中华补血草根提取物对D-GalN_LPS肝损伤的防护作用

（ＡｓＴ）、丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）活性的影响；观察肝脏组织超微结构的变化；测定肝线粒体膜电位以及线粒体对高钙诱
发肿胀的敏感性的变化。结果一定剂量（１００—４００ ｒａｇ·ｋｇ“）ＬＳＥ能有效抑制Ｄ－ＧａｌＮ／ＬＰＳ引起的小鼠血清ＡＳＴ及
ＡＬＴ活性的显著上升；明显减轻肝损伤引起的小鼠肝脏组织超微结构的破坏；抑制线粒体膜电位的降低以及线粒体对外
结果表明该处方合理可行。
参考文献：
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（１．Ｊｉａｎｇｓｕ Ｐｒ鲫ｉｎｃ＆ｌ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｃｏａｓｔａｌ Ｗｅｔｌａｎｄ Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ；Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ
蜘Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｙａｎｃｈｅｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｙａｎｃｈｅｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ，２２４００２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，纨，伽昭，Ｊｉａｎｇｓｕ，２１２０１３，Ｃｈｉｎａ；３．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｗｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｕｎｉ－
２．７统计方法进行单因素方差分析（ｏｎｅ ｗａｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｉｌ— Ｋｎｅｅ，ｏｎｅ ｗａｙ ＡＮＯＶＡ），各处理组的组问差异采用ＳＮＫ—ｑ （Ｓｔｕｄｅｎｔ Ｎｅｗｍａｎ Ｋｅｌｄ８一ｑ）检验进行比较。显著性水平
探讨其药理机制。
取ａ＝Ｏ．０５。
１材料与仪器
３结果
１．１ 中华补血草根提取物（ｔＳＶ．）的制备中华补血草采集于江 ３．１ ＬＳＥ对Ｄ－ＧａｌＮ／ＬＰＳ诱导的小鼠急性肝损伤酶活力的影响 苏盐城滩涂，由江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室 由图１可看出，Ｄ－ＧａｌＮ／ＬＰＳ损伤小鼠的ｓＡＳＴ及ｓＡＬＴ活性急剧
与正常组比较，”Ｐ＜Ｏ．０１；与Ｄ—Ｃ．ａｌＮ／ＬＰＳ组比较，。Ｐ＜Ｏ．Ｏｌ 图ｌ ＬＳＥ对Ｄ—ＧａｌＮ／ＬＰＳ诱导的急性肝损伤小鼠酶活力的影响
３．２ ＬＳＥ对Ｄ—ＧａｌＮ／ＬＰＳ急性肝损伤小鼠肝细胞超微结构的影 响观察图２发现，正常小鼠肝细胞线粒体具有完整双层膜结构， 线粒体排列整齐有序，细胞核核质分布均匀。Ｄ－ＧａｌＩ、『／ＬＰＳ损伤 组中小鼠肝细胞发生明显的凋亡形态学变化，细胞核固缩，出现 脂滴沉积，线粒体结构破坏。而２００ ｒａｇ·ｋｇ“ＬＳＥ组小鼠肝细胞 的细胞核结构均有所改善，脂滴数也逐渐减少，尤其是４００ ｍｇ· ｌ【ｇ。１ＬＳＥ处理组，细胞核形态、线粒体排列等与正常组的小鼠肝 组织形态结构无明显差异。
４０００ ３６００ ，３０００
色２５００
艟２０００ ＿１ ５００
１０００
（Ｒｈｌ２３），甘露醇、蔗糖、ＥＤＴＡ、琥珀酸、鱼藤酮，购自Ｓｉｇｍａ公司；
５００
Ｏ
Ｔｒｉｓ－ＨＣＩ，Ｈｅｐｅｓ，购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司ｏ
２方法 ２．１ Ｄ—ＧａｌＮ／ＬＰＳ急性肝损伤模型的建立小鼠分５组：正常组； Ｄ—ＧａｌＮ／ＬＰＳ损伤组；１００，２００，４００ ｒａｇ·ｋｇ“ＬＳＥ组。正常组和 损伤组小鼠以０．２ ｍｌ·１０ ｇ“体重生理盐水连续灌胃５ ｄ，ＬＳＥ各 剂量组则分别以不同浓度ＬＳＥ同样方式灌胃；第６天正常组小鼠 按０．２ ｍｌ·（１０ ｇ）．１腹腔注射生理盐水，其余组小鼠腹腔注射 ６００ ｎａｇ·ｌ【ｇ～Ｄ．ＧａｌＮ；ｌ ｈ后，除正常组小鼠腹腔注射０．２ ｍｌ· （１０ ｇ）“生理盐水外，其它各组腹腔注射ＬＰＳ（１０ ｍｇ·ｋｇ“），同 时小鼠给予禁食不禁水。ＬＰＳ注射１２ ｈ后，取血，分离血清，待测 血清ＡＬＴ，ＡＳＴ活力。处死小鼠后，取部分肝组织固定，待制备肝 组织电镜切片，其余肝组织匀浆，制备肝脏线粒体。
ｓｗｅｌｌｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｅｘｏｔｉｃ Ｃａ２＋ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＬＳＥ ｈａｓ ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｉｔｓ ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ０１１ ｌｉｖｅｒ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ．
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｅ仃ｂｃｔ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｉｕｍ ｓｉｎｅｎｓｅ Ｋｔｚｅ Ｒｏｏｔ ａｇａｉｎｓｔ Ａｃａｔｅ Ｌｉｖｅｒ Ｉｎｊｕｒｙ
Ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｄ—ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ ａｎｄ ＬｉｐｏｐｏＩｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ＴＡＮＧ Ｘｉｎ－ｈｕｉ １。ＧＡＯ Ｊｉｎ９２，ＣＨＥＮ Ｊｉｎ。，ＸＵ Ｌｉ—ｚｈｉ‘
时珍国医国药２００８年第ｌ ９卷第８期ＨＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００８ ＶＯＬ．１ ９ ＮＯ．８
作为复方野葛根胶囊的辅料。 从正交实验结果可以看出，Ｌ—ＨＰＣ对颗粒的成型性有较大
影响，加入Ｌ—ＨＰＣ后，制出的颗粒外观均匀、美观。 微晶纤维素具有较好的抗湿能力。本实验表明，加入微晶纤
于延球副教授鉴定。取中华补血草干燥全根１００ ｇ，粉碎，用蒸馏 水提取１—３次，合并提取液，浓缩、干燥，即得棕色干粉３２．９ ｇ （得率３２．９％）。
升高（Ｐ＜０．０１），而预先以不同剂量ＬＳＥ灌胃给药的小鼠ｓＡＳＴ 及ｓＡＬＴ活性均显著低于损伤组（Ｐ＜０．０１），其中２００，４００ ｍｇ· ｌ【ｇ。１ ＫＳＥ组小鼠ｓＡｓＴ及ｓＡＬＴ活性已恢复至正常，表明ＬＳＥ对
加高钙诱发肿胀敏感性的下降。结论ＬＳＥ对Ｄ－ＧＡＩＮ／ＬＰＳ诱导的急性肝损伤具显著的防护作用，其机理可能与保护肝
脏线粒体、抑制肝细胞凋亡有关。
关键词：中华补血草；Ｄ一氨基半乳糖／脂多糖； 肝损伤；线粒体
中图分类号：Ｒ２８５．５
文献标识码：Ａ
文章编号：１００８－０８０５（２００８）０８—１８８８－０３
２．江苏大学药学院，江苏镇江２１２０１３；３．南京大学医学院，江苏南京２１００９３）
摘要：目的研究中华补血草根提取物（ｔｌｌｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆＬｉｍｏｎｉｕｍ ｓｉｎｅｎｓｅ Ｋｔｚｅ ｒｏｏｔ，ＬＳＥ）对小鼠急性肝损伤的防护作用及药
理机制。方法建立小鼠Ｄ．氨基半乳糖／脂多糖（Ｄ－ＧＡＩＮ／ＬＰＳ）肝损伤模型，检测ＬＳＥ对血清天冬氨酸氨基转移酶
江苏省潍涂生物资源与环境保护重点建设实验室开放课题项 目（Ｎｏ．ＪＬＣＢＥ０５０１１） 作者简介：汤新慧（１９６６·），女（汉族）．江苏盐城人，现任盐城师范学院生 命科学与技术学院教授，博士学位，主要从事药理学教学、植物药药理研 究及新荮研发工作． ·１８８８·
云草、海菠菜、海赤芍等，为白丹花科补血草属Ｌｉｍｏｎｉｕｍ Ｍｉｌｌ．多 年生泌盐草本植物，喜生于沿海盐渍化的低洼湿地上，广泛分布 于我国东北、华北及陕、甘、宁和苏北等地区。除具有较高观赏价 值、环境保护等作用外，具有一定药用价值。据记载，该植物具有 补血、止血、散淤、调经、益脾、健胃等多种功效，目前临床上主要 用于治疗功能性子宫出血症，学者们对中华补血草药理作用的研 究也主要集中在其抗菌止血方面ｏ ｇｊ。成分分析表明，该植物化 学成分十分丰富，含有多糖、鞣质、萜类、黄酮类以及氨基酸、矿物 质等等口’３ Ｊ，推测中华补血草可能具有其它功效。最新的研究初
