法庭科学人类荧光标记str 复合扩增检测试剂质量基本要求
检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则
检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则1、目的规范了本中心荧光定量PCR检测试剂盒的验收方法，以确保检测试剂盒的质量符合检测技术的要求；确保检测结果的准确、有效。
2、使用范围适用于本中心荧光定量PCR检测试剂盒的验收。
3、职责由动物疫病监测室相关人员负责荧光定量PCR试剂盒的验收。
4、验收内容4.1 荧光定量PCR检测试剂盒选用规定荧光定量PCR检测试剂盒的选用以政府招标的方式进行，由具有相关资质的供应商提供试剂盒。
所提供的试剂盒的保质期必须在半年以上，否则予以退货。
每一批号检测试剂盒都必须进行验收，符合要求后方可使用4.2 验收标准及方法4.2.1 荧光定量PCR检测试剂盒的验收按照《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》（GB/T19438.2-2004）与《新城疫病毒中强毒株检测方法荧光RT-PCR法》（SN/T1686-2005）中的规定执行。
试剂盒中提供的试剂有荧光RT-PCR反应液、转录酶、反转录酶和Taq 酶。
验收指标就是使用试剂盒的反应体系，按照GB/T19438.2-2004中的反应程序，使质控阴性对照无Ct值且无扩增曲线；阳性对照Ct值≤30.0，且出现特定的扩增曲线。
4.2.2 主要使用仪器荧光定量PCR扩增仪，生物安全柜4.2.3 验收步骤按照GB/T19438.2-2004以及SN/T1686-2005中的规程对质控阴、阳性对照进行核酸提取，再进行荧光RT-PCR反应。
质控阴性对照无Ct值且无扩增曲线；阳性对照Ct值≤30.0，且出现特定的扩增曲线。
这两个参数同时满足，表明试剂盒符合要求，可以使用。
5、相关记录FNAJ/BG-B-406-05 日常采购（包括易耗品）验收记录表GB/T19438.2-2004 H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法SN/T1686-2005 新城疫病毒中强毒株检测方法荧光RT-PCR 法。
检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则
检测中心荧光定量PCR检测试剂盒验收细则
一、科学选材
1.测序级合成核苷酸：合成产品应经全长光谱比色检测，确认无肽键
断和错义残基；
2.反应相关试剂：应经分子生物学检测，确认无污染情况；
3.其他活性物质：无反应性活性物质，可保证活性物质以及荧光活性
物质的稳定性；
4.荧光活性物质：其荧光活性物质的滴度必须稳定，没有偏离正常谱
线的情况；
5.合成核苷酸扩增片段：应确保试剂盒所使用的合成核苷酸扩增片段
的序列准确性及效率；
6.唯一性：检测试剂中所用活性物质的唯一性，比如它的荧光量子产
量在一些符合的范围内，可保证检测试剂的性能稳定，可以准确检测出检
测物质；
二、检测实验
1.合成核苷酸的检测：应在实验所用的检测试剂中检测它的质量，通
过GC/MS、全长光谱比色法，检测出来的结果要符合产品质量要求；
2.反应相关试剂的检测：通过分子生物学检测，检测每种试剂的活性，并定量测定；
3.荧光活性物质的检测：确保各种荧光活性物质的谱线分布正常，以
及它们的滴度稳定，没有异常偏移的情况；
4.核苷酸扩增片段的检测：通过质控检测，确保序列的准确性和扩增片段的效率；。
STR遗传标记荧光复合扩增系统的法医学应用_贾振军
2009 年第 3 期 No. 3 2009 Journal of Chinese Peopleps Public Security U niversity( Science and T echnolog y) 总第 61 期 Sum61
STR 遗传标记荧光复合扩增系统的法医学应用
采集 05 年四川大学法医教研室亲子鉴定检案 10 例, 其中 5 例认定父权, 5 例排除父权。对 这 10
例检案的检材用 Chelex 法提取 DNA, 本复合扩增 系统分析。结果: 5 例认定父权的案例 中未排除父 权; 5 例排除父权的案例中, 1 个基因座排除父权 1 例, 2 个基因座排除父权 2 例, 3 个基因座均排除父 权 1 例, 未排除父权 1 例。在另外 1 例亲子鉴定中, 通过本系统检测提供了参考依据。具体案例如下:
( 3) 可重复性研究样本: 抽取两名男性志愿者 血样 5 mL , EDT A 抗凝, - 20 e 保存。
( 4) 种属特异性研究样本: 提取猪、狗、羊、牛、 兔、鸡、鱼、泥鳅、蛇、鸭等动物的 DNA。
