佛波酯诱导小鼠慢性炎症模型考察肤光方抗炎作用的研究
无患子在洗护用品中的应用研究
无患子在洗护用品中的应用研究冯 娇（东莞波顿香料有限公司，广东东莞，523000）1 无患子成分分析及提取工艺无患子主要含有皂苷类、油脂类、黄酮类、酚类、蛋白质及其他一些微量元素等。
其果皮富含丰富的皂苷类成分，主要包含50余种三萜皂苷，14余种倍半萜类和3个利胆醇苷化合物。
种子中含有大量油脂成分，主要为不饱和脂肪酸，质量分数达到80%以上，由棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸等组成；所含有的黄酮类成分主要有山柰酚、槲皮素、芹菜素等。
除此之外，无患子还含有氨基酸、多酚、鞣质、生物碱等多种活性成分[1-2]。
对于无患子中主要活性成分的提取，目前常见的提取方法主要有溶剂法、超声法、酶法、微波提取法、大孔树脂吸附法等。
且大多数并非是单一的提取方式，而是采用两种或多种提取方法复合提取，例如溶剂-超声提取、溶剂-酶辅助提取等。
皂苷类成分主要通过大孔吸附树脂法、超声波协同提取法、水提法、醇提法、发酵法、复合酶法等提取[2-3]，黄酮类的提取方法以超声萃取为主[4]，多糖类成分提取法主要有微波提取法[1]。
其中，水提法和醇提法在工业生产中较为成熟，操作简单，质量可控，成本较低；超声波协同提取和微波法等其他方法相对成本较高，在实际生产中有一定局限性。
2 无患子在洗护用品中的传统功效2.1 清洁去污在洗涤应用方面，无患子果皮中富含的皂苷及苷元均具有很强的表面活性，能降低表面张力，具有很好的去污力，在去污的同时不会产生有害物质污染环境且刺激性小不易对衣物造成损害。
沈国军等[5]通过超声的方法提取得到无患子提取液，采用GB 9985-2000中的去油率法进行测定，结果表明：无患子提取液的污垢去除率高于市售洗涤剂。
不同时期的无患子果实去污能力也有所不同，孙雨辰等[6]用比较测色计测量颜色深浅，根据GB/T 13173－2008《表面活性剂洗涤剂实验方法》测量无患子提取物的去污力，得到果实成长第6周采摘得到的提取物颜色较浅，具有更好的去污效果。
升麻素经皮给药对小鼠特应性皮炎的作用机制
网络出版时间：２０２３－０８－２８１２：０５：５１ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．ｒ．２０２３０８２５．１００３．０１８升麻素经皮给药对小鼠特应性皮炎的作用机制王晓钰１，王倩倩１，张方辰１，王杰琼２（山东中医药大学１．药学院、２．健康产业学院，山东济南 ２５０３５５）收稿日期：２０２３－０３－２１，修回日期：２０２３－０６－２９基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２２０４７９４）；山东省医药卫生科技发展计划项目（Ｎｏ２０２００２０７０９１７）；山东省中医药科技项目（Ｎｏ２０２０Ｑ００３）作者简介：王晓钰（１９９０－），女，博士，讲师，研究方向：中药免疫药理，Ｅ ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉａｏｙｕ０５０４＠１２６．ｃｏｍ；王杰琼（１９８２－），女，副教授，研究方向：中药药理，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｊｉｅｑｉｏｎｇ２０１６＠１２６．ｃｏｍｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２３０２０１５文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０９－１６４８－０７中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ２８２ ７１；Ｒ３４１；Ｒ４５２；Ｒ３６４ ５；Ｒ７５８ ３摘要：目的 研究升麻素经皮给药抑制异硫氰酸荧光素（ｆｌｕ ｏｒｅｓｃｅｉｎｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ，ＦＩＴＣ）诱导的小鼠特应性皮炎（ａｔｏｐｉｃｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ，ＡＤ）的效应，并探讨其作用机制。
方法 ＩＣＲ小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松阳性药组、升麻素经皮给药低剂量组、高剂量组、升麻素灌胃组。
在致敏阶段，采用ＦＩＴＣ溶液涂抹小鼠剃毛腹部，激发阶段，采用０ ６％ＦＩＴＣ溶液攻击小鼠左右耳，给药组从致敏开始给药连续７ｄ。
检测升麻素经皮给药对小鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数的影响；ＨＥ染色观察耳部炎症细胞浸润；测量小鼠耳肿胀，ＥＬＩＳＡ方法检测Ｔｈ２型细胞因子ＩＬ ５、ＩＬ １３以及促过敏关键启动子ＩＬ ３３；免疫组化和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法检测丝聚合蛋白（ｆｉｌａｇ ｇｒｉｎ）、紧密连接蛋白 １（ｃｌａｕｄｉｎ １）、封闭蛋白（ｏｃｃｌｕｄｉｎ）、钙黏蛋白（Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ）。
