马铃薯试管薯的诱导
紫色马铃薯试管薯诱导体系的优化研究
二、 结果与分 析
１ ． 不同培养基对试管薯形成的影响
小、 重量轻 、 生产不受季节限制 、 易储 留有 １ 个芽的茎段 ，并转移到培养基 藏、 繁殖速度高于常规田间生产、 栽培 Ａ Ｂ Ｃ、 、 、 Ｄ上诱导结薯 （ 其培养基成分
重也从每瓶 １ ｇ ． 增加到 ３ ｇ薯块的平 ３ ．； ２
Ａ 固体培养基
Ｂ Ｃ
ＭＳ ８ 的蔗糖 ＋ ． ％ ＋％ ０ ５ 的琼脂 ４
ＭＳ ８ 的蔗糖 ＋ ． ％ ＋％ ０ ５ 的琼脂 ＋ ｍ ／ － Ａ ４ ５ ｇＬ ６ Ｂ ＭＳ ８ 的蔗糖 ＋％
ＭＳ ８ ＋ ％的蔗糖 ＋５ ／ － Ａ ｍｇ Ｌ ６ Ｂ
在马铃薯脱毒试管薯生产中， 要求 薯， 天后收获试管薯。 ４ ｏ 生产的试管薯产量高、 质量好 、 成本低，
诱导产生的试管薯的总体质量明显优
（） ３不同接种密度对试管薯形成的 于固体培养基诱导产生的试管薯， 这可 这是马铃薯试管薯生产的基本要求。 本 影响 将带一叶单茎的切段各 自按每 能是由于液体培养基更有利于营养物 试验的 目的在于比较马铃薯试管苗在 瓶 １、０２ 、Ｏ３ 、０ ５２ 、５３ 、５４ 个接种 在培 养 质的扩散， 便于试管薯生长时对营养物
不同培养基类型对试管薯的形成有
一
定的影响（ 结果见表 ２ 。从表 ２ ） 中可 成活率高等突出优点， 因此更便于种质 的配制如表 １。每瓶内放 １ 株 ， ） ０ 在 以看出 ， 液体培养基（ Ｄ） Ｃ、 在结薯个 交流及贮存推广， 也适于大规模自动化 ２￣ ２ ０１连续光照下培养 ２ 天后， 数、 ２ ０ Ｃ、 ０ ｘ ０ 鲜薯重和大薯数方面都明显高于固 生产 。 置于黑暗中于 ２￣温度条件下诱导结 体培养基（ 、 ） ０ Ｃ Ａ Ｂ 。这说明液体培养基中
利用试管薯诱导途径探讨马铃薯品质形成及其调控研究
利用试管薯诱导途径探讨马铃薯品质形成及其调控研究离体条件下诱导形成试管薯是研究马铃薯块茎形成和碳水化合物代谢的适宜系统。
本文以试管薯离体诱导培养体系为模式，模拟研究了光温、营养、激素、辐射、盐胁迫和贮藏等环境条件对马铃薯试管薯块茎发育及其品质形成的影响，同时还对不同贮藏温度下，随贮藏时间延长马铃薯块茎内部品质及其生理变化的规律进行了探讨。
主要研究结果如下： 1．光温条件对试管薯产量及品质影响研究表明：试管薯的形成在17℃低温下较为合适，而结薯后块茎的生长在25℃下较快。
不同基因型对光周期反应不完全一致，马铃薯品种克新1号在黑暗条件下诱导结薯产量较高，而荷兰无花在8小时光照下较好。
随着光周期的延长，块茎内叶绿素含量逐渐增加，同温、同光照条件下，试管薯内叶绿素b(Chl b)含量均大于叶绿素a(Chl a)含量。
块茎内糖苷生物碱含量随光照时间延长而不断增加，且与叶绿素含量变化呈极显著的正相关。
光照时间的延长有利于试管薯内干物质、淀粉和糖含量的累积，25℃下累积效果高于17℃下。
块茎内Vc含量也随光照时间延长而增加，但17℃下培养的试管薯内Vc含量高于25℃下。
