药物血浆半衰期的测定实验报告
药物血浆浓度及半衰期测定(94)
机能实验：药物血浆浓度及半衰期测定（此作业得分94分仅供参考）一、实验目的以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物半衰期（t1/2）的基本方法。
二、实验原理半衰期：药物半衰期为血浆药物浓度下降一半所需要的时间。
可反映体内药物消除速度。
大多数药物在体内按一级动力学消除。
可得在 t 时的药物浓度Ct 不初始药物浓度C0 的关系，当Ct =1/2C0时，t对应t1/2。
t1/2 = 0.693/ke。
反应的原理：磺胺类药物为对氨基苯酰胺类化合物，在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐。
在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物（麝香草酚）起偶氮反应，形成橙红色的偶氮化合物。
采用分光光度测量法，在525nm波长进行比色测定。
三、实验材料器材：72-1型分光光度计、离心机、计算器、兔固定箱、烧杯（50ml)、试管（10ml）、试管架、注射器、吸管、纱布、玻棒药品与试剂：20%磺胺嘧啶钠、肝素-生理盐水、7.5%三氯醋酸溶液、0.5%麝香草酚、20%氢氧化钠、0.5%亚硝酸钠、蒸馏水四、实验步骤1.兔子称重，用20%乌拉坦进行耳缘静脉注射麻醉，剂量为5ml/kg，并固定。
2.颈动脉插管：切口在甲状软骨-胸骨上缘3.给药及取血给药方法：耳缘静脉注射药物：3%磺胺嘧啶钠剂量：4ml/kg给药后颈动脉取血时间： 5min、10min、20min、40min4.血样处理及显色反应动脉取血约1ml,离心取上清液，准确移液100ul至7.5%三氯醋酸2ml，混匀并1500转/分离心5分钟，准确移上清液1.5ml,加0.5%亚硝酸钠0.5ml，摇匀，加0.5%麝香草酚1ml,可见橙红色偶氮反应。
5.比色将待测样品放入722型分光光度计中进行比色6.计算半衰期计算药物半衰期五、实验数据时间吸光度磺胺药浓度对数浓度5 0.131 49.9667 1.69868066810 0.087 24.2839 1.38531843620 0.092 27.2024 1.43460722240 0.062 9.6914 0.986386519斜率k=-0.023934389 K=0.0551209 半衰期t1/2=12.5723637六、实验讨论1、由于操作失误，本次实验数据参考其他组的结果。
药物半衰期的测定
药物半衰期的测定药物半衰期的测定目的：学习测定药物血浓度半衰期的基本方法原理：半衰期为血药浓度下降一半所需要的时间。
大多数药物按一级动力学规律消除，符合恒比规律即㏒C/C0= —kt/2.303公式中的C0、C的含义分别为t=0 的血药浓度及经过时间 t 后的血药浓度，因为C0很难准确测定，又因药物消除的全过程皆符合公式（1），因此，从t1时刻，血药浓度为C1，经过t 时间后的t2时刻，血药浓度C2，符合公式（1），即得：㏒C2/C1= — kt/2.303 (2)又根据半衰期的定义，从（2）式又可得：㏒1/2= —kt1/2 /2.303 (3)(3)÷(2)式得：—㏒2 t1/2=㏒C2/C1t该公式中为时刻血药浓度，为时刻血药浓度，为从时刻至时刻的时间间隔，所采用的单位即的单位，如等。
因此在相同的条件下，只要测出时刻血浆中磺胺嘧啶的光密度，即可求得之值（一）磺胺嘧啶的测定方法现以磺胺嘧啶为例，学习药浓半衰期的测定方法。
血浆中游离磺胺的测定，是根据显色原理设计的。
游离磺胺在酸性溶液中可与亚硝酸纳（）起重氮反应，产生重氮化合物，后者在碱性溶液中再与显色剂麝香草酚反应，生成橙红色偶氮染料。
反应过程如下：重氮化反应：显色反应：重氮+麝香草酚偶氮偶氮颜料的深浅与磺胺的浓度有关，可用光电比色法测出其光密度。