鸵鸟油对巴豆油所致小鼠耳急性炎症抑制作用的研究_郭敏
鸵鸟油对巴豆油所致小鼠耳急性炎症抑制作用的研究郭敏，喻凯*，米可彧，黄先洲，郭乐，曾兰岚（西南交通大学生命科学与工程学院，四川 成都 610031）摘 要：目的 研究鸵鸟油的抗炎作用。
方法 制备巴豆油所致小鼠耳急性炎症模型，以鸸鹋油为阳性对照，以液体石蜡为阴性对照，观察各组对小鼠耳肿胀的抑制作用；并测定致炎耳组织中的白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α)和一氧化氮（NO）含量。
结果 鸵鸟油对巴豆油所致小鼠耳肿胀有抑制作用，抑制率为44.4%。
且鸵鸟油能明显降低小鼠耳炎症组织中IL-1β、TNF-α和NO 的含量。
结论 鸵鸟油对巴豆油致小鼠耳急性炎症有显著的抑制作用。
关键词：鸵鸟油；耳肿胀；炎症；巴豆油；NO ；IL-1β；TNF-α中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2013)02-0031-03Research on Inhibition of Ostrich Oil on Croton Oil Induced Mouse Ear AcuteIn fl ammationGUO Min, YU Kai*, MI Ke-yu, HUANG Xian-zhou, GUO Le, ZENG Lan-lan(Southwest Jiaotong University, School of Life science and Engineering, Chengdu 610031, China)Abstract: Objective To research on the antiinflammation of ostrich oil. Methods The ear acute in fl ammation models of mice were made with Croton Oil. The inhibitions on ear edema and effects on expression of NO, IL-1β and TNF-α in ear homogenate of ostrich oil were observed. Results Ostrich oil could alleviate ear edema, its inhibition was 44.4%. And ostrich oil also could decrease the content of NO, IL-1β and TNF-α in ear homogenate signi fi cantly. Conclusion Ostrich oil had curative effect on croton oil induced mouse ear acute in fl ammation.Key words: Ostrich oil; ear edema; in fl ammation; Croton Oil; NO; IL-1β; TNF-α收稿日期：2012-12-16作者简介：郭敏，硕士研究生，研究方向：药理学，E -m a i l595190574@*通讯作者：喻凯，教授，硕士研究生导师，E-mail yukai2037@有研究显示，鸸鹋油具有保持皮肤湿润、防腐、减轻皮肤肿胀、抗炎镇痛的作用，能够促进烧伤创面愈合，抑制炎症反应[1,2]。
健脾养血祛风方对脾虚慢性湿疹模型小鼠皮肤组织水通道蛋白3的影响
健脾养血祛风方对脾虚慢性湿疹模型小鼠皮肤组织水通道蛋白3的影响摘要：目的观察健脾养血祛风方对脾虚慢性湿疹模型小鼠皮损处水通道蛋白3（AQP3）含量的影响，并探讨其可能的作用机制。
方法取健康雄性小鼠50只，随机分为正常组、模型组、阳性药组及中药高、低剂量组。
采用小剂量反复DNCB涂抹及番泻叶致脾虚证建立小鼠脾虚慢性湿疹模型。
中药组予健脾养血祛风方灌胃，阳性药组予盐酸左西替利嗪灌胃。
免疫组化法检测病变皮肤组织中AQP3的表达，同时观察皮肤组织病理变化。
结果病理观察结果显示，健脾养血祛风方对小鼠皮损处炎症损伤具有一定的修复作用。
与正常组比较，模型组AQP3过度表达；与模型组比较，各给药组AQP3表达均明显下降，染色强度降低。
模型组AQP3平均光密度值明显高于正常组（P<0.01）；与模型组比较，各给药组均能下调AQP3表达（P<0.05）。
结论健脾养血祛风方下调皮损中过度表达的AQP3可能是其治疗脾虚慢性湿疹的作用机制之一。
