上皮间质转化与肿瘤转移研究进展
tim-3在肝癌细胞上皮间质转化及转移中的作用机制
atoma cells. Method: Culture normal liver cell LO2 and hepatocellular carcinoma cell SMMC-7721,
detection of Tim-3 expression by RT-PCR.The hepatocellular carcinoma cells were divided into
three groups, experimental group control group HCC cells without transfection; experimental group:
HCC transfected with Tim-3 siRNA, low expression of Tim-3; positive control group: HCC trans-
tim3在肝癌细胞上皮间质转化及转移中的作用机制12方法121细胞培养将肝细胞lo2和smmc7721在培养瓶中加入025trypsinedta溶液1ml25cm2冤袁对细胞进行消化袁离心后袁弃去上清液袁加入适量完全培养基袁分瓶后置于37益袁5co2培养箱中袁取对数生长期细胞为实验对象遥122细胞转染选取对数生长期细胞作为实验对象袁分成不同组袁应用lipofectamine2000进行转染袁实验组转染tim3sirna袁阳性对照组转染pex3htim3过表达质粒袁对照组未接受转染遥123rtpcr检测通过rtpcr检测各分组细胞tim3尧ecadherin尧ncadherin尧mmp9尧twist1尧slug尧snail尧smadmrna的表达遥根据试剂盒说明书步骤提取细胞总rna袁然后按照pcr反应试剂盒说明进行反转录和pcr扩增遥pcr引物序列见表1遥124westernblot检测通过westernblot检测各分组细胞tim3尧ecadherin尧ncadherin尧mmp9尧twist1尧slug尧snail尧smad蛋白表达细胞裂解后提取总蛋白袁经过page电泳转于pvdf膜上袁血清蛋白封闭袁漂洗后加入一抗尧二抗袁免疫印迹增强化学发光法显像并记录袁应用imageproplus60图像分析袁通过对比灰度值袁计算各蛋白的相对表达量遥125transwell小室细胞迁移侵袭实验将不同分组肝癌细胞用pbs洗3遍袁将待测细胞胰酶处理袁取200滋l袁调至细胞浓度为5伊104ml袁接种到上室袁37益袁5co2共培养24h遥取出transwell小室袁用棉棒清除未穿透微孔滤膜的细胞遥将tran鄄swell放入95的乙醇溶液中袁静置15min袁然后将transwell小室放入01的结晶紫溶液中袁静置10min袁pbs清洗3遍遥染色后相差显微镜下200倍袁每张膜自上而下随机取10个视野袁计数每个视野内的穿过的细胞数遥实验重复3次遥13统计学处理采用spps160软件袁计量资料以x依表示袁两组之间比较采用检验袁相关性分析采用pearson相关分析法袁约005表示差异有统计学意义遥2结果21rtpcr检测肝癌细胞smmc7721及正常肝细胞lo2tim3mrna的表达smmc7721和lo2tim3mrna表达水平分别为185依021和102依019袁tim3mrna在肝癌细胞系smmc7721表达明显高于正常肝细胞lo2袁
足细胞上皮间质转分化研究
足细胞上皮间质转分化研究随着科学技术的不断进步，人们对细胞生物学的研究也日益深入。
足细胞上皮间质转分化是细胞生物学领域的一个热门研究课题，该过程是指上皮细胞通过一系列分化和转化过程，最终转变为间充质细胞。
足细胞上皮间质转分化的研究可以帮助我们更好地了解细胞的生物学特性，为解释细胞分化和组织重塑提供新的思路和方法。
本文将就足细胞上皮间质转分化的研究进展进行介绍和讨论。
一、足细胞上皮间质转分化的基本过程足细胞上皮间质转分化是一个复杂的细胞生物学过程，其基本过程包括细胞形态改变、细胞移动、基质降解、细胞重塑等多个步骤。
在上皮-间质转分化过程中，细胞经历从极性排列的上皮细胞向无规则排列的间充质细胞的转变，同时伴随着细胞骨架的重构、胞外基质的合成和降解、细胞分化相关标志物的表达等生物学特性的改变。
这一过程不仅涉及到细胞形态学和生物化学特性的改变，还涉及到细胞内信号传导通路的激活和抑制等分子水平的变化。
足细胞上皮间质转分化是受到多种信号通路的调控的。
研究表明，包括Wnt信号通路、TGF-β信号通路、Notch信号通路等在内的多种信号通路参与了足细胞上皮间质转分化过程。
具体来说，Wnt信号通路通过β-catenin介导的转录调控作用参与了足细胞上皮间质转分化的调控过程。
而TGF-β信号通路则通过Smad信号蛋白介导的细胞核转录调控作用调控了细胞的上皮间质转化。
Notch信号通路也在足细胞上皮间质转分化过程中发挥了重要作用。
这些信号通路之间相互作用，共同调控了足细胞上皮间质转分化的过程。
除了信号通路的调控外，细胞外基质的重组和降解也是足细胞上皮间质转分化的重要调控机制。
细胞外基质是由一系列蛋白质和多糖组成的胞外结构支架，对于细胞的形态和功能具有重要影响。
当细胞发生上皮间质转分化时，细胞外基质的重组和降解过程将为细胞的形态改变提供支持，同时还可以调节细胞的迁移和浸润能力。