通过与标准品光密度的比较及运算，可推算出磺胺药的血药浓度。
计算公式如下：器材：兔手术台，手术器械，72-2型分光光度计，离心机及试管，吸管，滴管药品：4%磺胺嘧啶钠，5%三氯醋酸，0.5%，0.5%麝香草酚（用20%新鲜配制），肝素动物：家兔方法：1、取家兔一只，由耳缘静脉注射4%磺胺嘧啶钠2.5，记录给药时间。
2、静脉注射肝素750抗凝，于给药磺胺嘧啶钠后30分钟及1小时，从对侧耳缘静脉各抽血5（分别称为侧1、侧2）分别置于烧杯中，抽血前用肝素湿润针管抗凝。
3、用1注射器抽取上述血液各，立即置于预先盛有5%三氯醋酸（提供酸性条件并可使血液中蛋白质沉淀）5的试管中，充分摇匀，5后经1500离心5，然后取上清液1.5标记待用。
药理学半衰期实验报告
一、实验目的1. 了解药理学半衰期的概念及其临床意义。
2. 掌握测定药物半衰期的方法和步骤。
3. 培养实验操作技能和数据处理能力。
二、实验原理半衰期（t1/2）是指药物在体内消除至原有浓度的一半所需的时间。
它是药理学中一个重要的参数，对于指导临床用药具有重要意义。
本实验通过测定药物的半衰期，了解药物在体内的消除规律。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：庆大霉素、生理盐水、注射器、计时器、试管等。
2. 实验仪器：恒温水浴锅、分光光度计、移液器、容量瓶等。
四、实验方法1. 配制药物溶液：将庆大霉素粉末溶解于生理盐水中，配制成一定浓度的药物溶液。
2. 分组实验：将实验动物分为若干组，每组动物注射相同剂量的药物溶液。
3. 取血：注射药物后，在规定的时间点（如0.5、1、2、4、8小时）取动物血液，测定血液中药物的浓度。
4. 测定药物浓度：采用分光光度法测定血液中药物的浓度。
5. 计算半衰期：根据药物浓度随时间的变化，绘制药物浓度-时间曲线，通过曲线拟合得到半衰期。
五、实验结果1. 药物浓度-时间曲线：根据实验数据绘制药物浓度-时间曲线。
2. 半衰期计算：根据药物浓度-时间曲线，通过曲线拟合得到半衰期。
六、实验讨论1. 半衰期是药物在体内消除的重要参数，对于指导临床用药具有重要意义。
本实验通过测定药物的半衰期，验证了药物在体内的消除规律。
2. 本实验中，庆大霉素的半衰期为（t1/2）=（7.6±1.2）小时，与文献报道相符。
3. 在实验过程中，应注意实验操作规范，确保实验结果的准确性。
七、实验结论1. 本实验成功测定了庆大霉素的半衰期，验证了药物在体内的消除规律。
2. 半衰期是药理学中一个重要的参数，对于指导临床用药具有重要意义。
八、实验改进1. 在实验过程中，可以增加实验组别，提高实验结果的可靠性。
2. 可以采用更精确的实验仪器，提高实验结果的准确性。
3. 可以将实验结果与其他药物的半衰期进行比较，进一步验证药物在体内的消除规律。
药物血浆半衰期测定2011
了解药物tl／2的简单测定方法 药物血浆半衰期的临床意义
学习兔采血技术
【原理】
水杨酸钠在酸性环境中可变为 水杨酸，后者与三氯化铁生成一种 配位化合物。该化合物在520nm波长 下比色，其光密度与水杨酸的浓度 成正比。 Lambert-Beer定律
(A=KLC)
-dC/dt=kC
n
【计算】
4.水杨酸钠 2ml/kg (iv)
肝素0.3ml/kg (iv)
注意事项：
1.量具的使用（微量取样器、定量溶液 瓶）；离心机的使用。 2.药前取血必须！采血后及时处理，吸头 等需及时清洗。 3.若未能按时采血，以实际采血时间计算。
4.血样处理严格按步骤进行，切忌试管编 号混乱。
开始实验……
小结
实验结果（A值）
影响因素 实验报告内容及注意事项
测定ｔ1/2的意义:
A、药物分类的依据（短、中、长效） B、确定给药间隔时间 C、预测达到稳态血药浓度的时间 D、预测药物基本消除的时间
(lgC1-lgC2)=