关键词：健脾养血祛风方；脾虚；慢性湿疹；水通道蛋白3；小鼠DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2015.07.014中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2015）07-0047-04Effects of Jianpi Yangxue Qufeng Formula on Aquaporin-3 in Model Mice Skin Tissue with Chronic Eczema TIAN Jing1，2，LI Xin-hong2，ZHU Hui-wen1，2，MA Xian-de1，FENG Chang-qing2，WANG Min2 （1.Liaoning University of TCM，Shenyang 110032，China；2.Affiliated Hospital of Liaoning University of TCM，Shenyang 110032，China）Abstract：Objective To observe the effects of Jianpi Yangxue Qufeng Formula （JPYXQF）on the AQP3 in mice with chronic eczema，and explore mechanism of action. Methods Fifty healthy male mice were randomly divided into 5 groups，namely normal group，model group，positive medicine group and JPYXQF high and low dose groups.Low-dose DNCB and Sennae Fominm were used to establish mice models of chronic eczema with spleen deficiency. JPYXQF groups were treated by JPYXQF for gavage，while the positive medicine group was treated by levocetirizine hydrochloride for gavage. The expression of AQP3 in mice skin tissue was detected by immunohistochemical method. At the same time，the pathological changes of skin were observed. Results The pathology of mice skin lesion showed that JPYXQFhas certain recovery effects on the inflammation injury of skin lesion. Compared with the normal group，expression of AQP3 over expressed in model group. Compared with the model group，the expression of AQP3 in all treatment groups significantly decreased，and the staining intensity decreased. In the model group，the average optical density of AQP3 was significantly higher than that in the normal group （P<0.01）. Compared with the model group，the treatment groups can reduce the expression of AQP3 in mice skin tissues （P<0.05）. Conclusion JPYXQF can reduce the over expression of AQP3 in skin lesion，which is probably its mechanism for the treatment of chronic eczema.Key word：Jianpi Yangxue Qufeng Formula；spleen deficiency；chronic eczema；AQP3；mice基金项目：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目（L2012342）；辽宁省中医药学（专）科能力建设项目（2011-lnzyxzk-03）慢性湿疹常由急性或亚急性湿疹反复发作转化而来，也可起病即为慢性。
抗炎三肽KdPT对小鼠眼干燥症的治疗作用
Journal of China Pharmaceutical University2021，52（1）：100-103学报抗炎三肽KdPT对小鼠眼干燥症的治疗作用王华，许元生，宋燕*（广州领晟医疗科技有限公司，广州510663）摘要为探讨抗炎三肽KdPT治疗眼干燥症的疗效，用0.2%苯扎氯铵溶液处理8周龄雄性BALB/c小鼠，建立眼干燥症模型；造模4周后，将小鼠随机分为模型对照组，阳性对照组和KdPT的低、中、高剂量组。
每组分别给予生理盐水、人工泪液和1、10、100μg/mL KdPT。
