萘敏维滴眼液的抑菌效力测定
211216623_滴眼液中13_种常用抑菌剂含量测定的HPLC_法建立及其在利巴韦林滴眼液测定中的
引用格式：罗建琴, 冯雨薇, 袁军, 等. 滴眼液中13种常用抑菌剂含量测定的HPLC 法建立及其在利巴韦林滴眼液测定中的应用[J]. 中国测试，2023, 49(4): 73-79. LUO Jianqin, FENG Yuwei, YUAN Jun, et al. A HPLC method for the determination of 13common bacteriostatic agents in eye drops and its application in the determination of ribavirin eye drops[J]. China Measurement &Test, 2023, 49(4): 73-79. DOI: 10.11857/j.issn.1674-5124.2021110042滴眼液中13种常用抑菌剂含量测定的HPLC 法建立及其在利巴韦林滴眼液测定中的应用罗建琴1， 冯雨薇1， 袁 军2， 冯 文2， 刘 峰2， 钱广生1(1. 四川大学华西药学院，四川 成都 610041; 2. 四川省药品检验研究院，四川 成都 611730;3. 药物制剂体内外相关性技术研究重点实验室，四川 成都 611730)摘 要: 建立同时测定滴眼液中13种常用抑菌剂含量的高效液相色谱法并应用于利巴韦林滴眼液中3种抑菌剂的含量测定。
采用高效液相色谱法，使用 YMC-Triart C18（4.6 mm×150 mm ，3 μm ）色谱柱；以 5 mmol·L −1醋酸铵（含1%三乙胺，冰醋酸调 pH5.0）为流动相 A ，乙腈为流动相 B ，梯度洗脱；流量1 mL·min −1；柱温35 ℃；检测波长214nm ；进样体积10 μL 。
结果表明13种抑菌剂间分离度均达到要求，空白辅料不干扰抑菌剂测定；抑菌剂在各自线性范围内的线性关系良好；平均回收率在91.91%～102.2%范围内，RSD 均小于2.0%；按拟定方法测定样品中硫柳汞钠含量为0.005～0.007 mg·mL −1，苯扎溴铵含量为0.074 4～0.093 5 mg·mL −1，羟苯乙酯含量为0.230 9～0.356 mg·mL −1。
5、抑菌剂效力检查法
四、抑菌效力检查法在制剂通则中的体现
在2015年版中国药典附录Ⅰ制剂通则中相关的制剂项 下“生产与贮存期间应符合下列规定”中，增加“加 入抑菌剂（防腐剂）的制剂，应符合抑菌剂（防腐剂 ）效力检查法的有关要求”
五、抑菌剂效力检查实验
1、培养基的适用性检查 2、抑菌效力测定
1、培养基的适用性检查
在2010年版的抑菌剂效力检查法指导 原则基础上，并参照欧洲药典对抑菌 效力检查法的判断标准进行修订而成。
二、抑菌效力检查法主要修订内容
1、按中国药典2010年版的抑菌剂效力检查法指导 原则修订
2、在概述部分增加抑菌剂的定义：抑菌剂是指抑 制微生物生长的化学物质，有时也称防腐剂。
3、培养基、培养基适用性检查、检查方法所用菌 种名称、菌液制备均与微生物限度检查法中控制 菌检查法一致
4、培养基适用性、方法的适用性试验中各试验 菌的回收率按70%要求。
5、产品分类及判断标准按EP进行修改，根据给 药途径分为4类
6、结果判断中的初始值定为所加菌数值
三、抑菌效力检查法的应用 采用微生物方法测定灭菌及非灭菌制剂的
抑菌活性，以评价最终产品的抑菌效力。 1 、 用于评价最终产品的抑菌效力 2 、 用于指导生产企业在制剂研发阶段抑菌 剂最低浓度的确定。
。
注意
方法适用性菌株同前（培养基适用性，与计 数法不同）
方法适用性试验回收率要求同前（70%） Lg值保留小数点后1位有效数字
E、结果判断A、B级的规定来自注射剂和眼用制剂取样检测时间：2d、7d、14d、28d
28d—NR
局部给药
取样检测时间：6h、24h、7d、14d、28d
28d—NI
《中国药典》2015年版 抑菌剂效力检查法
抑菌效力检查法
附录ⅩⅢJ抑菌效力检查法抑菌剂是指抑制微生物生长的化学物质，有时也称防腐剂。