2．激素与植物生长物质对试管薯产量及品质影响研究表明：GA促进了马铃薯茎、叶生长和匍匐茎的伸长，但抑制或延缓了块茎的形成，极大地降低了产量：CCC抑制马铃薯苗和匍匐茎的伸长，对马铃薯品种克新1号和荷兰无花的试管薯形成有诱导作用，但对试管薯的进一步增大有抑制作用。
JA和SA处理均能有效促进结薯，并使产量得到显著地提高。
GA抑制块茎中淀粉的合成，并且使Vc和蛋白质含量也降低。
同时，GA处理后匍匐茎的增长进一步阻碍了蔗糖向块茎中的转移而使蔗糖含量下降，并使不利于加工品质的还原糖含量显著上升；CCC、JA和SA处理不仅能使两品种的淀粉含量显著提高，而且Vc和蛋白质含量也有极大地提高。
两品种在CCC、JA和SA处理下，蔗糖含量都显著降低，虽然还原糖含量比对照有所增加，但却显著低于GA处理的还原糖含量。
马铃薯试管薯诱导研究进展及其应用
光照条 件、 诱 导培 养基 类 型、 植物 生长调 节剂和糖 浓度等 因素 ，
并且 对试 管薯的收 获和贮藏 方法 ， 以及 其在种 质资 源保 存和原 原种繁 育上 的应 用进行 了总结 ， 阐明 了试 管薯比试 管苗的优 势。
关键 词 ： 马铃薯 ； 试 管薯； 诱导 ； 应用
万林 等 ｆ ７ 研究认为 ， 香豆素在增加川芋 １ １ ７ 所结薯 中 生产 马铃薯脱毒种薯有两种形式 ， 一是脱毒试管
最佳条 件。刘玲玲 ［ １ 】 认为 ， 在适 宜的结薯 温度下 ， 全 黑暗培养 比长 日照培养诱导结薯快 ， 并且结薯数量多 、
体培养基 比固体培养基更利于营养 物质 的扩散 ， 并且
对试管薯在生长过程 中对营养物质的吸收也是非常有
利 的。但在培养过程 中要根据培养瓶的大小来确定加
薯。 虽然全黑暗是诱导试管薯 的必要条件 ， 但是长期
专 题 论 述
的成活率为 ９ ７ ． ４ ％， 而试管苗种植 的成活率为 ８ ５ ． ２ ％， 在２ 个月时 ， 试管薯种植 的植株高大健壮 ， 叶片数较多。
利用试管薯种植所结的薯块较大 ， 而且数量多 ； 利用试 管薯繁殖微型薯 ， 试管薯 比试管苗在抗逆性 、 生长势和
等【 １ １ ］ 研究 表明， ２ ５ ０ ｍ Ｌ的广 口瓶接种 １ ０ — １ ５ 个外植体
较适宜 ， 此密度下 ５ ｍ ｍ 以上 的试管薯较多。试管薯 的
上都有较大差异。这可能是 由于不 同品种马铃薯 自身 激素水平有差异 ， 所以才造成 了品种 间诱导形成试管 薯的能力差异。
１ ． ２ 培养基类型 马铃薯试管薯适合于在液体培养体 系上进行诱导 ， 产生的试管薯质量高 、 数量多。因为液
马铃薯茎段快繁及试管薯诱导
马铃薯茎段快繁及试管薯诱导
马铃薯茎段快繁及试管薯诱导
在马铃薯(Solanum tuberosum)的茎段快繁中,采用生根时间、生根率、节间长度和粗度作为评估马铃薯茎段快繁壮苗的标准.结果表明,以MS为基本培养基,添加40 mg/L 的B9处理马铃薯茎段快繁效果最好;黑暗处理20 d,并在培养基中添加B9能够提高试管薯诱导的效果.