( 5) 环境因素研究样本: 抽取两名男性志愿者 血样 5 m L, EDT A 抗凝。用 棉棒蘸取鲜血制 成血 痕。第一组置于室内环境条件下( 2005 年 2 月~ 4 月) , 第二组放置于 60 e 环境下。将两组样本分别 于第 10、15、20、30、40、50 天提取 DNA, 用于观察环 境因素 对 D20S601、D6S474、D6S2418 复 合扩增 体 系的影响。
择均能出现特异性产物的基因座, 结果选出 3 个基 因座: D20S601、D6S474、D6S2418。各 基因座引物 序列、基因序列及个人识别率、非父排除率、扩增条 件及其它遗传学数据见参考文献[ 7] 和[ 8] 。
核酸扩增检测用试剂
核酸扩增检测用试剂1 范围本标准规定了核酸扩增检测用试剂（盒）（以下简称“试剂（盒）”）的术语和定义、技术要求、试验方法、标签与使用说明、包装、运输和贮存等。
本标准适用于核酸扩增检测用试剂（盒）的质量控制。
核酸扩增方法包含聚合酶链反应（PCR）技术与等温核酸扩增技术等。
本标准不适用于下列产品：a）用于血源筛查的试剂（盒）；b）用于基因测序的试剂（盒）。
本标准为核酸扩增检测用试剂（盒）通用标准，已有专项标准的产品或试剂（盒），宜依据产品特性，及专项标准要求，制定相应的产品标准或技术要求。
2 规范性引用下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 21415-2008 体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性GB/T 29791.2 体外诊断医疗器械制造商提供的信息（标示）第2部分：专业用体外诊断试剂3 术语和定义以下术语和定义适用于本文件3.1聚合酶链反应 polymerase chain reaction, PCR聚合酶链反应或多聚酶链反应是一种对特定的DNA或RNA片段在体外进行快速扩增的方法。
由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。
3.2样本线性 linearity of series diluted samples对高浓度样本进行系列稀释，得到的检测浓度与理论浓度之间线性相关。
3.3检出限 detection limit，limit of detection样品中以一定概率可被声明与零有差异的被测量的最低值。
注1：也被描述为“最低检测限”（Minimum Detectable Concentration）（或剂量或值）。
注2：有时被不正确地指作分析灵敏度。
注3：本标准中的最低检测限为区别于零的不低于95%可信区间的最低浓度。
3.4阈值循环数Ct (cp) cycle threshold ,crossing point实时监测扩增过程中，反应管内的荧光信号到达指数扩增时经历的循环周期数。
荧光定量PCR实验室规范
荧光定量PCR实验室规范临床基因扩增检验实验室工作规范为使基因扩增检验技术有效地应用于临床，更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务，保证检验质量，特制定本规范。
一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。
为避免污染，必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置临床基因扩增检验实验室。
临床基因扩增检验实验室四个隔开的工作区域中每一区域都须有专用的仪器设备。
各区域都必须有明确的标记，以避免设备物品如加样器或试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备物品发生混淆。
进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区(简称扩增区)至产物分析区，避免发生交叉污染。
在不同的工作区域应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服，以便于鉴别。
此外，当工作者离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出。
清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因，因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增产物分析区的方向进行。
不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止交叉污染。