抑菌效力检查法系用于测定灭菌及非灭菌制剂的抑菌活性，以评价最终产品的抑菌效力，同时也可用于指导生产企业在研发阶段制剂中抑菌剂浓度的确定。
如果药物本身不具有充分的抗菌效力，那么应根据制剂特性（如水溶性制剂）添加适宜的抑菌剂，以防止制剂在正常贮藏或使用过程中可能发生的微生物污染和繁殖使药物变质而对使用者造成危害，尤其是多剂量包装的制剂。
在药品生产过程中，抑菌剂不能用于替代药品生产的GMP管理，不能作为非无菌制剂降低微生物污染的唯一途径，也不能作为控制多剂量包装制剂灭菌前的生物负载的手段。
所有抑菌剂都具有一定的毒性，制剂中抑菌剂的量应为最低有效量。
同时，为保证用药安全，成品制剂中的抑菌剂有效浓度应低于对人体有害的浓度。
抑菌剂的抗菌效力在贮存过程中有可能因药物的成分或包装容器等因素影响而变化，因此，应验证成品制剂中的抑菌剂效力在效期内不因贮藏条件而降低。
本试验方法和抑菌剂抑菌效力判断标准用于包装未启开的成品制剂。
培养基培养基的制备1.胰酪大豆胨液体培养基胰酪胨17.0g 氯化钠 5.0g大豆木瓜蛋白酶消化物 3.0g 磷酸氢二钾 2.5g葡萄糖（一水合） 2.5g 水1000mL除葡萄糖外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过，调节pH值使灭菌后在25℃的pH 值为7.3±0.2，加入葡萄糖，分装，灭菌。
胰酪大豆胨液体培养基置20～25℃培养。
2. 胰酪大豆胨琼脂培养基胰酪胨 15.0g 氯化钠 5.0g大豆木瓜蛋白酶水解物 5.0g 琼脂 15.0g水 1000ml除琼脂外，取上述成分，混合。
微温溶解，调节pH值使灭菌后在25℃的pH值为7.3±0.2，加入琼脂，加热溶化后，摇匀，分装，灭菌。
3.沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基照微生物限度检查法（附录ⅩⅢ C）制备。
培养基的适用性检查抑菌效力测定用培养基应进行培养基的适用性检查，包括成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应检查。
抑菌试验方法总结
抑菌试验方法总结用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验称为抑菌试验。
通过抑菌实验，可以测定一个药物的最低抑菌浓度，用以评价该药物的抑菌性能，这是抗菌药物的最基本的药效学数据。
主要方法有进行定性测定的扩散法（如抑菌斑试验）和进行定量测定的稀释法（如最低抑菌浓度实验）。
1、定性测定（1）纸片扩散法(disk diffusion test)，K-B法：WHO推荐的全球统一的标准方法。
原理：含有定量抗菌货物的纸睡帖在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度。
在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。
抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关。
质控：标准菌株的抑菌圈直径应落在预期范围内，如果超出该范围，应视为失控而予以纠正。
影响因素：培养基的质量、药敏纸片的质量、接种菌量、试验操作质量、孵育条件、抑菌圈测量工具的精度和质控菌株本身的药敏特性等均能影响试验结果的准确性。
操作方法：按每1000 ml蒸馏水称取Muller-hinton Agar 38 g配备M—H琼脂，按每个平皿(直径9 mm)25 ml进行分装。
将孵育16—24 h的菌种分别接种生理盐水试管中，校正浓度至0.5麦氏标准(相当于1.0×108 CFU／m1)。
用无菌棉签拭蘸取菌液，在试管内壁旋转挤去多余菌液后在M—H琼脂表面，均匀涂布接种3次，每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂抹1周。
平板在室温下干燥3—5 min后用无菌镊子将药物纸片紧贴于琼脂表面．置35℃孵育16 18 h。
记录抑菌圈的直径，实验。
重复10次。
主要用于比较不同抗菌物质，或者通过不同方法提取的同一种物质的效果。