治疗3、5、7、10、14d后，观察眼表面形态，进行荧光素钠染色评分；治疗14d后用酚红棉线测定泪液分泌量；治疗14d后处死动物取出右眼角膜进行组织病理学分析。
实验结果显示，治疗3、5、7、10、14d后，各组小鼠的状态和体重无明显异常。
治疗14d后，KdPT可促进泪液分泌，修复受损角膜上皮，对小鼠眼干燥症有显著治疗作用。
KdPT有可能被开发为一种新型的眼干燥症治疗药物。
关键词眼干燥症；三肽；KdPT；荧光素钠染色；泪液分泌中图分类号R965.1文献标志码A文章编号1000-5048（2021）01-0100-04doi：10.11665/j.issn.1000-5048.20210114引用本文王华，许元生，宋燕.抗炎三肽KdPT对小鼠眼干燥症的治疗作用［J］.中国药科大学学报，2021，52（1）：100–103.Cite this article as：WANG Hua，XU Yuansheng，SONG Yan.Therapeutic effect of anti-inflammatory tripeptide KdPT on ophthalmoxerosis in mice［J］.J China Pharm Univ，2021，52（1）：100–103.Therapeutic effect of anti-inflammatory tripeptide KdPT on ophthalmoxero⁃sis in miceWANG Hua,XU Yuansheng,SONG Yan*Guangzhou Link Health Pharma Co.,Ltd.,Guangzhou510663,ChinaAbstract This study was designed to investigate the therapeutic effect of anti-inflammatory tripeptide KdPT on ophthalmoxerosis.Male BALB/c mice,8-week old,were treated with0.2%benzalkonium chloride solution to establish the ophthalmoxerosis model.Four weeks after modeling,the mice were randomly divided into control group,positive group and the low,medium,high dose groups of KdPT.Each group was given normal saline,artifi⁃cial tears and1,10,100μg/mL KdPT,respectively.After3,5,7,10and14days of treatment,the morphology of the eye surface was observed,and the fluorescein sodium staining score was performed.The amount of tear secre⁃tion was measured by phenol red cotton thread and the right corneas were taken out for histopathological analysis after14days of treatment.Data showed that there was no significant abnormality in general state and the weight of mice in each group at each time point of treatment.After14days of treatment,KdPT can promote the secre⁃tion of tear,repair the damaged corneal epithelium,and showed a significant therapeutic effect on ophthalmoxero⁃sis in mice.Based on the data,it is possible for KdPT to be developed as a novel drug for ophthalmoxerosis.Key words ophthalmoxerosis;tripeptide;KdPT;sodium fluorescein staining;tear secretion眼干燥症是由于泪液的量或质或流体动力学异常引起的泪膜不稳定和（或）眼表损害，从而导致眼不适症状及视功能障碍的一类疾病。
慢性炎症在X射线诱发恒河猴卵巢组织持续损伤中的潜在作用
论著文章编号１００６－８１４７（２０22）０2-0160-05作者简介周莹（1995-），女，硕士在读，研究方向：卵巢早衰，辅助生殖，生育力保存/保护；通信作者：王建梅，E-mail ：*******************.cn 。