(一)试剂贮存和准备区下述操作在该区进行：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。
贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。
在打开含有反应混合液的离心管或试管前，应将其快速离心数秒。
试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。
当贮存试剂溶液经检查可用后，应将其分装贮存备用，避免由于经常打开反应管吸液而造成污染。
含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。
大多数用于扩增的试剂都应冰冻贮存。
为避免因单次反应取液而频繁的冻融主贮存试剂，应分装冰冻贮存试剂溶液。
贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数来决定。
globalfiler-pcr扩增试剂盒验证及其str遗传多态性
法医学杂志２０１５年８月第３１卷第４期GｌｏｂａｌFｉｌｅｒ誖ＰCR 扩增试剂盒验证及其STR 遗传多态性路志勇，薛卢艳，张庆霞，赵怡，刘金杰，唐晖（北京市公安司法鉴定中心，北京１００１９２）摘要：目的测试GlobalFiler 誖ＰＣR 扩增试剂盒技术性能指标，评估其法医学应用价值，并对其遗传多态性进行调查。
方法从灵敏度、混合样本、种属特异性、适应性、耐受性、一致性、均衡性、稳定性８个方面对该试剂盒进行测试，自动工作站提取北京地区汉族人群３７３名无关个体血样DＮＡ进行扩增检测。
结果GlobalFiler 誖ＰＣR 扩增试剂盒灵敏度较高，对混合、酶切降解和含抑制剂样品具有一定的检测分析能力，适应性和均衡性较好。
２１个ＳTR 基因座基因型频率分布均符合Hardｙ－Weinberg 平衡（P >０．０５），ＰＩＣ值在０．５３６~０．９４０，H 值在０．５５８~０．９３３，DＰ值在０．７８３~０．９９２，ＰE 值在０．２４３~０．８７４。
结论GlobalFiler 誖ＰＣR 扩增试剂盒可用于法庭科学实际检案与建库，２１个ＳTR 基因座在北京汉族人群中具有较高的遗传多态性，对法医学应用和群体遗传学研究具有重要意义。
关键词：法医遗传学；多态现象，遗传；短串联重复序列；GlobalFiler 誖ＰＣR 扩增试剂盒中图分类号：DF７９５．２文献标志码：Ａｄｏｉ：１０．３９６９/j．issn．１００４－５６１９．２０１５．０４．００５文章编号：１００４－５６１９（２０１５）０４－０２７３－０４VａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆGｌｏｂａｌFｉｌｅｒ誖ＰCR AｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎKｉｔａｎｄｔｈｅSTR ＰｏｌyｍｏｒｐｈｉｓｍLU Zhi－yong,XUE Lu－yan,ZHANG Qing－xia,ZHAO Yi,LIU Jin－jie,TANG Hui（Forensic Science Service of the Beijing Public Security Bureau,Beijing 100192,China ）Aｂｓｔｒａｃｔ：OｂjｅｃｔｉvｅTo tes t t he t echni cal par am et er s of G l obal Fi l er 誖PC R A m pl i f i cat i on K i t f or i t s ap-pl i cat i on t o f or ens i c appl i cat i on val ue and t o i nves t i gat e t he genet i c pol ym or phi s m s .ＭｅｔｈｏｄｓThe vali da-t i on w as conduct ed i n s ens i t i vi t y,m i xed s am pl es ,s peci es s peci f i ci t y,adapt abi l i t y,s ur vi vabi l i t y,cons i s t ency,peak hei ght bal ance and s t abi l i t y.The am pl i f i cat i on and det ect i on of t he genom i c D N A f r om 373unr e-l at ed i ndi vi dual s f r om B ei