纳氏试剂分光光度法

纳氏试剂分光光度法

1、方法原则

碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长范围内具较强烈吸收。常测量用波长在410-425nm范围。

2、干扰及消除

脂肪胺、芳香胺、丙酮、醇类和有机氯胺类等有机化合物，以及铁、锰、镁、硫等无机离子，因产生异色或浑浊而引起干扰，水中颜色和浑浊亦影响比色。为此需经絮凝沉淀过滤称蒸馏预处理，易挥发的还原性干扰物质，还可在酸性条件下加热以除去。对金属离子的干扰，可加入适量的掩蔽剂加以消除。

3、本方法的适用范围

本法最低检出浓度为0.025mg/L(光度法)，测定上限为2 mg/L。采用目视比色法，最低检出浓度为0.02 mg/L。水样做适当的预处理后，本法可适用于地面水、地下水、工业废水和生活污水。

4、仪器

(1) 分光光度计；(2) PH计。

5、试剂

配制试剂用水均应为无氟水。

1) 纳氏试剂可选择下列一种方法制备。

①称取20g碘化钾溶于25mL水中，边搅拌边分次加入少量二氯化汞(HgCl2)结晶粉末(约10g)，至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液并充分搅拌，当出现少量朱红色沉淀不再溶解时，停止滴加氯化汞溶液。

另称取60 g氢氧化钾溶于水，并稀释至250mL，冷却至室温后，将上述溶液再边搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液中，用水稀释至40mL，混匀。静置过夜，将上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存。

②称取16g氢氧化钠，溶于50 mL水中，充分冷却至室温。

另称取7g碘化钾和10g碘化汞(HgI2)溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100 mL，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。

2) 石酸钾钠溶液称50g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)溶于100 mL水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100 mL。

3) 铵标准贮备溶液称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NH4Cl)溶于水中，移入1000 mL 容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.00 mg氨氮。

4) 铵标准使用溶液称取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含0.010 mg氨氮。

6、步骤

1) 校准曲线的绘制

①吸取0mL、0.50 mL、1.00mL、3.00mL、5.00 mL、7.00 mL和10.00 mL铵标准使用液于

50 mL比色管中，稀释至标线，加1.0mL酒石酸钾钠溶液，混匀。加1.5mL纳氏试剂，混匀。放置10min后，在波长420nm处，用光程20mm比色皿，以水为参比，测量吸光度。

②由测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量(mg) 对

校正吸光度得核准曲线。

2) 水样的测定

①分取适量经絮凝沉淀预处理后得水样(使氨氮含量不超过0.1 mg)，加入50mL比色管中。稀释至标线，加1.0mL酒石酸钾钠溶液。

②分取适量经蒸馏预处理后的馏出液，加入50mL比色管中，加一定量1mol/L氢氧化钠以中和硼酸，稀释至标线。加1.5mL纳氏试剂，混匀。放置10min后，同标准曲线步骤测量吸光度。

3) 空白试验以无氨水代替水样，作全程序空白测定。

7、计算

由水样测得的吸光度减去空白试验得吸光度后，从校准曲线上查得氨氮含量(mg)。

氨氮(N，mg/L)= m/v×1000

式中：m—由校准曲线查得的氨氮量(mg)；

v —水样体积(mL)。

8、精密度和准确度

三个实验室分析含1.14-1.16mg/L氨氮得的加标水样，单个实验室的相对标准偏差不超过9.5%；加标回收率范围为95%-104%。四个实验室分析含1.81-3.06mg/L氨氮的加标水样，单个实验室的相对偏差不超过4.4%；加标回收率范围94%-96%。

9、注意事项

1) 纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响。静置后生成的沉淀应除去。

2) 滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无铵水洗涤。所用玻璃器皿应避免实验室空气中的氨的玷污。