酶法制备牛皮明胶的工艺研究
酶法制备明胶过程中工艺参数的优化
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食品研究与拜发
工艺 技术
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２ ０ １ ３年 ７月
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明胶酶谱实验方法
明胶酶谱实验方法明胶酶谱实验72kD（MMP-2）和92kD（MMP-9）抽提缓冲液：10 mmol/L Tris-HCl pH 7.5,150 mmol/L NaCl,20 mmol/L CaCl2,1μmol/L ZnSO4,0.01% (v/v) Triton X-100,（0.5% PMSF）。
10mmol/LPMSF 溶液：取PMSF 粉末17.4mg, 加异丙醇溶解, 定容至100ml，置-20℃备用。
注意：PMSF在临提取组织时再加入，使终浓度为0.5%，配制时不加，不然易失效。
先用新鲜肾组织，蛋白量尽量加至最大。
如果按这个还做不出来，那就是你的实验技术问题了明胶酶是锌依赖的蛋白酶. EDTA是金属离子络合剂.加了就把明胶酶的锌离子络合了，完全抑制MMP的活性。
你加了这个我保证你一辈子也做不出来。
蛋白浓度一般是先摸索一个量。
就是分别上10,20,30,40,50,60,70,80,90,100ug跑一下电泳，先看结果。
条带看不见的，或者太透明的，都不能选。
就是要半明半暗的那种。
看是哪个道分解的，我们就选其中几个量上样。
(1)、5%浓缩胶(现配现用)：d3H2O 2.1ml30%丙烯酰胺溶液0.5ml1mol/L Tris-HCL( PH=6.8) 0.38ml10% SDS 30μl10%过硫酸铵(AP) 30μlTEMED 3μl3ml (2)、10%分离胶(现配现用)：d3H2O 2.1ml30%丙烯酰胺溶液 2.31ml1.5mol/l Tris-HCL(PH=8.8) 1.75ml10% SDS 70μl10%过硫酸铵(AP) 70μlTEMED 5.6μl1%明胶0.7ml7ml (3)、4×上样缓冲液（4o C保存）：0.32% Tris-HCL 6.4ml4%SDS 8ml50%甘油 3.2 ml溴酚蓝0.024gd3H2O 2.4ml20ml①wash buffer Ⅰ500ml50mM Tris-HCl pH 7.6 3.0286g→400ml (调pH )5 mM CaCl2 （110.99）0.2776g1μM ZnCl2 （136.30）0.068mg2.5% Triton X-100 12.5ml②wash buffer Ⅱ500ml50mM Tris-HCl pH 7.6 3.0286g→400ml (调pH )5 mM CaCl2 （110.99）0.2776g1μM ZnCl2 （136.30）0.068mg③incubate buffer 500ml50mM Tris-HCl pH 7.6 3.0286g→400ml (调pH ) 50mM CaCl2 （110.99）0.2776g1μM ZnCl2 （136.30）0.068mg1% Triton X-100 5.0ml（五）注意事项1）孵育时间可以根据情况而定，可以延长。
毕业论文牛骨料中明胶提取的工艺研究.ppt
3. 明胶样品IR谱图显示酸法制备的明胶样品 其结构式中含有各种特征基包括：—OH 、C=O 和—NH。酸法制备的明胶样品和分析纯明胶具 有相同的结构基团 。
致 谢:
衷心地感谢我的指导老师在论文撰写过程中给 了我悉心地指导和无私地帮助。老师严谨的治学 态度、高尚师德是我永远学习的楷模。
90 1640
80
70
60 3440
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000
500
Wavenumbers(cm-1)
图2 分析纯明胶样品IR谱图
结论
1.本文研究牛骨料中提取明胶的最佳工艺条件 为：骨料平均粒径为0.5mm；浸酸条件为：用 稀 HCl在 PH=2 的条件下浸酸24；浸灰条件为： 含1% Ca(OH)20.5%NaOH在PH=10条件下浸 5d (维持浸灰期间PH不小于9)；在PH=5温度为 70℃条件下提胶。
4.不同浸灰时间对明胶产量的影响
7 6 5 4 3 2 1 0 浸灰时间/d
原料200g 原料200g
5.提胶温度对明胶产量的影响
80 70 60 50 40 30 20 10
0 提胶温度
原料200g 原料200g 原料200g
由此得出本文研究牛骨料中提取明胶的最佳工艺 条件为：
(1)骨料平均粒径为0.5mm, (2)浸酸条件为：用稀 HCl在 PH=2 的条件下浸 酸24。 (3)浸灰条件含1% Ca(OH)2,0.5%NaOH在 PH=10条件下浸5d (维持浸灰期间PH不小于9)。 (4)在PH=5温度为70℃条件下提胶。
酶解法制备骨明胶
治。此时此刻 ， 成功只有靠正道去驾驭 ， 任何
Байду номын сангаас
车间进行生产。新工艺与传统工艺 的磷钙获
（ 下转 第 １９页 ） ３
第 ３ 卷第 ３期 １
李培仁 ： 可食性薄膜和 可食性包覆层
・１ ９・ ３