慢性炎症在X 射线诱发恒河猴卵巢组织持续损伤中的潜在作用周莹1，杜湧瑞1，Mary B. Zelinski 2，王建梅1（1.天津医科大学第二医院计划生育科，天津300211；2.美国俄勒冈健康与科学大学生殖科学部，俄勒冈97006）摘要目的：探讨在X 射线诱发恒河猴卵巢损伤中慢性炎症是否发挥重要作用。
方法：14只月经周期规律的成年雌性恒河猴（8～14岁），随机分为3组（3只/组）：假照射（Sham ）组（n =8）、卵巢照射（OXI ）组（n =3）、X 射线照射+FTY-720（免疫抑制剂）（FTY-720）组（n =3）。
Sham 组给与溶剂PET+假手术（保留卵巢血管蒂，将卵巢移出腹腔），OXI 组动物卵巢移出腹腔后给与15Gy X 射线照射，FTY-720组卵巢内行0.2mmol/L FTY-720灌注1周后给与15Gy X 射线照射。
各组手术操作相同，结束后将卵巢复位，均于早卵泡期行卵巢组织取材[照射结束后第（316±7）天]。
免疫组织化学染色法检测卵巢组织单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD11b 和CD68的表达并计数CD11b 、CD68阳性细胞，ELISA 法检测照射结束后第３个月和第９个月血清MCP-1、白细胞介素（IL ）-6水平。
结果：OXI 组卵巢组织MCP-1阳性染色强于Sham 组和FTY-720组，而FTY-720组MCP-1表达与Sham 组表达情况相似。
与Sham 组相比，OXI 组CD11b 阳性细胞数量明显增多（P <0.05）；而FTY-720组CD11b 阳性细胞数量明显少于OXI 组（P <0.05），且其与Sham 组相比较，差异无统计学意义（P >0.05）。
淫羊藿苷抑制钛颗粒诱导的炎症反应
淫羊藿苷抑制钛颗粒诱导的炎症反应崔京福，徐耀增，朱世军，朱锋，付稳，邵洪国，耿德春苏州大学附属第一医院骨科，江苏省苏州市 215006Icariin inhibits titanium particle-induced inflammatory reactionCui Jing-fu, Xu Yao-zeng, Zhu Shi-jun, Zhu Feng, Fu Wen, Shao Hong-guo, Geng De-chun Department of Orthopaedics, the First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou 215006, Jiangsu Province, China摘要背景：体外实验表明，淫羊藿苷可抑制脂多糖诱导的急性肺炎，其抗炎作用在磨损颗粒存在的条件下是否依然有效？目的：通过体内外实验相结合的方法探讨淫羊藿苷对磨损颗粒诱导炎症反应的调控作用。
方法：①体内实验：将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组，钛组和钛+淫羊藿苷组采用钛诱导小鼠颅骨无菌炎症模型，对照组、淫羊藿苷组也进行相同手术过程，但不植入钛，淫羊藿苷组、钛+淫羊藿苷组建模当天灌胃给予淫羊藿苷200mg/(kg·d)，对照组、钛组灌胃给予等量的安慰剂，2周后酶联免疫吸附实验、定量RT-PCR检测肿瘤坏死因子α，白细胞介素1β蛋白或mRNA的表达量。
②体外实验：将小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7分别与核因子кB受体配体、核因子кB受体配体+淫羊藿苷、核因子кB受体配体+钛颗粒及核因子кB受体配体+钛颗粒+淫羊藿苷共培养72 h，ELISA检测培养基上清中肿瘤坏死因子α，白细胞介素1β水平，RT-PCR分析肿瘤坏死因子α，白细胞介素1β基因mRNA表达。
结果与结论：①体内实验：在钛颗粒存在的条件下，口服淫羊藿苷可明显减少颗粒诱导的炎症细胞浸润，使炎性增厚的骨膜变薄，抑制颅骨标本中肿瘤坏死因子α，白细胞介素1β的表达。
芍药苷对DSS诱导大鼠慢性溃疡性结肠炎IL-17表达的影响
芍药苷对DSS 诱导大鼠慢性溃疡性结肠炎IL -17表达的影响①司晓丽王烨②王卓③李兰珍朱向东（甘肃中医药大学基础医学院，兰州730000）中图分类号R285.5文献标志码A文章编号1000-484X （2021）08-0946-05［摘要］目的：观察芍药苷对葡聚糖硫酸钠（DSS ）诱导慢性溃疡性结肠炎（UC ）大鼠模型中炎症因子IL -17表达的影响，探讨芍药苷干预慢性溃疡性结肠炎的可能机制。
方法：40只雄性Wistar 大鼠随机分为4组：空白对照组、DSS 组、DSS+芍药苷组、DSS+柳氮磺吡啶组。
柳氮磺吡啶组作为阳性对照。
除空白对照组外，其余3组大鼠采用DSS 自由饮水法构建慢性溃疡性结肠炎大鼠模型。
每轮DSS 饮用后记录大鼠体重、粪便性状及便血情况，计算疾病活性指数（DAI ）；ELISA 测定外周血IL -17、TNF -α及ICAM 的含量；免疫组织化学法测定结肠组织IL -17蛋白表达；Western blot 法测定结肠组织IL -17、LC3B 及Beclin1蛋白水平。