细胞外基质在足细胞上皮间质转分化中扮演了重要的角色。
上皮间质转化在肺癌中的研究进展
上皮间质转化在肺癌中的研究进展张琨琨【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2012(009)021【总页数】2页(P2726-2727)【关键词】上皮间质转化;肺癌;肿瘤干细胞;转移【作者】张琨琨【作者单位】第三军医大学第二附属医院,重庆,400037【正文语种】中文肺癌是全球新发病例和死亡病例均居首位的恶性肿瘤，影响患者预后的主要因素是出现局部复发及远处转移。
新近研究表明，上皮间质转化（EMT）在肿瘤演进中是一个重要的决定性过程［1－2］，与肿瘤细胞侵袭、转移乃至“干性”等密切相关。
1 EMT概念EMT是上皮细胞失去上皮特性获得间质细胞表型的一种生物现象。
EMT发生后，细胞间连接蛋白及上皮特异性蛋白表达下降，如 E－钙黏蛋白（E－cad）、β－连锁蛋白等；同时伴随间充质细胞特异性蛋白表达增高，如波形蛋白（vimentin）、N－钙黏蛋白（N－cad）等。
EMT在人胚胎干细胞分化过程中起着关键作用，这个过程在组织修复再生、器官纤维化和肿瘤发生时可被病理性激活［3］。
肿瘤细胞是否存在EMT现象，曾一度出现争论。
在一项乳腺癌研究中，研究者利用间质和上皮细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠模型，首次提供了肿瘤细胞在体内演进中发生EMT的直接证据［4］，从而使EMT从理论推测逐步走向肿瘤转化医学研究。
2 EMT相关信号通路EMT可被多种信号分子所诱导，如β生长转化因子（TGFβ）、肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子（FGF）以及Wnt、Notch与hedgehog通路蛋白等。
TGFβ是当前研究最广泛的EMT诱导因子，其与受体结合后，将发放跨膜信号，直接磷酸化C－末端激活Smad2和Smad3，后二者与Smad4形成三聚体转移进入核内，进而通过与DNA转录结合位点作用调控TGFβ应答基因表达［5］。
但是，由于Smad分子与DNA亲和力较低，这一过程中还需要Snail、ZEB等转录因子的协同作用，以获得对应答基因更高的亲和力和选择性。
上皮间质转化在肿瘤转移中的作用及机制共59页PPT
11、获得的成功越大，就越令人高兴 。野心 是使人 勤奋的 原因， 节制使 人枯萎 。 12、不问收获，只问耕耘。如同种树 ，先有 根茎， 再有枝 叶，尔 后花实 ，好好 劳动， 不要想 太多， 那样只 会使人 胆孝懒 惰，因 为不实 践，甚 至不接 触社会 ，难道 你是野 人。(名 言网) 13、不怕，不悔(虽然只有四个字，但 常看常 新。 14、我在心里默默地为每一个人祝福 。我爱 自己， 我用清 洁与节 制来珍 惜我的 身体， 我用智 慧和知 识充实 我的头 脑。 15、这世上的一切都借希望而完成。 农夫不 会播下 一粒玉 米，如 果他不 曾希望 它长成 种籽； 单身汉 不会娶 妻，如 果他不 曾希望 有小孩 ；商人 或手艺 人不会 工作， 如果他 不曾希 望因此 而有收 益。-- 马钉路 德。
16、业余生活要有意义，不要越轨。——华盛顿 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。——罗素·贝克 18、最大的挑战和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。——马云 19、自己活着，就是为了使别人过得更美好。——雷锋 20、要掌握书，莫被书掌握；要为生而读，莫为读而
肿瘤细胞转移原理
肿瘤细胞转移原理
肿瘤细胞转移是肿瘤治疗中的一个主要难题。
肿瘤细胞通过血液循环或淋巴循环进入身体其他部位，形成转移瘤，导致治疗的失败和复发。
肿瘤细胞的转移原理主要包括以下几个方面：
1.上皮-间质转化（EMT）：肿瘤细胞通过EMT过程，从上皮细胞转化为间质细胞，使其能够穿过血管和淋巴管壁，进入血液和淋巴系统，从而实现转移。
2.细胞外基质（ECM）降解：肿瘤细胞通过分泌酶类，如蛋白酶和酪氨酸蛋白酶等，降解细胞外基质，进一步促进肿瘤细胞的转移。
3.逃逸免疫监控：肿瘤细胞可以通过逃逸免疫监控的方式，干扰免疫系统对癌细胞的识别和清除，从而增强其转移的能力。
4.生物学特性：肿瘤细胞具有强的生存能力和适应性，可以适应不同的环境，如低氧环境、高温环境等，从而增强其转移的能力。
综上所述，肿瘤细胞转移是一个复杂的生物学过程，涉及多种因素的相互作用。
通过深入研究肿瘤细胞转移机制，可以为肿瘤治疗提供新的思路和方法。
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足细胞上皮间质转分化研究
足细胞上皮间质转分化研究足细胞上皮间质转分化（EMT）是一种生物学过程，指的是细胞从上皮细胞类型转变为间质细胞类型的转化。
这一过程在胚胎发育和器官形成中起着重要作用，同时也与多种疾病的发生和发展密切相关，如肿瘤转移和纤维化。
最近的研究表明，足细胞上皮间质转分化在肾脏疾病的发生和进展中也扮演着重要的角色。