组分薄膜有效地抑止水分 的迁徙 。含 甲基纤 道 的 多糖 基薄 膜相 比 ， 有较 低 的水 蒸气 渗 透 具 维素（ Ｃ 或羟丙基 甲基纤维素（ Ｐ ） Ｍ ） Ｈ ＭＣ 和脂 性 。 含有脂肪 酸 蔗糖 酯 和羧 甲基 纤 维 素 钠 的 肪酸的包 覆层也可用 以控制抗 菌剂 （ 山梨 包覆层 ， 如 有效地减慢 了水果产品的成熟速率 。
表 １ 传统 工艺 生产 １ ９ ００吨明胶的销售收入
５ ＜ ５ ｌｏ ５ 见 ） 新工艺改变了传统工艺生产模式 ， 提胶道 ７ ％ ， ２０Ｂｏｍ —ｇ为 ２ ％ （ 表 ２ 。从 销 同样生产 １０ ０ ０吨明胶 ， 销售收入可 次只有 ２次。从冻力指标来区分 ， 新工艺生产 售额来看 ， 的冻 力 ＞２０ Ｂｏｍ —ｇ的 明胶 占总 产 量 的 ５ ｌ ｏ 达 到 ５２ ６５万 ， 多盈 利 近 ７ ５万元 人 民 币 。 ２
煎 熬 是 成 功 的 煎 熬 。 因 为 “ 业 难 ， 业 更 时髦 的社 会 陋 习 在 中 国大地 上从 未 得 以彻 底 创 守
难” 。人们可 以在奋 斗 中千方百计 克 服各种 根 除 。赤橙 黄 绿青 蓝 紫 ， 就 出一个 色彩缤 纷 造 各样 的艰难 险阻， 但是却 很难驾驭成功 ， 经受 的世 界 。中 国企业 运作 与 经营之 路 ， 须亦 不 无 住 成功 的煎 熬 。 因而 往 往 在 创 业 征 途 上 很 少 该只有一条可走。实事求是 ， 企 ” 因“ 制宜 ， 才 犯错 ， 当凯歌高奏 、 庆辉煌 之后却常 常把握 是企 业 得 以持 续 发 展 的正 确 方 向 与 策 略 。丁 共 不住 自己。实际上 ， 当你在行业中成了万众仰 立国的反思与选 择 ， 我 品味到 了真 正 的精 使 慕 的领军人物 ， 一切细小的琐事却都成了大政 美。不敢藏私 ， 故与有心 的诸位同仁分享 。
一种酶法制备明胶的方法[发明专利]
![一种酶法制备明胶的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/6bebc3ca192e45361166f5b0.png)
专利名称：一种酶法制备明胶的方法专利类型：发明专利
发明人：魏连波,吴本礼,齐万林,卜盛永申请号：CN201110225294.4
申请日：20110805
公开号：CN102329843A
公开日：
20120125
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种酶法制备明胶的方法，该方法包括以下步骤：将骨粒制成骨粉，用磷酸酸化，再加入酸性蛋白酶水解，然后用双氧水脱色，用氢氧化钙调pH值，然后加入絮凝剂。
本发明提供的方法采用磷酸进行酸化，由于形成了较多可溶性的钙盐，使酶解反应较为温和，利于酶解反应终点的控制，克服了精磨胶原(骨素)酶解方法酶解终点难以控制的缺陷和不足，使酶解法制取骨明胶更有实用价值。
申请人：蚌埠丰原明胶有限公司
地址：233030 安徽省蚌埠市小蚌埠镇一路171号
国籍：CN
代理机构：北京路浩知识产权代理有限公司
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科技成果——生物酶解法制备明胶新工艺
科技成果——生物酶解法制备明胶新工艺技术开发单位中科院理化技术研究所项目概况明胶是利用牲畜（牛、羊、猪、马等）的骨和皮，通过物理和化学的方法制备而成的一种高技术、高附加值的产品。
它广泛用于医药、食品、感光材料等诸多领域。
我国明胶工业始于20世纪20年代，改革开放后得到迅猛发展，目前已拥有近80家生产企业，但其生产工艺一直沿用传统的碱法工艺生产，存在生产周期长、效率低、水、电资源消耗大、成本高、环境污染严重等缺陷。
技术特点本技术采用酶解生物技术取代传统的酸、碱降解法制备明胶，并由电脑控制胶原降解反应全过程，从根本上解决了碱法工艺的诸多弊端。
其主要特点是：1、生产时间由传统的80-100天减少到10天左右；2、电脑控制胶原降解反应，有效地控制明胶α、β组份含量；3、减少了水、电、气用量，特别是用水量由原来的吨胶400吨水下降到55吨水；4、减少了环境污染。
去掉了传统的浸酸、浸灰两步工序；5、采用高速离心和膜分离技术，解决了钙盐超微粒子的分离与澄清的大难题，从而提高了明胶的粘度与透明度。
市场情况2011年，国内明胶的产量约4.2万吨，扣除出口量2万吨，国内明胶消费量约为2.2万吨，而根据国内下游市场的测算，需求量大约为4.8万吨，其中食用及医用明胶的需求量大约在3.84万吨。
有关专家预测，世界明胶需求量平均年增长率1-1.5%，相当于每年增加量3000-4000吨。
投资与效益采用本项技术建成年产600吨药用明胶，400吨食用明胶的生产线，设备投资大约在2000万-2500万左右。
年产值3500万左右，年平均利润1000万左右。
具有较大的经济效益和社会效益。
合作方式合作开发。
酶法制胶工艺研究
酶法制胶工艺研究
酶法制胶工艺是一种使用酶催化剂反应制备胶水的技术。
其过程主要
涉及酶法水解、氧化、酯交换、磷酸化等多种反应，并且制备的胶水具有
环保、无毒、无味、无污染、拉伸性好等特点，适用于造纸、纺织、包装、建材等多个领域。
具体来说，酶法制胶的工艺步骤如下：
1.酶法水解：将原料淀粉或纤维素加入水中，加入转化酶反应，水解