结果：与空白对照组相比，DSS 组大鼠DAI 评分、外周血IL -17、TNF -α及ICAM 含量、结肠组织IL -17阳性区域吸光度值、结肠组织IL -17蛋白水平显著增加（P <0.01），结肠组织中LC3BⅡ及Beclin1蛋白水平显著降低（P <0.01）。
与DSS 组相比，DSS+芍药苷组和DSS+柳氮磺吡啶组大鼠DAI 评分、外周血IL -17、TNF -α及ICAM 含量、结肠组织IL -17阳性区域吸光度值、结肠组织IL -17蛋白水平下降（P <0.05），结肠组织中LC3BⅡ及Beclin1蛋白水平显著升高（P <0.05）。
结论：芍药苷可能通过下调IL -17的表达，减少炎性因子IL -17、TNF -α及ICAM 分泌，上调自噬相关因子LC3BⅡ及Beclin1的表达，减轻DSS 对模型大鼠的影响。
维生素甲酸在中长波紫外线诱导小鼠皮肤光老化模型中的作用
维生素甲酸在中长波紫外线诱导小鼠皮肤光老化模型中的作用李敏赵飞（河南省人民医院药学部，河南郑州452007）〔摘要〕目的探讨维生素甲酸在中长波紫外线诱导皮肤光老化小鼠模型中的作用。
方法长波紫外线（UVA1、短波紫外线（UVB1联合照射Dw建立皮肤光老化小鼠模型，根据实验分组使用维生素甲酸、维生素甲酸受体拮抗剂、维生素甲酸受体激动剂、维生素甲酸X受体拮抗剂、维生素甲酸X受体激动剂进行干预，苏木素-伊红（HE1染色观察皮肤组织病理学改变,Westem印迹检测皮肤组织中基质金属蛋白酶（MMP）3和MMPD蛋白表达，碱水解-光度法测定皮肤羟脯氨酸水平，计算胶原蛋白含量。
结果模型组MMP3、MMPD蛋白表达水平明显高于正常对照组（P<2.2（），维生素甲酸组明显低于模型组（P<2.27）,维生素甲酸受体拮抗剂组明显高于维生素甲酸组（P<2.27）；维生素甲酸X受体拮抗剂组与维生素甲酸组差异无统计学意义（P>2.47）。
维生素甲酸受体激动剂组MMP3、MMPD蛋白表达水平明显低于模型组,维生素甲酸受体激动剂联合拮抗剂组明显高于维生素甲酸受体激动剂组（P<2.25）。
维生素甲酸X受体激动剂组MMP3、MMPD蛋白表达水平与模型组差异无统计学意义（P>2.27）;维生素甲酸受体激动剂联合拮抗剂组与维生素甲酸受体激动剂组差异无统计学意义（P> 2.27）。
维生素甲酸受体拮抗剂组、维生素甲酸受体激动剂联合拮抗剂组胶原蛋白含量明显低于维生素甲酸组、维生素甲酸受体激动剂组（P<2.25）。
维生素甲酸X受体激动剂组与维生素甲酸组差异无统计学意义（P>2.25）。
结论维生素甲酸可通过维生素甲酸受体下调MMP3、MMPD蛋白表达,抑制光老化皮肤胶原降解。
〔关键词〕维生素甲酸;皮肤光老化;维生素甲酸X受体〔中图分类号〕R0〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202（2021）12-2630-04;doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2021.12.048长期紫外线照射会引发人皮肤组织光老化，出现皮肤增厚、粗糙、色素沉积、皮革样外观等症状⑴；皮肤胶原纤维含量减少、变性是光老化的特征性组织学表现〔〕。
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江西中医药大学学报201 8年8月第30卷第4期JOURNAL OF JIANGXI UNIVERSITY OF TCM 2018 Vol. 30 No. 4
佛波酯诱导小鼠慢性炎症模型考察肤光方抗炎 作用的研究#
★杨富金高燕妮李敏肖玉娟江雪刘毅* *(重庆市中医院皮肤科重庆400011)摘要：目的：研究肤光方对佛波酯诱导的小鼠慢性炎症模型的抗炎疗效。方法:采用佛波酯（TPA)诱导昆明种小鼠耳部的慢性
炎症模型，外用阳性药物吲咮美辛、肤光方，每日2次，连续给药3日后，观察药物对实验小鼠的耳厚度、耳重量、组织病理和髓 过氧化物酶（MPO)的改变。结果:造模给药后的耳厚度、耳重量及MPO酶活性方面，阳性药吲哚美辛组同模型组比较，具有 显著性差异（P<0.01);肤光方高剂量组同模型组比较，差异有统计学意义（P <〇.〇5);皮损病理切片方面，模型组和正常空 白对照组比较,棘层明显增厚，有明显的炎症细胞浸润，用药后，阳性药物组和肤光方高剂量组中增厚的棘层有所恢复，炎症 细胞浸润有所改善。结论:佛波酯诱导的小鼠慢性炎症模型稳定，操作简单，可用于炎症的药效学研究，同时提示肤光方具有 较强的抗炎作用。关键词:肤光方;佛波酯;慢性炎症
中图分类号:R364.5 文献标识码:B
Effects of Fuguangfang on 12 - O - tetradecanoylphorbol - 13 - acetate - induced the Chronic Inflammation Model in Mice
YANG Fu - jin,GAO Yan -ni, LI Min,XIAO Yu -juan,JIANG Xue,LIU YiDermatology Department of Chongqing Hospital of Traditional Chinese Medicine, Chongqing 400011,China.