作者：刘华姚振 LIU hua YAO Zhen 作者单位：长江大学园艺园林学院,湖北,荆州,434025 刊名：长江大学学报（自科版）农学卷英文刊名：JOURNAL OF YANGTZE UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2009 6(2) 分类号：Q813.1 关键词：马铃薯(Solanum tuberosum) 茎段快繁试管薯。
‘红皮’马铃薯试管苗培养和微型薯诱导
ｍｅｉ ｄ ｕｍ ｍ ． ／ ６一 ｗｉ ０ ５ ｍｇ Ｌ ＢＡ，Ｏ １ ％ ａ ｔｖ ｔ ｄ ｃ ｂｏ ｎｄ １ ０ ｇ Ｌ ｕ ｒ ｅｆ ｒ３ ｙ ， ｈ ｎｄ ｔｏ ｔ ．７ ｃｉ ａ ｅ ａ ｎ ａ ０ ／ ｓ ｃ ｏｓ ０ ｄａ ｓ ｔ ｅ ｉ ｕｃｉ ｒ ｒ ｏ ｒ ｔ ｆｍ ｃ ｏ ｔ ｂｅ ｅ ｃ ｄ ６ ． ％ ． ｅ ａ ｅ ａ ｅｄ ａ ｔｒｏ ｃ ｏ—ｕ ｒｗａ ２ ｍｉ ａ ｅｏ ｒ — ｉ ｕ ｒｒ ａ ｈｅ ２ ５ Ｔｈ ｖ ｒ ｇ ｉ ｍｅ ｅ ｆｍ ｒ ｔ ｂｅ ｓ４． ｎ． ｉ
ｓ ｏ ｄ ｔ ａ ｕ ｔｒ ｄ ｉ Ｓ ｂ ｓ ｄ ｕ ｔ ． ／ ６ ＢＡ． ．７ ａ ｔ ａ ｅ ａ ｂ ｎ ａ ｄ ２ ／ ｈ ｗｅ ｔｃ ｌ ｅ Ｍ ａ ａ ｍｅ ｉ ｍ ｗｉ ０ ５ ｍｇ Ｌ 一 ｈ ｕ ｎ ｌ ｈ ０ １ ％ ｃ ｉ ｔｄ ｃ ｏ ｎ ０ ｇ Ｌ ｖ ｒ
Ｋ ｙ ｗｏ ｄｓ：ｒ ｄ ｓ ｎ ｐ ｔ ｔ ｔ ｓ—ｕｂ ａ ｔｅ ； ｃ ｏ ｔ ｅ ｅ ｒ ｅ —ｋ ｏ ａ ｏ； ｅ ｔｔ ｅｐｌ ｌｔ ｍｉ ｒ —ｕｂ ｒ ｉ ｎ
马铃薯（ ｌ ｎ ｍ ｔ ｅｏｕ ） Ｓ ｏ ｕ ｕ ｒｓｍ 是重要经济作物，由于受病毒侵染等原因， ｏａ ｂ 导致了品质优 良特性 的退 化 ， 重影 响着 马铃 薯 块茎 的产 量 和质量 。 用离 体培 养技 术进 行 马铃 薯试 管苗 微型 薯 的诱导 可用 于 严 ¨利
（ ｏｌ ｅ ｆ ｒｃ ｌ ｒ， ｕｉｎ ｒ ｕｔｒ ｎ ｏｅｔ ｉ ｒｉ ， ｕｈ ｕ３ ０ ０ ， ｕｉ ｈｎ） Ｃ ｌ ｇ ｔ ｕｔ ｅＦ ｊ ｉ ｌ ｅ ｄＦ ｒｓ ｙ ｖ ｓｙＦ ｚｏ ５０ ２ Ｆｊａ Ｃ ｉａ ｅ ｏ Ｈｏｉ ｕ ａ Ａｇ ｃ ｕ ａ ｒ Ｕｎ ７
马铃薯试管薯的诱导
实验名称：马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖和试实验时间：2010-5至2010-6管薯的诱导一、实验预习1、实验目的：1．1、通过本次实验，进一步熟悉无菌操作技术1．2、了解马铃薯脱毒种薯生产的过程，为马铃薯脱毒种薯的生产提供必要的基础苗2、实验设备及材料：2.1、实验设备：50ml三角瓶、500ml搪瓷杯、25ml量筒、1ml和5ml吸管、pH试纸（5.4~7.0）、封口膜、扎口用棉线、药勺、称量纸、电炉、普通电子天平、酒精棉球、小块纱布、已灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工作台等。
2.2、药品及试剂MS基本培养基母液、马铃薯快速繁殖培养基、蒸馏水、75％酒精、蔗糖、琼脂、NAA、6-BA、水解酪蛋白、1mol/LHCl、1mol/LNaOH、。
2.3、实验材料马铃薯脱毒苗3、实验原理及实验流程或装置示意图：马铃薯试管薯是利用茎尖分生组织脱毒技术，在组织培养条件下高倍扩繁脱毒试苗，进而诱导试管苗所形成的块茎。
试管薯具有无病原、体积小、贮藏运输方便、能工厂化周年生产。