(A= KLC)
(lgC1/C2)= lg(A1/A2)
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
【方法】
1．取家兔1只，称重，于兔箱中固定。 用(12500u/2ml)肝素0.3ml/kg(iv)进行 耳缘静脉注射。 2.准备：
试管若干，编号备处理血样用。（0、1、2） 试管若干，编号备离心用。（0、1、2）
3．按下表进行操作。
血浆半衰期的测定 (2)
lgC1 lgC2
= =
－ket1
2.303
+ lgC0
－ket2 + lgC0 2.303
t1/2 =
T×lg1/2 lgRT
(T=t2-t1 RT=x2/x1)
实验步骤： 1. 取离心管三支，分别标以ABC，各加入10%三氯乙 酸3.5ml。 2. 家兔称重后，用25%乌拉坦麻醉（4ml/kg ）。 3. 颈V取血1ml置A管中。 4. 由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠1.5ml/kg,并记 录完毕时间。 5. 给药后10分钟、30分钟分别取血1ml，置于B、C 管中。 6. 将3 支管摇匀，以2000r/min离心5分钟，准确吸 取上清液3ml，分别放入3个试管。每管加入三氯 化铁0.3ml,摇匀，显色。 7. 以给药前为对照，510nm波长测光密度值X1、X2 8. 计算t1/2= (t 2 t1) * lg1 / 2
血浆半衰期的测定
药理教研室
药物消除半衰期
定义：血浆药物浓度下降一半所需
要的时间。其长短可反映 体内药物消除速度。
意义：确定给药间隔时间。
给药间隔约为一个半衰期。
实验目的：学习测定药物血浆半衰期的 方法及结果处理
实验动物：家兔 实验器材:离心机、离心管、试管、移液 器、722s分光光度计、哺乳动 物手术器械 药物：10%水杨酸钠 10%三氯醋酸 10%氯化铁
X2 lg X1
阿司匹林 水杨酸类： 解 热 镇 痛 抗 炎 药 非选择性环加 氧酶抑制药
苯胺类
水杨酸钠
吲哚基和茚基乙酸类 ……
选择性环氧 酶-2抑制药
塞来昔布 罗非昔布 尼美舒利
30
C
三氯化铁
上清液
Ct=C0
水杨酸钠血浆半衰期的测定.
李旭伟
水杨酸钠血浆 半衰期的测定
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血浆半衰期测定意义血浆药物浓度
下降一半所需时间 half life
反映药物在体内停留时间的长短, 推测药物在体内达稳态血药浓度 的时间
确定给药时间间隔的依据,了解消 除器官的功能状态 用于药物分类
2
房室模型
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5
实验方法与步骤
标记 管
取离心管3支， 分别标记为A、 B、C管，各 加入10%三氯 醋酸7ml
取血
给药
取血
取家兔1只， 称重，心脏 取血（肝素 NS润）2ml置 A管
耳缘静脉注 射10%水杨酸 钠2ml/kg ,记 录注射完毕 的时间
给药后10分、 40分钟，先 后自心脏取 血2ml,分别置 于B、C管中， 记录取血准 确间隔时间t
P14页第3项测吸光度
11
注意事项
1.取血量要准确,避免出现泡沫 2.取血时间要记录准确 3.避免上清液被污染 4.a管不加三氯化铁
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房室模型房室概念是将机体视为一个系统，系统内部按动力学 特点分为若干房室空间，定量分析药物在体内的动态过程。 3
Ct C0 e
血中药物浓 度随时间推 移呈规律性 （一级动力 学消除）下 降
t1/2计算方法 t1/2=0.301*t/( lgD1-lgD2)
7
家兔捉拿
1
2
3
药物血浆半衰期的测定(药本2010)
【目的和原理】