j i ng H an nat i onal i t y w er e ext r act ed by aut om at i on w or ks t at i on.RｅｓｕｌｔｓG l obal -Fi l er 誖PC R A m pl i f i cat i on K i t w as adapt i ve t o s om e m i xed,degr aded and i nhi bi t ed s am pl es.The pow er of s ens i t i vi t y and adapt abi l i t y and peak hei ght bal ance s how ed w el l .The di s t r i but i ons of genot ype f r e-quenci es f or 21STR l oci i n t he popul at i on w er e al l i n accor dance w i t h H ar dy －W ei nber g equi l i br i um （P ＞0.05）.The PI C val ue of t he 21STR l oci w as am ong 0.536t o 0.940;t he H val ue w as am ong 0.558t o 0.933;t he D P val ue w as am ong 0.783t o 0.992;t he PE val ue w as am ong 0.243t o 0.874.CｏｎｃｌｕｓｉｏｎG l obal Fi l er 誖PC R A m pl i f i cat i on K i t i s s ui t abl e f or cr i m i nal cas es and D N A dat abas e i n f or ens i c pr act i ce.A nd 21STR l oci i n B ei j i ng H an nat i onal i t y have hi gh pol ym or phi s m ,w hi ch have ap-pl i cat i on val ue i n f or ens i c pr act i ce and popul at i on genet i cs .Kｅy wｏｒｄｓ：f or ens i c genet i cs ;pol ym or phi s m ,genet i c;s hor t t andem r epeat ;G l obal Fi l er 誖PC R A m pl i f i ca-t i on K i t作者简介：路志勇（１９７５—），男，山东德州人，副主任法医师，主要从事法医物证学检验与研究；E－mail ：luｚｈiｙong２４３１＠１６３．com 通信作者：唐晖，女，博士，主任法医师，主要从事法医物证学研究；E－mail ：ｈuiｈuitangno１＠１６３．comGlobalFiler 誖ＰＣR 扩增试剂盒是美国Liｆe Tecｈ-nologies 公司推出的新一代荧光ＳTR 复合扩增试剂盒，采用六色荧光标记技术，比其上一代产品Ｉdenti -ｆiler 誖Ｐlus 试剂盒增加了D2S441、D22S1045、SE33、D10S1248、D1S1656、D12S391共６个常染色体ＳTR 基因座，并在Amelogenin 基因座的基础上，增加了Y indel 、DYS391两个Y 染色体遗传标志，从而使其整合的基因座达到２４个，在提高性别甄别能力的同时，还可获得更高的个人识别率和非父排除率。
CNAS-EL-03《检测和校准实验室认可能力范围表述说明》
1 目的和范围1.1 本文旨在规范检测和校准实验室认可能力范围的表述，使其更加科学、准确，同时也有助于提高不同实验室和评审组对相同能力表述的一致性。
1.2 本文规定了检测和校准实验室认可能力范围表述的通用要求，特定专业领域能力范围表述应按照该领域特定要求执行。
2 引用文件ILAC G18 Guideline for the Formulation of Scopes of Accreditation for LaboratoriesCNAS-R01《认可标识和认可状态声明管理规则》3 检测实验室能力范围描述的主要原则3.1 检测对象3.1.1 检测对象是检测活动所针对的对象、产品或产品类别，如空气和废气、生活饮用水、食品等。
一般情况下，检测对象不应超出检测标准规定的适用范围，也不能超出实验室实际开展的检测活动的范围，不应填写为检测参数。
如检测对象不应填写为“电磁兼容”、“环境试验”等。