微型薯是指通过组织培养方法，在试管中生产的马铃薯块茎他的体积小、重量轻，一般只有1-5克，从而为马铃薯优良种质的保全提供了一条理想的途径。
马铃薯试管苗在光照条件下进行自养的程度大于异养。
相反，在高浓度的糖类存在的情况下，以及在无光照的限制条件下，马铃薯向着诱导生成试管薯的过程。
这样生长出来的试管薯称之为原原种种薯。
试验流程图马铃薯茎段扦插位置4、实验方法步骤及注意事项：4.1、培养基的配制4.1.1、单节茎段的繁殖培养基MS培养基+2mg/L NAA+0.1mg/L 6-BA+0.7%琼脂+3%蔗糖+200mg/L水解酪蛋白4.1.2、微型薯的诱导培养基MS培养基+5mg/L 6-BA+8%蔗糖4.2、单节茎段的繁殖4.2.1、在无菌条件下，将由茎尖培养得到的脱毒马铃薯从试管中取出来，放在无菌培养皿中。
4.2.2、将植株切成单节茎段，每段只带1-2个叶片和腋芽。
马铃薯快速繁殖（实验结果）
一．实验设计方案快速繁殖培养基为MS培养基。
诱导培养基的配方如下：MS培养基+5mg/L 6-BA+8%蔗糖。
采用固液培养法诱导。
结薯率=总结薯个数/植株总数×100%单薯的重量=总重量/总薯数*100%步骤（3）培养将果酱瓶置于培养室中培养，培养条件是室温25-27℃。
每天光照16小时。
光强2000-3000lx。
②、更换培养基后，将果酱瓶放在室温25-27℃完全黑暗的条件下静止培养，不需要摇动或者摆动。
（五）注意事项由于高温高压灭菌会对部分物质活性产生一定的影响，因此配制培养基时要予以注意。
如NAA要最后加。
（一）实验现象及观察结果1、马铃薯试管苗快繁结果：下图为马铃薯试管苗快繁结果：图1 马铃薯试管苗快繁结果由图可见：经培养，瓶内15株（每瓶5棵，共3瓶）均成活，长势良好，株高和茎粗正常，叶片深绿色偏小；未出现茎段陡长的现象。
但由于培养时间较长，果酱瓶内培养基明显减少。
2、马铃薯试管薯诱导结果：由于时间关系，本小组实验绝大部分培育的苗尚未开始结薯，有极个别瓶苗结1-2个。
因此，不方便计算结薯率和单薯的重量。
（二）实验分析讨论1、光照对苗的快繁影响较大。
中期观察发现，苗未直立生长，且整体向一个方向倾斜，有较明显的向光生长趋势。
后期对培养瓶移位，改变捕光方向和位置后，有明显改善。
这是由于培养架内各处光照不均匀，以至偏向角落的苗向光生长。
2、马铃薯试管苗快繁过程中发现，有些同学的苗始终不长高，且不生根。
这是由于扦插时，违背了其形态学特性，故不生根。
3、避光才能诱导微型薯的产生。
在培育过程中，不时会有同学打开挡光布，甚至直接将培养瓶拿出来观察，这对试管薯的诱导是及其不利的。
4、有些同学快繁培养基耗尽后未及时更换或补充新的培养基，以致快繁苗因营养缺乏而死。
（三）实验总结本次实验包括以下主要环节：培养基的配制、试管苗快繁培养以及马铃薯试管薯诱导。
在配制培养基过程中，各小组分工合作，操作谨慎。
马铃薯试管薯综合诱导技术的研究
温 度应 掌握 在 １ ℃～ ９ ７ １ ℃。早 熟 品种 的结薯 时 间平 均 茎 段 ， 根 前 叶片 无 黄化 现 象 ， 扎 其培 养 的 脱 毒 马铃 薯
叶色浓 绿 ， 苗健 壮 。由测 定 可知 ， 因 为 ３ ５ｄ 同 时 结 薯 数 多 ，诱 导 ２ ～ ， ５ ｄ鲜 薯 重 增 加 较 对 照 叶片增 大 ，