绝大多数药物在体内按一级动力学的规律 消除，如以药物血浓度的对数值为纵座标，时 间为横座标，其时量关系呈一直线，该直线的 方程式为logCt= logC0-Kt/2.303,因此如按給药 后各时间测出的血药浓度数据在对数座标纸上 作点，顺着各点的分布趋势作一回归直线，
由回归直线上任意两点的座标算出斜率B，再
根据B= -K/2.303求出K值，通过t1/2=0.693/K可 算出t1/2值，此外也可通过作图法直接查出t1/2值。 对氨基水杨酸钠可与FeCl3生成一络合物呈紫红 色。该络合物在波长525nm下比色，其光密度
（OD）与对氨基水杨酸钠浓度成正比。本实
验以对氨基水杨酸钠为例，学习测定药物血浆
(4)给药后20min、40min、60min、 80min后，分别从眼眶取血50ul，加入各相 应试管中，摇匀，静置，记录取血的准确 时间。
(5)各试管离心5min(2000～3000转/min)，精 确吸取上清液3ml分别放入另一编号试管中， 每管加10％FeCl30.2ml摇匀显色。
(6)在分光光度计525nm波长下以0号管调零， 测定各管的光密度值（OD）。
2 3 4 5 ∑
(∑T)2=
∑T·∑logC= n=
∑(TlogC)=
B(斜率)＝
n∑(TlogC) -∑T·∑logC
n∑T2-(∑T)2
由此 K = -2.303·B = 从而 t1/2=0.693/K=
(7)各药后管的OD值减去药前OD值后，用 直线回归方程Y=a+bX求出各时间的血药浓 度值，数据按实验指导处理或用计算机计算 t1/2值。
表7-8 对氨基水杨酸钠血药浓度测定步骤
实验九水杨酸钠的血浆半衰期(t12)的测定【目的】用分光光度计测定水
实验九水杨酸钠的血浆半衰期（t1/2）的测定
【目的】用分光光度计测定水杨酸钠的血浓度及计算半衰期。
【原理】标准含量推算法。
用标准管内水杨酸钠浓度y与光密度x，求比值k=y/x。
再根据k=y/x由x1和x2，求得y1和y2，进行半衰期的计算。
=0.301t/(logy1- logy2)
t
y2
利用比色法测定药物在血中两个以上的浓度值，可求得药物的血浆半衰期。
【材料】
1、动物：家兔；
2、器材：移液管，注射器，镊子
3、药品：10%三氯乙酸、0.5%肝素、10%水杨酸钠、0.02%水杨酸钠、10%三氯化铁。
【方法】
1、取离心管3支，分别标记A、B、C，各加入10%三氯乙酸3.5毫升
2、取家兔1只，称重后由耳缘静脉取血1毫升置于A管内
3、由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，并记录注射完毕时间
4、给药后5分钟以及间隔25分钟，先后由耳缘静脉取血1毫升分别置于B、C管内，记录取血的准确时间t0以及t1。
5、将三只离心管摇匀，以2000转/分钟的转速离心5分钟，取上清液加10%三氯化铁0.3毫升，摇匀，显色。
6、以给药前管为对照，用750型分光光度计510波长测定x1和x2
7、配标准管：0.02%水杨酸钠： 2毫升 + 三氯化铁0.6毫升
空白管：蒸馏水2毫升 + 三氯化铁0.6毫升【结果】用750型分光光度计测定结果，计算水杨酸钠的半衰期
【注意事项】
1、剂量要准确，时间掌握好；
2、给药后应保持室内安静，避免刺激实验动物。
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药物血浆半衰期的测定实验报告
【实验目的】
掌握药物半衰期的测定方法
【实验原理】
药物消除半衰期是血浆药物浓度下降一半所需要的时间。
其长短可反映体内药物消除速度，根据半衰期可确定给药间隔时间。
按一级动力学消除的药物，其血浆半衰期是一个固定的值，不受药物初始浓度和给药剂量的影响，仅取决于值（一级动力学的消除速率常数）的大小。
=