（2）打孔法药敏实验：待M—H平板干后，用无菌棉签蘸取菌液(相当于1.0×108CFU／m1)，在培养基平板上密集划线接种。
滴眼剂中抑菌剂含量测定法
滴眼剂中抑菌剂含量测定法滴眼剂中常用的抑菌剂有季铵盐类（苯扎氯铵、苯扎溴铵）、羟苯酯类（羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯、羟苯丁酯）、硫柳汞、三氯叔丁醇及其他醇酚类等，应对抑菌剂含量进行控制，除另有规定外，可分别按下述方法测定。
1．季铵盐类和羟苯酯类抑菌剂照高效液相色谱法（通则0512）测定。
2．硫柳汞抑菌剂避光操作。
照高效液相色谱法（通则0512）测定。
色谱条件及系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以1%三乙胺溶液（用磷酸调节pH值至3.0）为流动相A，甲醇为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长为222nm；柱温为40℃。
硫柳汞峰与相邻色谱峰的分离度应符合规定。
时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0505025050171090201090对照品溶液制备取品种项下使用的抑菌剂对照品适量，精密称定，用90%甲醇溶液溶解并稀释制成与供试品溶液中抑菌剂浓度相当的溶液，即得。
测定法精密量取对照品溶液和供试品溶液各1μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。
按外标法以峰面积计算，即得。
【附注】（1）特殊供试品溶液的制备如供试品为乳浊液或用甲醇稀释后为乳浊液，以适宜溶剂稀释（如可用甲醇将供试品加倍稀释或稀释至10倍），过滤，取续滤液，即得；如供试品用甲醇稀释后析出沉淀或结晶，过滤，取续滤液，即得；如供试品是以固态形式包装（另备溶剂）的，临用前，取固体和液体两部分，按规定混合后，取上清液用测定方法中溶剂稀释后，过滤，取续滤液，即得。
（2）测定季铵盐类和羟苯酯类抑菌剂如所使用的苯扎氯铵为混合物，按下式计算含量：起草单位：中央军委后勤保障部卫生局药品仪器检验所、中国药典|沃特世联合实验室、北京市药品检验所复核单位：广州市药品药检所、河北省药品检验研究院、武汉药品医疗器械检验所、重庆市食品药品检验检测研究院参与单位：中国食品药品检定研究院。
萘敏维滴眼液中苯扎氯铵的含量测定
萘敏维滴眼液中苯扎氯铵的含量测定肖学成;李丹;李金;陈凤【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2013(032)010【摘要】目的建立萘敏维滴眼液中防腐剂苯扎氯铵的含量测定方法.方法采用高效液相色谱(HPLC)法,氰基键合硅胶为填充剂,以0.02 mol·L-1庚烷磺酸钠溶液(含0.1%三乙胺,用磷酸调节pH 3.45±0.10)-乙腈(35:65)为流动相;流速为1.5 mL·min-1;检测波长210 nm;柱温:45 ℃.结果苯扎氯铵在0.044 4～0.222 0 mg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 0,n=5),平均回收率为100.1%,RSD=0.23%.结论 HPLC法具有灵敏、准确、重复性好的特点,可有效测定萘敏维滴眼液中防腐剂苯扎氯铵的含量.【总页数】3页(P1358-1360)【作者】肖学成;李丹;李金;陈凤【作者单位】湖北中医药大学药学院,武汉,430065;湖北中医药大学药学院2010级硕士研究生班,武汉,430065;湖北中医药大学药学院2010级硕士研究生班,武汉,430065;湖北中医药大学药学院2010级硕士研究生班,武汉,430065【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.衣物消毒液中苯扎氯铵含量测定方法的研究 [J], 杨艳丽;钟海娟2.硝酸毛果芸香碱滴眼液中苯扎氯铵含量测定 [J], 黄志元;朱样根3.普拉洛芬滴眼液中防腐剂苯扎氯铵的含量测定 [J], 臧红波;于海岩;宋成君4.普拉洛芬滴眼液中苯扎氯铵的含量测定方法研究 [J], 甘加明;黄婉雯;黄莹5.氯化钠滴眼液中防腐剂苯扎氯铵的含量测定 [J], 谷成燕; 贺艳丽; 白若琬; 韩保萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