当依据标准为针对某一产品的标准时，检测对象应填写产品名称；当依据的标准为某一类产品的检测方法标准时，检测对象可填写产品名称或产品类别名称。
注：实验室应根据检测基质和检测方法准确界定检测对象。
如实验室只具备检测水产品能力，检测对象的填写不应扩大为“食品”。
检测对象规范表述示例：以下表述扩大了检测对象的范围，因此不规范：3.1.2 适用时，可将检测对象分类后再具体表述。
如建工领域可分为水泥及胶凝材料、钢材、外加剂、墙体材料、饰面材料/瓦及石材、防水材料、建筑涂料、室内环境及材料有害物质、建筑门窗、塑料管材管件、水暖配件、保温材料、结构工程、地基基础及土工等。
3.2 检测项目/参数3.2.1 “检测项目”指检测活动所针对的产品属性，可包含若干参数。
该栏目不应描述为检测对象。
3.2.2 通常情况下，方法标准应明确描述涉及的检测项目/参数，不应笼统的描述为“全部/部分项目/参数”。
例如：以下表述不规范：3.2.3 成系列产品标准的通用要求含检测方法时，通用要求也应描述在能力范围中。
Human残留DNA片段分析检测试剂盒(2G)(PCR-荧光探针法)产品技术要求标准2023版
Human残留DNA片段分析检测试剂盒（2G）（PCR-荧光探针法）1范围本标准规定了Human残留DNA片段分析检测试剂盒（2G）（PCR-荧光探针法）的规格和检测原理、要求、试验方法、检验规则、标志、标签、使用说明书、包装、运输和贮存。
本标准适用于Human残留DNA片段分析检测试剂盒（2G）（PCR-荧光探针法），以下简称试剂盒。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T191包装储运图示标志GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则YY/T1182-2010核酸扩增用试剂（盒）USP509Residual DNA Testing3规格和检测原理3.1规格试剂盒由四种不同扩增片段Human Primer&Probe MIX、IPC MIX、qPCR Reaction Buffer、Human DNA定量参考品、DNA稀释液组成，组成见表1。
表1序号组分名称装量1Human Primer&Probe MIX-75300μL/管×1管2Human Primer&Probe MIX-122300μL/管×1管3Human Primer&Probe MIX-244300μL/管×1管4Human Primer&Probe MIX-562300μL/管×1管5IPC MIX550μL/管×1管6qPCR Reaction Buffer850μL/管×8管7Human DNA定量参考品50μL/管×1管8DNA稀释液 1.5mL/管×3管3.2检测原理试剂盒是采用定量PCR-荧光探针法原理，定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中Human 宿主细胞DNA残留片段大小分布的专用试剂盒。
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法庭科学人类荧光标记str 复合扩增检测试剂质量基本要求
法庭科学人类荧光标记STR复合扩增检测试剂的质量基本要
求如下：
1. 纯度要求：荧光标记STR复合扩增检测试剂应具有高纯度，确保不会引入任何其他无关杂质。
这可以通过高效液相色谱（HPLC）或质谱等分析方法进行验证。
2. 稳定性要求：荧光标记STR复合扩增检测试剂应在储存期
间能够保持稳定，不会出现明显的分解或降解现象。
可以通过长期稳定性试验来验证其稳定性。
3. 敏感性要求：荧光标记STR复合扩增检测试剂应具有较高
的敏感性，能够在样本中检测到低浓度的目标DNA片段。
可
以通过模拟样品进行适当稀释，然后进行验证实验来评估其敏感性。
4. 特异性要求：荧光标记STR复合扩增检测试剂应具有较高
的特异性，能够准确识别目标DNA片段而不受其他杂质的干扰。
可以通过在样本中引入其他DNA样本或杂质，然后进行
验证实验来评估其特异性。
5. 一致性要求：荧光标记STR复合扩增检测试剂的不同批次
之间应具有较高的一致性，即不同批次的产品在性能和质量方面应保持一致。
可以通过批间比对实验来评估其一致性。
6. 检测效率要求：荧光标记STR复合扩增检测试剂应具有较
高的检测效率，能够在较短的时间内完成扩增反应并产生可靠的结果。
可以通过实时荧光定量PCR（qPCR）等方法来评估其检测效率。
总之，法庭科学人类荧光标记STR复合扩增检测试剂的质量要求应包括纯度、稳定性、敏感性、特异性、一致性和检测效率等方面的考虑。
这些要求是确保测试剂在法庭科学人类鉴定中能够提供准确、可靠结果的基础。