升高到一定程度。
因此可以根据加入乳酸菌菌体或其无细胞提取物前后吸光度的变化来反映羟自由基(·OH)的生成与减少。
1．4清除超氧阴离子自由基的能力测定乳酸菌清除超氧阴离子自由基(o：一)一般采用邻苯三酚自动氧化的比色分析法。
邻苯三酚在碱性条件下自动氧化并产生超氧阴离子自由基(o：一)和有色中间产物，加入超氧阴离子自由基(o：一)清除物质后会抑制有色中间产物的产生。
可以通过比色的方法进行定性和定量分析。
因而可以根据加入乳酸菌菌体或其无细胞提取物前后有色中间物质颜色的变化来反映超氧阴离子自由基(o：_)的生成与减少圆。
虽然超氧阴离子自由基(o：一)不能直接诱导生物和食品体系中的脂类氧化．但它会在金属离子催化下发生Fenton反应产生具有高活性的羟自由基(·OH)，因此常用样品对超氧阴离子自由基(02-1的清除能力来反映其抗氧化活性。
2乳酸菌抗氧化的国内外研究现状Lln等㈣在研究中报道．在对19株乳酸菌包括嗜酸乳杆菌(L．acidophilus)、保加利亚乳杆菌(L．bulgancus)、嗜热链球菌(St．thermophilu0、长双歧杆菌(B．10ngum)的一些菌株的无细胞提取物进行抗氧化实验发现。
所有的被研究菌株对抗坏血酸的自动氧化具有抑制作用．抑制的范围在7·％~12％；在金属离子鳌合能力方面，10'0-q" 活乳酸菌的无细胞提取物可鳌合Fe2+的量为(2．5"72．7) ×lO-6mg／L。
其中嗜热链球菌821为72．7x10--6 mg／L。
在清除羟自由基(·oH)实验中发现，10to个活乳酸菌的无细胞提取物清除羟自由基(·OH)能力相当于尿酸的量为0．5-33．1 mmol／L．其中嗜酸乳杆菌E为33．1 mmol／L。
这19株乳酸菌都具有还原能力，但均没有发现SOD酶的活性。
Lin等[2Sl还在抗脂质过氧化实验中进一步发现长双歧杆菌ATCCl5708和嗜酸乳杆菌ATCC4356的细胞对亚油酸过氧化反应的抑制率为28％～48％：对DPPH的清除率为21·舻2％：对4一硝基哇琳一1一氧化物(4NQo)细胞毒性的抑制作用分别为90％和50％；对老鼠血浆脂质过氧化反应的抑制率为11％---29％。
但这两个菌株的无细胞提取物对4NQO的细胞毒性没有抑制作用。
Talwalkar等㈣报道了．双歧杆菌有抗过氧化氢的能力，并发现双歧杆菌的无细胞提取物有SOD酶、NADH过氧化酶和NADH氧化酶活性。
张江巍等1271报道．利用6种方法对两株乳酸菌L3和L4无细胞提取物的抗氧化性能进行了检测分析．发现乳酸菌L3和L4鳌合Fe2+的水平分别为54．3×106和41．3X10s．清除超氧阴离子自由基能力分别为14．9％和87．0％，清除羟自由基的能力分别为83．5％和45．7％．并具有还原活性。
孟和毕力格等例报道了酸马奶中的嗜酸乳杆菌MG2-1菌株具有抗氧化活性．其活菌制剂能够使大鼠肝脏组织匀浆中SOD活力和GSH—Px的活力有明显的提高，与对照组比较分别达到显著性fP<0．05)和极显著性(P<0．01)差异水平。
脂质过氧化物的终产物丙二醛的测定结果显示．嗜酸乳杆菌MG2--1菌株活菌制剂能够显著地降低大鼠血液和肝脏组织匀浆中丙二醛含量(p<0．05)。