蓝润洁的药品说明书是什么样子
蓝润洁的药品说明书是什么样子蓝润洁的药品说明书【药品名称】通用名称：蓝润洁滴眼液汉语拼音：Naiminwei Diyanye【成份】本品为复方制剂，每支10毫升含盐酸萘甲唑林0.2毫克、马来酸氯苯那敏2毫克、维生素B12 1毫克、辅料为：甘油、蹦沙、依地酸二钠、玻璃酸钠、聚山梨酯80、薄荷脑，每毫升含抑菌剂苯扎溴铵0.03毫克。
【性状】本品为粉红色澄明液体，具有特殊气味。
【功能主治】用于缓解眼睛疲劳、结膜充血以及眼睛发痒等病症。
【用法用量】滴眼，一次1-2滴，一日3～4次。
【不良反响】1、眼部反响：偶见瞳孔散大、充血加重、刺激、眼部不适、视物模糊及轻度炎症。
2、全身反响：偶见晕眩、头痛、恶心、焦躁、思睡、血压升高、心律失常及血糖升高等。
【禁忌】1.闭角型青光眼。
2.对本品任何成分过敏者禁用。
【考前须知】1.儿童，尤其是婴儿使用可能会发生中枢神经抑制，导致昏迷和体温显著下降。
因此，婴儿和儿童必须在医师指导下使用。
2.连用3-4日，病症未缓解，请咨询医师或药师。
3.翻开后应在4周内用完，逾期请勿使用。
4.心血管疾病、糖尿病、高血压、甲状腺功能亢进和眼部感染患者慎用。
5.孕妇及哺乳期妇女慎用。
6.在使用过程中，如发现眼红、疼痛等病症应停药就医。
7.滴眼时请勿使管口接触手和眼睛，使用后应将瓶盖拧紧，以免污染药液。
8.对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。
9.本品性状发生改变时禁止使用。
10.请将本品放在儿童不能接触的地方。
11.儿童必须在成人监护下使用。
12.如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师。
【孕妇及哺乳期妇女用药】尚不清楚是否对胎儿造成伤害，因此只有在明确必须使用时，孕妇才可小心使用本品。
建议哺乳期妇女在使用本品时暂停哺乳。
【儿童用药】尚不明确。
【老年用药】尚不明确。
【药物相互作用】当马普替林或三环类抗抑郁药与本品合用时可加强萘唑林的升高血压作用。
使用MAO抑制剂治疗的病人如果再用拟肾上腺素药物可能会发生严重的高血压危象。
GC_MS法测定12种含中药成分滴眼液中抑菌剂_伍海涛
2013 年 11 月 第 35 卷 第 11 期
中成药 Chinese Traditional Patent Medicine
November 2013 Vol． 35 No． 11
津公司） ，AOC 20i 自动进样器，GC-MS solution 工 作站，AUW220D 岛津分析天平 （ 日本 Shmadzu 公 司） ，XW-80 旋涡混合器 （ 上海医科大学仪器厂） 。 1. 2 药 品 与 试 剂 三 氯 叔 丁 醇 （ Chlorobutanol， 98% ，购于阿拉丁试剂公司，批号 31071 ） ，苯氧 乙醇 （ Phenylglycol，99% ，购于 Acros 公司，批号 130242500） ，正十三烷 （ Tridecane ，GC 级，购于 阿拉丁试剂公司，批号 33701 ） ，羟苯乙酯 （ ethyl hydroxybenzoate，99. 0% ， 购 于 天 津 科 密 欧 公 司， 批号 2010. 7. 10） ，正己烷 （ hexane ，GC 级，购于 Sigma 公司，批号 305113） 。
近年来含中药眼用制剂的临床应用有增多趋 势，2005 年版 《中国药典》 仅收录四味珍层冰硼 滴眼液 （ 珍视明） ，2010 年版 《中国药典》 新增 马应龙八宝眼膏、复方熊胆滴眼液、夏天无滴眼 液，另有更多已上市但尚未收录的品种及健字号中 药产品。2010 年版 《中国药典》 定义眼用制剂为 “直接用 于 眼 部 发 挥 治 疗 作 用 的 无 菌 制 剂 ”［1］。 除 了少数自身有抗菌作用的制剂，这些眼用制剂开启 后的无菌 状 态 仍 需 靠 添 加 抑 菌 剂 维 持［2］， 我 国 现 行药典对抑菌剂的添加量是一个范围，没有硬性规 定［3］，而抑 菌 剂 含 有 量 过 高 对 角 膜 细 胞 有 损 害， 在一定情况下正常浓度时对角膜细胞也有损伤［4］。
