免疫组化染色技术

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免疫组化染色技术

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[分享]免疫组织化学染色技术

法医学院官大威

第一节常规组织学染色技术概述

宏观微观超微结构基因水平

组织形态学研究技术的种类:

一、病理大体组织标本的染色方法

在标本制作中,为了某种特殊目的,突出显示标本的重要部分,借助组织切片的特殊染色方法对标本进行染色,将病变器官及不同组织成分用染料染成不同的颜色,以便于区分大体标本的不同成分和病变特点,如:

..脂肪组织染色法

目的:主要用于心、肝、肾脂肪变性,动脉粥样硬化大体标本的染色

试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ

结果:病变处脂肪组织呈橙黄色

..早期心肌梗死染色法

目的:显示早期心肌梗死的区域

试剂:0.1% NBT(硝基四唑蓝)/ 0.2mol/ L PBS(pH7.6)

方法:将2-3 mm厚新鲜心肌大片放入试剂中,37 °C 孵育20 min。

结果:正常心肌呈蓝色,早期心肌梗死区、纤维结缔组织、瘢痕组织呈浅蓝色或不显色。

注意:新鲜标本,尸检心肌不超过6小时。

二、光学显微镜下的组织学染色方法

.常规HE染色(hematoxylin andeosin staining)

.组织学特殊染色

1.Mallory 三染色、Masson三染色

2. 神经纤维的镀银染色

3.其他的特殊染色,包括钙、铁、铅、铜、黑色素和脂褐素、细胞DNA和RNA的染色等

上述的各种染色方法只能在细胞水平上显示组织结构的形态改变。

三、超微结构的观察

.光线波长的限制,光学显微镜的分辨率极限为0.2μm

有效放大倍数最高不超过2000倍。

电镜的分辨率最佳可达0.14nm,放大倍率最高可达100万倍。

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