Abstract ： Objective ： To study the anti - inflammatory effect of Fuguangfang on 12 - O — tetradecanoilforbol acetate ( TPA) - induced
chronic inflammation model in mice. Method： TPA - induced mouse ear edema,species of mice ear, external use positive drug indom- ethacin, fuguangfang, 2 times a day, for three consecutive days, to observe the drug to the mice ear thickness, ear weight, histopathologic and myeloperoxidase (MPO) of the change. Results： The building of ear thickness after the administration, ear weight and MPO enzyme activity, positive drug indomethacin group compared with model group was significant difference (P <0.01) ； fuguangfan high dose group compared with model group, the difference was statistically significant (P <0.05) ；Skin pathological aspects of blank model group and normal control group, significantly thicker stratum spinosum, inflainmatory cell infiltration, obviously after medication, positive drug group and light skin thickening in high dose group of stratum spinosum recovered, inflammatory cells infiltration. Conclusion：
The chronic inflammation model in mice induced by TPA stability, simple operation can be used for inflammation in the pharmacody
namics research, and at the same time tip fuguangfang has strong anti - inflammatory effects.Key words：Fuguangfang； 12 - 0 - tetradecanoilforbol Acetate；Chronic Inflammation
肤光方系我科的协定处方，主要由苦参、蛇床 湿、泻火解毒、怯风止痒功效，用于风湿热毒引起的子、蒲公英、大叶桉、野菊花、地肤子等组成,治疗皮 各型湿疼，能显著改善患者的丘疹样皮肤及其增厚肤疾病常用的中药药浴处方。本处方具有清热燥 和鳞屑，减轻瘙痒，减少因瘙痒抓挠所致皮损[1_3]。
*基金项目:重庆市卫生局中医药科技项目（zy201602173)。
**通信作者:刘毅，男，博士研究生，主任中医师。研究方向:皮肤病的中医辨证及其基础。E-mail:lhiyifUZi@126.C〇m。
.86 •杨富金等:佛波酯诱导小鼠慢性炎症模型考察 ____________________肤光方抗炎作用的研究