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等不适症状 ，疗效 良好。我们参考美国药典测定了萘敏 １ 材料 ． ２ 维滴眼液的抑菌效力 ，验证了产品中抑菌剂的效果。
ｌ仪器与材料
１ １ 仪 器 ．
金 黄色 葡萄 球菌 （ Ｔ Ｃ６ ３ ）；大肠 埃 希 菌 Ａ Ｃ ５８ （ Ｔ Ｃ ７９ Ａ Ｃ ８３ ）；铜绿假单胞杆菌 （ Ｉ ９ ２ ）； 白 Ａ ℃Ｃ ｏ ７
ｍ ａｅ ｔ ｎｄ Ｖｉａ ｎ Ｂ ２ ｅ ｒ ｐ ．Ｍ ｅ ｈ ｌ ａ ｅ ａ ｔ ｍｉ １ ｙｅ ｄ ｏ ｓ ｔ ｏｄｓＴｈｅ ｂ ｃ ｅ ｉ ｓａ ｉ ｏ ｅ ｙ ｏ ｙ ｄ ｏ ｓ ｄ ｔ ｒ ｉ ｅ ｙ ａ ｔ ｒｏ ｔ ｔｃ ｐ ｔ ｎｃ ｆｔ ｅ ｅ ｒ ｐｓ ｗａ ｅ ｅｍ ｎ ｄ ｂ ｈｅ
色念珠菌 （ Ｔ Ｃ１２ １ Ａ Ｃ ０ ３ ）；黑 曲霉 （ Ｔ Ｃ１４ ４ Ａ Ｃ ６０ ）。
４ ２
食 品与药 品
Ｆ ｏ ｎ ｒ ｇ ｏ ｄａ ｄＤ ｕ
２ １年 第 １ 卷第 ０ 期 ０１ ３ ｌ
・
技术交流 ・
萘敏维滴眼液的抑菌效 力测定
张世 磊 ，白若琬 ，李 津 ，王 蕾
（ 山东博士伦福瑞达制药有限公司，山东 济 南 ２ ００ ） ５ １ １
摘 要：目的 测定萘敏维滴眼液的抑菌效力。方法 采用美国药典规定的方法，用菌落计数法计数。结果 萘敏维滴眼液
状 的患者有逐年增加的趋势。 目前市场上销售 的眼用 箱 （ 上海博讯 实业 ，Ｇ Ｘ。１０ＭＢ Ｚ ９ ４ Ｅ）；微量移液器 制剂多为多剂量包装，需要加 入抑菌 剂以保证产 品的 （ ａ ｉ，１０此 ）；一次性无菌刻度吸 管 （ ，２ Ｒ ｉｎ ０ ｎ １ ，
０ｍＬ Ｓｅｉｎ ｌ 正常贮藏和使用，避免微生物 生长与繁殖 。欧美药典 １ ）；一次性 无菌培养皿 （ ｔｒｉ）；无菌接种 均登载 了测定抑菌剂抑菌效力的方法 。中国药典２ １ 环 ；手动 菌落 计数器 （ 京赛百奥 ，ＸＫ．７ ）； 自 ００ 北 ９ｃ
ＺＨＡＮ Ｇ ｈ —ｅ， Ｓ ｉｌｉ ＢＡ Ｉ ｏ ｗａ ， ｉ， Ｒｕ — ｎ ＬＩ ｎ Ⅵ Ｎ Ｇ ｉ Ｊ Ｌｅ
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中的抑菌系统稳 定，各测定时 间点符合美国药典标准 。结论 采用 该方法可有效地判定眼用制 剂的抑菌效果 。
关 键 词 ：萘 敏 维 滴 眼 液 ；抑 菌 效 力
中图分类号：１ ８ ． １ ８１ ９
文献标识码 ：Ａ
文章编号 ：１７ ．７ Ｘ （ ０１ １０ ４ ．３ ６ ２９ ９ ２ １ ）０ ．０ ２０
Ａ ｓ ａｔ Ｏｂｅｔ ｅ ｏｄｔｒ ｎ ｅｂ ｃｅｉｓ ｔ ｏｅｃ ｆ ａｈ ｚ ｌ ｅｈ ｄｏｈｏｉｅａｄｃ ｌｒｈ ｎ ｍｉｅ ｂ ｔ ｃ： ｊｃｉ ｅ ｍｉｅｔ ａｔ ｏｔ ｉ ｐ ｔｎ ｙｏ ｐ ａｏｉ ｙ ｒｃ ｌｒ ｎ ｈｏｐ ｅ ａ ｎ ｒ ｖ Ｔ ｅ ｈ ｒ ａｃ ｎ ｎ ｄ
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随着 人们 生活环５ ）；离心机 （ ｐｃｒｆｇ ，６ ）； 高压 灭菌 Ｓ ｅｔ ｕ ｅ ｃ ａ 公和 电脑的普及 应用 ，视疲劳 、眼睛红肿 、干涩等症 锅 （ 上海博讯实业 ，Ｙ Ｏ．Ｓ７ Ｉ Ｘ Ｌ ．５ ）；数显鼓风干燥 Ｓ
年版 二部 附录 中 ，登载 了抑菌 剂效 力检 查法指 导原 动菌落 计数器 （ｎｅｓｉｎ ｅ ｃｎ ０ ）；超低温冰 Ｉｔ ｃｅ ｃ ，Ｓ ａ ５ ０ ｒ 则【。萘敏维滴眼液适用于眼疲 劳、结膜充血 、眼痒 箱 （ ｈｒ ｉ ｔ ｃ ０ 系列 ）。 １ 】 Ｔｅ ｍｏｓ ｅ ｉ ，７ ０ ｃｎｆ ｉ