本文将综述足细胞上皮间质转分化的研究进展，探讨其在肾脏疾病中的作用和意义。
足细胞是肾小球滤过屏障的重要组成部分，主要负责调节滤过屏障的通透性和选择性。
足细胞的另一个特点是它们具有上皮细胞的形态和功能，包括紧密连接、极性化和脚突的形成。
在肾脏疾病的发生和发展过程中，足细胞的结构和功能可能会发生改变，其中足细胞上皮间质转分化是一个重要的而又常见的现象。
足细胞上皮间质转分化的发生会导致足细胞失去上皮特性，增加间质特性，同时伴随着下丘脑内皮型转换和表型特性的改变，最终导致足细胞的结构和功能的改变，从而影响滤过屏障的通透性和选择性，使之发生损伤和失衡，为多种肾脏疾病的发生和发展奠定了基础。
研究表明，足细胞上皮间质转分化在多种肾脏疾病中发挥着重要的作用。
糖尿病肾病是一种常见的慢性肾脏疾病，其发病机制尚不完全清楚，但足细胞上皮间质转分化被认为是糖尿病肾病发生和发展的重要环节。
研究发现，高糖环境可以诱导足细胞发生上皮间质转分化，使其失去上皮特性，增加间质特性，同时导致足细胞脚突的脱落和足细胞密封层的破坏，最终影响滤过屏障的正常功能。
研究还发现，足细胞上皮间质转分化与肾小球硬化有密切关系。
肾小球硬化是糖尿病肾病的典型表现，其发生与足细胞上皮间质转分化有着密切的关联。
这些研究结果表明，足细胞上皮间质转分化在糖尿病肾病的发生和发展中起着重要作用，同时也为糖尿病肾病的治疗和预防提供了新的靶点和策略。
尽管足细胞上皮间质转分化在肾脏疾病中具有重要作用，但目前对于其具体机制和调控尚不完全清楚。
开展足细胞上皮间质转分化的研究，探究其具体机制和调控，对于深入理解和治疗肾脏疾病具有重要的意义。
上皮-间质转化与恶性肿瘤的侵袭转移
上皮-间质转化与恶性肿瘤的侵袭转移姜小云【摘要】转移是肿瘤发展的一个重要阶段,且多数患者逝于肿瘤转移,所以肿瘤转移一直备受关注.上皮-间质转化(EMT)在恶性肿瘤的侵袭转移过程中发挥着关键的作用,而研究EMT的始发因素及其下游通路在肿瘤生长、侵袭、转移中的作用,阻断这一机制的发生发展,对恶性肿瘤的侵袭转移前的早期诊断、早期治疗有着非常重要的意义.下面就上皮-间质转化及其在组织胚胎发育过程中的作用、涉及的有关信号通路、与肿瘤侵袭转移的关系和在口腔恶性肿瘤侵袭转移中的作用等作一综述.【期刊名称】《国际口腔医学杂志》【年(卷),期】2010(037)004【总页数】4页(P424-427)【关键词】上皮-间质转化;肿瘤;转移【作者】姜小云【作者单位】南京医科大学口腔医学研究所【正文语种】中文【中图分类】Q256恶性肿瘤患者多逝于肿瘤的转移或复发，而肿瘤的局部侵袭和远处转移是其顽固性和难治性的根本原因；因此，深入研究恶性肿瘤的侵袭转移机制，有可能为设计新的抗肿瘤侵袭转移治疗奠定基础。
近来，上皮—间质转化（epithelial－mesenchymal transformation，EMT）在恶性肿瘤侵袭转移中的作用备受关注。
1 EMTEMT是指上皮细胞在特定情况下逐渐获得间质细胞所特有性状的现象。
EMT不仅存在于胚胎发育过程中，同时还与肾纤维化等多种慢性疾病的发生和肿瘤的侵袭转移密切相关。
表现为上皮细胞失去细胞间的相互作用，由多边形变为梭形的纤维细胞样形态；细胞失去极性，黏附能力下降，获得较强的侵袭和转移能力。
此外，细胞表型亦发生改变，例如上皮钙黏着蛋白（epitheliumcadherin，E-cad）、细胞角蛋白等上皮标志物丢失；同时，表达间质细胞标志物，例如成纤维细胞特异性蛋白、纤连蛋白（fibronectin）、波形蛋白（vimentin，Vim）等。
在EMT过程中有时仅发生功能改变，有时以上皮表型为主，但同时存在间质表型[1]。
上皮-间充质转变在肿瘤学中的研究进展
上皮-间充质转变在肿瘤学中的研究进展国际肿瘤学杂志2007年2月第34卷第2期JIntOncol,February2007,V ol34,No.2 上皮.间充质转变在肿瘤学中的研究进展孙涛综述孙保存审校【摘要】上皮.间充质转变(EMT)是胚胎细胞在发育过程中重要的生物学行为,这一现象在肿瘤的形成与演进中也扮演了重要角色.肿瘤细胞EMT的研究对深入揭示肿瘤细胞的侵袭,转移及去分化等生物学特性,信号转导机制及寻找抗肿瘤治疗靶点奠定了基础.【关键词】上皮细胞;间质干细胞;肿瘤;表型【中图分类号】R73-3【文献标识码】A【文章编号】1673—422X(2007)02-0081.04 Researchadvancementonepithelial?mesenchymaltransitioninoncologySUNTao.Depart mentofPa—thology,CancerHospital,TianfinMedicalUniversity,Tianfin300060,China 【Abstract】Epithelial-mesenchymaltransition(EMT)occursduringcriticalphasesofembryonicdevel- opmentinmanyanimalspecies.Italsoplayanimportantroleintumorformationandevolution .EMToftumorcellsrevealsthedepthofinvasion,metastasisanddedifferentiationbiologicalcharacteristics ,andsignaltrans-ductionmechanisms,laysthefoundationtofindanti-tumortherapeutictarget. 