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｌｉｍｏｎｉｕｍ ｓｉｎｅｎｓｅ（Ｇｉｒａｒｄ）Ｋｔｓｅ；Ｄ—Ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ ａｎｄ Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；Ｌｉｖｅｒ ｄａｍａｇｅ；Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ
中华补血草Ｉ‰ｏｎｉｕｍ ｓｉａｅｎｓｅ（Ｇｉｒａｒｄ）Ｋｕｎｔｚ，又名匙叶草、盐
收稿日期：２０ｃｒ７－１１４）１；修订日期：２００７．１２．１６ 基金项目：江苏省高校自然科学重大基础研究项目（Ｎｏ．０７ＫＪＡｌ８０１７）；
ｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｊｉａｎｇｓｕ ２１００９３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｌｌｅ ｈｅｐａｔｏｐｍｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｌｉｍｏｎｉｕｍ￥ｉｎｅｌｌＪｅ（Ｇｉｒａｒｄ）Ｋｔｚｅ ｒｏｏｔ（ＬＳＥ）ｏｎ ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｄ—ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｅｈａｒｉｄｅ（Ｄ·ＧａｌＮ／ＬＰＳ）ａｎｄ ｉｔｓ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｄ—ＧａｌＮ／ＬＰＳ—ｉｎ— ｄｕｃｅｄ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ ｍｏｄｅｌ ＷａＳ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＬＳＥ ｏｎ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｓｅｒｌｌｌｌｌ ａｓｐａｒｔａｔｅ ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＳＴ）ａｎｄ ８．１－ ａｎｉｎｅ ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＬＴ）ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｕｌｔｒａｓｔｒｕｅｔｕｒｅ ｏｆ ｌｉｖｅｒ Ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｄ ｍｉｔｏ— ｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｓｗｅｌｌｉｎｇ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ Ｄ－ＧａＩＮ＋ＬＰＳ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈｏｕｔ ｏｒ ｗｉｔｈ ＬＳＥ．Ｒｅｓｕｌｔｓ １００ ｍｇ·ｋｇ～．２００ ｎａｇ－ ｌ【ｇ～ｏｒ ４００ ｍｇ·ｋｇ“ＬＳＥ ｃｏｕｌｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ８ｅｌ＇ｌｉｒａ ＡＳＴ ａｎｄ ＡＬＴ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｄ·ＧａｌＮ／ＬＰＳ ｉｍ－ ｐｒｏｖｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｏｆ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａＩ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｍｉｔｏｅｈｏｎｄｒｉａｌ