使其成为低分子量的单糖或寡糖。
2.氧化反应：在水解的物质中加入氧化酶催化剂，使其发生氧化反应，改变其分子结构，使其成为具有胶性的物质。
3.酯交换或磷酸化反应：将酰胺或酸加入到酶法水解产物中，使其与
糖分子发生酯交换或磷酸化反应，形成可粘合的高分子化合物。
4.精制纯化：将制备好的胶水进行脱色、脱盐、脱脂等处理，以保证
其纯度。
5.加工包装：将制备好的胶水进行灌装、包装、密封等加工，以便于
使用和储存。
总的来说，酶法制胶工艺是一种高效、环保的工艺，逐渐得到了广泛
的应用和推广。
胃蛋白酶提取牛皮胶原蛋白的工艺研究
摘要 : 以新鲜牛皮 为原料 , 分析了牛皮的基本组成 ; 采用胃蛋白酶提取牛皮胶原蛋白 , 研究了提取过程 中加酶量、 提取温度、 提取时间和料液比对胶原蛋白提取率的影响 , 得到酸酶结 合法提取 牛皮中胶 原蛋白 的最佳 工艺条 件 为 : 以 0 5 mo l/L 乙酸作提 取剂 , 每 1 g牛 皮加入 30 mL 浸 提液 ( 即料液比 1 30), 胃蛋白 酶加入量 3 000 U /g 牛 皮 , 提取 温度 30 , 提取时 间为 8 h, 在该条件下胶原蛋白的提取率为 61 7 % 。提取的胶原蛋白经 过初步纯化后 进行紫外扫描 , 测得其最大紫外吸收波长为 232 nm, 与 Sig m a标准 ! 型胶原蛋白一致。 关键词 : 牛皮 ; 胶原蛋白 ; 提取 ; 优化 ; 分离技术 中图分类号 : TS251 92 文献标识码 : A 文章编号 : 1003- 5214( 2010) 12- 1187- 05
A bstract : The collagen from cattle skin has been ex tracted by using th e pepsin , and the com posit ion o f cattle sk in w as a lso ana ly zed . E ffects o f enzym e addit io n , te m peratu re and ex tract ion t i m e as w ell as so lid liquor ratio on the extraction effic iency of co llagen w ere investigated in th is paper . The opti m al processing conditions w ere obta in ed by orth ogonal experi m ents as fo llow s: 0 5 m o l/L acetic ac id as extractio n so lv en, t the added pepsin dosage of 3 000 U /g and the ratio o f m ater ia l to liquor 1 30 , extractio n at 30 for 8 h , the recovery y ie ld o f th e co llagens w as 61 7 % . T he m ax i mu m absorpt ion w ave length o f the samp le is 232 nm by UV scan , wh ich is consistent w ith the S igm a produc. t K ey words : cattle skin ; co llagen ; extraction ; opt i m izatio n ; separa tio n techno lo gy 胶原蛋白 ( Co llagen) 是由动物细胞合成的一种 生物性高分子 , 广泛存在于动物骨、 腱、 软骨和皮肤 及其他结缔组织中 , 具有支撑器官、 保护机 体的功 能
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酶法制备牛皮明胶的工艺研究
刘乃强[1]
【期刊名称】《明胶科学与技术》
【年(卷),期】2018(038)003
【摘要】本文通过实验研究了用中性蛋白酶提取牛皮中明胶的工艺方法,并对工艺参数进行了优化,减少对环境的污染,减少废液的产生,缩短工艺时间。
在本研究中发现在pH=7.3、温度为40℃的环境下对牛皮进行酶解处理,酶解时间为3小时,酶用量为0.03%,提胶的温度为70℃,此条件下明胶的粘度为5.609mPa·s,产率为35.99%,为最优参数条件。
表征了所制明胶的结构。
酶法提取明胶工艺的生产周期短,污染小,具有很好的应用前景。
【总页数】8页(P123-130)
【作者】刘乃强[1]
【作者单位】[1]四川轻化工大学材料科学与工程学院自贡643000
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.21
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4.外切型蛋白酶法制备高档医用骨明胶工艺研究 [J], 张海林;朱友双;张玉然;仇艳
新;吴红;杨志茹
5.酶法制备牛骨明胶的工艺研究 [J], 李伟[1]
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