【Keywords】Epithelialcells;Mesenchymalstemcells;Neoplasms;Phenotype上皮-间充质转变(epithelial-mesenehymaltransi—tion,EMT)在多细胞动物发育早期的内胚层和原肠形成中起重要作用,神经嵴,心脏,骨骼肌系统,周围神经系统,颅面部都是胚胎细胞通过EMT作用形成的¨.EMT是指细胞由上皮表型向间充质表型的转变,在肿瘤生长,慢性炎症及纤维化等病理过程中也扮演着重要角色J.在肿瘤生长和演进过程中,肿瘤细胞本身会出现逆胚胎样转变,上皮来源性肿瘤细胞失去上皮表型而具备侵袭能力,更有甚者一些肿瘤细胞会表达间质细胞或间质来源细胞的表型,提示EMT现象可能广泛存在于肿瘤生长过程中,且为肿瘤治疗提供了新的思路J.1肿瘤生长中的EMT上皮来源的肿瘤细胞通过EMT过程失去彼此间的连接,获得间充质细胞的表型【4J,肿瘤细胞也在此基础上获得了侵袭和转移的能力,因此EMT被认为在肿瘤的生长和演进中起着重要作用¨.利用激光加压弹射技术分析肿瘤细胞及肿瘤间质细胞的遗传改变发现,肿瘤细胞和间质细胞往往存在相同的遗传改变,而不同细胞同时发生同种遗传改变的可能性极小_6J.Petersen等通过对乳腺癌的研究发现,肿基金项目:国家自然科学基金资助项目(30370554)作者单位:300060天津医科大学肿瘤医院病理科天津医科大学基础医学院病理教研室81-综述?瘤细胞和间质细胞存在x染色体不随机失活,提示肿瘤细胞和间质细胞可能起源相同,在某种微环境作用下一些肿瘤细胞通过EMT转化为间充质细胞或成纤维细胞.肉瘤样癌(旧称癌肉瘤,假肉瘤样癌,梭形细胞癌等)的组织中包含了癌和肉瘤的成分,而这些细胞群却起源于同一个上皮来源的祖先,暗示EMT可能在这种转化过程中起关键作用j.通过对细胞培养和转基因鼠肿瘤模型的研究表明,EMT与原癌基因Ras或受体酪氨酸激酶(RTK)诱发的信号级联,有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路及转化生长因子-p(TGF—B)信号激活有关J.EMT包括多种亚型的上皮细胞塑形性改变,它们可以被多种信号或因子所诱导,通过亚稳态或可逆的转变,增强或抑制某些关键基因的表达,从而实现细胞由上皮表型向间充质表型的转化'm川.发生EMT的恶性肿瘤细胞具备转移性或成纤维细胞表型,在此过程中上皮表型的肿瘤细胞失去E.钙黏蛋白(E—cadherin)等上皮细胞标志的表达,从而获得波形蛋白(vimentin)等间质细胞标志的表达,而这正与肿瘤的转移,浸润和演进密切相关J.2细胞上皮表型的缺失与间充质表型的获得细胞发生EMT的特征就是上皮表型基本消失,细胞变形失去彼此之间的连接,极性丧失,且迁移能力增强.此时细胞内的肌动蛋白微丝构成的细胞骨国际肿瘤学杂志2007年2月第34卷第2期JIntOncol,February2007,V ol34,No.2 架应力纤维重新组合,甚至出现伪足.Ecadherin是上皮细胞的重要表型之一,其表达缺失被认为是EMT的重要标志lljJ.上皮细胞通过表达E-cadherin而实现细胞间连接,E-cadherin属于I型钙黏蛋白,在细胞间通过一些免疫球蛋白胞外区相连,而与胞内-catenin,B-catenin蛋白及细胞骨架相连接,实现细胞间的连接作用….正常细胞或转化E.cadherin的间充质细胞可以通过表达E-cadher-in而实现细胞间的连接或黏附.对于上皮细胞,早期的连接是通过E.cadhefin介导,后期时这些分子可以聚集成稳定的连接复合体形成桥粒¨J.利用E-cad. herin抗体处理上皮表型的肿瘤细胞,可以使之出现间充质样表型的转变….不表达E-cadherin的裸鼠移植瘤生长迅速,在肝癌,肺癌,乳腺癌,结肠癌及胰腺癌等多种肿瘤中,E.cadhefin与肿瘤分级和预后呈负相关¨J.E.cadherin的下调主要是通过转录抑制,启动子甲基化和基因突变途径实现¨.J,其中转录抑制作用主要是通过SNAI蛋白,Smad相互作用蛋白l(SIP1)及Twist蛋白实现,E-cadherin抑制物也是研究EMT机制的关键之一llJ.上皮表型细胞经过EMT过程获得间充质表型是由复杂的转录调控网络控制的,其中细胞的E—cad. herin,细胞角蛋白等上皮特征分子表达被抑制,而纤维连接蛋白(fibronection),vimentin及成纤维细胞特异性蛋白.1(FSP.1)等间充质特征分子则表达水平上调,最终实现EMT的过程¨.FSP1又称S100A4,是目前被认为较特异的成纤维细胞标志.当上皮细胞接受TGF.B等因素的刺激后向成纤维细胞转变时,FSP.1表达显着上调^1.J.由于EMT涉及复杂的信号网络,对间充质表型获得的详细过程目前尚不明了.3EMT诱导物SNAI,SIP1和TwistSNAIl蛋白是一种锌指DNA结合蛋白,发挥E- cadherin转录抑制作用.