炎症贯穿于湿疹的整个发病过程，因此研究药 物的抗炎作用具有重要意义。目前湿疹的动物模型 多为炎症模型。炎症模型主要有小鼠耳肿胀模型、 组肿胀模型和肉芽肿模型等评价药物的抗炎作用。 其中小鼠耳肿胀模型因其操作简单，且小鼠价格便 宜等优点，在评价抗炎活性时应用更为广泛。小鼠 耳肿胀常用的致炎药物有二甲苯、花生四烯酸 (AA)、佛波酯(TPA)、巴豆油、组胺和辣椒素等[4]。 国内研究者常用二甲苯诱导的耳肿胀模型，笔者在 前期研究中采用了二甲苯致炎，但是实验过程中发 现该模型个体差异比较大，二甲苯致炎的炎症模型 约30min后小鼠就能自愈，模型不稳定，这可能是国 外不广泛使用的原因之一。目前国内采用佛波酯诱 导的炎症模型较少，本文采用该种模型，为慢性炎症 研究奠定一定的基础。1材料1.1药品与试剂中药材均购自重庆市桐君阁股 份有限公司,吲哚美辛购自重庆科瑞制药（集团）有 限公司，佛波酯（TPA)购自Sigma - Aldrich,四甲基联苯胺购自damas - beta。1.2实验动物昆明种小鼠，体重约为25g,雌性， 60只，由第三军医大学大坪医院动物实验中心提 供O1.3 实验仪器 DMIL - FL - EL6000倒置荧光显 微镜（LEICA DMIL LED德国）；BT -25S精密天平 (赛多利斯科学仪器有限公司北京）；电子显数千分 尺(东莞市景有模具五金有限公司）、DNM -9602G 酶标分析仪(普朗新技术有限公司北京）。1.4统计学处理数据均使用spssl5. 0软件进行 统计学处理，以P < 〇. 05为差异有统计学意义，P < 〇. 〇1为具有显著性差异，P < 〇. 〇〇1为有非常显著 性差异。2实验方法2.1药液的制备称取处方量的药材250g加水浸 泡30min,水煎煮三次，每次使用10倍量的水，煮沸 后保持微沸lh，合并三次的水提取液为A液，药渣 再用75%乙醇提取三次，每次使用10倍量的醇，合 并三次的醇提取液为B液，再合并A液和B液，浓 缩至1 OOOmL定容，得浓度为0. 25g/mL的肤光方 高剂量组药液。同法制备中剂量组（〇.〇5g/mL)和 低剂量组(〇.〇lg/mL)药液。2.2给药方案2.2.1动物分组随机将动物分为6组，每组各 1〇只，分别为肤光方高（〇. 25g/mL)、中（0.05g/ mL)、低（0. Olg/mL)剂量组、阳性药物组（B引哄美辛、0.05 g/mL)、模型组、正常空白对照组。2.2.2给药方案通过TPA多次刺激诱导小鼠耳 肿胀的慢性炎症模型，给药方案如下图1,每次用 1(VL的TPA(2.5(jLg/只）丙酮溶液涂抹小鼠右耳的 内外侧，在第4次TPA刺激后开始连续每天给药， 每天2次，第1次为直接涂抹TPA后，第2次为间隔 6小时后,实验第10天早晨最后一次给药后处死动 物进行下一步实验[5](注:TPA采用丙酮溶解，每次 使用时需现配现用）。阳性药物吲哚美辛每次给药 KVL，肤光方组每次给药IOjjlL，模型组给予等体积
的蒸馏水。
2.3耳厚度及耳重量的测定处死动物后将每组 随机动物分成两组，其中一组立即用千分尺分别测 量小鼠的左右耳厚度，并尽量选择在同一个位置，用 6mm的打孔器打下小鼠的左右耳进行重量精密称 定，记录数据后将标本冻存到-20T的冰箱内，用于 髓过氧化物酶的测定分析。另外一半浸泡至4%的 福尔马林溶液用于病例切片分析。2.3病理切片将浸泡到4%的福尔马林溶液中
的耳组织样品，纵向平均切成两半，取其一半进行石 蜡封片，切取3 -4^111的样品进行苏木精-伊红染 色，显微镜放大1〇〇倍，选择具有代表性的视野拍 照，分析结果。2.4 髓过氧化物酶（MP0)的测定[5] 将6mm的 组织用pH为5.4的PBS(0.5%HTAB配制）均浆， 1.5mL的匀浆液代离心20min(12000g)，取上清液 1(VL加人96孔板中，每个样品平行操作3份，然后 加人200斗的混合液（lOOpL的80mm的PBS;pH
为 5. 4,85|xL 的 0. 22MPBS; pH 为 5. 4, 15|xL 的 0.017%的H202 )，反应的开始为加人2〇!jlL的 18. 4mm的四甲基联苯胺（8%二甲基甲酰胺水溶 液），37尤孵育3min，孵育后置于冰上，反应的终止 为加人 30|jlL 的 1.46mm 的 NaOAc(pH 为 3. 0),然 后酶标分析仪620nm比色测定0D值。3实验结果3.1耳厚度及耳重量结果肿胀主要是由于局部 组织受到免疫或者其他理化因素刺激后，细胞的组 织胺等介质被释放，通过H1和H2受体使皮肤、粘 膜毛细血管扩张及毛细血管壁通透性增高，从而在 患处产出红斑、水肿和风团[6]。在急性湿疹的临床