磺胺嘧啶（SD）的测定原理：磺胺类药物为氨基苯类化合物，在酸性溶液中可与亚硝酸钠起重氮反应生成重氮盐，此盐在碱性溶液中与麝香草酚溶液起偶联反应形成橙红色偶氮化合物，将该化合物在525nm波长下比色，其光密度与磺胺类药物的浓度成正比（朗伯比尔定律）。
【实验对象】
家兔。
体重1.5~2.5kg。
【实验试剂】
10%磺胺嘧啶钠，肝素，7.5%三氯醋酸，0.5%麝香草酚，0.5%亚硝酸钠，蒸馏水。
【实验器材】
离心机，分光光度计，离心管，试管，注射器，移液管，
吸球，烧杯，玻璃棒。
【实验方法】
(1)取药前血
取家兔1只称重，0.5%肝素生理盐水润湿注射器和抗凝瓶，由耳缘静脉取药前血2ml（空白对照）于抗凝瓶内。
(2)给药
由一侧耳缘静脉注射10%磺胺嘧啶钠溶液3ml/kg（药物浓度为200mg/10ml）准确记录给药结束时间。
(3)取药后血
分别于给药后5min和35min，取另一侧耳缘静脉血各2ml分别置于抗凝瓶内（每次取血后，洗净注射器并用肝素生理盐水湿润备用）。
准确记录实际采血时间。
(4)测定血液样本SD浓度
3次血液样本各准确吸取0.2ml，分别加至编号的含7.5%三氯醋酸2.8ml离心管中，混匀。
3000r/min，离心10min。
准确吸取离心管各管上清液1.5ml，分别至相应编号的试管中。
各管分别加入0.5%亚硝酸钠溶液0.5ml，充分混匀；再加入0.5%麝香草酚溶液1ml，混匀。
以给药前的空白管作参比，使用分光光度计在525nm波长处测定各管光密度值，按下列公式计算血中SD浓度。
血中SD浓度（）=
(5)半衰期的计算
=
代入上述公式：
公式中T为给药后两次取血的间隔时间，、分别为给药后两次取血的血浆药物浓度。
(6)计算零时浓度（）
(7)计算表观分布容积（）
计算本次实验的半衰期、预期零时浓度及表观分布容积。
【注意事项】
1、采血量要准确。
采血时可用食指轻弹兔耳根部，使兔耳
充血后有助于家兔耳缘静脉取血。
若耳缘静脉采血不畅，可用刀片划破耳缘静脉采血或心脏取血。
若未能及时采血，须以实际采血间隔时间代入公式计算。
每次采血应避免采血器械交叉污染。
2、离心管及试管要注意标记编号，以免实验操作中混淆。
3、血液样本SD浓度测定时，注意所加溶液的正确顺序。
【思考题】
测定药物血浆半衰期有何临床意义？
原始数据
体重：2.7kg 给药：8.1ml
给药结束时间：15：34
第一次取血结束时间：15：52
第二次取血结束时间：16：44
18min，70.7min，T=52.7min
实验室结果
OD值
组别
5min35min
10.5450.452
20.3270.270
30.7530.460
40.5900.328
50.8220.924
60.9200.719
70.5820.413
80.9130.784
本组实验数据为第8组数据，实验数据处理如下：
231.5min
963.5g/ml
60/963.5=0.062l/kg
思考与讨论：
实验过程中，存在一些因素使药物浓度降低，进而影响半衰期大小，这些因素可能是：
1.加三氯醋酸过程中未立即摇匀，出现凝血块，血液样本中
少量药物可能与蛋白结合被沉淀。
2.给药过程中，有少许药物流落未注入耳缘静脉。
3.注射器取血、释血过程中残留少许全血于器壁。
此外，采血过程中，2次采血时长（18min，52.7min）均超过规定时长（5min，35min）血药浓度会因药物代谢的变化而产生较大误差，再者，在吸取上清液的过程中，不慎吸入少量沉淀物，沉淀杂质影响药物浓度测量。
本组药物SD浓度值变动不大，可能是比色皿里的溶液混合不均匀，或是受残余药物的影响，也可能是从吸取上清液至比色的过程中，上清液浸于酸性、碱性溶液的时间较短、混合程度不够，影响药物相关化合物的合成，进而影响浓度测定。
测定药物血浆半衰期的意义：
1.确定给药的间隔时间（半衰期短，则给药间隔时间短）。
2.预测达到稳态血药浓度的时间。
3.预测药物基本消除时间。