产量 有 所提 高 ， 但结 薯 数有 所 下 降 ， 添 加矮 壮 素 的 科 薯 ６号 为 材 料进 行 诱 导 试 验 ．０ ９年 １ 不 ２Ｏ ２月 ３ １日 培养基 结薯数 量 和鲜薯 产量均 有所 下 降 ： 同时我们 还 倒 入诱 导液 ，设 弱光 、全黑 暗和 ８ｈ光 照 ３个处 理 ， ０ ０年 １ ２ 月 ８日和 ２月 ２ 日分 别 调 查 结 薯 情 况 ， ５ 发现液 体培养 基优 于 固体培养 基 ， 液体培 养基 试管 薯 ２ １ 形 成早 ， 间短 ， 时 效率 高 。考虑 到成 本 因素 ， 活性炭 以 ３月 １ ２日收获称 量薯 重 ， 果如 表 ２所示 。 结 ０５ 蔗糖 以 ８ ． ％， ％为宜 。同时还应 注意 ， 暗培养 需要 在 由表 ２可 以看 出来 。科 薯 ６号在 弱光 条 件下 培 无菌 室 内更 换 培养 基 ． 以防污 染 ， 把原 液 体 培养 基 倒 养 ４周 ， 薯率 为 ４ ％， 黑 暗条 件 的结薯 率 为５ ％， 结 ８ 全 ０ ２ 这 掉， 加入 诱导 培养基 ． 口后放 人 暗培养 室 中培养 ， 封 暗 而 ８ｈ光 照 的结薯率 为 ２ ％， 说 明黑 暗是诱 导试 管 培养 的温度保 持在 ｌ℃～ ０ ，５ ７ ８ ２ ℃ ５ ～ ０ｄ即可 收获 。 ２２ 光 照对 试 管薯结 薯状 况的 影响 ． 薯 和增 加 结 薯 率 的必 要 条 件 ．但 在 ２月 ２ 日调 查 ５ 时 ， 处理 的结 薯 率分 别达 到 ９ ％ 、 １ ３个 ２ ９ ％和 ９ ％， ０ 在
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3.1马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖 马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖 3.2马铃薯试管薯的诱导 马铃薯试管薯的诱导
实验3.1马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖 实验 马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖
1 实验目的 通过本次实验，进一步熟悉无菌操作技术； 了解马铃薯脱毒种薯生产的过程，为马铃 薯脱毒种薯的生产提供必要的基础苗；能 设计和配制胡萝卜愈伤组织增殖培养基。 2 实验内容 （1）马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖 （2）胡萝卜愈伤组织诱导培养基的配制
3 实验用具和仪器
50ml三角瓶、500ml搪瓷杯、25ml量筒、 1ml和5ml吸管、pH试纸（5.4~7.0）、封 口膜、扎口用棉线、药勺、称量纸、电炉、 普通电子天平、酒精棉球、小块纱布、已 灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、 已灭菌培养皿、酒精灯、超净工作台等。
4 药品和试剂 MS基本培养基母液、马铃薯快速繁殖 培养基、蒸馏水、75％酒精、蔗糖、 琼脂、NAA、6-BA、水解酪蛋白、 1mol/LHCl、1mol/LNaOH、。 5 实验材料
封口包扎
Байду номын сангаас
灭菌
马铃薯脱毒试管苗
6 实验流程
（1）马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖 ）
①准备工作 a 接种室的清洁和消毒；b 超净工作台的开 机和消毒；c 剪刀、镊子、培养皿、待用 培养基等的准备；d 实验材料的准备 ②增殖方式：单节茎段扦插 增殖方式： ③无菌操作
（2）胡萝卜愈伤组织增殖培养基的配制 ）
配方： 配方：MS基本培养基＋ 2mg/L NAA＋ 0.1mg/L 6-BA＋200mg/L水解酪蛋白＋ 0.7 ％琼脂＋3％蔗糖 配制流程： 配制流程： 配制 调节pH值