通过酵母单杂交系统发现其主要识别启动子区E-box并与之牢固结合,从而发挥转录抑制作用¨J.SANI1首先在果蝇中被发现,有控制果蝇原肠胚形成作用.SANI1下调果蝇shot.gun基因的转录,shotgun基因与E.cadherin基因的功能类似,表达于果蝇中胚层腹沟形成的内陷过程中. 在脊椎动物中,SANI1及同家族基因SANI2都与原肠和神经嵴的形成密切相关,SANI2主要存在于鸟类和两栖类动物中,而SANI1则在果蝇和鼠类中被发现. SANI1的失活会导致胚胎的发育停止在原肠胚阶段. 肿瘤细胞E-cadherin的下调也与SANI1有关,应用SANI1转染E-cadherin阳性细胞系,可出现EMT且肿瘤细胞出现间充质标记….临床病理研究表明, SNAIl表达于几乎所有的淋巴结转移的导管癌中,如乳腺导管癌,且与肿瘤分化的级别呈负相关.另一种E-cadhefin转录抑制蛋白SIP1,也是与E- box结合的锌指蛋白.SIP1与SNAIl的DNA结合区域重叠,在多种E.cadherin缺失的肿瘤细胞系中高表达.SNAIl和SIP1过表达时,会削弱肿瘤细胞间E-cadherin介导的黏附并增强肿瘤细胞的侵袭作用-.Y ang等发现Twist作为新的E.cadherin抑制物能诱导EMT的发生,在对侵袭性小叶乳腺癌研究中发现,抑制twist基因的表达能够减少体内肿瘤转移的潜在可能.另外,twist基因的异位表达可以促进EMT的发生,使肿瘤细胞具备间充质标记,增强了细胞侵袭能力,诱导E-cadherin下调.4TGF-B信号与EMTTGF-B对正常上皮细胞和肿瘤细胞生长早期具有抑制作用,但当肿瘤细胞对这种抑制作用出现抵抗时TGF-B反而会促进肿瘤细胞生长¨J.这种机制通过对EpH14小鼠乳腺细胞系的研究而发现,在低浓度TGF-B存在的三维培养条件下,这种细胞会分散生长并呈现分支样结构而不出现凋亡.与之对应的是ras转化的EpH14细胞可以在含有TGF.B的三维培养条件下发生EMT并具有侵袭性,而无TGF.B刺激的转化细胞则保留了上皮样表型.在体内,ras转化的上皮细胞能够出现成纤维细胞样的形态并具有侵袭能力,而细胞TGF-B的分泌则由旁分泌转变为自分泌_lJ.已有多项研究证实肿瘤细胞系被转入外源TGF-B后都出现不同程度的上皮表型缺失而获得侵袭特征.抑制TGF-p信号,如阻断TGFp受体可以防止EMT和侵袭表型的出现ll.Smad蛋白是TGF-B受体的底物,smad4最初被认为是抑癌基因,同时smad4也是TGF-B通路和EMT的重要参与者之一.通过扰动实验表明,Smad4能够诱导EMT的重要基因lef-l表达从而诱导EMTl17].另外一个重要的EMT调节因子整合素结合激酶,已经被证明可以被TGF.13/Smad信号上调.同时,Smad4还可以介导细胞外信号调节激酶及p38MAP激酶磷酸化.与EMT关系最为密切的E.cad.herin也可以受到Smad4的调节,通过对结肠癌细胞系的研究表明,Smad4表达缺失将导致E.cadherin不表达.当向结肠癌细胞转染smad4后,E.cadherin将恢复表达,同时出现间充质.上皮转化(MET)[3,8,t83.这些实验表明smad4可能具有维持细胞上皮表型的作用.而相反的是,同样与Smad4有关的LEF.1则2007年2月第34卷第2期JIntOncol,February2007.V o134.No.2 促进EMT的发生_】.由此可见.Smad4在EMT和MET两个过程中同时起作用,至于发生哪种转化则取决于Smad4下游的信号.H—ras与TGF-p协同可以产生持续的EMT及侵袭样表型,而Ras通路与TGF.p通路的协同作用则是通过Ras下游的Raf/MAPK来实现的.此外,Ras下游尚可通过磷脂酰肌醇3一激酶途径来补偿刺激细胞增殖¨.亦有报道称H—ras的表达可诱导Smad.2 的核聚集,进而促进EMT,最终产生肿瘤细胞的侵袭和转移.5EMT相关的信号转导通路RTK/Ras通路是EMT的重要通路,其上游为表皮生长因子或成纤维细胞生长因子激活相应受体,信号传递给Ras,进而通过Raf/MAPK与TGF.B协同促进EMT,同时通过磷脂酰肌醇3一激酶促进细胞增殖, 抑制细胞凋亡_31.除RTK/Ras,TGF—B通路外,一些新的通路也逐步被发现对EMT有重要作用,也与肿瘤生长及预后密切相关.Wnt/13一catenin通路是对干细胞功能和发育有重要作用的信号转导通路,同时也对发育和肿瘤生长过程中的EMT有重要影响J.该通路中的Bcatenin是Wnt通路的重要枢纽分子,介导Wnt信号从膜至胞浆进核的传递.p—catenin水平,稳定性及功能是通过T细胞因子/淋巴增强因子(TCF/LEF)进行转录调控的,同时在E—cadherin降解或转录抑制时被增强,也可以通过RTK/Ras下游的磷脂酰肌醇3.激酶激活抑制糖原合成激酶3B而增强卫.Wnt/13 catenin和TGF一13/Smad通路亦可通过多种途径协同:SNAIl表达可以抑制E.cadherin,破坏Ecadher.in/13一catenin复合物,刺激胞浆内B.catenin向核转移,促进TCF/LEF的转录,此时来自TGFB通路的Smad信号可与TCF/LEF协同增强转录,协同促进EMT的发生.Notch通路是近年来的研究热点.Notch信号与TGF—B类似,也是扮演肿瘤促进和抑制双重角色. 目前证明Notch通路在EMT中与TGFB通路协同上调E—cadherin抑制因子Hey1或SNAIl的表达. hedgehog通路是干细胞维持和形成表型的重要信号通路,在一些特殊的肿瘤类型中存在突变].进一步研究表明,hedgehog通路的活性增强将提高肿瘤的转移能力.将hedgehog下游转录因子Gli一1转入无转移能力的小鼠前列腺癌细胞系中,将导致体外侵袭和移植瘤的肺转移,且与诱导SNAIl表达及E—cadherin抑制有关,在人类前列腺癌细胞系中也观察到类似情况.上述作用都可以被hedgehog通路抑制药物cyclopamine所彻底抑制,提示hedgehog通路与EMT具有一定关系.此外,Gli也可以上调人类皮肤癌的SNAIl表达;hedgehog信号还可以诱导人类皮肤癌自分泌血小板源生长因子受体信号,并且增强Wnt通路的作用.6结语EMT是肿瘤细胞自身塑形的重要标志,也是理解肿瘤细胞逆胚胎样转型的重要依据.肿瘤细胞与问质细胞及细胞外基质关系的研究将使EMT在肿瘤学中的意义进一步被证实,例如肿瘤相关成纤维细胞,肿瘤血管生成拟态及肉瘤样癌等方面的研究将进一步揭示EMT在肿瘤细胞演进中的作用,其与基因组不稳定性理论,肿瘤干细胞理论的相互融合和促进,必将进一步揭示肿瘤生长的本质,为抗肿瘤治疗提供新的思路.参考文献1ThieryJP.Epithelial-mesenchymaltransitionsintumourprogression. 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NatRevMolCellBiol,2002,3(3):155-66.14Ca~nY,eta1.ThemouseSnailgeneeIlcode$a keyregulatoroftheepithelial-mesenehymaltransition.MolCellBiol,84.2007年2月第34卷第2期JIntOncol,Febma~2007V o134,. 2001.21(23):8184?8188.15Y angJ,ManiSA,DonaherJL,eta1.Twist,amasterregulatorofmot- phogenesis,playsanessentialroleintumormetasta~s.Cell,2004,117(7):927.939.16AkhumtIu,DerynckR.TGF-betasignalingincancer-adouble? edgedsword.TrendsCellBiol,2001,11(11):44?51.17NawshadA,HayED.TGFbeta3signalingactivatestranscriptionof theLEF1genetoinduceepithelialmesenchymaltransformationduring moosepalatedevelopment.JCellBiol,2003.163(6):1291?1301.18MullerN.Reinacher.SchickA,BaldusS.eta1.Smad4inducesthe tumorsuppressorE?cadherinandP-eadherinincoloncarcinoma cells.Oncogene,2002,21(39):6049-6058.19JandaE.LitosG,Grune~S,eta1.OncogenicRas/Her?2mediatehyper- proliferationofpol~depithelialcellsin3Dculturesandrapidtumor growthviathePDKpathway.Oncogene,2O02,21(33):5148?5159.20NelsonWJ,NusseR.ConvergenceofWnt.beta?eatenin,andcad- herinpathways.Science,2004,303(5663):1483?1487.21EgerA.StockingerA,ParkJ,eta1.Beta?CateninandTGF?betasig- nalingcooperatetomaintainamesenchymalphenotypeafterFosER- inducedepithelialtomesenchymaltransition.Oncogene,2004,23 (15):2672?2680.22LiebnerS.CattelinoA,GalliniR,eta1.Beta-cateninisrequiredforendothelial-mesenchymaltransformationduringheartcushiondevelop, meritinthemous~JCellBiol,2004.166(3):359-367.23RadtkeF,RajK.TheroleofNotchintumorigenesis:oncogeneor tumoursuppressor?NatRevCancer,2003,3(10):756-767.24TimmermanLA,GregoBessaJ.RaysA,eta1.Notchpromotesepithe-lia1.mesenchymaltransitionduringcardiacdevelopmentandoncogenic transformation.GenesDev,2004,18(1):99?115.25ZavadilJ,CermakL,SotoNievesN,eta1.IntegrationofTGF?beta/ SmadandJagged1/Notchsignallinginepithelial-tomesenchymaltran?sition.EMBOJ,2004.23(5):I155.1165.26PastaMM.HebrokM.Hedgehogsignallingincancerformationandmaintenance.NatRevCancer,2003.3(12):903-91I.27KarhadkarSS,BovaGS,AbdallahN,eta1.Hedgehogsignallingin prostateregeneration,neoplasiaandmetastasis.Nature,2004,431(7009):707-712.(收稿日期:2006.08-08修回日期:2006?09?25)基质金属蛋白酶在肿瘤血管生成中的作用车绪春陆融综述姚智审校【摘要】血管生成是在原有毛细血管和(或)毛细血管后微静脉基础上生成新血管的过程,是肿瘤持续生长和发生转移的必要条件,其过程极为复杂,需要多种因素的参与.近年来的研究结果显示,基质金属蛋白酶(MMP)在肿瘤血管生成中发挥重要作用.【关键词】基质金属蛋白酶类;新生血管化,病理性;肿瘤转移【中图分类号】R730.231【文献标识码】A【文章编号】1673.422X(2007)02?0084.04 MatrixmetalioproteinasesandtheirroleintumorangiogeneslsCHEXu.chun,LURong.Dep artmentofImmunology,TianjinMedicalUniversity,BasicMedicalCollege,Tianjin300070,China【Abstract】Angiogenesisistheprocessofformingnewbloodvesselsfromexistingbloodcapillaryand (or)post-capillaryvenule.Itisaprerequisiteoftumorpersistentgrowthandmetastasis.Thepr ocessoftumorangiogenesisisverycomplicated,involvinginmanyfactors.Thefindingsinthepastfewyears showthatmatrixmetalloproteinases(MMP)playaimportantroleintumorangiogenesis.【Keywords】Matrixmetalloproteinases;Neovasculafization,pathologic;Neoplasmmetastasis转移是恶性肿瘤的重要生物学特征,也是造成肿瘤患者死亡和肿瘤治疗失败的主要原因.肿瘤转移是一个动态的连续过程,而血管生成则被认为贯穿了基金项目:国家863高技术研究发展计划基金资助项目(2005AA2Z3D40);国家重大基础研究前期研究专项基金资助项目(2003CCA04300);教育部科学技术研究重点项目(03007)作者单位:300070天津医科大学基础医学院免疫教研室(车绪春);深圳康哲药业有限公司(陆融)综述?这一过程的始终.血管生成过程中的一个重要步骤是基底膜及胞外基质的降解,大量研究表明基质金属蛋白酶(MMP)是降解细胞外基质最重要的酶类,这类蛋白酶能够降解细胞外基质的许多成分,从而导致侵袭,转移和血管生成….l细胞外基质的降解肿瘤的生长和转移依赖于新血管生成,其过程经过一系列相关步骤,包括内皮细胞增生,内皮细胞通。
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此外 ， 肿瘤细胞到 达新 的定居 点增 值分 化过 程也 需要 Ｅ Ｍ Ｔ 的逆过程 ＭＥ Ｔ的参与 。研究表 明原发肿瘤发生转 移前普遍
存在 Ｅ ＭＴ 。
用， 可分为 以下三 型： Ｉ型 ： 胚胎发育和器官形成 ； ｌ Ｉ 型： 纤 维
化 一损伤修复 、 组织再 生 ； Ⅲ型 ： 肿瘤发生及转移 。
２ Ｅ ＭＴ与肿瘤转移 恶性肿瘤的浸润 和转 移是其 最特征性 的生 物学标 志之
一
重要。微环境和肿瘤 相互 作用 产生 了一 些 Ｅ ＭＴ诱 导 因子 如
一
步了解其影 响肿瘤 的机 制 ， 而且 可促进 Ｅ ＭＴ生物 标记物
及靶 向治疗 的研究 ， 这对侵袭性肿瘤的诊治具有重大意义。
１ Ｅ ＭＴ概 述
Ｅ Ｍ Ｔ是上皮细 胞暂 时失 去细胞 极性 ， 逐 渐 获得 间质 细
信号被破坏 ， 导致原 代乳 腺上 皮细胞迁移及 自我更新 受到抑 制， 肿瘤形成及转移也因此受到抑制。这些 研究 结果 揭示 了
交叉诱 导 Ｅ Ｍ Ｔ 。在 上 述 外 源性 激 活物 和信 号 通 路 中，
Ｔ Ｇ Ｆ — ｐ是肿瘤 进展 过程 中的强效 激活 物 。Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ作 为 转化生长 因子－ Ｂ超家族蛋 白成员 ， 可参与 肿瘤的 发展 、 组 织 自稳及生长发育 的调 节过程 。Ｔ Ｇ Ｆ － Ｂ可促 使正 常上皮 细 胞、 内皮细胞 、 造血细胞的细胞凋亡和或细胞周期的停滞 ， 当 Ｔ Ｇ Ｆ ． ８通路 突变或调节异 常时 ， 细胞凋 亡受 到抑制 ， 细胞 的
Ｓ ｎ ａ ｉ ｌ 家族 成 员 。外 源 性 的激 活物 还 包 括 Ｗｎ ｔ 、 Ｈ ｅ ｄ ｇ ｅ ｈ ｏ ｇ 、
Ｎ Ｆ — Ｋ Ｂ、 Ｔ Ｇ Ｆ ． Ｂ等信号通路的激活物。上述信号 通路均可抑 制Ｅ 一 钙粘素表达 ， 并通 过诱 导 Ｅ Ｍ Ｔ参 与肿瘤转 移过程 。其 中 Ｗｒ ｉ ｔ 和Ｈ ｅ ｄ ｇ ｅ ｈ ｏ ｇ 信号通路 可使 Ｓ ｎ ａ ｉ ｌ 表 达 上调 及 Ｅ 一 钙 粘 素表达下调 ， Ｈ ｅ ｄ ｇ ｅ ｈ ｏ ｇ 信号与 Ｎ ｏ ｔ ｃ ｈ 、 Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ信号通路 可相 互
，
其 主要过程有 以下步骤 ： ①肿瘤 细胞脱 离原发 性肿瘤 病
灶； ② 降解 细胞外基质穿透 基底 膜 ， 进入血管或淋 巴管 ； ③移 出或渗 出血管或淋 巴管 ； ④迁徙 的肿瘤 细胞经过 间质 上皮转
化（ ｍｅ ｓ ｅ ｎ ｃ ｈ ｙ ｍａ ｌ — ｅ ｐ ｉ ｔ ｈ ｅ ｈ ａ ｌ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ＭＥ Ｔ ） ， 再次 表现 出上皮
７ ６
肝胆 外科 杂志 ２ ０ １ ３年 ２月第 ２ １ 卷第 １ 期
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆＨ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｂ ｉ ｌ ｉ ａ ｒ ｙ Ｓ ｕ ｒ ｇ ｅ ｒ ｙ ， Ｖ ｏ ｌ ， ２ １ ， Ｎ ｏ ． １ ， Ｆ ｅ ｂ ． ２ ０ １ ３
上皮间质 转化与肿 瘤转 移研 究进 展
３ Ｅ Ｍ Ｔ与 信 号 通 路
Ｅ ＭＴ中肿瘤转移和胚胎发育 及组织修 复 的正 常细胞 的 信 号通路 相似 。在 Ｅ ＭＴ过程 中有 三 条 比较重 要 的信 号通
尹 帅， 李永翔
【 关键词 】 上皮 间质转化 ， 肿瘤 ； 侵袭 和转移 ， 肿瘤干细胞
【 中图分 类号】 Ｒ ７ ３ ５ ． ７
【 文献标识码 】 Ｃ
【 文章编号 】 １ ０ ０ ６ － ４ ７ ６ １ （ ２ ０ １ ３ ） ０ １ － ０ ０ ７ ６ － ０ ３
途径诱导上皮细胞发生 上皮 间质转化 。而长 期 以来 人们 对 诱导 Ｅ ＭＴ以及 维持 间质 细胞状态 的信号机 制却 并不是 十分 清楚 。Ｗｅ ｉ ｎ ｂ ｅ ｒ ｇ等人证实 Ｔ Ｇ Ｆ － Ｂ 、 经典及非经典 Ｗｎ ｔ 三条 信 号通路协 同诱导激活 细胞 Ｅ Ｍ Ｔ程 序 ， 之后信 号通路 又 以 自 分泌 的方式维持 间质 细胞状态 。他 们证 实在上皮 细胞 中下 调 内源 的 自分泌信号 抑制 因子可诱 导细胞 启动 Ｅ ＭＴ程序 。
相反 ， 当他们在细胞 中添 加相关信号 通路抑 制剂 时 ， 自分 泌
上皮细胞 间质转化是一种基本 的生理病理变化 ， 其在胚 胎发育 、 慢性炎症 、 纤维化和肿瘤浸润转移 中发挥重要作 用。 近年来 ， 人们发现 Ｅ Ｍ Ｔ与肿瘤 的发 生及转 移可能存在 关联 ， 使其迅速成 为肿瘤研究 的焦点 。对 于 Ｅ Ｍ Ｔ的研究 不但能进
运动能力和周 围组织侵 袭力 也增 强 ， Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ可 通过 其诱 导 细胞凋亡作用 和生长 抑制 效应 而抑 制肿 瘤发 展 ｌ Ｏ ｊ 。Ｇ ａ ｌ Ａ 等人证实 Ｔ Ｇ Ｆ — Ｂ可通过 诱导 Ｐ Ｉ ３ Ｋ 信号 通路作 用 于下游 效
细胞 的特征 ， 重新获得 定居及 增殖 能力 ⑤ 在其 它器官 或组 织形成微型转移结节 ， 进而形成转移灶。人体 的恶性 肿瘤绝
ห้องสมุดไป่ตู้
胞 特性 的现象 ， 其主要 的特征是上皮细胞失去其上皮特性 获
得 间质细胞 特性 ， 如细胞 间黏 附力减弱 、 细胞 间紧密 连接 和 细胞极 性被破坏及细胞运动性 增强 等 ， 这些特征对胚胎发育 形成各种器官及形成原肠胚起重要 作用 … ， 此外 ， Ｅ ＭＴ也参
与促进伤 口愈合和肿瘤转移过程 。根据 Ｅ ＭＴ所起 的具 体作
启动 Ｅ Ｍ Ｔ及维持最终细 胞状态 相关 的信号 机制 ， 从而 为预 防肿瘤 发生及转 移提供 了新 的靶点 。 内源性 和外 源性 的激 活物均可诱导肿瘤 的 Ｅ Ｍ Ｔ过程 。 （ １ ） Ｅ Ｍ Ｔ外源 性 的激 活 物一微 环 境 微环 境 是肿 瘤 Ｅ ＭＴ过程 的重要外 源性 激活 物 ， 对 肿瘤 的发 生 和转移 至关